免疫缺陷病和檢驗

臨床免疫學(xué)檢驗吉林醫(yī)藥學(xué)院檢驗學(xué)院整理ppt第一頁，共七十五頁。免疫缺陷病及檢測整理ppt第二頁，共七十五頁。由遺傳因素或其他原因造成的免疫系統(tǒng)發(fā)育或免疫應(yīng)答障礙而導(dǎo)致的一種或多種免疫功能不全稱為免疫缺陷(immunodeficiency),由此所致的各種臨床綜合征稱為免疫缺陷病(immunodeficiencydisease,ID)。免疫缺陷病整理ppt第三頁，共七十五頁。第一節(jié)免疫缺陷病的分類和特點整理ppt第四頁，共七十五頁。原發(fā)性免疫缺陷性疾病〔primaryimmunodeficiencydisease,PIDD〕繼發(fā)性免疫缺陷病〔secondaryimmunodeficiencydisease,SIDDorAIDD〕一、免疫缺陷病分類整理ppt第五頁，共七十五頁。整理ppt第六頁，共七十五頁。反復(fù)感染易發(fā)腫瘤高度伴發(fā)自身免疫病的傾向，以類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎和惡性貧血等多見。遺傳傾向臨床表現(xiàn)和病理損傷復(fù)雜多樣二、免疫缺陷病的特點整理ppt第七頁，共七十五頁。免疫缺陷病類型病原體類別感染類型體液免疫、吞噬細(xì)胞和補體缺陷以化膿性球菌感染為主，補體缺陷時也常見腦膜炎鏈球菌和淋球菌感染敗血癥、化膿性腦膜炎、肺炎、氣管炎、中耳炎、全身性肉芽腫等細(xì)胞免疫缺陷細(xì)胞內(nèi)寄生病原體感染為主重癥病毒感染、真菌感染、布氏菌病、結(jié)核病聯(lián)合免疫缺陷以化膿菌為主，有時合并胞內(nèi)寄生病原體感染全身重癥細(xì)菌及病毒感染、頑固性腹瀉或膿皮病免疫缺陷病感染特點整理ppt第八頁，共七十五頁。第二節(jié)原發(fā)性免疫缺陷病原發(fā)性免疫缺陷性疾病〔primaryimmunodeficiencydisease,PIDD〕又稱先天性免疫缺陷病〔congenitalimmunodeficiencydisease,CIDD〕,是由于免疫系統(tǒng)遺傳基因異常或先天性免疫系統(tǒng)發(fā)育障礙而致免疫功能不全引起的疾病。整理ppt第九頁，共七十五頁。

一、原發(fā)性B細(xì)胞缺陷病二、原發(fā)性T細(xì)胞缺陷病三、原發(fā)性聯(lián)合免疫缺陷病四、原發(fā)性吞噬細(xì)胞缺陷病五、原發(fā)性補體系統(tǒng)缺陷病原發(fā)性免疫缺陷性疾病整理ppt第十頁，共七十五頁。由于B細(xì)胞先天性發(fā)育不全，或由于B細(xì)胞不能接受T細(xì)胞傳遞的信號，而導(dǎo)致抗體產(chǎn)生減少的一類疾病。一、原發(fā)性B細(xì)胞缺陷primaryBlymphocytesdeficiency整理ppt第十一頁，共七十五頁。實驗室指標(biāo)特征主要臨床表現(xiàn)體內(nèi)Ig水平降低或缺陷外周血B細(xì)胞可減少或缺陷T細(xì)胞數(shù)量正常。反復(fù)化膿性感染整理ppt第十二頁，共七十五頁。發(fā)病機制:B細(xì)胞的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子酪氨酸激酶〔Bruton’styrosinekinase，Btk〕基因缺陷，使得B細(xì)胞發(fā)育過程中信號轉(zhuǎn)導(dǎo)障礙，導(dǎo)致B細(xì)胞發(fā)育停滯于前B細(xì)胞階段，成熟B細(xì)胞數(shù)量減少或缺失?！惨弧砐性連鎖無丙種球蛋白血癥〔X-linkedagamaglobulinemia，XLA〕為X連鎖隱性遺傳，多見于男性嬰幼兒。故又稱Bruton病。臨床表現(xiàn)：患兒多在出生6月后反復(fù)發(fā)生化膿性細(xì)菌感染,血清中各類Ig含量明顯降低，外周血成熟B細(xì)胞和漿細(xì)胞數(shù)量幾乎為零。整理ppt第十三頁，共七十五頁。臨床表現(xiàn)：患兒易反復(fù)感染，尤其是呼吸道感染，比低水平免疫球蛋白缺陷病表現(xiàn)更為嚴(yán)重?！捕砐性聯(lián)高IgM綜合征

