高考生物臨考必背【新教材新高考 生物考前必背核心知識】選必3 第2章 細(xì)胞工程

高考生物核心知識復(fù)習(xí)背誦NO.6選必3第2章細(xì)胞工程核心必備知識植物細(xì)胞工程1.植物組織培養(yǎng)的概念是什么？原理是什么？1.將離體的植物器官、組織或細(xì)胞（即外植體）等，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的條件，誘導(dǎo)其形成完整植株的技術(shù)。植物細(xì)胞具有全能性2.什么是全能性？植物細(xì)胞具有全能性的原因是什么？細(xì)胞在體內(nèi)為什么不表現(xiàn)出全能性？2.細(xì)胞經(jīng)分裂和分化后，仍然具有產(chǎn)生完整生物體或分化成其他各種細(xì)胞的潛能，即細(xì)胞具有全能性。具有全能性的原因：生物體的細(xì)胞中都含有該物種生長發(fā)育的全套遺傳物質(zhì)。因為在特定的時間和空間條件下，細(xì)胞中的基因會選擇性表達。3.植物細(xì)胞表現(xiàn)全能性的條件有哪些？3.離體；一定的營養(yǎng)物質(zhì)（其中蔗糖的作用：提供營養(yǎng)，調(diào)節(jié)滲透壓）、植物激素（生長素、細(xì)胞分裂的濃度、比例）；適宜的溫度、pH、無菌等外界條件4.植物組織培養(yǎng)的流程是怎樣的？（兩種途徑）核心是什么？4.自己確定答案脫分化和再分化5.在組織培養(yǎng)實驗中，為什么要強調(diào)所用器械的滅菌和實驗人員的無菌操作？植物組織培養(yǎng)實驗操作：（注意哪些材料需要消毒，哪些材料滅菌）5.防止雜菌污染，因為雜菌生長快，會和培養(yǎng)物爭奪營養(yǎng)。雜菌生長過程中會產(chǎn)生有害的物質(zhì)，導(dǎo)致培養(yǎng)物迅速死亡。消毒：①雙手、超凈工作臺臺面——酒精②外植體（幼嫩的莖段）——酒精、無菌水、次氯酸鈉③幼苗生長環(huán)境——蛭石或珍珠巖④外植體插入脫分化培養(yǎng)基——酒精燈火焰旁滅菌：培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基（脫分化培養(yǎng)基、誘導(dǎo)生芽培養(yǎng)基、誘導(dǎo)生根培養(yǎng)基)6.脫分化、在分化、愈傷組織的概念6.①脫分化：已分化的細(xì)胞失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能，轉(zhuǎn)變成未分化的細(xì)胞的過程②再分化：愈傷組織重新分化成芽、根等器官的過程③愈傷組織：不定形的薄壁組織團塊（具分裂、分化能力；具全能性），做題時還碰到過高度液泡化7.切取幼嫩的莖段原因？接種時外植體的方向能否倒插？脫分化過程避光處理的原因？再分化需要光照的原因？7.分裂旺盛，分化程度低，容易誘導(dǎo)形成愈傷組織不能有光可抑制愈傷組織的形成再分化出芽和葉時需要光照，有利于葉綠素的合成。8.植物體細(xì)胞雜交時，植物細(xì)胞去除細(xì)胞壁的方法？纖維素酶和果膠酶的酶溶液中一般加入一定濃度的無機鹽離子和甘露醇，試分析原因？人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法？8.纖維素酶和果膠酶使溶液具有一定的滲透壓，防止原生質(zhì)體吸水過多而漲破，保持原生質(zhì)體正常物理法—電融合法、離心法；化學(xué)法：聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+—高PH融合法9.植物體細(xì)胞雜交的原理？融合完成標(biāo)志？意義？9.細(xì)胞膜的流動性；植物細(xì)胞具有全能性再生細(xì)胞壁打破生殖隔離，實現(xiàn)遠緣雜交育種，培育植物新品種。10.植物體細(xì)胞雜交過程中遺傳物質(zhì)的變化10.植物體細(xì)胞雜交若兩個不同品種的植物細(xì)胞A、B進行融合，A含有2X條染色體，2個染色體組．基因型為Aabb,B含有2Y條染色體，2個染色體組，基因型為ccDd,則新植株應(yīng)為四倍體，其體細(xì)胞中染色體數(shù)為2x+2Y,基因型為AabbccDd,從中不難看出，體細(xì)胞雜交即兩個細(xì)胞融合成一個細(xì)胞，不管是染色體數(shù)、基因型還是染色體組數(shù)都是直接相加得到的。11.快速繁殖（微型繁殖）的優(yōu)點？實現(xiàn)作物脫毒為何選擇頂端分生區(qū)附近？11.