2024屆 一輪復(fù)習(xí) 蘇教版 發(fā)酵工程的培養(yǎng)基與無菌技術(shù) 課件 （115張）

第1課時發(fā)酵工程的培養(yǎng)基與無菌技術(shù)課標(biāo)要求1.概述培養(yǎng)基的類型及用途。2.闡明無菌技術(shù)的操作方法。3.概述利用平板劃線法和稀釋涂布平板法，進(jìn)行微生物分離和純化?？键c一發(fā)酵工程的培養(yǎng)基考點二發(fā)酵工程的無菌技術(shù)內(nèi)容索引重溫高考

真題演練課時精練考點一發(fā)酵工程的培養(yǎng)基培養(yǎng)基(1)概念：主要是指為人工培養(yǎng)微生物等而制備的，適合微生物等_____

的營養(yǎng)基質(zhì)。歸納

夯實必備知識生長、繁殖或積累代謝產(chǎn)物(2)類型①按成分分類培養(yǎng)基種類成分優(yōu)點缺點用途天然培養(yǎng)基

或

以及它們的提取物或粗消化物取材便利、____

、配制簡便營養(yǎng)成分難以控制，實驗結(jié)果的重復(fù)性較差工業(yè)化生產(chǎn)合成培養(yǎng)基準(zhǔn)確稱量的高純度_________加_______化學(xué)成分

，實驗可重復(fù)性好配制過程繁瑣，成本較高研究與育種動植物組織微生物細(xì)胞營養(yǎng)豐富化學(xué)試劑明確蒸餾水②按物理狀態(tài)分類培養(yǎng)基種類特點用途

培養(yǎng)基不含

，呈

狀態(tài)工業(yè)生產(chǎn)

培養(yǎng)基或半固體培養(yǎng)基含

，呈_____或半固體狀態(tài)微生物的分離、鑒定，活菌計數(shù)，菌種保藏液體凝固劑液體固體凝固劑(如瓊脂)固體③按用途分類：

培養(yǎng)基和特殊培養(yǎng)基基礎(chǔ)特殊培養(yǎng)基種類選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基

培養(yǎng)基用途將某種或某類

從混雜的微生物中分離出來快速

不同微生物，也用于

和篩選產(chǎn)生某種________的菌種用于培養(yǎng)營養(yǎng)要求比較苛刻的

微生物?？稍黾铀栉⑸锏腳____微生物分類鑒定分離代謝產(chǎn)物異養(yǎng)數(shù)量加富(3)成分成分含義作用來源碳源__________________構(gòu)成生物體的細(xì)胞的物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物，有些也是異養(yǎng)生物的能源物質(zhì)無機(jī)碳源：CO2、NaHCO3等；有機(jī)碳源：糖類、牛肉膏等氮源_________________________________________無機(jī)氮源：N2、NH3、銨鹽、硝酸鹽等；有機(jī)氮源：蛋白胨等提供碳元素的物質(zhì)提供氮元素的物質(zhì)合成蛋白質(zhì)、核酸等物質(zhì)無機(jī)鹽為微生物提供除碳、氮之外的各種重要元素，包括大量元素和微量元素為微生物提供無機(jī)營養(yǎng)，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH等無機(jī)化合物：KH2PO4、K2HPO4、NaCl等水生物體含量最高的無機(jī)化合物良好的溶劑，參與化學(xué)反應(yīng)等培養(yǎng)基、代謝產(chǎn)物考向培養(yǎng)基配制及其作用1.(多選)現(xiàn)有兩種固體培養(yǎng)基，已知其配制時所加的成分和含量如下表，假設(shè)用這兩種培養(yǎng)基分別去分離土壤中的兩種微生物，甲、乙適合分離的微生物是突破

強(qiáng)化關(guān)鍵能力成分KH2PO4MgSO4·7H2ONaClCaSO4·2H2OCaCO3葡萄糖純淀粉甲培養(yǎng)基0.02%0.02%0.02%0.01%0.5%0.5%2%乙培養(yǎng)基0.02%0.02%0.02%0.01%0.5%－－成分KH2PO4MgSO4·7H2ONaClCaSO4·2H2OCaCO3葡萄糖純淀粉甲培養(yǎng)基0.02%0.02%0.02%0.01%0.5%0.5%2%乙培養(yǎng)基0.02%0.02%0.02%0.01%0.5%－－A.甲培養(yǎng)基適于分離自養(yǎng)型自生固氮菌B.甲培養(yǎng)基適于分離異養(yǎng)型自生固氮菌C.乙培養(yǎng)基適于分離自養(yǎng)型自生固氮菌D.乙培養(yǎng)基適于分離異養(yǎng)型自生固氮菌√√成分KH2PO4MgSO4·7H2ONaClCaSO4·2H2OCaCO3葡萄糖純淀粉甲培養(yǎng)基0.02%0.02%0.02%0.01%0.5%0.5%2%乙培養(yǎng)基0.02%0.02%0.02%0.01%0.5%－－甲培養(yǎng)基中含有的葡萄糖和淀粉是有機(jī)物，可以作為碳源和能源，適用于異養(yǎng)微生物生長，由此推出該培養(yǎng)基適于分離異養(yǎng)型的自生固氮菌，A錯誤，B正確；乙培養(yǎng)基中不含有機(jī)碳源，不含氮源，可用來分離培養(yǎng)自養(yǎng)型的自生固氮菌，C正確，D錯誤。2.在微生物培養(yǎng)的過程中，需要通過選擇培養(yǎng)或鑒別培養(yǎng)的方法來篩選出目標(biāo)菌種。下列與之相關(guān)的敘述中，不正確的是A.纖維素分解菌能夠分解剛果紅染料，從而使菌落周圍出現(xiàn)透明圈B.尿素分解菌能夠?qū)⒛蛩胤纸鉃榘?，從而使酚紅指示劑變紅C.在培養(yǎng)基中加入抗生素能夠篩選出具有相應(yīng)抗性的菌株D.在含有碳酸鈣的培養(yǎng)基上生長的乳酸菌菌落周圍會出現(xiàn)“溶鈣圈”√纖維素分解菌能夠分解纖維素，在培養(yǎng)基中加入剛果紅，可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，紅色復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，A錯誤；尿素分解菌能夠?qū)⒛蛩胤纸鉃榘?，使培養(yǎng)基呈堿性，從而使酚紅指示劑變紅，B正確。3.(2023·江蘇無錫高三模擬)培養(yǎng)微生物需要提供適宜的培養(yǎng)基。下列關(guān)于培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基的敘述，錯誤的是A.培養(yǎng)基為目標(biāo)微生物提供適宜的生長環(huán)境B.培養(yǎng)基的成分需根據(jù)微生物的代謝特點而定C.培養(yǎng)基需滿足各種微生物生長繁殖的需求D.培養(yǎng)基通常需包含水、無機(jī)鹽、碳源、氮源等營養(yǎng)物質(zhì)√培養(yǎng)基中含有微生物生長需要的營養(yǎng)物質(zhì)，還能滿足微生物生長對環(huán)境的要求，A正確；配制培養(yǎng)基時，需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)的需要，B正確；培養(yǎng)基是根據(jù)不同微生物的生長繁殖需求進(jìn)行配制的，不能滿足各種微生物生長繁殖的需求，C錯誤?？键c二發(fā)酵工程的無菌技術(shù)1.發(fā)酵工程的滅菌方法(1)化學(xué)試劑滅菌法：采用

