芳胺類藥物的分析

對(duì)氨基苯甲酸酯母核

一、結(jié)構(gòu)當(dāng)前第1頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)鹽酸普魯卡因一、結(jié)構(gòu)鹽酸丁卡因苯佐卡因返回當(dāng)前第2頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)二、性質(zhì)水解特性紫外吸收弱堿性芳伯氨基特性當(dāng)前第3頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)弱堿性除苯佐卡因外均具有脂烴胺側(cè)鏈且為叔胺氮原子，故具有弱堿性，能與生物堿沉淀劑發(fā)生沉淀反應(yīng)。

可用非水堿量法滴定。

返回當(dāng)前第4頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)芳伯氨基特性多具有芳伯氨基（丁卡因無），可以發(fā)生重氮化-偶合反應(yīng)；可與芳醛縮合反應(yīng)，生成schiff堿?？捎糜诙ㄐ澡b別，含量測(cè)定。返回當(dāng)前第5頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)水解特性具有酯鍵（或酰胺鍵），易水解，光線、熱或堿性條件可以促進(jìn)其水解，影響藥品質(zhì)量，因此必須對(duì)其水解產(chǎn)物的限量加以控制。多用于雜質(zhì)檢查，也用于定性鑒別。返回紫外吸收本類藥物都有苯環(huán)，在紫外光區(qū)有吸收。當(dāng)前第6頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)三、鑒別重氮化-偶合反應(yīng)

水解反應(yīng)氯化物反應(yīng)紅外光譜法當(dāng)前第7頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)重氮化-偶合反應(yīng)分子結(jié)構(gòu)中具有芳伯氨基或潛在芳伯氨基的藥物，均可發(fā)生重氮化-偶合反應(yīng)，生成橙紅色偶氮化合物，此即為芳香第一胺反應(yīng)

當(dāng)前第8頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)鹽酸普魯卡因的鑒別:供試品約50mg0.1mol/L亞硝酸鈉溶液數(shù)滴溶解稀鹽酸1ml堿性β-萘酚溶液數(shù)滴橙黃到猩紅色↓

重氮化-偶合反應(yīng)當(dāng)前第9頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)鹽酸丁卡因與亞硝酸鈉的反應(yīng)鹽酸丁卡因不具有芳伯氨基，無重氮化-偶合反應(yīng)，但其結(jié)構(gòu)中的芳香仲胺在酸性溶液中也可與亞硝酸鈉發(fā)生反應(yīng)，生成乳白色的N-亞硝基化合物沉淀，可與含有芳伯氨基的同類藥物區(qū)別。返回當(dāng)前第10頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)水解產(chǎn)物的反應(yīng)三、鑒別反應(yīng)式:當(dāng)前第11頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)水解產(chǎn)物的反應(yīng)三、鑒別反應(yīng)式:當(dāng)前第12頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)鹽酸普魯卡因的鑒別:三、鑒別供試品約0.1g10％氫氧化鈉溶液1ml溶解水2ml水解產(chǎn)物的反應(yīng)↓油狀物加熱↑加熱能使?jié)駶?rùn)的紅色石蕊試紙變?yōu)樗{(lán)色放冷鹽酸酸化↓油狀物消失加熱返回當(dāng)前第13頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)方法1:三、鑒別供試品溶液硝酸銀試液硝酸使成酸性氯化物的反應(yīng)↓沉淀溶解↓硝酸沉淀加氨試液一般鑒別實(shí)驗(yàn)當(dāng)前第14頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)方法2:三、鑒別供試品少量氯化物的反應(yīng)二氧化錳試管等量混勻硫酸使?jié)駶?rùn)加熱氯氣↑能使?jié)駶?rùn)的碘化鉀淀粉試紙顯藍(lán)色返回當(dāng)前第15頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)紅外吸收光譜法中國(guó)藥典（2015）收載鹽酸普魯卡因、鹽酸丁卡因、苯佐卡因均可采用此法鑒別，供試品的紅外吸收?qǐng)D譜與對(duì)照?qǐng)D譜比較，應(yīng)一致。三、鑒別返回當(dāng)前第16頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)鹽酸普魯卡因注射液水解生成對(duì)氨基苯甲酸（PABA）和2-二乙氨基乙醇。其中PABA經(jīng)長(zhǎng)期貯存或高溫加熱，可進(jìn)一步脫羧轉(zhuǎn)化為苯胺，苯胺又可被氧化為有色物質(zhì)，使注射液變黃，導(dǎo)致藥物療效下降，甚至?xí)黾佣拘?。鹽酸普魯卡因注射液的對(duì)氨基苯甲酸檢查返回中國(guó)藥典（2015年版）規(guī)定鹽酸普魯卡因注射液用HPLC法檢查PABA當(dāng)前第17頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)五、含量測(cè)定亞硝酸鈉滴定法非水滴定法返回當(dāng)前第18頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)亞硝酸鈉滴定法五、含量測(cè)定原理反應(yīng)條件指示終點(diǎn)的方法