保持優(yōu)良品種的遺傳特性，高效快速地實現(xiàn)種苗的大量繁殖。病毒極少，甚至無病毒12.植物細(xì)胞培養(yǎng)的概念？12.是指在離體條件下對單個植物細(xì)胞或細(xì)胞團進行培養(yǎng)使其繁殖的技術(shù)。13.初生代謝物和次生代謝物分別有哪些？13.初生代謝產(chǎn)物：蛋白質(zhì),脂肪,糖類,核酸次生代謝產(chǎn)物：小分子有機化合物（酚類、萜類和含氮化合物等），具體如生物堿(紫草寧、人參皂甙、紫杉醇)，在植物抗病、抗蟲等方面發(fā)揮作用，也是很多藥物、香料、色素等的重要來源。14.單倍體育種的方法、原理、優(yōu)點？14.方法：花藥離體培養(yǎng)得到單倍體幼苗，秋水仙素處理抑制有絲分裂前期紡錘體的形成，染色體加倍得到穩(wěn)定遺傳（純合子）的優(yōu)良品種。原理：染色體（數(shù)目）變異、植物細(xì)胞的全能性優(yōu)點：極大地縮短了育種的年限，節(jié)約了大量的人力和物力；大多數(shù)單倍體植株的細(xì)胞中只含一套染色體，染色體加倍后得到的植株的隱性性狀容易顯現(xiàn)，可作為進行體細(xì)胞誘變育種和研究遺傳突變的理想材料15.突變體獲得的原理、方法？15.原理：基因突變和植物細(xì)胞的全能性。在植物的組織培養(yǎng)過程中，由于培養(yǎng)細(xì)胞一直處于不斷增殖的狀態(tài)，因此它們?nèi)菀资艿脚囵B(yǎng)條件和誘變因素（如射線、化學(xué)物質(zhì)等）的影響而產(chǎn)生突變。從產(chǎn)生突變的個體中可以篩選出對人們有用的突變體，進而培育成新品種。16.認(rèn)識人工種子16.人工種子：就是以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽為材料，經(jīng)過人工薄膜包裝得到的種子。人工種子在適宜條件下同樣能夠萌發(fā)長成幼苗。為了促進胚狀體的生長發(fā)育，還可以向人工種皮中加入加入適量的養(yǎng)分、無機鹽、有機碳源以及農(nóng)藥、抗生素、有益菌等。為了促進胚狀體的生長發(fā)育，還可以向人工種皮中加入一些植物生長調(diào)節(jié)劑。動物細(xì)胞培養(yǎng)1.動物細(xì)胞培養(yǎng)的原理？流程？1.細(xì)胞增殖取動物組織（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→用機械方法或胰蛋白酶、膠原蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞→用培養(yǎng)液制成細(xì)胞懸液→原代培養(yǎng)→傳代培養(yǎng)。2.原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)？細(xì)胞貼壁？接觸抑制？懸浮生長？2.原代培養(yǎng)：分瓶之前的細(xì)胞培養(yǎng)，即動物組織經(jīng)處理后的初次培養(yǎng)為原代培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)：分瓶后的細(xì)胞培養(yǎng)為傳代培養(yǎng)。細(xì)胞貼壁：大多數(shù)細(xì)胞需要貼附于某些基質(zhì)表面才能生長增殖，如貼附于培養(yǎng)瓶的瓶壁上接觸抑制：當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時，細(xì)胞通常會停止分裂增殖。懸浮生長：細(xì)胞懸浮在培養(yǎng)液中生長增殖3.為什么選用動物胚胎或幼齡個體的器官或組織做動物細(xì)胞培養(yǎng)材料？組織塊怎樣制成細(xì)胞懸液？胃蛋白酶行嗎？酶解法較溫和，一定不會對動物細(xì)胞造成損傷，對嗎？3.增殖能力強，細(xì)胞分化程度低，容易培養(yǎng)用機械的方法，或用胰蛋白酶、膠原蛋白酶將組織分散成單個細(xì)胞不行，胃蛋白酶作用的適宜pH約為2，多數(shù)動物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2～7.4，在此環(huán)境中胃蛋白酶會失去活性。不對，使用胰蛋白酶時，要控制好作用時間，因為胰蛋白酶不僅能分解細(xì)胞間的蛋白質(zhì)，長時間作用還會分解細(xì)胞膜蛋白等，對細(xì)胞造成損傷。4.體外培養(yǎng)的動物細(xì)胞分類？細(xì)胞培養(yǎng)一段時間后，分裂會受阻的原因？4.