滅菌的方法。一般不用于培養(yǎng)基滅菌。(2)射線滅菌法：利用紫外線等產(chǎn)生的

進(jìn)行滅菌的方法。(3)干熱滅菌法：包括

滅菌法和

法等。(4)濕熱滅菌法：利用

進(jìn)行滅菌的方法。(5)過濾除菌法：通過

從而達(dá)到除菌目的的方法。歸納

夯實必備知識滅菌劑高能粒子干熱空氣火焰灼燒飽和蒸汽過濾阻留微生物2.發(fā)酵工程的滅菌設(shè)備(1)電熱鼓風(fēng)干燥箱：

滅菌設(shè)備常用于空的

、金屬用具和其他耐高溫的物品的滅菌。(2)高壓蒸汽滅菌鍋：

滅菌設(shè)備，其使用包括加水、

、加熱、排空冷空氣、

、出鍋等步驟。(3)空氣除菌設(shè)備。干熱玻璃器皿濕熱裝鍋保溫保壓3.發(fā)酵工程的無菌操作器具(1)接種器具①接種：是指在

條件下將微生物接入

的操作過程。②常用的工具有

等，在涂布平板接種時要用

，穿刺接種時要用接種針，在

或在平板培養(yǎng)基上進(jìn)行

時要用接種環(huán)。無菌培養(yǎng)基玻璃涂布器、接種針、接種環(huán)玻璃涂布器斜面接種劃線接種(2)轉(zhuǎn)移器具①移液管：用來準(zhǔn)備移取一定

的溶液或

化學(xué)試劑的量器。②微量取液器：取液量

時使用，分為固定容量的和可調(diào)容量的兩種。③超凈工作臺：是一種經(jīng)過空氣凈化而形成

操作環(huán)境的設(shè)備。優(yōu)點是操作

。體積分裝很少高潔凈方便4.微生物接種和傳代的無菌技術(shù)(1)穿刺接種：常用于

微生物。(2)斜面接種：常用的菌種傳代和低溫下

菌種的方法。(3)斜面接種和培養(yǎng)酵母菌①主要目的：

、擴(kuò)大培養(yǎng)和

等。②主要步驟：準(zhǔn)備接種→

→試管口滅菌→挑取少許菌種→

→培養(yǎng)。厭氧保存菌種轉(zhuǎn)移保存純凈菌種接種環(huán)滅菌劃線接種5.微生物分離、純化和培養(yǎng)的無菌技術(shù)(1)兩種純化方法的比較項目平板劃線法稀釋涂布平板法分離結(jié)果

關(guān)鍵操作接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線①一系列的梯度稀釋；②涂布平板操作接種用具接種環(huán)涂布器優(yōu)點可以觀察菌落特征，對混合菌進(jìn)行分離可以計數(shù)，可以觀察菌落特征缺點不能計數(shù)操作復(fù)雜，需要涂布多個平板共同點都要用到固體培養(yǎng)基；都需進(jìn)行無菌操作；都會在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落；都可用于觀察菌落特征(2)酵母菌純培養(yǎng)的操作步驟15~20g瓊脂濕熱滅菌(高壓蒸汽滅菌)干熱滅菌酒精燈火焰灼燒滅菌平板劃線法恒溫培養(yǎng)箱28①平板冷凝后，要將平板倒置的原因是什么？提示因為平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠，平板倒置后，既可避免培養(yǎng)基表面的水分過快地?fù)]發(fā)，又可防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。②在接種前隨機(jī)取若干個滅菌后的未接種的平板，先行培養(yǎng)一段時間，這樣做的目的是

。檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格③平板劃線第二次及其以后的劃線操作總是從上一次劃線末端開始，這樣做的目的是什么？提示能使微生物的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少，最終得到由單個微生物繁殖形成的純培養(yǎng)物。④平板劃線時最后一次劃線為何不能與第一次劃線相連？提示最后一次劃線已經(jīng)將酵母菌稀釋成單個細(xì)胞，如果與第一次劃線相連，則增加了酵母菌數(shù)目，得不到純化的效果。(3)土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)①分離原理：土壤中的細(xì)菌之所以能分解尿素，是因為它們能合成

