細(xì)胞生物學(xué)細(xì)胞調(diào)亡

一、凋亡概念的形成：

1965年澳大利亞科學(xué)家Kerr發(fā)現(xiàn)，結(jié)扎鼠門靜脈后，電鏡觀察到肝實(shí)質(zhì)組織中有一些散在的死亡細(xì)胞,這些細(xì)胞體積收縮、染色質(zhì)凝集從其周圍的組織中脫落并被吞噬,機(jī)體無炎癥反應(yīng)。1972年Kerr提出了細(xì)胞凋亡的概念，宣告了對(duì)細(xì)胞凋亡的真正探索的開始,在此之前，關(guān)于胚胎發(fā)育生物學(xué)、免疫系統(tǒng)的研究，肝細(xì)胞死亡的研究都為這一概念的提出奠定了基礎(chǔ)。細(xì)胞凋亡定義:是指為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定,由基因控制的細(xì)胞自主的有序的結(jié)束生命的過程。細(xì)胞凋亡(Apoptosis)蝌蚪向蛙發(fā)育的變態(tài)反應(yīng)發(fā)育過程中手和足的成形過程發(fā)育中神經(jīng)細(xì)胞數(shù)量的調(diào)節(jié)誘導(dǎo)細(xì)胞調(diào)亡的因子◆物理性因子，包括射線（紫外線，射線等），較溫和的溫度刺激（如熱激，冷激）等

◆化學(xué)及生物因子：包括活性氧基團(tuán)和分子，DNA和蛋白質(zhì)合成的抑制劑，激素，細(xì)胞生長因子，腫瘤壞死因子（TNF），抗Fas/Apo-1/CD95抗體等。細(xì)胞凋亡形態(tài)變化特征（1）凋亡的起始；微絨毛的消失，細(xì)胞間接觸的消失，與周圍的細(xì)胞脫離，染色質(zhì)固縮.沿著核膜分布。（2）凋亡小體的形成。核膜核仁破碎，核染色質(zhì)斷裂為大小不等的片段，與某些細(xì)胞器如線粒體一起聚集，為反折的細(xì)胞膜所包圍。（3）凋亡小體逐漸被周圍專職或非專職吞噬細(xì)胞吞噬。A、NormalcellB、Apoptosis:Apoptoticbodies胸腺細(xì)胞正常凋亡

是細(xì)胞受到化學(xué)因素（如強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、有毒物質(zhì)）、物理因素（如熱、輻射）和生物因素（如病原體）等環(huán)境因素的傷害，引起細(xì)胞死亡的現(xiàn)象。

細(xì)胞壞死早期表現(xiàn)為細(xì)胞膜破壞，線粒體腫脹。繼而溶酶體破裂,細(xì)胞內(nèi)容物流出,引起炎癥。細(xì)胞遇凋亡怪與壞死(n愧ec迷ro半si黃s)Ap靜op雀to彈si擴(kuò)sNe講cr繼os皂isDe迅at間h喘by遼a胸po鑼pt鎮(zhèn)os效is擇i注s毯a償ne凡at訂,婆or趴de糕rl臺(tái)y沈pr報(bào)oc航es吩s細(xì)胞凋亡與壞死的區(qū)別①胞漿虎內(nèi)Ca2+濃度根升高環(huán)。②DN蓬A(yù)內(nèi)切櫻酶活烤性被溜激活陷升高獅，雙果鏈DN謊A在核盾小體探之間灣切斷丙形成18忽0～20波0b捎p特征雜性的DN戀A蹲la爭dd杜er男s。細(xì)胞扣凋亡情的生洽化特波征Ap患o(jì)p汁to適si扁s驚in綢du投ce劫d叨by首C蔬yt坡o疤CLa礎(chǔ)ne蒜1．0販h2．1燥h3．2臭h4．3蕩h5．4價(jià)h6．Co汪nt館ro執(zhí)l7．Ma狐rk奸er③凋亡抬細(xì)胞tT流G（組仿織轉(zhuǎn)洗谷氨娘酰胺襯酶葡）積葬累并改達(dá)到納較高籃水平形態(tài)立學(xué)觀追測：銜染色危法、膽透射尤和掃舉描電蝴鏡觀復(fù)察細(xì)胞離凋亡伴的檢是測NuclearmorphologicalchangesofHeLacellsinapoptosisprocess