〔X-linkedhighIgMsyndrome，XLHM〕發(fā)病機制：X-染色體上CD40L基因突變，使T細(xì)胞表達(dá)CD40L缺陷，其與B細(xì)胞CD40的相互作用受阻，導(dǎo)致B細(xì)胞活化增殖和Ig類別轉(zhuǎn)換障礙，不能產(chǎn)生除IgM以外的其它類型免疫球蛋白。實驗室指標(biāo)：血清IgM升高而IgG、IgA、IgE水平低下，外周血和淋巴組織中有大量分泌IgM的漿細(xì)胞。整理ppt第十四頁，共七十五頁。實驗室指標(biāo)：血清IgA水平異常低下〔<50mg/L〕，sIgA缺乏，其它各類Ig水平正常?！踩尺x擇性IgA缺陷

〔selectiveIgAdeficiency〕最常見的選擇性Ig缺陷，為常染色體顯性或隱性遺傳

發(fā)病機制：具有IgA受體的B細(xì)胞發(fā)育停滯，不能分化成為分泌IgA的漿細(xì)胞。臨床表現(xiàn)：患者多無明顯病癥，或僅表現(xiàn)為呼吸道、消化道和泌尿道反復(fù)感染，少數(shù)患者可出現(xiàn)嚴(yán)重感染，常伴有自身免疫病和超敏反響性疾病。整理ppt第十五頁，共七十五頁。T細(xì)胞的發(fā)生、分化和功能障礙的遺傳性缺陷，其中包括T細(xì)胞及其前體。T細(xì)胞缺陷不僅影響T效應(yīng)細(xì)胞〔如TCL〕，也會間接影響單核-吞噬細(xì)胞和B細(xì)胞。因此，多數(shù)T細(xì)胞功能缺陷者常伴體液免疫功能缺陷。二、原發(fā)性T細(xì)胞缺陷〔primaryTlymphocytesdeficiency〕整理ppt第十六頁，共七十五頁。患兒T細(xì)胞功能缺陷、外周血T細(xì)胞數(shù)減少或正常，B細(xì)胞和抗體功能正?；蚱汀！惨弧诚忍煨孕叵侔l(fā)育不全綜合癥又稱DiGeorge綜合征，為典型的T細(xì)胞缺陷性疾病，并伴甲狀腺功能低下。發(fā)病機制：由于妊娠早期胚胎第三、四咽囊分化發(fā)育障礙，導(dǎo)致起源于該部位的器官如胸腺、甲狀旁腺、主動脈弓、唇和耳等發(fā)育不全。臨床特征：有心臟和大血管畸形，反復(fù)感染和新生兒24小時內(nèi)出現(xiàn)手足抽搐

整理ppt第十七頁，共七十五頁。例如：CD3復(fù)合分子〔-、-、-、-鏈〕基因變異引起TCR-CD3復(fù)合物表達(dá)或功能受損ZAP-70〔一種酪氨酸激酶〕基因變異，不能產(chǎn)生ZAP-70蛋白〔二〕TCR活化和功能缺陷T細(xì)胞膜分子表達(dá)異?；蛉笔Э蓪?dǎo)致T細(xì)胞活化和功能缺陷整理ppt第十八頁，共七十五頁。

一組胸腺、淋巴組織發(fā)育不全及Ig缺乏的遺傳性疾病，機體不能產(chǎn)生細(xì)胞免疫和體液免疫應(yīng)答。患者出生后6個月即出現(xiàn)發(fā)育障礙，易發(fā)嚴(yán)重感染而死亡。三、重癥聯(lián)合免疫缺陷