，這種物質(zhì)在把尿素分解成無機(jī)物的過程中起到

作用。②統(tǒng)計菌落數(shù)目一般用

法。脲酶催化涂布平板③計數(shù)：統(tǒng)計菌落數(shù)目時，培養(yǎng)基表面生長的1個菌落，來源于樣品稀釋液中

個活菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在

的平板進(jìn)行計數(shù)。④公式：

。130～300(平均菌落數(shù)÷涂布的稀釋液體積)×稀釋倍數(shù)延伸應(yīng)用篩選能高效降解尿素的細(xì)菌(目的菌)的培養(yǎng)基成分如下表所示：KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素瓊脂H2O1.4g2.1g0.2g10.0g1.0g15.0g定容至1000mL(1)該培養(yǎng)基是如何實現(xiàn)對分解尿素的細(xì)菌的篩選的？提示該培養(yǎng)基中唯一氮源為尿素，只有能合成脲酶的微生物才能夠分解尿素，而不能合成脲酶的微生物不能分解尿素，會因缺乏氮源而無法生長繁殖，所以用該培養(yǎng)基能夠篩選出分解尿素的細(xì)菌。延伸應(yīng)用KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素瓊脂H2O1.4g2.1g0.2g10.0g1.0g15.0g定容至1000mL(2)如何證明該選擇培養(yǎng)基的確起到了篩選作用？提示同時設(shè)置牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基并進(jìn)行接種后培養(yǎng)，觀察兩種培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目；若牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上的菌落數(shù)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的菌落數(shù)，則證明了選擇培養(yǎng)基的確起到了篩選作用。延伸應(yīng)用KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素瓊脂H2O1.4g2.1g0.2g10.0g1.0g15.0g定容至1000mL(3)如何證明所用的選擇培養(yǎng)基沒有受到環(huán)境污染？提示將未接種的上述培養(yǎng)基與接種的上述培養(yǎng)基同時培養(yǎng)，觀察是否有菌落的產(chǎn)生；若未接種的培養(yǎng)基無菌落產(chǎn)生，則證明培養(yǎng)基沒有受到環(huán)境污染。延伸應(yīng)用KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素瓊脂H2O1.4g2.1g0.2g10.0g1.0g15.0g定容至1000mL(4)若甲、乙兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的該細(xì)菌數(shù)。在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，得到以下兩種統(tǒng)計結(jié)果。①甲同學(xué)在該濃度下涂布了一個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)為230，該同學(xué)的統(tǒng)計結(jié)果是否真實可靠？為什么？提示不可靠。為增強(qiáng)實驗的說服力與準(zhǔn)確性，應(yīng)設(shè)置重復(fù)實驗，在同一稀釋度下涂布至少3個平板，統(tǒng)計結(jié)果后計算平均值。延伸應(yīng)用KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素瓊脂H2O1.4g2.1g0.2g10.0g1.0g15.0g定容至1000mL②乙同學(xué)在該濃度下涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別為21、212、256，該同學(xué)將21舍去，然后取平均值。該同學(xué)對實驗結(jié)果的處理是否合理？為什么？提示不合理。微生物計數(shù)時，如果實驗中出現(xiàn)重復(fù)實驗結(jié)果不一致的情況，應(yīng)分析實驗過程中可能的影響因素，找出差異的原因，需重新實驗，而不能簡單地舍棄?？枷蛞话l(fā)酵工程滅菌的方法設(shè)備與無菌技術(shù)操作器具4.下列有關(guān)使用高壓蒸汽滅菌鍋的操作，錯誤的是A.加水時，水面應(yīng)與三角擱架平齊B.加蓋時，將排氣軟管插入內(nèi)層滅菌桶的排氣槽內(nèi)C.加熱時，待冷空氣完全排盡后關(guān)上排氣閥D.切斷電源后，打開排氣閥使壓力表降到零后開蓋突破

