人體生物材料監(jiān)測

人體生物材料監(jiān)測第一頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六人體生物材料檢驗的意義環(huán)境中有害物質(zhì)的評估，歷來依靠環(huán)境監(jiān)測，即監(jiān)測空氣、水、土壤和食品中有害物質(zhì)的濃度來衡量其危害程度，但這只能反映環(huán)境中化學毒物的存在水平，不能準確代表人體接觸后的實際情況。本世紀70年代以來,隨著環(huán)境醫(yī)學與環(huán)境監(jiān)測研究與實踐的進展,人體生物監(jiān)測已逐漸形成一個新的分支,在評價環(huán)境質(zhì)量及人體健康效應方面,愈加顯示出它的特點及重要性。第二頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六生物監(jiān)測的概念及內(nèi)容

生物監(jiān)測在不同科學領域有不同的定義和內(nèi)容。這里所指的是勞動衛(wèi)生與職業(yè)病防治領域中的生物監(jiān)測，即評價工人在生產(chǎn)勞動過程中，接觸化學物的內(nèi)劑量和健康危險度。1973年世界衛(wèi)生組織(WHO)，1977年歐洲共同體委員會(CEC)和WHO及美國環(huán)境保護局(EPA)，1980年：CEC和美國國立職業(yè)安全與衛(wèi)生研究所(NIOSH)及職業(yè)安全衛(wèi)生局(0SHA)，以及1986年美國羅徹斯特大學和國際職業(yè)衛(wèi)生委員會等，都為生物監(jiān)測下過定義。第三頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六歸納起來，生物監(jiān)測是測量接觸化學物后，生物材料中該化學物或其代謝物的含量，或產(chǎn)生的生物效應，用以評價工人接觸化學物的劑量和健康危險度。

第四頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六生物監(jiān)測的主要內(nèi)容可分為三類

a.測定生物材料中化學物原形的濃度。如測定血、尿中鉛、汞、鎘、鉻、鎳、砷、硒等金屬和類金屬元素，呼出氣中苯、苯乙烯、甲苯等有機溶劑。

第五頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六生物監(jiān)測的主要內(nèi)容可分為三類

b.測定生物材料中化學物的代謝物。許多化學物進入機體后，以不同速率在體內(nèi)分布、代謝和排泄。尤其是有機化學物，經(jīng)代謝轉變成不同于原形的代謝物，如苯代謝成苯酚，甲苯代謝成馬尿酸等，它們可以在血和尿中檢出。第六頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六生物監(jiān)測的主要內(nèi)容可分為三類

c.測定生物材料中因化學物的作用產(chǎn)生的無損性生物效應，如接觸有機磷類農(nóng)藥后，血中膽堿酯酶活性下降；接觸無機鉛后，血中紅細胞游離原卟啉或鋅卟啉(ZPP)及尿中δ-氨基-α-酮戊酸(δ-ALA)的改變。當接觸停止后，這種無損性效應會逐漸消失。接觸化學物后，導致機體出現(xiàn)損害性變化，如心肺肝腎功能的改變，不用于生物監(jiān)測的范圍。

第七頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六

對于特定的化學物來說，有的可測定其原形或代謝物或生物效應，有的既可測定其原型，又可測定其代謝物或生物效應。例如，多數(shù)金屬化合物以測定其原形為主；許多有機化合物則常常測定原形和代謝物。

第八頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六生物監(jiān)測指標

生物監(jiān)測指標用來表示機體近期化學物的接觸量，或機體累積接觸量，或化學物作用在靶部位的量，或機體產(chǎn)生的生物效應的程度。

第九頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六一種生物監(jiān)測指標究竟能表達什么樣的意義，決定于化學物在機體內(nèi)的代謝動力學。如化學物在體內(nèi)代謝快、排泄快，其半減期短(＜10-15小時)，則生物監(jiān)測指標表示近幾個小時或近幾天的接觸量，如血、尿中某些有機溶劑的含量。