（488nm400）電鏡鋤觀察凋亡諷細(xì)胞錘體積路變小腫，細(xì)贏胞質(zhì)嫁濃縮婆，核盡內(nèi)染醫(yī)色質(zhì)賓高度什盤繞此，出漠現(xiàn)許梳多空扎泡結(jié)赤構(gòu)。允細(xì)胞俯凋亡崇的晚揭期，扯細(xì)胞藥核裂塵解為撞碎塊參，產(chǎn)滲生凋驅(qū)亡小神體。磷脂幫酰絲磨氨酸正常針位于垂細(xì)胞唐膜的渠內(nèi)側(cè)續(xù)，在潑凋亡童早期嬌，PS可從蒸細(xì)胞謀膜的破內(nèi)側(cè)沸翻轉(zhuǎn)護(hù)到細(xì)碰胞膜張的表邀面，預(yù)暴露夏在細(xì)鴨胞外搬環(huán)境政中。An顯ne鍋xi怕n-既V是一約種Ca2+依賴飯性磷煙脂結(jié)民合蛋斜白，能專住一性悠的結(jié)爪合暴庭露在撈膜外檔側(cè)的PS。將An棋ne偉xi穩(wěn)n-胳V進(jìn)行痰熒光嚇?biāo)兀‵I息TC）或bi胃ot疾in標(biāo)記走，以戶標(biāo)記遙了的An巾ne泡xi濁n-炸V作為秩熒光誕探針劍，利泥用熒猜光顯半微鏡坑以及逃共聚閃焦激維光掃沸描顯奔微鏡周檢測民細(xì)胞腸凋亡晌的發(fā)航生。磷脂羞酰絲執(zhí)氨酸（Ph刻os豎ph珍at仁id滋yl朋se陽ri萍nePS）外翻喬分析（An居ne匙xi聲n今V法）Ap伐op幕to斯ti抬c摟He右La是c堆el枝ls頌w破er佩e(cuò)飾st綁ai溫ne友d惱wi堪th丸F軋IT把C-弟An換ne貍xi紹nVDN僑A片段郵化分旋析細(xì)胞預(yù)凋亡版時(shí)主你要生鬼物化沃學(xué)特增征是末其染纖色質(zhì)祖發(fā)生運(yùn)濃縮,染色敘質(zhì)DN癢A在核墻小體塔單位論之間嘗的連蘇接處酒斷裂,形成18朗020洗0b祖p整數(shù)年倍的煌寡核勾苷酸殃片段,在凝眉膠電黎泳上踐表現(xiàn)練為梯區(qū)形電嚼泳圖尚譜(D枕NA孔l煮ad古de鈴r)。TU毫NE攔L測定優(yōu)法是te無rm鹿in皇al蜻d噸eo餓xy仍nu燭cl隆eo蔽ti著dy印l裂tr扔an魚sf卻er視as李e-板me灶di欠at紛ed咸d差UT恭P污ni雨ck當(dāng)e走nd金l避ab算el堂in掃g的縮醫(yī)寫，士意指末端僑脫氧績核苷啊酸移掛換酶介導(dǎo)念的dU測TP缺口戀末端杰標(biāo)記雀測定斤法。這一取方法匙能對(duì)DN核A分子微中3’讓-O鵲H斷裂課缺口賴進(jìn)行深原位慎標(biāo)記腿。凋懷亡細(xì)寶胞的疤核DN勒A中產(chǎn)水生的3’訂-O蔥H末端體，可帽藉助面一種丸可觀妥測的染標(biāo)記晴物，漫如熒陽光素移進(jìn)行慶原位衡標(biāo)記咳，并夾用熒算光顯起微鏡剃進(jìn)行搶觀察罰。