懸浮生長的細(xì)胞分裂受阻的原因：細(xì)胞密度過大、有害代謝物積累、培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質(zhì)缺乏等貼壁生長的細(xì)胞分裂受阻的原因：①細(xì)胞密度過大、有害代謝物積累、培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質(zhì)缺乏等。②發(fā)生接觸抑制5.動物細(xì)胞生長的特點？怎樣進行傳代培養(yǎng)？動物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用？5.細(xì)胞貼壁、接觸抑制①懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞：直接用離心法收集；②貼壁細(xì)胞：重新用胰蛋白酶等處理，使之分散成單個細(xì)胞，然后再用離心法收集人造皮膚的構(gòu)建、有毒物質(zhì)檢測（許多致畸、致癌物質(zhì)加入培養(yǎng)液后，培養(yǎng)細(xì)胞會發(fā)生染色體結(jié)構(gòu)和數(shù)目的變異。根據(jù)變異細(xì)胞占全部培養(yǎng)細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)，可以判斷某種物質(zhì)的毒性。）6.動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件？6.（1）營養(yǎng)（2）無菌、無毒的環(huán)境（3）溫度、PH和滲透壓（4）氣體環(huán)境7.為何需要加入血清等一些天然成分？7.補充促細(xì)胞生長因子及其他活性物質(zhì)8.如何保證無菌的條件？8.①培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行滅菌處理。②在無菌環(huán)境下操作。9.如何保證無毒的環(huán)境？定期更換培養(yǎng)液的目的是？9.培養(yǎng)液定期更換。目的:清除代謝物,防止細(xì)胞代謝物積累對細(xì)胞自身造成危害。10.具體的氣體環(huán)境是怎樣的？O2和CO2的作用分別是什么？溫度和pH分別是多少？10.95%空氣和5%CO2的混合氣體O2的主要作用:是細(xì)胞代謝必需的。CO2的主要作用:是維持培養(yǎng)液的pH。36.5℃±0.5℃；pH：7.2～7.4。11.干細(xì)胞的分類、分布、功能？11.干細(xì)胞存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等，包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞。胚胎干細(xì)胞：簡稱ES細(xì)胞，存在于早期胚胎，能分化成任何一種細(xì)胞、組織、器官甚至個體。成體干細(xì)胞：是成體組織或器官內(nèi)的干細(xì)胞，包括造血干細(xì)胞、神經(jīng)干細(xì)胞、精原干細(xì)胞等，成體干細(xì)胞具有組織特異性，只能分化成特定的細(xì)胞或組織。12.用小鼠的成纖維細(xì)胞制備iPS細(xì)胞的方法有？12.借助載體將特定基因?qū)爰?xì)胞中、直接將特定蛋白導(dǎo)入細(xì)胞中或者用小分子化合物誘導(dǎo)13.將Oct3/4、Sox2、c-Myc和Klf4基因通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細(xì)胞后，置于培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）的培養(yǎng)基上培養(yǎng)。2~3周后，細(xì)胞會呈現(xiàn)出與ES細(xì)胞類似的形態(tài)和活躍分裂能力，稱為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞）。①逆轉(zhuǎn)錄病毒的作用？它的轉(zhuǎn)入過程需要顯微注射法嗎？①是載體，將4種外源基因送入成纖維細(xì)胞不需要②將成纖維細(xì)胞誘導(dǎo)成iPS細(xì)胞的過程類似于植物細(xì)胞工程的哪一步？②脫分化③若將iPS細(xì)胞轉(zhuǎn)化為骨骼肌細(xì)胞，這能否體現(xiàn)iPS細(xì)胞的全能性？③不能④iPS細(xì)胞應(yīng)用于臨床治療時可能存在什么風(fēng)險？