〔severecombinedimmunodeficiencydisease，SCID〕整理ppt第十九頁，共七十五頁?；颊卟±肀憩F(xiàn)：T細(xì)胞缺乏或顯著減少B細(xì)胞數(shù)量正常但功能異常，導(dǎo)致Ig生成減少和類型轉(zhuǎn)換障礙主要發(fā)病機制：IL-2受體鏈基因突變。〔一〕性聯(lián)重癥聯(lián)合免疫缺陷〔X-linkedSCID,X-SCID〕整理ppt第二十頁，共七十五頁。發(fā)病機制：定位于第20對染色體的ADA基因突變導(dǎo)致ADA缺乏，使腺苷和脫氧腺苷分解障礙，造成核苷酸代謝產(chǎn)物dATP和dGTP在細(xì)胞內(nèi)大量蓄積，對早期T、B細(xì)胞有毒性作用，影響RNA、DNA、蛋白質(zhì)和磷脂合成，使之發(fā)育成熟受阻，造成T細(xì)胞和B細(xì)胞缺陷?！捕诚佘彰摪泵溉狈ΠY〔adenosinedeaminase,ADA〕整理ppt第二十一頁，共七十五頁。整理ppt第二十二頁，共七十五頁。主要表現(xiàn)：吞噬細(xì)胞的數(shù)量、移動和〔或〕黏附功能、殺菌活性等異常四、原發(fā)性吞噬細(xì)胞缺陷

primaryphagocytesdeficiency臨床表現(xiàn)：化膿性細(xì)菌或真菌反復(fù)感染整理ppt第二十三頁，共七十五頁。臨床表現(xiàn)：患兒多在出生后1個月內(nèi)即開始發(fā)生各種細(xì)菌的反復(fù)感染。〔一〕中性粒細(xì)胞數(shù)量減少分類：粒細(xì)胞減少癥〔granulocytopenia〕和粒細(xì)胞缺乏癥〔agranulocytosis。發(fā)病機制：G-CSF〔粒細(xì)胞集落刺激因子〕基因突變導(dǎo)致粒細(xì)胞分化受阻。整理ppt第二十四頁，共七十五頁。LAD-1發(fā)病機制：是由于CD-18基因突變，使中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞、NK細(xì)胞外表整合素家族成員表達(dá)缺陷，導(dǎo)致中性粒細(xì)胞不能與內(nèi)皮細(xì)胞黏附、移行并穿過血管壁到達(dá)感染部位?！捕嘲准?xì)胞黏附缺陷

〔leukocyteadhesiondeficiency，LAD〕分類：分為LAD-1和LAD-2兩種LAD-2發(fā)病機制：是一種巖藻糖轉(zhuǎn)移酶基因突變，使得白細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞外表缺乏能與選擇素家族成員結(jié)合的寡糖配體Sialyl-Lewisx〔Slex〕，導(dǎo)致白細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞間的黏附障礙。臨床表現(xiàn)：均表現(xiàn)為反復(fù)的化膿性細(xì)菌感染整理ppt第二十五頁，共七十五頁。發(fā)病機制：編碼復(fù)原型輔酶Ⅱ〔NADPH〕氧化酶系統(tǒng)的基因缺陷?！踩陈匀庋磕[病

〔chronicgranulomatousdisease，CGD〕臨床表現(xiàn)：為反復(fù)的化膿性感染，淋巴結(jié)、皮膚、肝、肺、骨髓等器官有慢性化膿性肉芽腫或伴有瘺管形成。整理ppt第二十六頁，共七十五頁。多數(shù)為常染色體隱性遺傳，少數(shù)為常染色體顯性遺傳,屬最少見的原發(fā)性免疫缺陷病。五、原發(fā)性補體系統(tǒng)缺陷