實(shí)例分析

返回當(dāng)前第19頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)亞硝酸鈉滴定法——原理酸性溶液中芳伯氨基藥物與NaNO2定量反應(yīng)，生成重氮化合物:含潛在芳伯氨基藥物，先經(jīng)處理得到芳伯氨基，再測(cè)定返回當(dāng)前第20頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)亞硝酸鈉滴定法——反應(yīng)條件溫度太低則重氮化反應(yīng)速度慢溫度太高會(huì)使亞硝酸逸失，且會(huì)使重氮鹽分解溫度：室溫（10℃～30℃）滴定當(dāng)前第21頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)酸度大反應(yīng)向左進(jìn)行，重氮鹽穩(wěn)定。但若酸度過大，反而影響重氮化反應(yīng)速度，且太濃的鹽酸還會(huì)使亞硝酸分解。鹽酸的量與芳胺類藥物最佳比為1：2.5～6.0。酸度加過量鹽酸加速反應(yīng)酸度過量鹽酸當(dāng)前第22頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)先快：開始時(shí)為避免滴定過程中亞硝酸的揮發(fā)和分解，將滴定管尖端插入液面下約2/3處，一次將大部分亞硝酸鈉滴定液在攪拌條件下迅速加入，使亞硝酸在強(qiáng)烈攪拌下迅即四方擴(kuò)散并立即與芳伯氨基反應(yīng)。速度與方式先快后慢，滴定管尖端插入液面下2/3滴定當(dāng)前第23頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)

后慢：在近終點(diǎn)時(shí)，應(yīng)將滴定管尖端提出液面，用少量水淋洗尖端后，緩緩滴定至終點(diǎn)。接近終點(diǎn)時(shí)，每滴入一滴或半滴亞硝酸鈉滴定液后，須攪拌1min后，再觀察終點(diǎn)是否真正到達(dá)。

溴化鉀加入適量溴化鉀作催化劑返回當(dāng)前第24頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)亞硝酸鈉滴定法——指示終點(diǎn)的方法永停滴定法電位滴定法外指示劑法內(nèi)指示劑法當(dāng)前第25頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)亞硝酸鈉滴定法——指示終點(diǎn)的方法永停滴定法返回當(dāng)前第26頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)亞硝酸鈉滴定法——實(shí)例分析取鹽酸普魯卡因0.5930g，精密稱定，加水40ml與鹽酸液（1→2）15ml，置電磁攪拌器上，攪拌使溶解，再加溴化鉀2g，照永停滴定法插入鉑-鉑電極后，將滴定管尖端插入液面下約2/3處，用亞硝酸鈉滴定液（0.1055mol/L）迅速滴定，隨滴隨攪拌，至近終點(diǎn)時(shí)將滴定管尖端提出液面，用少量水淋洗，當(dāng)前第27頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)亞硝酸鈉滴定法——實(shí)例分析繼續(xù)緩緩滴定，至電流計(jì)指針突然偏轉(zhuǎn)不再回復(fù)，即為終點(diǎn)，消耗亞硝酸鈉滴定液（0.1055mol/L）20.10ml。中國(guó)藥典（2015）規(guī)定，每1ml亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于27.28mg的C13H20N2O2?HCl。本品按干燥品計(jì)算，含C13H20N2O2?HCl不得少于99.0%。請(qǐng)問，該供試品含量是否合格？當(dāng)前第28頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)亞硝酸鈉滴定法——實(shí)例分析鹽酸普魯卡因的百分含量％＝＝