第十頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六什么是生物半減期

由于生物的代謝作用，環(huán)境污染物在機體或器官內(nèi)的量減少到原有量的一半所需要的時間，又稱代謝半減期或生物半衰期()同一環(huán)境污染物在不同組織器官內(nèi)的消除情況存在差異，因此，又可分為全身生物半減期和某一器官生物半減期。

第十一頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六意義

在用生物半減期評定環(huán)境污染物引起的人體健康損害和制訂人體攝入量限度時，應該考慮生物半減期的個體差異。在有害物質(zhì)攝入量完全相等的情況下，生物半減期長的人中毒的危險性比半減期短的人大。此外，要選擇半減期的最大值作為依據(jù)。例如，制訂甲基汞攝入量標準時，主要應考慮臟器特別是腦的半減期，因為甲基汞的全身半減期，并不能可靠地反映出體內(nèi)某些特殊器官中汞的蓄積情況。動物實驗表明，汞在腦中的生物半減期比在其他器官中長。第十二頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六半減期較長(1-2個月)的化學物的生物監(jiān)測指標，則表示最近幾個月的接觸量，加尿中汞的含量。半減期長(幾個月以上)的化學物的生物監(jiān)測指標，則表示長期低劑量接觸或累積接觸量，如血液和脂肪組織中有機氯農(nóng)藥的含量，尿中鉛、鎘的含量等。

第十三頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六理想的生物監(jiān)測指標應滿足下列要求

a．有特異性。生物監(jiān)測指標應能反映一個或一類特定化學物的接觸內(nèi)劑量，如血鉛可反映機體接觸鉛量；血中膽堿酯酶活性能反映有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的接觸程度，但不能反映具體品種。第十四頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六理想的生物監(jiān)測指標應滿足下列要求

b．有明確的劑量關系。即能反映化學物的內(nèi)劑量與外接觸量的相關關系。如血鉛含量地高低與工人接觸環(huán)境空氣中的鉛濃度有關，因此，血鉛是較理想的生物監(jiān)測指標。

第十五頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六理想的生物監(jiān)測指標應滿足下列要求

c．有明確的效應關系。即能反映化學物的內(nèi)劑量與所產(chǎn)生的生物效應的相關關系。如ZPP和δ-ALA與血鉛含量有相關關系。第十六頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六理想的生物監(jiān)測指標應滿足下列要求

d.應有足夠的穩(wěn)定性。作為生物監(jiān)測指標的生物材料以及所含有的化學物原形或其代謝物或生物效應指標，應能在一定時間內(nèi)穩(wěn)定不變，以便準確測定。

e．有相應的準確可靠的監(jiān)測方法。第十七頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六

近年來，由于新的醫(yī)學生物學技術的問世，生物材料中金屬的監(jiān)測工作有了迅速發(fā)展，特別是許多關于致癌性的金屬生物監(jiān)測指標已基本確立并被學者們廣泛采用。對不同職業(yè)人群金屬生物監(jiān)測指標概括見表。

第十八頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六不同職業(yè)人群金屬生物監(jiān)測指標作業(yè)類型各種焊接作業(yè)生物監(jiān)測指標金屬

鉻血鉻，尿鉻，鼻、鼻竇組織鉻鎳

紅細胞鎳，血漿鎳，尿鎳錳尿錳，血清錳

外周血淋巴細胞染色體畸變，姊妹染色單體交換，程序外DNA合成，外周血淋巴細胞DNA鏈斷裂，外周血白細胞、淋巴細胞DNA-蛋白交聯(lián)鎳精練鎳尿鎳，發(fā)鎳，鼻腔刷片細胞影像學分析，真活檢材料癌前組織學變化，鼻活檢材料p53蛋白表達，鼻、鼻竇組織鉻和鎳含量鎳電解鎳尿鎳，血鎳，口腔粘膜細胞微核形成第十九頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六生物監(jiān)測技術