〔primarycomplementsystemdeficiency〕在補體系統(tǒng)中，幾乎所有的補體固有成分、補體調(diào)控蛋白及補體受體都可發(fā)生缺陷。臨床表現(xiàn)為反復(fù)化膿性細(xì)菌感染。整理ppt第二十七頁，共七十五頁。發(fā)病機制：C1抑制分子〔C1inhibitor,C1INH〕基因缺陷所致?！惨弧尺z傳性血管神經(jīng)性水腫為常見的補體缺陷，屬于常染色體顯性遺傳病臨床表現(xiàn)：反復(fù)發(fā)作的皮膚黏膜水腫，假設(shè)水腫發(fā)生于喉頭可導(dǎo)致窒息死亡。整理ppt第二十八頁，共七十五頁。發(fā)病機制：編碼糖基磷脂酰肌醇〔glycosylphosphatidylinositol,GPI〕的pig-α基因翻譯后修飾缺陷，導(dǎo)致GPI合成障礙。〔二〕陳發(fā)性夜間血紅蛋白尿臨床表現(xiàn)：慢性溶血性貧血、全血細(xì)胞減少和靜脈血栓形成，晨尿中出現(xiàn)血紅蛋白。整理ppt第二十九頁，共七十五頁。第三節(jié)繼發(fā)性免疫缺陷病繼發(fā)性免疫缺陷病〔secondaryimmunodeficiencydisease,SIDD〕是后天因素造成的，繼發(fā)于某些疾病或使用藥物后所致的免疫系統(tǒng)暫時或持久損害的一類免疫缺陷性疾病。分為繼發(fā)性T細(xì)胞功能缺陷、繼發(fā)性低丙種球蛋白血癥、繼發(fā)性吞噬細(xì)胞功能缺陷和補體缺陷。整理ppt第三十頁，共七十五頁。1．腫瘤：惡性腫瘤，加之放療、化療、營養(yǎng)不良、消耗等因素可導(dǎo)致免疫缺陷。2．感染性疾?。阂訦IV感染所致的艾滋病最為嚴(yán)重。3．遺傳性疾?。喝旧w異常、酶缺乏、血紅蛋白病等。4．營養(yǎng)不良5．免疫抑制療法6．其它：如電離輻射、手術(shù)、創(chuàng)傷、脾切除等均可引起免疫功能低下。一、繼發(fā)性免疫缺陷的常見原因整理ppt第三十一頁，共七十五頁。又稱艾滋病，是由人類免疫缺陷病毒〔humanimmunodeficiencyvirus，HIV〕感染引起的一組綜合征。病人以CD4+T細(xì)胞減少為主要特征，同時伴反復(fù)時機感染、惡性腫瘤及中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性病變。二、獲得性免疫缺陷綜合征

〔acquiredimmunodeficiencysyndrome，AIDS〕整理ppt第三十二頁，共七十五頁。艾滋病全球分布情況整理ppt第三十三頁，共七十五頁。AIDS的病因：人類免疫缺陷病毒〔humanimmunodifiencyvirus，HIV〕HIV-1和HIV-2兩型?！惨弧巢≡瓕W(xué)整理ppt第三十四頁，共七十五頁。HIVHIV-1HIV-2OMA,B,C,D,E,F,G,H,I,JTypesCladesANT70,MVP5180,VAURODNIH2GroupsNHIV的型和亞型整理ppt第三十五頁，共七十五頁。結(jié)構(gòu)基因HIV-1(HIV-2)包膜(env)Gp160/gp120,gp41(gp140/gp105,gp36)多聚酶(pol)P66,p55(P68,P56)核心(gag)P24,p17(P26,p16)HIV的主要結(jié)構(gòu)基因和相應(yīng)的抗原整理ppt第三十六頁，共七十五頁。整理ppt第三十七頁，共七十五頁。整理ppt第三十八頁，共七十五頁。整理ppt第三十九頁，共七十五頁。整理ppt第四十頁，共七十五頁。整理ppt第四十一頁，共七十五頁?！捕矵IV的致病機制HIV通過gp120與靶細(xì)胞外表的CD4分子高親和性結(jié)合，同時也與表達(dá)在靶細(xì)胞外表的趨化因子受體〔CXCR4和CXCR5〕結(jié)合，再由gp41介導(dǎo)病毒包膜與細(xì)胞膜融合，使病毒得以進(jìn)入細(xì)胞。1．HIV侵入CD4+靶細(xì)胞的機制CD4分子是HIV糖蛋白的特異性受體，故HIV主要侵犯CD4﹢T細(xì)胞。表達(dá)CD4分子的單核-吞噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、B細(xì)胞、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞等也是其重要的靶細(xì)胞整理ppt第四十二頁，共七十五頁。整理ppt第四十三頁，共七十五頁。2．HIV損傷感染的CD4+細(xì)胞：HIV在靶細(xì)胞中復(fù)制，可通過直接或間接途徑損傷CD4+細(xì)胞3．HIV逃防止疫攻擊的機制：HIV感染機體后，可通過不同機制逃防止疫系統(tǒng)識別和攻擊，以利于病毒在體內(nèi)長期存活并不斷復(fù)制。整理ppt第四十四頁，共七十五頁?！踩矵IV誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答HIV感染機體后，HIV會進(jìn)行性破壞機體免疫系統(tǒng)(尤其是細(xì)胞免疫)，但在病程不同階段，機體免疫系統(tǒng)可通過不同應(yīng)答機制以阻止病毒復(fù)制。體液免疫應(yīng)答