強(qiáng)化關(guān)鍵能力√在使用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌時，加水時的水面應(yīng)與三角擱架平齊，A正確；加蓋時，應(yīng)該將排氣軟管插入內(nèi)層滅菌桶的排氣槽內(nèi)，B正確；加熱時，應(yīng)該等冷空氣完全排盡后再關(guān)上排氣閥，C正確；切斷電源后，應(yīng)該等壓力表降到零后再打開排氣閥并開蓋，D錯誤。5.微生物培養(yǎng)時常利用無菌技術(shù)避免雜菌的污染，下列相關(guān)敘述錯誤的是A.配制好的培養(yǎng)基應(yīng)放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌B.實驗中避免已滅菌處理的材料用具與周圍物品接觸C.接種前后的接種環(huán)都要在酒精燈火焰上進(jìn)行灼燒D.實驗結(jié)束后對實驗室噴灑石碳酸同時配合紫外線照射√對培養(yǎng)基滅菌的方法是高壓蒸汽滅菌法，A錯誤；為避免雜菌污染，實驗中應(yīng)避免已滅菌處理的材料用具與周圍物品接觸，B正確；為了防止雜菌污染，每次接種前后，接種環(huán)都要進(jìn)行灼燒滅菌，C正確；紫外線能破壞DNA結(jié)構(gòu)，密閉空間內(nèi)的空氣常采用紫外線照射消毒，噴灑石碳酸同時配合紫外線照射可提高對密閉空間的消毒效果，D正確。考向二微生物接種和傳代、分離、純化和培養(yǎng)的無菌技術(shù)6.(2023·江蘇南通高三模擬)下圖為微生物的實驗室培養(yǎng)的有關(guān)操作，下列相關(guān)敘述錯誤的是A.步驟①中，需將接種工具灼燒至變紅，以殺滅雜菌B.步驟②中，將接種工具冷卻時不宜距酒精燈火焰太遠(yuǎn)C.圖中接種方法的目的是使菌種逐漸稀釋，經(jīng)培養(yǎng)后獲得單個菌落D.接種后應(yīng)將培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)，培養(yǎng)后可以根據(jù)結(jié)果進(jìn)行微生物計數(shù)√步驟②中，將接種工具冷卻時不宜距酒精燈火焰太遠(yuǎn)，防止受到雜菌污染，B正確；圖中所示的接種方法是平板劃線法，目的是使接種的菌種逐漸稀釋，經(jīng)培養(yǎng)后獲得由單個細(xì)菌繁殖而來的菌落，C正確；圖示的平板劃線法不能用于微生物的計數(shù)，D錯誤。步驟①中，接種前灼燒接種環(huán)至變紅，目的是殺滅接種環(huán)上可能引起污染的微生物，A正確；7.(2018·江蘇，31)酵母的蛋白質(zhì)含量可達(dá)自身干重的一半，可作為飼料蛋白的來源。有些酵母可以利用工業(yè)廢甲醇作為碳源進(jìn)行培養(yǎng)，這樣既可減少污染又可降低生產(chǎn)成本。研究人員擬從土壤樣品中分離該類酵母，并進(jìn)行大量培養(yǎng)。下圖所示為操作流程，請回答下列問題：(1)配制培養(yǎng)基時，按照培養(yǎng)基配方準(zhǔn)確稱量各組分，將其溶解、定容后，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的_____，及時對培養(yǎng)基進(jìn)行分裝，并進(jìn)行_______________滅菌。pH高壓蒸汽(濕熱)配制培養(yǎng)基時，進(jìn)行計算、稱量、溶解、定容后，需先調(diào)pH再分裝到錐形瓶中進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。(2)取步驟②中不同梯度的稀釋液加入標(biāo)記好的無菌培養(yǎng)皿中，在步驟③中將溫度約________(在25℃、50℃或80℃中選擇)的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿混勻，冷凝后倒置培養(yǎng)。50℃倒平板時的培養(yǎng)基溫度約為50℃，冷凝后倒置培養(yǎng)。(3)挑取分離平板中長出的單菌落，按步驟④所示進(jìn)行劃線。下列敘述合理的有_________。a.為保證無菌操作，接種針、接種環(huán)使用前都必須滅菌b.劃線時應(yīng)避免劃破培養(yǎng)基表面，以免不能形成正常菌落c.挑取菌落時，應(yīng)挑取多個菌落，分別測定酵母細(xì)胞中甲醇的含量d.可以通過逐步提高培養(yǎng)基中的甲醇的濃度，獲得甲醇高耐受株a、b、d平板劃線時，接種針、接種環(huán)使用前和每次劃線后都需要進(jìn)行灼燒滅菌，以免造成雜菌污染，a正確；劃線時不能劃破培養(yǎng)基表面，否則不能形成正常菌落，b正確；挑取菌落時，應(yīng)挑取多個不同的菌落，分別測定酵母細(xì)胞中蛋白質(zhì)含量，c錯誤；逐步提高培養(yǎng)基中甲醇的濃度，能篩選出其中的耐受菌，獲得甲醇高耐受菌株，d正確。(4)步驟⑤中，為使酵母數(shù)量迅速增加，培養(yǎng)過程中需保證充足的營養(yǎng)和______供應(yīng)。為監(jiān)測酵母的活細(xì)胞密度，將發(fā)酵液稀釋1000倍后，經(jīng)等體積臺盼藍(lán)染液染色，用25×16型血球計數(shù)板計數(shù)5個中格中的細(xì)胞數(shù)，理論上_____色細(xì)胞的個數(shù)應(yīng)不少于______，才能達(dá)到每毫升3×109個活細(xì)胞的預(yù)期密度。氧氣無30酵母是兼性厭氧型真菌，在有氧條件下可大量繁殖。酵母擴(kuò)大培養(yǎng)時，需保證充足的營養(yǎng)和氧氣等條件。由題中信息“經(jīng)等體積臺盼藍(lán)染液染色”可知，計數(shù)室中培養(yǎng)液容積實際只有0.1÷2＝0.05mm3。設(shè)5個中方格中無色(活細(xì)胞不能被臺盼藍(lán)染色)的細(xì)胞數(shù)目為x個，則3×109＝x/5×25×1000×1000÷0.05，解得x＝30(個)。三重溫高考真題演練1.(2021·山東，14)解脂菌能利用分泌的脂肪酶將脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪酸會使醇溶青瓊脂平板變?yōu)樯钏{(lán)色。將不能直接吸收脂肪的甲、乙兩種菌分別等量接種在醇溶青瓊脂平板上培養(yǎng)。甲菌菌落周圍呈現(xiàn)深藍(lán)色，乙菌菌落周圍不變色，下列說法錯誤的是A.甲菌屬于解脂菌B.實驗中所用培養(yǎng)基以脂肪為唯一碳源C.可將兩種菌分別接種在同一平板的不同區(qū)域進(jìn)行對比D.該平板可用來比較解脂菌分泌脂肪酶的能力1234√5根據(jù)題干信息“甲菌菌落周圍呈現(xiàn)深藍(lán)色”，說明甲可以分泌脂肪酶將脂肪分解成甘油和脂肪酸，脂肪酸會使醇溶青瓊脂平板變?yōu)樯钏{(lán)色，因此甲菌屬于解脂菌，A項正確；乙菌菌落周圍沒有出現(xiàn)深藍(lán)色，說明乙菌不能產(chǎn)生脂肪酶，不能利用脂肪為其供能，但乙菌也可以在培養(yǎng)基上生存，說明該培養(yǎng)基不是以脂肪為唯一碳源，B項錯誤；12345可將兩種菌分別接種在同一平板的不同區(qū)域進(jìn)行對比，更加直觀，C項正確；可以利用該平板來比較解脂菌分泌脂肪酶的能力，觀察指標(biāo)可以是菌落周圍深藍(lán)色圈的大小，D項正確。123452.(2021·山東，20)含硫蛋白質(zhì)在某些微生物的作用下產(chǎn)生硫化氫導(dǎo)致生活污水發(fā)臭。硫化氫可以與硫酸亞鐵銨結(jié)合形成黑色沉淀。為探究發(fā)臭水體中甲、乙菌是否產(chǎn)生硫化氫及兩種菌的運動能力，用穿刺接種的方法，分別將兩種菌接種在含有硫酸亞鐵銨的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，如圖所示。若兩種菌繁殖速度相等，下列說法錯誤的是A.乙菌的運動能力比甲菌強(qiáng)B.為不影響菌的運動需選用液體培養(yǎng)基C.該實驗不能比較出兩種菌產(chǎn)生硫化氫的量D.穿刺接種等接種技術(shù)的核心是防止雜菌的污染12345√從圖中可以看出甲菌在試管中分布范圍小于乙菌，說明了乙菌的運動能力比甲菌強(qiáng)，A正確；為不影響菌的運動需選用半固體培養(yǎng)基，B錯誤；該實驗可以根據(jù)黑色沉淀的多少初步比較細(xì)菌產(chǎn)生硫化氫的能力，但不能測定產(chǎn)生硫化氫的量，C正確；微生物接種技術(shù)的核心是防止雜菌的污染，D正確。123453.(2020·江蘇，19)為純化菌種，在鑒別培養(yǎng)基上劃線接種纖維素降解細(xì)菌，培養(yǎng)結(jié)果如圖所示。下列敘述正確的是A.倒平板后需間歇晃動，以保證表面平整B.圖中Ⅰ、Ⅱ區(qū)的細(xì)菌數(shù)量均太多，應(yīng)從Ⅲ區(qū)挑取