為什么？④腫瘤風(fēng)險，因為iPS細(xì)胞具有活躍分裂能力，有分化為各種細(xì)胞的潛能，因此存在分化為腫瘤細(xì)胞的風(fēng)險⑤如何設(shè)計實驗證明iPS細(xì)胞的產(chǎn)生是由于外源基因的作用？如何設(shè)計實驗證明iPS細(xì)胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用？⑤將轉(zhuǎn)入外源基因和沒有轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞分別培養(yǎng)在相同的培養(yǎng)基中，并確保其他培養(yǎng)條件相同。如果只有轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞轉(zhuǎn)化成了iPS細(xì)胞，就可以證明iPS細(xì)胞的產(chǎn)生是由于外源基因的作用，而不是培養(yǎng)基的作用。⑥若要了解Oct3/4、Sox2、c-Myc和Klf4基因在誘導(dǎo)產(chǎn)生iPS細(xì)胞時，每個基因作用的相對大小，如何設(shè)計實驗？⑥依次去掉1個基因，將其他3個8基因轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細(xì)胞，然后通過與轉(zhuǎn)入4個基因的小鼠成纖維細(xì)胞的誘導(dǎo)情況進行比較，來推測缺失的那個基因?qū)φT導(dǎo)產(chǎn)生的iPS細(xì)胞的影響，進而判斷每個基因作用的相對大小。⑦為什么說iPS細(xì)胞的應(yīng)用前景優(yōu)于胚胎干細(xì)胞？⑦a.誘導(dǎo)iPS細(xì)胞產(chǎn)生的過程無需破壞胚胎b.iPS細(xì)胞可以來源于病人自身體細(xì)胞，將它移植回病人體內(nèi)后，理論上可以避免免疫排斥反應(yīng)動物細(xì)胞融合和單克隆抗體的制備1.動物細(xì)胞融合的原理？誘導(dǎo)融合的方法？意義？最重要的應(yīng)用？1.原理：細(xì)胞膜的流動性誘導(dǎo)方法：PEG融合法，電融合法，滅活病毒誘導(dǎo)法意義：突破有性雜交的局限，使遠緣雜交成為可能最重要的應(yīng)用是制造單克隆抗體2.滅活的概念？滅活病毒誘導(dǎo)融合的原理？2.滅活：指用物理或化學(xué)手段使病毒或細(xì)菌失去感染能力，但并不破壞它們的抗原結(jié)構(gòu)原理：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使細(xì)胞相互凝聚，細(xì)胞膜是哪個的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新分布，細(xì)胞膜打開，細(xì)胞發(fā)生融合3.傳統(tǒng)抗體制備方法及缺陷3.方法：反復(fù)注射抗原缺陷：產(chǎn)量低、純度低、特異性差4.單克隆的制備包括的階段及原理？注射特定抗原的目的？4.動物細(xì)胞融合（細(xì)胞膜的流動性）、動物細(xì)胞培養(yǎng)（細(xì)胞增殖）獲得產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞5.第一次篩選的方法？目的？死亡的細(xì)胞類型？5.方法：選擇培養(yǎng)基目的：篩選出雜交瘤細(xì)胞死亡的細(xì)胞類型：未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞6.第二次篩選的目的和方法？6.方法：克隆化培養(yǎng)、抗體檢測目的：篩選出能產(chǎn)生特定（或所需）抗體的雜交瘤細(xì)胞7.雜交瘤細(xì)胞的特點？7.既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生（特異性）抗體（如果問的是第二次篩選出的雜交瘤細(xì)胞的特點，就答：既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生特定（或所需）抗體）8.大量增殖雜交瘤細(xì)胞獲得單抗的方法8.體外培養(yǎng)（從細(xì)胞培養(yǎng)液中獲?。?、注射到小鼠腹腔內(nèi)（從腹水中獲?。?.單克隆抗體的優(yōu)點9.能準(zhǔn)確識別抗原的細(xì)微差異，與特定的抗原發(fā)生特異性結(jié)合，可大量制備。10.