OlympusI5倒置顯微鏡操作規(guī)程

倒置熒光顯微鏡操作規(guī)程Olympus IX5廈門大學(xué)醫(yī)學(xué)院中心試驗(yàn)室說明：①透射光主開關(guān)；②汞燈高壓電源開關(guān)；③透射光光強(qiáng)把握鈕；④濾色片架；XY/微調(diào)焦旋鈕；⑨雙目觀看筒；⑩屈光度調(diào)整環(huán)；?聚光鏡高度調(diào)整鈕；?聚光鏡對中旋鈕；???〔SHUTTER；?熒光激發(fā)塊轉(zhuǎn)盤；?熒光減光閥正式操作儀器之前請留意如下事項(xiàng)：首先要在儀器預(yù)約保護(hù)時(shí)間內(nèi)準(zhǔn)時(shí)使用本人注冊的校園卡刷卡開頭試驗(yàn)。并清空除濕機(jī)水箱。查看儀器使用記錄本分鐘以上再開機(jī)使用。一、開機(jī)1〔白光〕主開關(guān)①；2〔汞燈高壓電源〕②；3、翻開電腦，進(jìn)入cellSensStandard備注：標(biāo)本為HE染色、免疫組化時(shí)，不需要翻開熒光光源；標(biāo)本為熒光染料染色時(shí)，一般也不需要翻開白光光源。二、明場觀看〔BrightFieldBF〕1、正確放置標(biāo)本，BFHE2、轉(zhuǎn)動(dòng)熒光激發(fā)塊轉(zhuǎn)盤?到“6”的位置；3、轉(zhuǎn)動(dòng)聚光鏡轉(zhuǎn)盤?到“BF”位置，直到聽到咔嗒聲；4、將光路選擇桿⑤推動(dòng)去〔 選擇目鏡觀看光路；粗/細(xì)調(diào)焦旋鈕⑧聚焦觀看,依據(jù)需要調(diào)整瞳間距⑨和屈光度⑩；三、相襯觀看〔PhasecontrastPH)1、正確放置標(biāo)本，PH2、轉(zhuǎn)動(dòng)熒光激發(fā)塊轉(zhuǎn)盤?到“6”的位置；3、轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)盤⑦，選用適宜的物鏡；4、轉(zhuǎn)動(dòng)聚光鏡轉(zhuǎn)盤?，使相襯光學(xué)元件與所用物鏡相匹配〔1；5、將光路選擇桿⑤推動(dòng)去〔 選擇目鏡觀看光路；、調(diào)整光強(qiáng)把握鈕③直至適宜的強(qiáng)度，調(diào)整粗/細(xì)調(diào)焦旋鈕⑧進(jìn)展聚焦觀看,依據(jù)需要調(diào)整瞳間距⑨和屈光度⑩。1：物鏡、相差元件匹配表物鏡四、熒光觀看

4XPHL

10X、20XPH1〔PHC〕

40XPH21、假設(shè)需要，可先用明場觀看對標(biāo)本定位，再轉(zhuǎn)入熒光觀看；2BF至最低，將孔徑光闌向右撥至最??；3、轉(zhuǎn)動(dòng)熒光激發(fā)塊轉(zhuǎn)盤?，依據(jù)所用的熒光染料選擇匹配的熒光激發(fā)塊；2：熒光激發(fā)塊序號激發(fā)塊名稱放射光λ〔nm〕濾掉光λ〔nm〕1WU330-385420＜4002WB450-480515＜5003WG510-550590＜5704WBV400-440475＜4555WIY545-580610＜6006BF明場、相差4?〔SHUTTER，使其置于“O”位置；5、將光路選擇桿⑤推動(dòng)去〔選擇目鏡觀看光路；/細(xì)調(diào)焦旋鈕⑧聚焦觀看，依據(jù)熒進(jìn)入光路的熒光強(qiáng)度進(jìn)入光路。五、CCD、cellSensStandard2將光路選擇桿⑤拉出〔 圖像更清楚；4、背景校準(zhǔn)：進(jìn)展明場和相差成像時(shí)執(zhí)行白平衡 像時(shí)執(zhí)行黑平衡， 在樣品空白背景處畫一個(gè)小區(qū)域，軟件自動(dòng)以該處為背景對整幅圖像進(jìn)展調(diào)整，使所選區(qū)域顯示為白色或黑色；5、各成像參數(shù)設(shè)定完畢后，點(diǎn)擊拍照 ，儀器自動(dòng)成像；6、右鍵文檔工具欄窗口或在文件處進(jìn)展保存〔TIFJPG。六、圖像處理1、標(biāo)尺：在工具欄上選擇正確的物鏡倍數(shù)，點(diǎn)擊“視圖標(biāo)尺，軟件自動(dòng)標(biāo)尺加在圖像上，再點(diǎn)擊“圖像” 印入信息，保存即可。2、測量：點(diǎn)擊“測量” 測量工具，軟件左側(cè)顯示出測量工具欄，點(diǎn)擊選擇所需的測量工具在圖像上畫目標(biāo)區(qū)域右鍵點(diǎn)擊完畢測量即可顯示結(jié)果。測量結(jié)果可導(dǎo)出Excel：點(diǎn)擊測量工具欄圖標(biāo) 。3、圖像疊加：翻開擬疊加的圖“圖像----組合彩色圖像 “可用圖像”中選擇擬疊加的圖----√合并層 確認(rèn)。4、圖像拼接：按確定挨次 像，相鄰兩張圖像的邊緣要局部重疊，全部圖像拍攝完畢后選擇視圖---工具---畫廊 全選擬拼接的圖像選擇運(yùn)算---圖像拼接---設(shè)置水平方向圖像數(shù)量 依據(jù)拍攝挨次擺好圖像位置---確定；預(yù)覽后視狀況選擇“裁剪邊緣” 確定。七、關(guān)機(jī)1儀器，無需關(guān)機(jī)，聯(lián)系后面使用者。2、試驗(yàn)完畢，先退出工作站；3、將透射光光強(qiáng)調(diào)整鈕③逆時(shí)針旋至最低，關(guān)閉透射光主開關(guān)〔TH4〕①；40.5h，方能關(guān)閉汞燈高壓電源②；5、用無水乙醇擦拭鏡頭，并將物鏡轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)至空位，清理載物臺及桌面；的“云存儲文件夾”中。7、關(guān)電腦及