單菌落C.該實驗結(jié)果因單菌落太多，不能達(dá)到菌種純化的目的D.菌落周圍的纖維素被降解后，可被剛果紅染成紅色√12345溫度降低后，培養(yǎng)基易凝固，因此倒平板后要及時輕輕晃動，以保持均一性，A項錯誤；由題圖可見，隨著劃線次數(shù)增多，細(xì)菌密度減小，Ⅲ區(qū)開始出現(xiàn)單菌落，應(yīng)從Ⅲ區(qū)挑取單菌落，B項正確；菌落是由單個微生物細(xì)胞或多個同種細(xì)胞繁殖到一定程度后形成的，能得到單菌落即可以達(dá)到菌種純化的目的，C項錯誤；剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物，菌落周圍的纖維素被降解后紅色消失，出現(xiàn)透明圈，D項錯誤。123454.(2020·江蘇，31)產(chǎn)脂肪酶酵母可用于含油廢水處理。為篩選產(chǎn)脂肪酶酵母菌株，科研人員開展了相關(guān)研究。請回答下列問題：(1)常規(guī)微生物實驗中，下列物品及其滅菌方法錯誤的是_____(填編號)。12345編號①②③④物品培養(yǎng)基接種環(huán)培養(yǎng)皿涂布器滅菌方法高壓蒸汽火焰灼燒干熱臭氧④12345(2)稱取1.0g某土壤樣品，轉(zhuǎn)入99mL無菌水中，制備成菌懸液，經(jīng)__________后，獲得細(xì)胞密度不同的菌懸液。分別取0.1mL菌懸液涂布在固體培養(yǎng)基上，其中10倍稀釋的菌懸液培養(yǎng)后平均長出了46個酵母菌落，則該樣本中每克土壤約含酵母菌___________________個。梯度稀釋4.6×105(或460000)12345利用稀釋涂布平板法統(tǒng)計活菌數(shù)目時，需要將制備的菌懸液進(jìn)行梯度稀釋，以獲得細(xì)胞密度不同的菌懸液，一般來說，菌落數(shù)在30～300個的平板最適于計數(shù)。0.1mL菌懸液中含有46個酵母菌落，則1mL菌懸液中含有460個酵母菌落；1.0g土壤樣品首先稀釋100倍，然后稀釋10倍，共稀釋了1000倍，因此樣本中每克土壤約含酵母菌460×1000＝4.6×105(個)。12345(3)為了進(jìn)一步提高酵母菌產(chǎn)酶能力，對分離所得的菌株，采用射線輻照進(jìn)行______育種。將輻照處理后的酵母菌涂布在以______為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時間后，按照菌落直徑大小進(jìn)行初篩，選擇直徑______的菌落，純化后獲得A、B兩突變菌株。誘變脂肪較大12345采用射線輻照引起酵母菌基因突變，此種方法屬于誘變育種。檢查誘變酵母菌產(chǎn)脂肪酶的能力，需要把酵母菌接種到以脂肪為唯一碳源的培養(yǎng)基上，按照產(chǎn)生菌落直徑大小進(jìn)行初步篩選，直徑大的說明產(chǎn)酶能力強(qiáng)，利用的脂肪(碳源)多，直徑小的說明產(chǎn)酶能力弱，利用的脂肪(碳源)少。(4)在處理含油廢水的同時，可獲得單細(xì)胞蛋白，實現(xiàn)污染物資源化。為評價A、B兩菌株的相關(guān)性能，進(jìn)行了培養(yǎng)研究，結(jié)果如圖。據(jù)圖分析，應(yīng)選擇菌株____進(jìn)行后續(xù)相關(guān)研究，理由是________________________________________________________________。B該菌株增殖速度快，單細(xì)胞蛋白產(chǎn)量高；降解脂肪能力強(qiáng)，凈化效果好1234512345通過分析題圖可知，相同時間內(nèi)，菌株B細(xì)胞密度大，說明該菌株增殖速度快，單細(xì)胞蛋白產(chǎn)量高；相同時間內(nèi)，菌株B利用的脂肪多，脂肪剩余量少，說明該菌株降解脂肪的能力強(qiáng)，凈化效果好。5.(2022·全國乙，37)化合物S被廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品和化工工業(yè)。用菌株C可生產(chǎn)S，S的產(chǎn)量與菌株C培養(yǎng)所利用的碳源關(guān)系密切。為此，某小組通過實驗比較不同碳源對菌體生長和S產(chǎn)量的影響，結(jié)果見表。碳源細(xì)胞干重(g/L)S產(chǎn)量(g/L)葡萄糖3.120.15淀粉0.010.00制糖廢液2.300.18回答下列問題：(1)通常在實驗室培養(yǎng)微生物時，需要對所用的玻璃器皿進(jìn)行滅菌，滅菌的方法有___________________________________(答出2點即可)。干熱滅菌、濕熱滅菌(或高壓蒸汽滅菌)1234512345碳源細(xì)胞干重(g/L)S產(chǎn)量(g/L)葡萄糖3.120.15淀粉0.010.00制糖廢液2.300.18防止雜菌污染是獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵，對所需的玻璃器皿進(jìn)行滅菌，滅菌的方法有干熱滅菌、濕熱滅菌(或高壓蒸汽滅菌，濕熱滅菌中效果最好的方法)、灼燒滅菌。12345(2)由實驗結(jié)果可知，菌株C生長的最適碳源是________；用菌株C生產(chǎn)S的最適碳源是__________。菌株C的生長除需要碳源外，還需要_______________(答出2點即可)等營養(yǎng)物質(zhì)。碳源細(xì)胞干重(g/L)S產(chǎn)量(g/L)葡萄糖3.120.15淀粉0.010.00制糖廢液2.300.18葡萄糖制糖廢液氮源、無機(jī)鹽碳源細(xì)胞干重(g/L)S產(chǎn)量(g/L)葡萄糖3.120.15淀粉0.010.00制糖廢液2.300.18分析題干實驗結(jié)果，以葡萄糖為碳源時，細(xì)胞干重最大，故菌株C生長的最適碳源是葡萄糖；以制糖廢液為碳源時，S產(chǎn)量最高，故用菌株C生產(chǎn)S的最適碳源是制糖廢液。微生物的生長需要水、無機(jī)鹽、碳源、氮源以及特殊的營養(yǎng)物質(zhì)，故菌株C的生長除需要碳源外，還需要氮源、無機(jī)鹽、生長因子等營養(yǎng)物質(zhì)。12345(3)由實驗結(jié)果可知，碳源為淀粉時菌株C不能生長，其原因是___________。碳源細(xì)胞干重(g/L)S產(chǎn)量(g/L)葡萄糖3.120.15淀粉0.010.00制糖廢液2.300.18缺少淀粉酶由實驗結(jié)果可知，菌株C可以利用葡萄糖，但在以淀粉為碳源時，菌株C不能生長，說明菌株C無法利用淀粉，分析其原因是菌株C不能合成淀粉酶，導(dǎo)致其無法利用淀粉。1234512345(4)若以制糖廢液作為碳源，為進(jìn)一步確定生產(chǎn)S的最適碳源濃度，某同學(xué)進(jìn)行了相關(guān)實驗。請簡要寫出實驗思路：_____________________________________________________________________________________________________________________。碳源細(xì)胞干重(g/L)S產(chǎn)量(g/L)葡萄糖3.120.15淀粉0.010.00制糖廢液2.300.18設(shè)計一系列不同濃度的制糖廢液分別培養(yǎng)菌株C，測定不同濃度制糖廢液中S產(chǎn)量，尋找S產(chǎn)量最大的碳源濃度，確定最適碳源濃度碳源細(xì)胞干重(g/L)S產(chǎn)量(g/L)葡萄糖3.120.15淀粉0.010.00制糖廢液2.300.18以制糖廢液作為碳源，進(jìn)一步確定生產(chǎn)S的最適碳源濃度，可以以碳源濃度作為自變量，不同碳源濃度下S產(chǎn)量作為因變量，實驗思路為：設(shè)計一系列不同濃度的制糖廢液分別培養(yǎng)菌株C，測定不同濃度制糖廢液中S產(chǎn)量，尋找S產(chǎn)量最大的碳源濃度，從而確定最適碳源濃度。1234512345(5)利用制糖廢液生產(chǎn)S可以實現(xiàn)廢物利用，其意義是___________________________________。碳源細(xì)胞干重(g/L)S產(chǎn)量(g/L)葡萄糖3.120.15淀粉0.010.00制糖廢液2.300.18減少污染、節(jié)省原料、降低生產(chǎn)成本一、易錯辨析1.消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消毒劑對細(xì)胞的傷害(