生物監(jiān)測技術是生物監(jiān)測十分重要的組成部分，其包括樣品的采集、運輸、保存、處理、分析和質(zhì)量保證等。第二十頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六1

采樣和保存

1.1血液

血液為生物監(jiān)測最常用的生物材料之一。血液中化學物的濃度可反映機體近期接觸的程度，常與機體吸收化學物的總量呈正相關。血液中含有許多能被化學物作用的成分(酶、蛋白質(zhì)等)，如鉛影響δ-ALA、有機磷農(nóng)藥抑制膽堿脂酶、一氧化碳與血紅蛋白結合為碳氧血紅蛋白等。測定這些成分的變化，可間接反映化學物的內(nèi)劑量和健康危險度。

第二十一頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六1

采樣和保存此外，化學物可以不同的分配比進入血液的不同成分，有的化學物主要進入紅細胞內(nèi)，有的則留在血漿中。如錳、鉛、鋅在紅細胞中的濃度遠高于血漿，而鈣則相反。因此，可以分別測定血液不同成分中化學物或其代謝物含量或無損性效應。但反復采血不易被受檢者接受，采血量也受到一定的限制，故在實際工作中，血樣不如尿樣應用普遍。第二十二頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六

血樣的采集

需血量在0.1mL以下，可從指端或耳垂采集；需血量0.5mL以上，從肘部靜脈采集。采血前，先將采血部位皮膚清洗消毒。在監(jiān)測金屬時，應先用0.1mol/LHCL或HNO3清洗，再作常規(guī)處理。采血的注射器及針頭等，要清洗干凈和消毒。在采集金屬血樣時，最好用塑料針頭。第二十三頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六血樣的采集據(jù)文獻報道，用不銹鋼針頭采血的鉻含量比用塑料針頭要高出4倍。因此，采血前，應先作空白檢查，選擇空白低的能滿足生物監(jiān)測要求的針頭。在需要分別測定紅細胞、血漿或血清中化學物時，為防止溶血發(fā)生，采血用的針頭、針管、容器要完全干燥；

第二十四頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六血樣的采集抽完血，拔下針頭后，再將血注入容器中。樣品中使用的抗凝劑或防腐劑，可能帶進污染，例如有些肝素中含有微量鉛，在測定血鉛時會造成誤差。其他抗凝劑EDTA和草酸鹽等也可能是金屬元素的污染源。作為防腐劑的硝酸、鹽酸等也可含微量金屬，要選擇符合測定要求的防腐劑。第二十五頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六

血樣的保存

采好的血樣應放入清潔干燥的聚四氟乙烯或聚乙烯塑料管中，密封保存。在貯存過程中，必須注意避免污染和揮發(fā)、吸附等引起檢測物濃度的增加和降低。通常在采樣后應盡早分析。全血應加抗凝劑后于4℃冷暗處保存，但不宜長期保存。血漿或血清從全血中分離后，可保存在4℃冰箱內(nèi)。如要長期保存，可置于低溫冰箱中凍結或冷凍干燥。

第二十六頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六1.2

尿

為最常用的生物監(jiān)測材料。采集容易，不損傷受檢者；能采集較大量的樣品供測定；許多化學物經(jīng)機體吸收、代謝后，經(jīng)腎臟隨尿排出原型或代謝物，而且排泄量可反映機體接觸化學物的程度和體內(nèi)的平衡狀況。尿作為生物監(jiān)測材料的缺點是其成分受飲食、氣候、勞動強度等影響較大。第二十七頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六

尿樣的采集

根據(jù)監(jiān)測目的和要求，監(jiān)測物的性質(zhì)、代謝和生物半減期，以及所選用的監(jiān)測方法，來確定尿樣采集的時間、數(shù)量和保存方法。以采樣時間而言，可分為采集一定時間內(nèi)的全部尿液和采集某—時刻的一次尿液兩種。