中和抗體抗P24殼蛋白抗體抗gpl20和抗gp41抗體細(xì)胞免疫應(yīng)答

CD8+T細(xì)胞應(yīng)答CD4+T細(xì)胞應(yīng)答

整理ppt第四十五頁，共七十五頁。1．CD4﹢T細(xì)胞數(shù)量顯著減少。2．Th1細(xì)胞與Th2細(xì)胞平衡失調(diào)。3．抗原呈遞細(xì)胞功能降低。4．B細(xì)胞功能異常，表現(xiàn)為多克隆激活、高Ig血癥和產(chǎn)生多種自身抗體。〔四〕HIV感染的免疫學(xué)特征整理ppt第四十六頁，共七十五頁。HIV感染宿主其特征為潛伏期長、病程開展緩慢?！参濉矵IV感染的臨床特點HIV急性感染多表現(xiàn)為單核細(xì)胞增多樣綜合征，血清可檢出抗HIV抗體。臨床病癥多發(fā)生于感染后2-6周，表現(xiàn)為發(fā)熱、肌肉痛、關(guān)節(jié)痛、頭痛、腹瀉、咽痛和淋巴結(jié)腫大等。HIV在胞內(nèi)主要呈潛伏感染，當(dāng)宿主細(xì)胞被細(xì)菌、病毒、絲裂原激活后，病毒即進(jìn)行復(fù)制。整理ppt第四十七頁，共七十五頁。③神經(jīng)系統(tǒng)損害：約60%的AIDS病人出現(xiàn)AIDS癡呆癥?！参濉矨IDS的典型臨床表現(xiàn)①時機性感染：是AIDS病人死亡的主要原因。常見的引起時機感染的病原體是卡氏肺囊蟲和白色念珠菌，其他有巨細(xì)胞病毒、帶狀皰疹病毒、隱球菌和鼠弓型蟲等；②惡性腫瘤：AIDS患者易伴發(fā)Kaposi肉瘤和惡性淋巴瘤，也是AIDS病人常見的死亡原因；整理ppt第四十八頁，共七十五頁。常

見綜合征整理ppt第四十九頁，共七十五頁。愛滋病〔卡波氏肉瘤〕整理ppt第五十頁，共七十五頁。整理ppt第五十一頁，共七十五頁。整理ppt第五十二頁，共七十五頁。整理ppt第五十三頁，共七十五頁。整理ppt第五十四頁，共七十五頁。第四節(jié)免疫缺陷病檢驗免疫缺陷病的檢測是多方面、綜合性的，主要涉及體液免疫、細(xì)胞免疫、補體和吞噬細(xì)胞等方面的檢測，除了采用免疫學(xué)方法、分子生物學(xué)方法外，一些常規(guī)的和特殊的檢測手段也極為重要。整理ppt第五十五頁，共七十五頁。