單克隆抗體的應(yīng)用——了解，選擇題中會選即可10.①作為診斷試劑（早早孕診斷試劑盒用同位素或熒光標(biāo)記的單克隆抗體定位腫瘤等）②運載藥物③治療疾病11.抗體-藥物偶聯(lián)物（ADC）的組成、各部分功能、優(yōu)點？11.ADC由抗體、接頭和藥物組成。抗體主要發(fā)揮靶向運輸作用，即通過特異性結(jié)合靶細(xì)胞表面的抗原，將連接的藥物輸送到靶細(xì)胞；藥物發(fā)揮治療效應(yīng)，如殺傷靶細(xì)胞。優(yōu)點毒副作用小。12.ADC治療腫瘤具有毒副作用小，治療效果明顯等優(yōu)點，原因？12.抗體-藥物偶聯(lián)物（ADC）通過將細(xì)胞毒素類藥物能與特異性識別腫瘤細(xì)胞的單克隆抗體結(jié)合，通過胞吞的方式進入腫瘤細(xì)胞，溶酶體使其裂解，釋放藥物，實現(xiàn)了對腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷。動物體細(xì)胞核移植技術(shù)與克隆動物1.分析動物細(xì)胞核移植技術(shù)的概念：①細(xì)胞核的來源？②去核是指？③對卵母細(xì)胞的要求？④原理？1.①胚胎細(xì)胞核和體細(xì)胞核②去核指去除該復(fù)合物③減數(shù)分裂Ⅱ中期（MⅡ期）④動物細(xì)胞核的全能性2.胚胎細(xì)胞核移植比體細(xì)胞核移植容易的原因？2.動物胚胎細(xì)胞分化程度低，表現(xiàn)全能性相對容易3.體細(xì)胞核移植過程分析：①整個生產(chǎn)流程用到了哪些技術(shù)?①動物體細(xì)胞核移植，胚胎移植，動物細(xì)胞培養(yǎng)②受體細(xì)胞選擇MII期卵母細(xì)胞的原因？②體積大易操作；含有促使細(xì)胞核表現(xiàn)全能性的物質(zhì)和營養(yǎng)條件③用什么方法去核？為何要去核？去核的時期？③顯微操作法保證克隆動物細(xì)胞核內(nèi)的遺傳物質(zhì)全部來自于有重要利用價值的供體MⅡ期④實際操作時注入卵母細(xì)胞的是供體細(xì)胞還是細(xì)胞核？為什么？④將整個供體細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞對卵母細(xì)胞的損傷小⑤何為重構(gòu)胚？重構(gòu)胚是怎樣形成的？激活重構(gòu)胚的方法？激活的目的？⑤重構(gòu)胚是指人工重新構(gòu)建的胚胎，具有發(fā)育成完整個體的能力將整個供體細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞，電融合法使兩細(xì)胞融合，供體核進入卵母細(xì)胞，形成重構(gòu)胚。激活重構(gòu)胚的方法：物理或化學(xué)方法（如電刺激、Ca2+載體、乙醇和蛋白酶合成抑制劑等）使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進程⑥克隆動物是對體細(xì)胞供體動物進行了100%的復(fù)制嗎？為什么？⑥不是克隆動物的遺傳物質(zhì)組成：供體細(xì)胞核DNA，供體和去核卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)DNA。表現(xiàn)型=基因型+環(huán)境4.了解動物細(xì)胞核移植技術(shù)中使用的去核方法？顯微操作法（普遍使用），也有采用梯度離心、紫外線短時間照射和化學(xué)物質(zhì)處理等方法。這些方法是在沒有穿透卵母細(xì)胞透明帶的情況下去核或使其中的DNA變性胚胎工程1.胚胎工程包括哪些技術(shù)手段？1.體外受精、胚胎移植、胚胎分割2.體內(nèi)受精包括哪兩個階段？精子獲能的場所？發(fā)育到哪個時期的卵子才具備受精的能力？場所？體內(nèi)受精的場所？2.受精前的準(zhǔn)備階段和受精階段輸卵管雌性生殖道MII期輸卵管輸卵管3.體內(nèi)受精的過程？3.①精子釋放多種酶，溶解卵細(xì)胞膜外的結(jié)構(gòu)（如透明帶），接觸卵細(xì)胞膜。②在精子觸及卵細(xì)胞膜的瞬間，透明帶發(fā)生反應(yīng)阻止后來的精子進入透明帶。③精子入卵后，卵細(xì)胞膜立即發(fā)生生理反應(yīng)，拒絕其他精子入卵。4.