第二十八頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六

尿樣的采集

前者如收集24小時或晨尿，能較好地反映化學物的排泄量和機體的內(nèi)劑量，受飲水量、出汗量等影響小，但收集較困難；后者收集比較容易，根據(jù)需要和要求，選擇班中、班后、班前尿或晨尿，但測得結果受尿量的影響較大。最好同時測定尿比重或肌酐，將測定值進行校正。第二十九頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六

尿樣的采集

采集尿樣的容器常用帶蓋的廣口玻璃瓶或塑料瓶，采樣前，一定要清洗干凈。容器壁不應含有被測物，也不吸附被測物。采樣量按測定需要而定。一次尿最好收集100mL以上；以便用于測定比重或肌酐。第三十頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六

尿樣的保存

在常溫下，尿容易腐敗變質(zhì)，產(chǎn)生沉淀或細菌生長，破壞待測物，故短期保存，應放在l-4℃冰箱內(nèi)；長期保存，則放在-20℃低溫冰箱中。尿采集后，有時可加少量酸酸化（100+1），有時需加細菌生長抑制劑，如NaN3(5-10mg/L尿)等。第三十一頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六

尿樣濃度的校正

為減少尿量的影響，一次尿樣的測定值必須進行校正。尿比重校正法是用尿比重計測量尿的比重后，用下式計算校正系數(shù)，將測得的尿中化學物或其代謝物的濃度乘以校正系數(shù)，即得校正后的濃度。第三十二頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六尿樣濃度的校正式中1.020為我國規(guī)定的尿樣標準比重。比重低于1.010過分稀釋的尿，經(jīng)比重校正后的濃度會出現(xiàn)不適當?shù)钠?；而比重大?.035過分濃的尿，則結果會不適當?shù)钠?。比重低?.010或高于1.035的尿樣應棄去，重新采樣測定。第三十三頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六尿液比重的測定有何意義?

尿比重表示尿中全部粒子的重量總和，是簡單測定腎臟濃縮功能的指標。測定時以水的比重作為1，因為尿液內(nèi)含有代謝產(chǎn)物，所以其比重應大于1。正常人24小時總尿量的比重約在1．015～1．025之間，而1天中各次尿液的比重，受飲水及出汗等因素影響，變化很大，稀釋時可低至1．001，濃縮時可高至1．040。尿比重固定于1．010±0．003，稱為等滲尿，表示濃縮與稀釋功能均受損害。若測定全日各次尿比重均達不到1．018時，或者全日各次尿比重差距不到0．008以上，均表示濃縮功能不全。

第三十四頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六尿液比重的測定有何意義?

尿比重反映尿液內(nèi)可溶性物質(zhì)和水分的比例，是尿中溶解物質(zhì)濃度的指標，不僅取決于尿中質(zhì)點的數(shù)量，也取決于質(zhì)點的密度和溶解度。尿液比重被用于度量腎臟在維持機體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定中的濃縮和稀釋能力，故比重測定常作為腎功能試驗之一。

第三十五頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六尿樣濃度的校正尿肌酐校正法是在測定尿中化學物或其代謝物的同時，測定其肌酐含量，以每克或每毫摩爾肌酐相應的化學物或其代謝物的量來表示。可由下式計算：肌酐濃度小于0.3或大于3.0g／L的尿樣，應重新采樣測定。第三十六頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六什么是肌酐？

肌酐是肌肉在人體內(nèi)代謝的產(chǎn)物，每20g肌肉代謝可產(chǎn)生1mg肌酐。肌酐主要由腎小球(腎臟的重要組成部分)濾過排出體外。血中肌酐來自外源性和內(nèi)源性兩種，外源性肌酐是肉類食物在體內(nèi)代謝后的產(chǎn)物；內(nèi)源性肌酐是體內(nèi)肌肉組織代謝的產(chǎn)物。在肉類食物攝入量穩(wěn)定時．身體的肌肉代謝又沒有大的變化，肌酐的生成就會比較恒定。