一、B細(xì)胞缺陷病的實驗室檢測二、T細(xì)胞缺陷病的實驗室檢測三、吞噬細(xì)胞缺陷病的實驗室檢測四、補體系統(tǒng)缺陷病的實驗室檢測五、獲得性免疫缺陷病的實驗室檢測免疫缺陷病的實驗室檢測整理ppt第五十六頁，共七十五頁。血清Ig測定同種血型凝集素的測定特異性抗體產(chǎn)生能力測定噬菌體試驗B細(xì)胞外表膜免疫球蛋白〔SmIg〕的檢測CD抗原檢測一、B細(xì)胞缺陷的檢測整理ppt第五十七頁，共七十五頁。二、T細(xì)胞缺陷的檢測T細(xì)胞功能檢測T細(xì)胞數(shù)量及其亞群檢測皮膚試驗T細(xì)胞功能體外試驗整理ppt第五十八頁，共七十五頁。白細(xì)胞計數(shù)趨化功能檢測吞噬和殺傷試驗NBT復(fù)原試驗黏附分子檢測三、吞噬細(xì)胞免疫缺陷的檢測整理ppt第五十九頁，共七十五頁。四、補體系統(tǒng)缺陷的檢測總補體活性單個組分的測定一般認(rèn)為CH50、C1q、C4、C3和B因子等幾項檢測可大致反響補體缺陷的情況，對遺傳性血管神經(jīng)性水腫患者必須檢測C1抑制劑才能最終確診。整理ppt第六十頁，共七十五頁。五、獲得性免疫缺陷病的檢測HIV感染的免疫學(xué)診斷方法主要包括病毒抗原抗病毒抗體免疫細(xì)胞數(shù)目和功能整理ppt第六十一頁，共七十五頁?？贵w檢測：血液〔清〕、尿液、唾液抗原檢測：血清〔漿〕核酸檢測：血清〔漿〕病毒別離：血液，腦脊液，性分泌液CD4細(xì)胞檢測：血液病毒載量測定：血清〔漿〕檢測標(biāo)本種類整理ppt第六十二頁，共七十五頁。〔一〕HIV抗原檢測常用ELISA法檢測HIV的核心抗原P24。P24出現(xiàn)于急性感染期和AIDS晚期，其定量檢測可作為早期或晚期病毒量的間接指標(biāo)。在潛伏期，P24檢測常為陰性。

整理ppt第六十三頁，共七十五頁。〔二〕HIV抗體檢測HIV感染后2～3月可出現(xiàn)抗體，并可持續(xù)終身，此為艾滋病的常規(guī)檢測指標(biāo)。

初篩試驗： ELISA法膠乳凝集法免疫金層析法

確認(rèn)試驗： 免疫印跡法整理ppt第六十四頁，共七十五頁。初篩查最根本，最可靠的手段ELISA試劑敏感性和特異性越來越高與抗原檢測同時進(jìn)行ELISA法檢測HIV抗體整理ppt第六十五頁，共七十五頁。常用的方法有免疫斑點法、免疫層析法、硒標(biāo)記法、金標(biāo)記法和凝集試驗等。HIV抗體快速檢測OraQuicktest整理ppt第六十六頁，共七十五頁?！?〕便于操作，大局部快速檢測試劑均為一步法，只需在樣品孔中按要求滴上樣品后在規(guī)定的時間內(nèi)觀察結(jié)果即可。〔2〕反響時間短，一般為15～60分鐘，大局部試劑的反響時間為30分鐘?！?〕可以目測，不需要特殊的儀器設(shè)備。HIV快速檢測法的優(yōu)點整理ppt第六十七頁，共七十五頁?！?〕試劑可在室溫條件下保存，如雅培HIV-1/2抗體診斷試劑在30℃儲存12個月后的試劑敏感性與儲存與2~8℃的試劑敏感性相同。〔4〕技術(shù)要求不高。方法簡單，受訓(xùn)的技術(shù)員都可操作。整理ppt第六十八頁，共七十五頁。確認(rèn)試劑必須經(jīng)國家食品藥品監(jiān)督管理局注冊批準(zhǔn)。HIV抗體確認(rèn)試驗確認(rèn)試驗可使用免疫印跡法、條帶免疫法及免疫熒光法。目前以免疫印跡法〔WB試驗〕最為常用。整理ppt第六十九頁，共七十五頁。HIV抗體確認(rèn)試驗判斷標(biāo)準(zhǔn)①HIV抗體陽性：至少有兩條膜帶〔gp41/