受精階段：①精子如何穿越卵細(xì)胞膜外結(jié)構(gòu)①釋放多種酶，溶解這些結(jié)構(gòu)②防止多精入卵的兩道屏障②透明帶反應(yīng)、卵細(xì)胞膜反應(yīng)③透明帶反應(yīng)發(fā)生時間③精子觸及卵細(xì)胞膜的瞬間④卵細(xì)胞膜反應(yīng)發(fā)生時間④精子入卵后⑤精子入卵后，精子、卵子發(fā)生的變化⑤精子：尾部脫離、形成雄原核卵子：完成減數(shù)分裂Ⅱ，排出第二極體，形成雌原核⑥受精的標(biāo)志⑥透明帶與卵細(xì)胞膜之間觀察到兩個極體（或觀察到雌、雄原核）5.胚胎早期發(fā)育的場所？過程？5.輸卵管、子宮受精卵卵裂期桑葚胚囊胚原腸胚6.①卵裂期的特點？②囊胚組成及各部分功能6.①在透明帶內(nèi)，細(xì)胞的數(shù)量不斷增加，但胚胎的總體積并不增加②內(nèi)細(xì)胞團（將來發(fā)育成胎兒的各種組織）、滋養(yǎng)層（將來發(fā)育成胎膜和胎盤）、囊胚腔7.①全能性最高的階段②出現(xiàn)細(xì)胞分化的階段③出現(xiàn)胚層分化的階段④發(fā)生孵化的階段⑤胚胎移植的時期7.①桑葚胚及其以前的階段②囊胚③原腸胚④囊胚⑤桑葚胚或囊胚8.①體外精子獲能的方法？采集到的卵母細(xì)胞是否都要經(jīng)過培養(yǎng)？舉例說明8.①用獲能液（常見的有效成分有肝素、Ca2+載體等）②從卵巢中獲得——體外培養(yǎng)至MII期超數(shù)排卵（促性腺激素）獲得的—不需體外培養(yǎng)9.胚胎移植的概念？分析概念：①操作對象？②受體？③地位（在胚胎工程中所處的位置）？9.將通過體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的雌性動物體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術(shù)。①胚胎（胚胎的來源：雌性動物體內(nèi)的早期胚胎、體外受精、核移植、轉(zhuǎn)基因）②同一物種、與供體處于相同的生理狀態(tài)、雌性動物③胚胎工程的最終技術(shù)環(huán)節(jié)10.胚胎移植時：①選擇怎樣的供體和受體？②進行怎樣的處理？③進行哪兩次檢查？10.①供體:遺傳性狀優(yōu)良、生產(chǎn)能力強受體:同一物種，健康體質(zhì)，正常繁殖能力②同期發(fā)情處理（供、受體母牛）：激素超數(shù)排卵處理（供體母牛）：促性腺激素③收集胚胎后，檢查胚胎質(zhì)量胚胎移植后，對受體進行妊娠檢查11.①胚胎移植實質(zhì)？②胚胎移植的優(yōu)勢？11.①早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移②充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖潛力12.生理學(xué)基礎(chǔ)：①如何使供、受體生殖器官生理變化相同？②胚胎收集的基礎(chǔ)？③胚胎在受體內(nèi)存活的基礎(chǔ)？④受體是否影響胚胎的遺傳特性？12.①同期發(fā)情處理②早期胚胎處于游離狀態(tài)③不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)④不影響供體胚胎與受體子宮建立的僅是生理和組織上的聯(lián)系，其遺傳物質(zhì)在孕育過程中不會發(fā)生任何變化13.①胚胎分割時選擇什么樣的胚胎？②對囊胚進行分割時注意什么？為什么？③用什么設(shè)備？13.①發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑葚胚或囊胚②將內(nèi)細(xì)胞團均等分割以免影響胚胎恢復(fù)和進一步發(fā)育③設(shè)備：體視顯微鏡和顯微操作儀，操作液，分割針、分割刀14.分割后胚胎去向？14.可直接移植給受體，或體外培養(yǎng)后移植。15.胚胎移植前，如何進行性別鑒定？15.取樣滋養(yǎng)層細(xì)胞，做DNA分析，鑒定性別16.胚胎移植的局限性16.采用胚胎分割技術(shù)產(chǎn)生同卵多胎的可能性是有限的，分割次數(shù)越多，分割后胚胎成活的概率越小，目前仍然以二分胚胎的分割和移植效率最高17.利用核移植技術(shù)、體外受精（試管嬰兒）、胚胎分割獲得胚胎，生殖方式一樣嗎？17.不一樣；核移植——無性生殖、體外受精——有性生殖、胚胎分割——無性生殖選必3第2章細(xì)胞工程核心必備知識達標(biāo)驗收植物細(xì)胞工程1.植物組織培養(yǎng)的概念是什么？原理是什么？2.什么是全能性？植物細(xì)胞具有全能性的原因是什么？細(xì)胞在體內(nèi)為什么不表現(xiàn)出全能性？3.