)2.倒平板就是等待培養(yǎng)基冷卻凝固后，將培養(yǎng)皿倒過來放置(

)3.倒平板時，應(yīng)將打開的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上(

)4.為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落(

)5.分解尿素的細(xì)菌在分解尿素時，可以將尿素轉(zhuǎn)化為氨，使得培養(yǎng)基的酸堿度降低(

)五分鐘查落實√××××二、填空默寫1.培養(yǎng)基的化學(xué)成分包括

等。2.選擇培養(yǎng)基是_________________________________________________

。3.平板冷凝后，要將平板倒置的原因是___________________________________________________________________________________________

。4.在灼燒接種環(huán)之后，要等其冷卻后再進(jìn)行劃線的原因是_____________

。水、無機(jī)鹽、碳源、氮源一種能將某種或某類微生物從混雜的微生物群體中分離出來的特殊培養(yǎng)基平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以減少培養(yǎng)基中的水分過快地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種5.在第二次以及其后的劃線操作時，總是從上一次劃線的末端開始劃線的原因是__________________________________________________________________________________________________________________________

。6.同一稀釋度下，應(yīng)至少對

個平板進(jìn)行重復(fù)計數(shù)，然后求出平均值。7.絕大多數(shù)微生物都能利用葡萄糖，但是只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。利用以

作為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，可以從土壤中分離出分解尿素的細(xì)菌。8.當(dāng)

，統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目少。劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細(xì)菌繁殖而來的菌落3尿素兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落四課時精練一、單項選擇題1.下列有關(guān)培養(yǎng)基的敘述，不正確的是A.純化微生物和植物組織培養(yǎng)時常用的是固體培養(yǎng)基B.在固體培養(yǎng)基中加入無菌水稀釋，可直接用于擴(kuò)大化培養(yǎng)細(xì)菌C.根據(jù)培養(yǎng)基上菌落的特征可初步判斷和鑒別細(xì)菌的類型D.用高壓蒸汽滅菌法對培養(yǎng)基滅菌時，初期需排氣1～2次，否則壓力

達(dá)到溫度達(dá)不到√1234567891011121312345678910111213純化微生物需要獲得單個菌落，用固體培養(yǎng)基，而植物組織培養(yǎng)一般用固體培養(yǎng)基，因為植物需要固定，A正確；大量培養(yǎng)微生物要用液體培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基用于分離純化微生物，B錯誤；不同細(xì)菌的菌落形態(tài)、顏色、大小等菌落特征不同，因此根據(jù)培養(yǎng)基上菌落的特征可初步判斷和鑒別細(xì)菌的類型，C正確；用高壓蒸汽滅菌法對培養(yǎng)基滅菌時，初期需排氣1～2次，排出滅菌鍋內(nèi)的冷空氣，否則壓力達(dá)到溫度達(dá)不到，D正確。2.下圖表示土壤中微生物為植物提供氮的過程，圖中①、②、③分別代表相關(guān)物質(zhì)，下列有關(guān)說法，正確的是A.①是N2、③是NH3，X代表的細(xì)菌異化作用類型是需氧型B.①是NH3、②是