＝97.55％

97.55％<99.0%，試驗(yàn)證明該鹽酸普魯卡因供試品含量不合格。返回當(dāng)前第29頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)非水滴定法鹽酸丁卡因的含量測(cè)定采用非水滴定法。本品為有機(jī)堿的鹽酸鹽，分子結(jié)構(gòu)中含有脂烴胺側(cè)鏈，具弱堿性，可用非水堿量法測(cè)定含量，將供試品溶解在冰醋酸中，以結(jié)晶紫為指示劑，以高氯酸液滴定至藍(lán)色為終點(diǎn)。當(dāng)前第30頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)非水滴定法（P139）方法：非水定堿法溶劑：滴定液：指示劑：空白試驗(yàn)HAcHClO4結(jié)晶紫Hg(Ac)2作用——消除HCl的干擾非水定堿法(因某某卡因顯弱堿性)當(dāng)前第31頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)非水滴定法——實(shí)例分析取鹽酸丁卡因約0.2032g，精密稱定，加冰醋酸25ml與醋酐5ml溶解后，加熱回流2分鐘，放冷，加醋酸汞試液5ml與結(jié)晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液(0.09962mol/L)滴定，至溶液顯藍(lán)色，消耗高氯酸滴定液(0.09962mol/L)6.76ml，空白試驗(yàn)消耗高氯酸滴定液(0.09962mol/L)0.02ml。當(dāng)前第32頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)非水滴定法——實(shí)例分析中國(guó)藥典（2015年版）規(guī)定，每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于30.08mg的C15H24N2O2?HCl。本品按干燥品計(jì)算，含C15H24N2O2?HCl不得少于99.0％。請(qǐng)問，該供試品含量是否合格？當(dāng)前第33頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)非水滴定法——實(shí)例分析鹽酸丁卡因的百分含量％＝＝

＝99.39％

99.39％>99.0%，試驗(yàn)證明該鹽酸丁卡因供試品含量合格。當(dāng)前第34頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)（二）芳酰胺類藥物的分析檢查含量測(cè)定結(jié)構(gòu)性質(zhì)鑒別當(dāng)前第35頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)對(duì)乙酰氨基酚一、結(jié)構(gòu)醋氨苯砜鹽酸利多卡因鹽酸布比卡因返回當(dāng)前第36頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)二、性質(zhì)酚羥基特性與重金屬離子發(fā)生沉淀反應(yīng)弱堿性水解特性紫外吸收返回當(dāng)前第37頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)弱堿性利多卡因和布比卡因具有脂烴胺側(cè)鏈且為叔胺氮原子，顯弱堿性，可以成鹽，可與生物堿沉淀劑發(fā)生沉淀反應(yīng)。其中與三硝基苯酚試液反應(yīng)生成的沉淀具有一定的熔點(diǎn)?？捎糜阼b別、含量測(cè)定，也可借此將二者與對(duì)乙酰氨基酚區(qū)別開來。返回當(dāng)前第38頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)水解特性水解后具有（潛在）芳伯氨基對(duì)乙酰氨基酚水解產(chǎn)物為醋酸，可與乙醇反應(yīng)，發(fā)出醋酸乙酯的香味?？捎糜阼b別。水解速度受空間位阻影響，對(duì)乙酰氨基酚大于利多卡因及布比卡因。返回當(dāng)前第39頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)酚羥基特性對(duì)乙酰氨基酚具有酚羥基，與FeCl3發(fā)生呈色反應(yīng)，可用于鑒別。返回當(dāng)前第40頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)與重金屬離子發(fā)生沉淀反應(yīng)鹽酸利多卡因和鹽酸布比卡因可在水溶液中與Cu2+、Co2+絡(luò)合，生成有色沉淀，可用于鑒別。返回當(dāng)前第41頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)二、性質(zhì)紫外吸收本類藥物都有苯環(huán)，在紫外光區(qū)有吸收。返回當(dāng)前第42頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)三、鑒別測(cè)定衍生物熔點(diǎn)氯化物反應(yīng)重氮化-偶合反應(yīng)