TU雞NE喇L測定去法:即DN壇A斷裂瓦的原幸位末如端標(biāo)穴記法細(xì)胞快凋亡鄉(xiāng)豐的基筐因調(diào)趁控機(jī)啞制最已先是腫從線筋蟲（c.違el蜘eg眉an告s）研獸究開忍始的(M蜻IT許:嚷Ro至be察rt伐H役or勻ri凝d事,古19柴86號(hào))。線壁蟲是寬一種工細(xì)胞士定數(shù)呢細(xì)胞秀，在騙個(gè)體機(jī)發(fā)育達(dá)中，冬成體含的10愚90個(gè)體叨細(xì)胞旗中，申有13據(jù)1個(gè)注序定是華要自摩然凋錦亡。三、串細(xì)胞惡凋亡幼的分殼子機(jī)耕制C漢el買eg政an麗s:外a見mm渣,占tr揚(yáng)an財(cái)sp符ar得en嘩t望bo探dy省o贏nl興y徹a汗fe渾w僵ce麗ll涉t風(fēng)yp茫es早,鋤fr轟om爭z越y(tǒng)g憑ot椅e旬to債m錦at嘉ur奶e血ad堤ul蝴t腥on礦ly察i蔬n概3.射5d砍ay寇s.1、與PC傅D有關(guān)醬的基艦因，慕負(fù)責(zé)PC蘇D控制侄：ce噴d-鐮3、ce惕d-紗4和ce桃d-領(lǐng)9。CE疤D-戒3是一裂個(gè)蛋甩白酶麗，激旦活的CE攤D-稱3可以冊水解傳靶蛋梁白從戒而使課細(xì)胞駛死亡，是宣細(xì)胞遠(yuǎn)殺手；Ce叮d-茂4對(duì)ce悔d-桃3引起臭的體細(xì)租胞凋闖亡起促絹進(jìn)作亡用。ce礎(chǔ)d-荒9可抵榴消ce螞d-虎3的作協(xié)用，岡防止宮細(xì)胞懷被殺港死，起在ce損d-優(yōu)3和ce察d-疤4的殺論死細(xì)氧胞作鎮(zhèn)用中蛇起負(fù)陳調(diào)控逮。2、與PC穩(wěn)D過程鉗吞噬托作用焰有關(guān)扣：ce衡d-綁1、ce躺d-討2、ce省d-驕5-左8和ce矮d-支103、核賄酸酶原基因妨（nu右c-鑄1）,控制DN禁A降解弦，但遍非PC丈D所必行須。4、影五響特亮異細(xì)辮胞類袖型PC寶D的基慨因：ce注s-骨1、ce半s-拉2和he因r-頸1.線蟲壺體細(xì)侄胞凋筆亡研旋究：PC沉D相關(guān)糠基因15個(gè)，程分為耕四組保守艷性高粘，在思哺乳出動(dòng)物舉中有俗相應(yīng)購?fù)茨懳铮篊e補(bǔ)d-蛛3=辭IC侮E,侮C們ed瓜-4零=A柄pa筐f-鵝1,城C笛ed梨-9安=B炸cl謝-2彈.所有夕的動(dòng)永物細(xì)樸胞都黎有一瞧種相膏類似墊的細(xì)胞墻凋亡的機(jī)鄭制，逮即通豆過一喬個(gè)蛋縱白酶壞家族匠的介怒導(dǎo)。動(dòng)物污細(xì)胞解中的揮凋亡爸效應(yīng)牌分子－Ca布sp寶as丟e家族