，固氮菌在生態(tài)系統(tǒng)中屬于消費者C.②是NH3、③是

，X代表的細(xì)菌以有機(jī)物作為碳源D.在實驗室培養(yǎng)固氮菌可用二氧化碳為碳源的無氮培養(yǎng)基√12345678910111213①是N2、③是

，X代表的細(xì)菌異化作用方式可能是需氧型，A錯誤；①是N2、②是NH3，固氮菌在生態(tài)系統(tǒng)中屬于消費者，B錯誤；②是NH3、③是

，X表示土壤中的分解者，X代表的細(xì)菌以土壤中的有機(jī)物為碳源，C正確；固氮菌屬于異養(yǎng)微生物，在實驗室培養(yǎng)固氮菌不能用二氧化碳為碳源的無氮培養(yǎng)基，D錯誤。123456789101112133.下列有關(guān)以CO2為唯一碳源的自養(yǎng)微生物所需營養(yǎng)物質(zhì)的描述中，錯誤的是A.銨鹽和硝酸鹽等無機(jī)氮為該微生物提供必要的氮素B.碳源物質(zhì)不是該微生物的能源物質(zhì)C.水、無機(jī)鹽也是該微生物不可缺少的營養(yǎng)物質(zhì)D.瓊脂是該微生物的營養(yǎng)要素之一√1234567891011121312345678910111213銨鹽和硝酸鹽等無機(jī)氮為該微生物提供必要的氮素，A正確；以CO2為唯一碳源的自養(yǎng)微生物，CO2不是該微生物的能源物質(zhì)，B正確；水、無機(jī)鹽也是該微生物不可缺少的營養(yǎng)物質(zhì)，C正確；瓊脂是凝固劑，不是該微生物的營養(yǎng)要素之一，D錯誤。4.下列關(guān)于無菌操作技術(shù)的說法，正確的是A.消毒僅能殺死物體表面的芽孢和孢子B.液態(tài)的牛奶可用巴氏消毒法消毒C.培養(yǎng)皿、膠頭吸管可用干熱滅菌法滅菌D.高壓蒸汽滅菌時間達(dá)到后立即排氣降溫12345678910111213√12345678910111213消毒不能殺死物體表面的芽孢和孢子，A錯誤；牛奶用巴氏消毒法消毒，B正確；干熱滅菌法適用于玻璃器皿和金屬工具，膠頭吸管可用高壓蒸汽滅菌，C錯誤；高壓蒸汽滅菌時間達(dá)到后待壓力降至零時，再打開排氣閥排氣，D錯誤。5.(2023·江蘇鎮(zhèn)江高三模擬)微生物的計數(shù)方法有多種，下列有關(guān)敘述錯誤的是A.用濾膜法測定飲用水中大腸桿菌數(shù)目時，需利用鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)后計數(shù)B.用平板劃線法和稀釋涂布平板法進(jìn)行微生物計數(shù)時，結(jié)果往往比實際少C.用血球計數(shù)板進(jìn)行微生物顯微計數(shù)時，高倍鏡下觀察不到完整的計數(shù)室D.用已知密度紅細(xì)胞懸液對待測菌液以比例計數(shù)法計數(shù)時，兩種液體需混合

均勻12345678910111213√12345678910111213測定飲用水中大腸桿菌的數(shù)目可取一定量的飲用水，之后按一定倍數(shù)稀釋，再用加入伊紅美藍(lán)的鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)，取黑色金屬光澤菌落進(jìn)行計數(shù)，A正確；微生物接種到固體培養(yǎng)基常用的方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法，其中稀釋涂布平板法接種可以形成單菌落，所以常用來進(jìn)行微生物的計數(shù)，平板培養(yǎng)基上長出一個菌落就代表原待測樣品中一個微生物個體，由于有時候一個菌落是由多個細(xì)胞連在一起形成的，因此導(dǎo)致計數(shù)偏?。黄桨鍎澗€法常用來篩選分離微生物，不用于計數(shù)，B錯誤；12345678910111213用血細(xì)胞計數(shù)板進(jìn)行微生物顯微計數(shù)時，高倍鏡下觀察不到完整的計數(shù)室，C正確；將已知顆粒(如霉菌孢子或紅細(xì)胞)濃度的液體與一待測細(xì)胞濃度的菌液按一定比例均勻混合，在顯微鏡視野中數(shù)出各自的數(shù)目，即可得未知菌液的細(xì)胞濃度，D正確。6.(2023·江蘇泰州高三期末)稀釋涂布平板是常用的微生物培養(yǎng)方法，下列相關(guān)敘述正確的是A.滅菌鍋中取出的培養(yǎng)基應(yīng)趁燙時倒平板，如此可對培養(yǎng)皿滅菌B.稀釋涂布平板法不可用于微生物的分離，可用于微生物的計數(shù)C.用此法估測的數(shù)值往往偏小，應(yīng)以菌落數(shù)最多的平板計數(shù)為準(zhǔn)D.稀釋涂布平板法分離到的單菌落需進(jìn)一步純化，可用平板劃線法√12345678910111213滅菌鍋中取出的培養(yǎng)基應(yīng)冷卻至50℃左右時倒平板，A錯誤；稀釋涂布平板法既可用于微生物的分離，也可用于微生物的計數(shù)，B錯誤；當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，因此統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目少。一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計數(shù)，C錯誤；稀釋涂布平板法分離到的單菌落仍需進(jìn)一步劃線純化，以獲得純種，D正確。123456789101112137.下列有關(guān)微生物培養(yǎng)的敘述，正確的是A.純化培養(yǎng)時，對培養(yǎng)皿皿蓋做標(biāo)記，培養(yǎng)皿應(yīng)倒置放在恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)的

搖床上培養(yǎng)B.涂布接種時，需將涂布器蘸酒精后在酒精燈外焰上引燃，冷卻后再使用C.培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌，高壓滅菌加熱結(jié)束后，打開放氣閥使壓力表