第三十七頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六肌酐包括血肌酐和尿肌酐

肌酐分為血清肌酐和尿肌酐兩類。我們平時都把血清肌酐叫做血肌酐或簡稱為肌酐。

第三十八頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六什么是血肌酐？臨床上檢測血肌酐是常用的了解腎功能的主要方法之一。那么血肌酐是怎么一回事呢?內(nèi)生肌酐是人體肌肉代謝的產(chǎn)物。在肌肉中，肌酸主要通過不可逆的非酶脫水反應緩緩地形成肌酐，再釋放到血液中，隨尿排泄。因此血肌酐與體內(nèi)肌肉總量關系密切，不易受飲食影響。肌酐是小分子物質(zhì)，可通過腎小球濾過，在腎小管內(nèi)很少吸收，每日體內(nèi)產(chǎn)生的肌酐，幾乎全部隨尿排出，一般不受尿量影響。腎功能不全時，肌酐在體內(nèi)蓄積成為對人體有害的毒素。第三十九頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六什么是尿肌酐?

尿肌酐檢查可測定血液經(jīng)腎濾過排出的肌酐含量。單獨測定尿肌酐濃度對于評價腎功能很少有幫助，但與血肌酐一起測定，可作為內(nèi)生肌酐清除率的必需指標。其增高可見于肢端肥大癥、巨人癥、糖尿病、感染、甲狀腺功能減低、進食肉類、運動、攝入藥物（如維生素C、左旋多巴、甲基多巴等）；尿肌酐減低見于急性或慢性腎功能不全、重度充血性心力衰竭、甲狀腺功能亢進、貧血、肌營養(yǎng)不良、白血病、素食者，以及服用雄激素、噻嗪類藥等。

第四十頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六尿肌酐：主要來自血液經(jīng)過腎小球過濾后隨尿液排出的肌酐[參考值]0.2—13．2mmol／L700—1500mg/L第四十一頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六尿中肌酐生成和排泄量非常恒定，與機體內(nèi)肌肉的總量比例，食物和尿量幾乎不受影響。第四十二頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六1.3

呼出氣

呼出氣中揮發(fā)性化合物(如有機溶劑等)的濃度與血中濃度有關，并與機體總的吸收量、脫離接觸后的時間，以及從體內(nèi)排出的速度有關。呼出氣分析具有采樣方便、無損傷性、受檢者易于接受等特點，在國外作為職業(yè)性接觸有機溶劑無損害性監(jiān)測的方法而得到日益發(fā)展。第四十三頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六1.3

呼出氣揮發(fā)性有機溶劑吸收進入肺部，最后在肺泡氣與動脈血和靜脈血的分壓間達到動態(tài)平衡。根據(jù)呼出氣分析結果可評估接觸者對有害物質(zhì)的接觸水平，在一定程度上可代替血液毒物分析。因而，呼出氣分析研究是生物監(jiān)測領域中一個重要課題第四十四頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六

呼出氣的采集

呼出氣的采集分為混合氣和末端氣(肺泡氣)兩種。前者包括死體積呼氣，受環(huán)境空氣濃度的影響；后者反映血中化學物濃度，已成為主要的采集對象。采集呼出氣可用塑料袋、玻璃管等。塑料袋可收集混合氣和末端氣，使用方便?？筛鶕?jù)測定的需要，選擇合適的塑料袋。玻璃管主要用于采集末端氣，它的兩端裝有閥門和取氣裝置，可采集末端氣50-100mL。通過玻璃管吐氣入塑料袋中，可以達到分段收集的目的。

第四十五頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六

呼出氣的保存

采得的呼出氣應盡快分析，不宜長期保存。各種化學物的保存時間，可測量衰變率來確定。

第四十六頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六1.4

其它生物材料

毛發(fā)、指甲、唾液、牙齒、骨骼、脂肪組織、肝和腎等，在職業(yè)衛(wèi)生的生物監(jiān)測中應用較少。有遺傳毒性的監(jiān)測已有人檢查生殖細胞、羊水細胞、臍帶血及胚胎組織等，但目前推薦的生物樣品仍是尿和血。

