大學(xué)分析化學(xué)課件-紫外-可見分光光度法定性和定量分析

2023/7/1第十章

紫外-可見分光光度法第三節(jié)

定性和定量分析一、定性分析二、定量分析2023/7/1第五節(jié)定性和定量分析一、定性分析二、定量分析

定性鑒別純度檢查和雜質(zhì)限量測(cè)定單組分的定量方法多組分的定量方法2023/7/1一、定性分析（一）定性鑒別(P199)

定性鑒別的依據(jù)→吸收光譜的特征吸收光譜的形狀吸收峰的數(shù)目吸收峰的位置（波長(zhǎng)）吸收峰的強(qiáng)度相應(yīng)的吸光系數(shù)2023/7/11．對(duì)比吸收光譜的一致性同一測(cè)定條件下，與標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照物譜圖或標(biāo)準(zhǔn)譜圖進(jìn)行對(duì)照比較2023/7/12．對(duì)比吸收光譜的特征值2023/7/13．對(duì)比吸光度或吸光系數(shù)的比值：例：2023/7/1（二）純度檢查和雜質(zhì)限量測(cè)定1．純度檢查（雜質(zhì)檢查）(P200)(1)峰位不重疊：

找λ→使主成分無(wú)吸收，雜質(zhì)有吸收→直接考察雜質(zhì)含量(2)峰位重疊：

主成分強(qiáng)吸收，雜質(zhì)無(wú)吸收/弱吸收→與純品比較，E↓

雜質(zhì)強(qiáng)吸收>>主成分吸收→與純品比較，E↑，光譜變形2023/7/12．雜質(zhì)限量的測(cè)定：例：腎上腺素中微量雜質(zhì)——腎上腺酮含量計(jì)算

2mg/mL-0.05mol/L的HCl溶液，λ310nm下測(cè)定

規(guī)定A310≤0.05

即符合要求的雜質(zhì)限量≤0.06%2023/7/1二、定量分析（一）單組分的定量方法1．吸光系數(shù)法2．標(biāo)準(zhǔn)曲線法3．對(duì)照法：外標(biāo)一點(diǎn)法2023/7/11．吸光系數(shù)法(P201)2023/7/1例：維生素B12

的水溶液在361nm處的百分吸光系數(shù)為207，用1cm比色池測(cè)得某維生素B12溶液的吸光度是0.414，求該溶液的濃度解：2023/7/1例：精密稱取B12樣品25.0mg，用水溶液配成100ml。精密吸取10.00ml，又置100ml容量瓶中，加水至刻度。取此溶液在1cm的吸收池中，于361nm處測(cè)定吸光度為0.507，求B12的百分含量(B12的百分吸光系數(shù)為207)解：2023/7/1例：解：2023/7/12．標(biāo)準(zhǔn)曲線法(P202)標(biāo)準(zhǔn)曲線法需要配制一系列標(biāo)準(zhǔn)溶液2023/7/1例：蘆丁含量測(cè)定0.710mg/25mL2023/7/13．對(duì)照法：外標(biāo)一點(diǎn)法(P202）注：當(dāng)樣品溶液與標(biāo)準(zhǔn)品溶液的稀釋倍數(shù)相同時(shí)對(duì)照法只需要配制標(biāo)準(zhǔn)溶液和試樣溶液2023/7/1例：維生素B12的含量測(cè)定精密吸取B12注射液2.50ml，加水稀釋至10.00ml；另配制對(duì)照液，精密稱定對(duì)照品25.00mg，加水稀釋至1000ml。在361nm處，用1cm吸收池，分別測(cè)定吸光度為0.508和0.518，求B12注射液注射液的濃度以及標(biāo)示量的百分含量（該B12注射液的標(biāo)示量為100μg/mL）解：(1)對(duì)照法

2023/7/1(2)吸光系數(shù)法

2023/7/1（二）多組分的定量方法(P203)三種情況：1．兩組分吸收光譜不重疊（互不干擾）兩組分在各自λmax下不重疊→分別按單組分定量2023/7/12．兩組分吸收光譜部分重疊

λ1→測(cè)A1→b組分不干擾→可按單組分定量測(cè)Caλ2→測(cè)A2→a組分干擾→不能按單組分定量測(cè)Ca

2023/7/13．兩組分吸收光譜完全重疊——混合樣品測(cè)定(1)解線性方程組法(2)等吸收雙波長(zhǎng)消去法(3)系數(shù)倍率法2023/7/11．解線性方程組法步驟：2023/7/12．等吸收雙波長(zhǎng)法步驟：

消除a的影響測(cè)b2023/7/1消去b的影響測(cè)a注：須滿足兩個(gè)基本條件選定的兩個(gè)波長(zhǎng)下干擾組分具有等吸收點(diǎn)選定的兩個(gè)波長(zhǎng)下待測(cè)物的吸光度差值應(yīng)足夠大2023/7/13．系數(shù)倍率法前提：干擾組分b不成峰形無(wú)等吸收點(diǎn)2023/7/1步驟：b曲線上任找一點(diǎn)→λ1

另一點(diǎn)→λ2優(yōu)點(diǎn)：同時(shí)將待測(cè)組分和干擾組分放大信號(hào)K倍，提高了待測(cè)組分測(cè)定靈敏度abλ1

λ22023/7/1解：例：取咖啡酸，在165℃干燥至恒重，精密稱取10.00mg，加少量乙醇溶解，轉(zhuǎn)移至200ml容量瓶中，加水至刻度線，取此溶液5.00ml，置于50ml容量瓶中，加6mol/l的HCl4ml，加水至刻度線。取此溶液于1cm比色池中，在323nm處測(cè)定吸光度為0.463，已知該波長(zhǎng)處的，求咖啡酸百分含量2023/7/1解：例：精密稱取0.0500g樣品，置于250ml容量瓶中，加入

0.02mol/LHCl溶解，稀釋至刻度。準(zhǔn)確吸取2ml，稀至

100ml。以0.02mol/lHCL為空白,在263nm處用1cm吸收池測(cè)定透光率為41.7%，其摩爾吸光系數(shù)為12000