Caspase:天冬氨酸特異性的半胱氨酸蛋白水解酶Whycalledcaspase?Activesite:CysteineCleavagesite:Asparaticacid

CysteineAsparaticacidspecificproteaseAsp-Xxx起始者Caspase執(zhí)行者Caspase有兩剝類ca種sp冠as忘e，一顛類是辱起始爹者，如ca錯(cuò)sp銜as噴e-挨8、9煩,1江0浮;另一探類是慨執(zhí)行肝者，如ca冶sp拘as擦e-雖8可依涂次激科活ca啦sp葡as拒e-演3、6、7。Ca摟sp層as礙e家族殿的分語類所有表的ca史sp戲as碗e都以管非活架性的攀形式升存在—減Pr還oc格as旅pa始se源sCaspases酶原包含三個(gè)結(jié)構(gòu)域：NH2末端結(jié)構(gòu)域、約20KD的大亞基和約10KD的小亞基。

Ca邊sp逃as沒e家族扔的級(jí)嘉聯(lián)反因應(yīng)在誘干導(dǎo)細(xì)胞牧凋亡信號(hào)輛的作效用下綿通過不自我乳切割啄而激外活。渾激活挽后又鞋可激洲活家剖族中層的其摘他成騾員，蘇引起洋蛋白鋸質(zhì)酶視解的床級(jí)聯(lián)宋反應(yīng)偷。最許后，影被激逆活的短蛋白叛酶切儉割了鈔細(xì)胞憐與細(xì)胞助凋亡相關(guān)據(jù)的關(guān)攔鍵蛋骨白，然如核犯纖層近蛋白濃，從晝而引質(zhì)起凋亡。（1）蛋蛋白激輛酶：如粘學(xué)著斑良激酶(F嫌AK所)、PK償C以及Ra麗f1。（2）核筋纖層熱蛋白怖：導(dǎo)致題核纖失層解寸體、勢核被裝膜濃巴縮。（3）細(xì)每胞結(jié)憐構(gòu)蛋訪白：如中宮間纖躁維、私肌動(dòng)脹蛋白捉，導(dǎo)穿致細(xì)電胞形慶態(tài)的華改變爹。（4）與DN點(diǎn)A修復(fù)疫相關(guān)供的酶境類:使合具成的DN艱A難以彩保證袍正確盛，導(dǎo)鐮致細(xì)楊胞調(diào)理亡。（5）ca良sp浪as剖e激活罪的DN暴as搖e抑制田蛋白：將內(nèi)徐切核隸酸酶DN腐as祝e的抑惠制蛋遣白水婚解，旋導(dǎo)致牧這種針酶被郊激活彈，將DN鑰A切割裙成片卸段。能夠戴被ca挨sp堤as急e切割抗的靶荒蛋白留包括境以下字幾類賴：（一餃）細(xì)項(xiàng)胞凋忙亡相東關(guān)基默因和揀蛋白細(xì)胞涉凋亡剪的調(diào)漆控涉則及許功多基瘦因，呆包括銷一些粒與細(xì)盾胞增鑼殖有捉關(guān)的徐原癌懸基因義和抑挖癌基惰因。走其中墾研究預(yù)較多曲的有Fa再s、IC亭E、Ap蔽af附-1、Bc上l-眨2等。1、fa障s屬TN斜F受體斤家族掩。Fa貌s基因喬編碼鄉(xiāng)豐產(chǎn)物結(jié)為分撞子量45平KD的跨粘膜蛋山白，寒分布練于胸書腺細(xì)炸胞，米激活改的T和B淋巴次細(xì)胞再，巨簡噬細(xì)州胞以后及卵呼巢細(xì)勸胞等那。Fa伙s蛋白騙與Fa仿s配體施結(jié)合姑后，味會(huì)激糠活ca衛(wèi)sp唯as蓮e，導(dǎo)擇致靶距細(xì)胞殲走向酬凋亡望。2、IC艘E：白介誕素-1拆β轉(zhuǎn)換近酶（In雅te輸rl男eu徑ki織n-層1救β-掀co棄nv瞧er鋤ti優(yōu)ng剩e車nz汁ym運(yùn)e）基壤因，沒該酶撥能將期白介座素前播體切攤割為東活性漢分子文，扭是一仰類Ca婚sp憲as炕e，能皂選擇述性降意解蛋料白質(zhì)妄。IC借E蛋白蠻酶參奮與Fa賽s誘導(dǎo)犁的細(xì)幻玉胞凋愧亡，縱與線困蟲細(xì)謀胞凋袍亡基誓因ce巖d-付3同源。3、Ap聰af具-1：(a誘po嘗pt齡ot亦ic頃p型ro盟te宣as識(shí)e犧ac壤ti慈va挪ti巾ng匆f哄ac噴to勿r-概1)，是ce該d-短4在哺速乳動(dòng)佛物中殘的同工源體圈為Ap翅af現(xiàn)-1，能激活Ca米sp透as性e3，這橫一過翼程需象要細(xì)破胞色陰素c的參勒與?；虍a(chǎn)物功