植物細(xì)胞表現(xiàn)全能性的條件有哪些？4.植物組織培養(yǎng)的流程是怎樣的？（兩種途徑）核心是什么？5.在組織培養(yǎng)實驗中，為什么要強調(diào)所用器械的滅菌和實驗人員的無菌操作？植物組織培養(yǎng)實驗操作：（注意哪些材料需要消毒，哪些材料滅菌）6.脫分化、在分化、愈傷組織的概念7.切取幼嫩的莖段原因？接種時外植體的方向能否倒插？脫分化過程避光處理的原因？再分化需要光照的原因？8.植物體細(xì)胞雜交時，植物細(xì)胞去除細(xì)胞壁的方法？纖維素酶和果膠酶的酶溶液中一般加入一定濃度的無機鹽離子和甘露醇，試分析原因？人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法？9.植物體細(xì)胞雜交的原理？融合完成標(biāo)志？意義？10.植物體細(xì)胞雜交過程中遺傳物質(zhì)的變化11.快速繁殖（微型繁殖）的優(yōu)點？實現(xiàn)作物脫毒為何選擇頂端分生區(qū)附近？12.植物細(xì)胞培養(yǎng)的概念？13.初生代謝物和次生代謝物分別有哪些？14.單倍體育種的方法、原理、優(yōu)點？15.突變體獲得的原理、方法？16.認(rèn)識人工種子動物細(xì)胞培養(yǎng)1.動物細(xì)胞培養(yǎng)的原理？流程？2.原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)？細(xì)胞貼壁？接觸抑制？懸浮生長？3.為什么選用動物胚胎或幼齡個體的器官或組織做動物細(xì)胞培養(yǎng)材料？組織塊怎樣制成細(xì)胞懸液？胃蛋白酶行嗎？酶解法較溫和，一定不會對動物細(xì)胞造成損傷，對嗎？4.體外培養(yǎng)的動物細(xì)胞分類？細(xì)胞培養(yǎng)一段時間后，分裂會受阻的原因？5.動物細(xì)胞生長的特點？怎樣進行傳代培養(yǎng)？動物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用？6.動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件？7.為何需要加入血清等一些天然成分？8.如何保證無菌的條件？9.如何保證無毒的環(huán)境？定期更換培養(yǎng)液的目的是？10.具體的氣體環(huán)境是怎樣的？O2和CO2的作用分別是什么？溫度和pH分別是多少？11.干細(xì)胞的分類、分布、功能？12.用小鼠的成纖維細(xì)胞制備iPS細(xì)胞的方法有？13.將Oct3/4、Sox2、c-Myc和Klf4基因通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細(xì)胞后，置于培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）的培養(yǎng)基上培養(yǎng)。2~3周后，細(xì)胞會呈現(xiàn)出與ES細(xì)胞類似的形態(tài)和活躍分裂能力，稱為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞）。①逆轉(zhuǎn)錄病毒的作用？它的轉(zhuǎn)入過程需要顯微注射法嗎？②將成纖維細(xì)胞誘導(dǎo)成iPS細(xì)胞的過程類似于植物細(xì)胞工程的哪一步？③若將iPS細(xì)胞轉(zhuǎn)化為骨骼肌細(xì)胞，這能否體現(xiàn)iPS細(xì)胞的全能性？④iPS細(xì)胞應(yīng)用于臨床治療時可能存在什么風(fēng)險？為什么？⑤如何設(shè)計實驗證明iPS細(xì)胞的產(chǎn)生是由于外源基因的作用？如何設(shè)計實驗證明iPS細(xì)胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用？⑥若要了解Oct3/4、Sox2、c-Myc和Klf4基因在誘導(dǎo)產(chǎn)生iPS細(xì)胞時，每個基因作用的相對大小，如何設(shè)計實驗？⑦為什么說iPS細(xì)胞的應(yīng)用前景優(yōu)于胚胎干細(xì)胞？動物細(xì)胞融合和單克隆抗體的制備1.動物細(xì)胞融合的原理？誘導(dǎo)融合的方法？意義？最重要的應(yīng)用？2.滅活的概念？滅活病毒誘導(dǎo)融合的原理？3.傳統(tǒng)抗體制備方法及缺陷4.單克隆的制備包括的階段及原理？注射特定抗原的目的？5.第一次篩選的方法？目的？死亡的細(xì)胞類