第四十七頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六2

分析方法

用于生物監(jiān)測的分析方法，首先要滿足衛(wèi)生學的要求，其次應滿足分析化學的要求。生物監(jiān)測的受檢物不少在ppm或ppb水平，加上生物材料樣品量常有一定的限制，樣品基體比較復雜，所以分析方法的靈敏度要高，準確度和精密度要好，還應有較好的特異性，操作不宜太復雜

第四十八頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六2

分析方法

隨著現(xiàn)代技術的發(fā)展，已有許多分析儀器能夠滿足生物監(jiān)測的需要。原子吸收分光光度法、等離子體原子發(fā)射光譜法、中子活化法、新的電化學法等能很好地測定生物材料中金屬和類金屬。氣相色譜法、高效液相色譜法等能用于有機化學物的測定。其它分析技術如色-質(zhì)聯(lián)機、付里葉紅外光譜法、X線熒光分析法以及生化方法如酶免疫法和放射免疫分析法等，越來越多地用于生物監(jiān)測。

第四十九頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六我國“七五”期間已經(jīng)研制了28種化學物的54個規(guī)范化監(jiān)測方法，可作為國內(nèi)部分生物監(jiān)測的標準方法：

尿鉛的雙硫腙比色法、吸附催化極譜法、原子吸收光譜法(AAS)、微分電位溶出法(DPSA)；血鉛的AAS法、DPSA法；尿δ-ALA比色法；紅細胞原卟啉的熒光法；尿汞的雙硫腙比色法、冷原子吸收法、有機汞和無機汞的分別測定方法；第五十頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六尿砷的DDC-Ag比色法；氯化物發(fā)生AAS(HAAS)法；尿氟離子選擇電極法；尿鎘的石墨爐AAS(GFAAS)法、巰基棉富集火焰AAS(FAAS)法，DPSA法；血鎘的AAS法；尿鉻的比色法和AAS法，血鉻的AAS法；尿鎳的比色法和AAS法；血鎳的AAS法；尿釩的極譜法和AAS法；尿鈹AAS法；尿硒的HAAS法；

第五十一頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六碳氧血紅蛋白的雙波長比色法；尿中氰酸鹽的比色法；呼出氣中二硫化碳的氣相色譜(GC)法；尿中2-硫代噻唑烷-4-羧酸(TTCA)的高效液相色譜(HPLC)法；呼出氣中苯的GC法；尿酚的比色法、液晶柱GC法和FFAP柱GC法；尿馬尿酸的比色法；尿馬尿酸和甲基馬尿酸分別測定的薄層層析法和HPLC法；尿中苯乙醇酸和苯乙醛酸的HPLC法；

第五十二頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六尿對氨基酚的比色法和HPLC法；尿對硝基酚的比色法和HPLC法；尿硫撐雙乙酸(TDGA)的GC法；尿三氯乙酸的比色法；尿五氯酚的比色法和HPLC法；尿4-氨基-2，6-二硝基甲苯（4A)的GC法；尿甲醇的頂空GC（HS—GC）法；尿殺蟲脒及代謝物的比色法和GC法；全血膽堿酯酶活性的羥胺-FeCl3和DTNB兩個比色法。

第五十三頁，共六十頁，編輯于2023年，星期六近10多年來發(fā)展起來的DNA加合物和蛋白質(zhì)加合物測定，不僅可用作內(nèi)劑量或生物效應劑量的標志物，而且探討了化學物的生物標志物與毒性之間的關系，增強了對致毒、致突變和致癌機制的認識。目前檢測加合物除用高效液相色譜法、氣相色譜—質(zhì)譜聯(lián)機等方法外，常用免疫分析法，包括競爭性放射免疫分析法(RIA)、酶聯(lián)免疫吸附分析法(EL