指針回到零后，開啟鍋蓋D.可用平板劃線操作對微生物進(jìn)行分離和計數(shù)123456789101112√1312345678910111213純化培養(yǎng)時，培養(yǎng)皿應(yīng)倒置放在恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)靜止培養(yǎng)，不需要放在搖床上培養(yǎng)，以免雜菌污染，A錯誤；涂布接種時，需將涂布器蘸酒精后在酒精燈外焰上引燃，冷卻后再使用，以免高溫將部分微生物殺死，B正確；高壓滅菌加熱結(jié)束，等待壓力表指針回到零后，才能開啟鍋蓋，不能打開放氣閥使壓力表指針回到零，C錯誤；稀釋涂布平板法和平板劃線法都能對微生物進(jìn)行分離純化，但只有稀釋涂布平板法可用于計數(shù)，D錯誤。8.在做分離“分解尿素的細(xì)菌”實驗時，甲同學(xué)從對應(yīng)10－6培養(yǎng)基中篩選出大約150個菌落，而其他同學(xué)只選擇出大約50個菌落。下列有關(guān)敘述不正確的是A.甲同學(xué)出現(xiàn)這種結(jié)果的原因可能是土樣不同B.可以將甲同學(xué)配制的培養(yǎng)基在不加土樣的情況下進(jìn)行培養(yǎng)作為空白對照，

以證明培養(yǎng)基是否受到污染C.讓其他同學(xué)用與甲同學(xué)一樣的土壤進(jìn)行實驗，如果結(jié)果與甲同學(xué)一樣，

則可證明甲同學(xué)無誤D.B選項的實驗思路遵循了實驗的對照原則，而C選項的沒有12345678910111213√甲同學(xué)出現(xiàn)這種結(jié)果的原因可能是土樣不同，也可能是操作中污染造成的，A正確；甲同學(xué)的實驗結(jié)果可能是培養(yǎng)基污染造成的，可以將甲同學(xué)配制的培養(yǎng)基在不加土樣的情況下進(jìn)行培養(yǎng)作為空白對照，以證明培養(yǎng)基是否受到污染，B正確；如果是甲同學(xué)實驗操作過程中污染造成的，讓其他同學(xué)用與甲同學(xué)一樣的土壤進(jìn)行實驗，如果結(jié)果與甲同學(xué)一樣，則可證明甲同學(xué)無誤，C正確；B、C選項的實驗思路都遵循了實驗的對照原則，D錯誤。12345678910111213二、多項選擇題9.下列關(guān)于微生物培養(yǎng)和利用的敘述，正確的是A.接種前要了解固體培養(yǎng)基是否被污染無需接種無菌水來培育檢測B.接種時連續(xù)劃線的目的是將聚集的菌體逐步稀釋獲得單個菌落C.以尿素為唯一氮源且含剛果紅的培養(yǎng)基可選擇和鑒別尿素分解菌D.利用尿素固體培養(yǎng)基可迅速殺死其他微生物，而保留利用尿素的微

生物√√1234567891011121312345678910111213檢測培養(yǎng)基是否被污染，應(yīng)將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生，A正確；平板劃線法的原理是通過連續(xù)劃線將聚集的菌體逐步稀釋以獲得單個菌落，B正確；以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基可選擇尿素分解菌，用含酚紅指示劑的培養(yǎng)基可鑒別尿素分解菌，C錯誤；利用尿素固體培養(yǎng)基可保留利用尿素的微生物，同時抑制或阻止其他微生物生長，而非殺死，D錯誤。10.(2023·江蘇海門中學(xué)高三期末)野生型大腸桿菌菌株能在基本培養(yǎng)基上生長，氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株無法合成某種氨基酸，只能在完全培養(yǎng)基上生長，下圖為純化某氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株的部分流程圖，①②③④代表培養(yǎng)基，a、b、c表示操作步驟，d、e為菌落。下列敘述正確的是12345678910111213A.圖中①②④為基本培養(yǎng)基，③為完全培養(yǎng)基B.a操作的目的是提高突變率，增加突變株的數(shù)量C.b的正確操作是用涂布器把菌液均勻地涂布在②表面D.經(jīng)c過程原位影印及培養(yǎng)后，可從④中挑取d菌落進(jìn)行純化培養(yǎng)√√√1234567891011121312345678910111213野生型大腸桿菌菌株能在基本培養(yǎng)基上生長，氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株無法合成某種氨基酸，只能在完全培養(yǎng)基上生長，根據(jù)題干信息和圖形分析，圖中①②④為完全培養(yǎng)基，③為基本培養(yǎng)基，A錯誤；12345678910111213紫外線可以提高突變的頻率，a操作的目的是提高突變菌株的濃度，B正確；b操作是將菌液滴加到培養(yǎng)基表面，再用涂布器將菌液均勻地涂布在②培養(yǎng)基表面，C正確；12345678910111213從圖中可看出，d菌落在基本培養(yǎng)基中無法生長，在完全培養(yǎng)基中可生長，說明d是氨基酸缺陷型菌落，故經(jīng)c過程影印及培養(yǎng)后，可從④培養(yǎng)基中挑取d菌落進(jìn)行純化培養(yǎng)，D正確。11.某生物興趣小組完成了“分離土壤中分解尿素的細(xì)菌并進(jìn)行計數(shù)”的實驗，具體操作流程如圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是A.在酒精燈火焰附近稱取土壤并將其倒入錐形瓶中B.梯度稀釋時可用移液管或微量移液器進(jìn)行操作C.振蕩的目的是為了增加尿素分解菌的濃度D.由圖示菌落計數(shù)結(jié)果可知10克土樣中的菌株數(shù)約為1.6×107個√√√12345678910111213酒精燈火焰附近存在一個無菌區(qū)，在酒精燈火焰附近稱取土壤并將其倒入錐形瓶中，可以防止稱取的土壤在倒入錐形瓶過程中，土樣被污染，A正確；只用移液管，分度太低，而只用微量移液器，容量又太小，所以梯度稀釋時可用移液管或微量移液器進(jìn)行操作，B正確；12345678910111213振蕩培養(yǎng)的目的是提高培養(yǎng)液的溶解氧的含量，使菌體充分接觸培養(yǎng)液，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率，C錯誤；由分析可知，每克土壤中的菌株數(shù)為1.6×106，