三氯化鐵反應(yīng)重金屬離子反應(yīng)光譜法[紫外、紅外]返回

當(dāng)前第43頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)重氮化-偶合反應(yīng)對(duì)乙酰氨基酚具有潛在芳伯氨基，在酸性條件（鹽酸或硫酸）下加熱水解，再加亞硝酸鈉試液，可發(fā)生重氮化-偶合反應(yīng)。當(dāng)前第44頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)對(duì)乙酰氨基酚的鑒別:供試品約0.1g亞硝酸鈉溶液5滴放冷，取0.5ml稀鹽酸5ml堿性β-萘酚溶液2ml紅色↓

重氮化-偶合反應(yīng)

水浴加熱40分鐘水3ml返回當(dāng)前第45頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)對(duì)乙酰氨基酚栓的鑒別供試品適量約相當(dāng)于0.3g振搖，冷卻，濾過水20ml即顯藍(lán)紫色取濾液5ml三氯化鐵反應(yīng)水浴加熱60℃三氯化鐵試液1滴返回當(dāng)前第46頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)供試品取該溶液溶解2ml硫酸銅試液0.2ml氯仿層顯黃色

重金屬離子反應(yīng)——與銅離子反應(yīng)鹽酸利多卡因的鑒別0.2g水20ml碳酸鈉試液1ml顯藍(lán)紫色氯仿2ml振搖返回當(dāng)前第47頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)四、檢查對(duì)氨基酚對(duì)乙酰氨基酚的檢查有關(guān)物質(zhì)乙醇溶液的澄清度與顏色返回

當(dāng)前第48頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)乙醇溶液的澄清度與顏色對(duì)乙酰氨基酚易溶于乙醇。生產(chǎn)工藝中使用鐵粉作為還原劑，可能帶入成品中，致使乙醇溶液產(chǎn)生渾濁。中間體對(duì)氨基酚的有色氧化產(chǎn)物，在乙醇溶液中顯橙紅色或棕色。

當(dāng)前第49頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)乙醇溶液的澄清度與顏色檢查方法：取本品1.0g，加乙醇10ml溶解后，溶液應(yīng)澄清，無色；如顯渾濁，與1號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液比較，不得更濃；如顯色，與棕紅色2號(hào)或橙紅色2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)液比較，不得更深。返回當(dāng)前第50頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)本品的生產(chǎn)工藝路線較多，不同生產(chǎn)工藝路線會(huì)引入不同的雜質(zhì)，這些雜質(zhì)多為反應(yīng)中間體、副產(chǎn)物及分解產(chǎn)物，主要包括：對(duì)氨基酚、對(duì)氯乙酰苯胺等。中國(guó)藥典以對(duì)氯乙酰苯胺為對(duì)照品，采用薄層色譜法對(duì)此項(xiàng)雜質(zhì)進(jìn)行限度檢查。有關(guān)物質(zhì)返回當(dāng)前第51頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)本品在合成或貯藏過程中，均可引入對(duì)氨基酚。對(duì)氨基酚會(huì)使本品產(chǎn)生色澤并對(duì)人體有毒性，應(yīng)嚴(yán)格控制其限量。可利用對(duì)氨基酚在堿性條件下能與亞硝基鐵氰化鈉生成藍(lán)色配位化合物，而對(duì)乙酰氨基酚無此反應(yīng)的特點(diǎn)，將供試品與對(duì)照品比較進(jìn)行限量檢查。對(duì)氨基酚當(dāng)前第52頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)檢查方法：取本品1.0g，加甲醇溶液(1→2)20ml溶解后，加堿性亞硝基鐵氰化鈉試液1ml，搖勻，放置30min；如顯色，與對(duì)乙酰氨基酚對(duì)照品1.0g加對(duì)氨基酚50μg用同一方法制成的對(duì)照液（臨用配制）比較，不得更深(0.005％)。對(duì)氨基酚檢查返回

