植物染色體帶型分析

關(guān)于植物染色體帶型分析第1頁(yè)，講稿共17頁(yè)，2023年5月2日，星期三1、了解染色體帶型分析的有關(guān)概念。2、了解染色體C-帶顯色技術(shù)。3、學(xué)會(huì)植物染色體C-帶分析方法。一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡?頁(yè)，講稿共17頁(yè)，2023年5月2日，星期三二、實(shí)驗(yàn)原理染色體是遺傳物質(zhì)的載體，如果染色體發(fā)生變化了，生物的外在性狀必然發(fā)生變化。染色體數(shù)目的變化比較容易察覺(jué)，但是染色體結(jié)構(gòu)和組成成分的變化就比較難以發(fā)現(xiàn)。染色體顯帶技術(shù)使不可察覺(jué)的染色體結(jié)構(gòu)和成分變化轉(zhuǎn)變?yōu)榭梢远勘硎龅膸妥兓?。染色體分帶技術(shù)：染色體經(jīng)物理、化學(xué)因素處理后，再進(jìn)行染色，使其呈現(xiàn)特定的深淺不同帶紋（band）的方法。染色體分帶技術(shù)可分為兩大類，一類是產(chǎn)生的染色帶分布在整個(gè)染色體和長(zhǎng)度上，如Q、G和R帶；另一類是局部性的顯帶，它只能使少數(shù)特定的帶或結(jié)構(gòu)染色，如C、T和N帶等。第3頁(yè)，講稿共17頁(yè)，2023年5月2日，星期三第4頁(yè)，講稿共17頁(yè)，2023年5月2日，星期三其中C-帶主要顯示著絲粒附近的異染色質(zhì)，故稱為C-帶，其他異染色質(zhì)均可顯示。染色體經(jīng)酸（HCl）、堿[Ba(OH)2]和緩沖鹽溶液（2×SSC）處理后，再以Giemsa染液染色而顯示的帶型。它包括染色體C-帶結(jié)構(gòu)特征、C-帶位置、染色強(qiáng)度，異染色質(zhì)含量等。作為細(xì)胞分類學(xué)指標(biāo)，染色體C-帶核型可以從不同層次上反映其生物類群間的分類關(guān)系。染色體C-帶在同一屬內(nèi)有一明顯而恒定的C-帶結(jié)構(gòu)模式，往往構(gòu)成“標(biāo)志性C-帶帶紋”，由此可以進(jìn)行屬級(jí)分類單元的比較。第5頁(yè)，講稿共17頁(yè)，2023年5月2日，星期三材料：經(jīng)C-分帶技術(shù)處理得到的黑麥染色體的圖片。器具：顯微鏡、測(cè)微尺、毫米尺、鑷子、剪刀、繪圖紙、圓規(guī)、鉛筆等。三、儀器與材料第6頁(yè)，講稿共17頁(yè)，2023年5月2日，星期三四、實(shí)驗(yàn)說(shuō)明植物C帶主要包括四種帶型：1、著絲粒帶（centromericband，C），是指著絲粒及其附件的帶。2、中間帶（intercalaryband，I），分布于染色體著絲粒至末端之間的帶。3、末端帶（telomericband，T），位于染色體的末端的帶。4、核仁縊痕帶（nucleolaronstrictionband，N），是指核仁染色體特殊的帶型，位于核仁組織中心區(qū)。第7頁(yè)，講稿共17頁(yè)，2023年5月2日，星期三C帶分類方法：1、完全帶類型：處理染色后，同時(shí)出現(xiàn)四種帶型。2、不完全帶類型：只顯示三種以下的帶類別。aCIN型：缺乏末端帶類型。bCTN型：不具有中間帶類型。cTN型：只有末端帶和縊痕帶。dN型：只有縊痕帶。第8頁(yè)，講稿共17頁(yè)，2023年5月2日，星期三第9頁(yè)，講稿共17頁(yè)，2023年5月2日，星期三四、實(shí)驗(yàn)程序1、測(cè)量圖片上的每條染色體的相對(duì)長(zhǎng)度，進(jìn)行核型分析。2、分析每條染色體C-帶位置。3、每對(duì)同源染色體上相對(duì)應(yīng)的C-帶是否純合，即在某一特定位置相配對(duì)的兩條染色體是否都具有帶紋，帶紋大小、染色程度是否一致，如不一致，則按雜合計(jì)。第10頁(yè)，講稿共17頁(yè)，2023年5月2日，星期三

4、各染色體C-帶帶紋的著色程度。在同樣的處理程序下，染色體組中各染色體C-帶帶紋上存在恒定的深淺不同的著色反應(yīng)，它表示C-帶結(jié)構(gòu)異染色質(zhì)在質(zhì)上的差異?？梢运募?jí)表示法：特強(qiáng)：染色極深；強(qiáng)：染色較深；中：染色程度中等；弱：染色極淡。5、根據(jù)以上C-帶各項(xiàng)統(tǒng)計(jì)結(jié)果，描述各染色體的C-帶特征，并據(jù)此繪制出黑麥染色體C-帶帶型示意圖。第11頁(yè)，講稿共17頁(yè)，2023年5月2日，星期三[重要實(shí)驗(yàn)步驟]：在觀察染色體C-帶型時(shí)，同時(shí)要考慮染色體長(zhǎng)度、著絲粒位置等核型特征。第12頁(yè)，講稿共17頁(yè)，2023年5月2日，星期三[實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)]

：帶型辨別是要考慮到因制片、分帶處理而導(dǎo)致的帶型可能出現(xiàn)的變化。另外染色體排隊(duì)時(shí)也要從大到小，短臂向上、長(zhǎng)臂向下，各染色體的著絲粒排在一條直線上。第13頁(yè)，講稿共17頁(yè)，2023年5月2日，星期三例如節(jié)節(jié)麥C-帶第14頁(yè)，講稿共17頁(yè)，2023年5月2日，星期三排隊(duì)：模式圖：第15頁(yè)，講稿共17頁(yè)，2023年5月2日，星期三對(duì)各染色體的描述1D：短臂具有端帶及亞端帶，長(zhǎng)臂具有兩條不太明顯的中間帶。2D：短臂具有端帶及明顯的近著絲粒帶，長(zhǎng)臂具端帶及兩條小的中間帶。3D：短臂顯示端帶及亞端帶。4D：短臂具有端帶及近著絲粒帶，長(zhǎng)臂具有1條明顯的特征帶。5D：是節(jié)節(jié)麥中唯一一組隨體染色體，短臂具有端帶和1條中間帶，隨體經(jīng)C-分帶后不易觀察。6D：為等臂染色體，長(zhǎng)臂