能BCL-2凋亡抑制劑，可和Bax及Bak結(jié)合BCL-x其L型抑制凋亡，S型促進(jìn)凋亡，與Bax及Bak結(jié)合BCL-w凋亡抑制劑Bax凋亡促進(jìn)劑，可與BCL-2，BCL-XL，EIB19K結(jié)合Bak凋亡促進(jìn)劑，亦可作抑制劑，可與BCL-2，BCL-X和E1B19K結(jié)合MCL-1凋亡抑制劑Bad凋亡促進(jìn)劑，與BCL-2和BCL-XL結(jié)合Ced-9線蟲中的凋亡抑制劑，BCL-2同源物E1B19K腺病毒凋亡抑制劑，與Bax和Bak結(jié)合名稱貨來源砌于B細(xì)胞睛淋巴安瘤/白血統(tǒng)病-2磚(B叫-c責(zé)el闊l蔑ly建mp怎ho置ma，bc掩l-絞2)主要討存在薪于線破粒體戶外膜董上，瓜是ce糠d-瓶9在哺籮乳類飯中的所同源們物。減是昏一個(gè)楊不斷辣擴(kuò)增弄的多軟基因檢家族祝，其陜在哺桑乳類蹈中的養(yǎng)家族卡成員插有：4、bc倚l(wèi)-桶2：當(dāng)細(xì)意胞接旦受凋熄亡信渡號(hào)分緩子(F竟as似,T粘NF等)后，口凋亡段細(xì)胞您表面究信號(hào)必分子疾受體蓮相互增聚集吊并與歐細(xì)胞膛內(nèi)的斜銜接逐蛋白(A尋da響pt棋or餡p冤ro王te樣in恰)結(jié)合喇，這痰些銜育接蛋撐白又愧募集Pr智oc鍛as括pa襯se際s聚集探在受辛體部渾位，Pr亦oc帖as陪pa懂se相互閱活化駁并產(chǎn)凈生級(jí)背聯(lián)反躬應(yīng)，王使細(xì)肅胞凋炊亡。胞外艇信號(hào)絡(luò)分子宅誘導(dǎo)擦的細(xì)償胞凋狼亡途融徑參與事死亡趕受體捷信號(hào)從轉(zhuǎn)導(dǎo)半的接鄭頭蛋滲白（畝死亡并結(jié)構(gòu)逝域蛋敘白de彈at盒h消do陽ma竄in義p陸ro絮te宗in）：TR尾AD橫D：TN瘦F受體荒相關(guān)沿死亡罷結(jié)構(gòu)糧域蛋玻白FA婆DD（Fa針s-平as挺so隔ci客at脹ed潤d甩ea癢th吼d輪om分ai橋n）：Fa歲s相關(guān)噸死亡蟻結(jié)構(gòu)澇域蛋癥白。TN禽F激發(fā)姻細(xì)胞團(tuán)的程登序性炭死亡隸的過本程細(xì)胞保內(nèi)信攪號(hào)對(duì)射程序遭性細(xì)叛胞死零亡的趕激發(fā)細(xì)胞賀內(nèi)源絹信號(hào)丹：DN意A損傷果、細(xì)貢胞質(zhì)脅中Ca2+濃度捎過高厲、