當(dāng)前第53頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)五、含量測(cè)定非水滴定法紫外分光光度法返回

當(dāng)前第54頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)非水滴定法鹽酸利多卡因和鹽酸布比卡因的分子結(jié)構(gòu)中雖然具有潛在芳伯氨基，但由于受空間位阻影響，其水解較慢，不適宜用重氮化法測(cè)定。而鹽酸利多卡因結(jié)構(gòu)中含有脂烴胺基，鹽酸布比卡因側(cè)鏈哌啶環(huán)上的叔胺氮，均具有弱堿性，可以采用非水溶液滴定法進(jìn)行含量測(cè)定。當(dāng)前第55頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)非水滴定法——實(shí)例分析[鹽酸布比卡因]取本品約0.1970g，精密稱定，加冰醋酸20ml與醋酸汞試液5ml溶解后，加萘酚苯甲醇指示液5滴，用高氯酸滴定液(0.1084mol/L)滴定至溶液顯綠色，消耗高氯酸滴定液5.56ml，空白試驗(yàn)消耗高氯酸滴定液0.04ml。每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于32.49mg的C18H28N2O·HCl。本品按干燥品計(jì)算，含C18H28N2O·HCl不得少于98.5%。請(qǐng)問，該供試品含量是否合格？當(dāng)前第56頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)鹽酸布比卡因的百分含量％＝＝

＝98.68％

98.68％>98.5%，試驗(yàn)證明該鹽酸布比卡因供試品含量合格當(dāng)前第57頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)紫外分光光度法對(duì)乙酰氨基酚的測(cè)定方法：取本品約40mg，精密稱定，置250ml量瓶中，加0.4％氫氧化鈉溶液50ml溶解后，加水至刻度，搖勻，精密量取5ml，置100ml量瓶中，加0.4％氫氧化鈉溶液10ml，加水至刻度，搖勻，照分光光度法，在257nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，按C8H9NO2的吸收系數(shù)（）為715計(jì)算，即得。當(dāng)前第58頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)一、苯乙胺類基本結(jié)構(gòu)R第二節(jié)苯乙胺類藥物分析當(dāng)前第59頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)腎上腺素堿性，非水堿量法，+生物堿沉淀劑→↓鄰苯二酚易氧化手性碳當(dāng)前第60頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)鹽酸異丙腎上腺素堿性，非水堿量法，+生物堿沉淀劑→↓鄰苯二酚易氧化·Cl－反應(yīng)手性碳當(dāng)前第61頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)苯乙胺類結(jié)構(gòu)與性質(zhì)的關(guān)系*脂烴胺生物堿沉淀劑→↓

非水堿量法測(cè)含量*手性碳光學(xué)活性*鄰苯二酚、酚羥基易氧化

三氯化鐵反應(yīng)當(dāng)前第62頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)（一）與三氯化鐵試液反應(yīng)鄰苯二酚腎上腺素重酒石酸去甲腎上腺素鹽酸異丙腎上腺素綠色二、鑒別反應(yīng)當(dāng)前第63頁\共有72頁\編于星期六\18點(diǎn)例腎上腺素ChP（2015）【鑒別】（1）取本品約2mg，加鹽酸溶液（9→1000）2~3滴溶解后，加水2ml與三氯化鐵試液1滴，即顯翠綠色；

例鹽酸異丙腎上腺素ChP（2015）【鑒別