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精選范本,供參考!精選范本,供參考!精選范本,供參考!選修3《現(xiàn)代生物科技專題》中的流程圖1.基因工程的基本操作流程圖生物材料生物材料蛋白質mRNA堿基排列順序DNAmRNADNA蛋白質mRNA堿基排列順序DNAmRNADNA氨基酸排列順序氨基酸排列順序PCR一定大小范圍DNAcDNAPCR一定大小范圍DNAcDNA基因組文庫cDNA文庫基因組文庫cDNA文庫獲取目的基因獲取目的基因酶:限制酶、DNA連接酶酶:限制酶、DNA連接酶運載體:質粒、運載體:質粒、λ噬菌體的衍生物、動植物病毒構建表達載體方法:植物細胞:方法:植物細胞:農桿菌轉化法、花粉管通道法、基因槍法動物細胞:顯微注射技術微生物細胞:Ca2+處理,增大細胞壁的通透性,得到感受態(tài)細胞。導入受體細胞導入受體細胞得到轉基因生物得到轉基因生物目的基因檢測與鑒定目的基因檢測與鑒定目的基因是否整合到受體的染色體上觀察/檢測抗原-抗體雜交DNA分子雜交目的基因是否整合到受體的染色體上觀察/檢測抗原-抗體雜交DNA分子雜交mRNA個體蛋白質mRNA個體蛋白質分子雜交分子雜交是否出現(xiàn)雜交帶目標性狀是否出現(xiàn)雜交帶目標性狀2.PCR技術的原理示意圖模板DNA模板DNA變性:加熱至90~95℃原理:DNA雙鏈復制變性:加熱至90~95℃解旋成單鏈DNA解旋成單鏈DNA復性:冷卻至55~60℃變性:加熱至90~95℃復性:冷卻至55~60℃變性:加熱至90~95℃Taq酶從引物起始進行互補鏈的合成Taq酶從引物起始進行互補鏈的合成雙鏈DNA引物結合到互補DNA鏈延伸:加熱至70~75℃延伸:加熱至70~75℃需要需要熱穩(wěn)定DNA聚合酶和4種游離的脫氧核苷酸3.蛋白質工程流程圖分子設計分子設計DAN合成預期功能蛋白質三維結構氨基酸序列預期功能蛋白質三維結構氨基酸序列多肽鏈基因DNA生物功能mRNA生物功能mRNA折疊轉錄翻譯折疊轉錄翻譯外植體(離體的植物組織、器官、細胞)外植體(離體的植物組織、器官、細胞)消毒接種接種培養(yǎng)基準備培養(yǎng)基準備培養(yǎng)基脫分化(避光:有利于脫分化脫分化(避光:有利于脫分化)培養(yǎng)基培養(yǎng)基包括:瓊脂、無機營養(yǎng)物、有機營養(yǎng)物、激素(生長素和細胞分裂素)薄壁細胞特點:排列疏松,高度液泡化。愈傷組織薄壁細胞特點:排列疏松,高度液泡化。愈傷組織再再分化(光照:有利于葉片內葉綠素的合成)胚狀體胚狀體或叢芽試管苗試管苗原理:植物細胞的全能性正常植株正常植株5.植物體細胞雜交技術操作流程圖原理:細胞膜的流動性;植物細胞的全能性甲原生質體乙植物體細胞甲植物體細胞酶解法去細胞壁甲原生質體乙植物體細胞甲植物體細胞酶解法去細胞壁所需的酶:所需的酶:纖維素酶、果膠酶乙原生質體乙原生質體誘導融合誘導融合誘導方法:物理法誘導方法:物理法(離心、振動、電激)化學法(聚乙二醇)融合的原生質體融合的原生質體再生出細胞壁高爾基體活躍再生出細胞壁高爾基體活躍(雜種細胞產生標志)雜種細胞雜種細胞篩選脫分化篩選脫分化愈傷組織愈傷組織再分化再分化胚狀體胚狀體多倍體,同時具有甲、乙的性狀。多倍體,同時具有甲、乙的性狀。植物體細胞雜交技術完成標志雜種植株6.動物細胞培養(yǎng)過程示意圖原理:細胞增殖動物組織塊動物組織塊剪碎組織剪碎組織胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理單個細胞單個細胞加入細胞培養(yǎng)液加入細胞培養(yǎng)液細胞懸液細胞懸液培養(yǎng)條件培養(yǎng)條件:無菌無毒環(huán)境一定的營養(yǎng)(特別加入血清)適宜的溫度和pH含95%空氣加5%CO2的氣體環(huán)境(CO2主要作用是維持培養(yǎng)液的pH)原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)細胞貼壁,接觸抑制細胞貼壁,接觸抑制胰蛋白酶處理,分瓶傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)9.單克隆抗體制備過程示意圖特定抗原特定抗原反復注射反復注射小鼠小鼠提取提?。ㄐ〣淋巴細胞(效應)B淋巴細胞小鼠骨髓瘤細胞體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)誘導融合誘導方法:電激、聚乙二醇、誘導融合誘導方法:電激、聚乙二醇、滅活的病毒多種融合細胞多種融合細胞篩選(選出篩選(選出雜交瘤細胞)特點:既能迅速大量繁殖,又能產生專一的抗體特點:既能迅速大量繁殖,又能產生專一的抗體多種雜交細胞多種雜交細胞克隆化培養(yǎng),多次檢驗,篩選得到專一抗體檢驗陽性的雜交瘤細胞克隆化培養(yǎng),多次檢驗,篩選得到專一抗體檢驗陽性的雜交瘤細胞能產生特定抗體的雜交瘤細胞能產生特定抗體的雜交瘤細胞體外培養(yǎng)雜交瘤細胞體外培養(yǎng)雜交瘤細胞小鼠體內培養(yǎng)雜交瘤細胞提純、制備提純、制備提純、制備提純、制備單克隆抗體單克隆抗體特點:靈敏度高,特異性強,可大量制備特點:靈敏度高,特異性強,可大量制備7.動物體細胞核移植過程流程圖(一):生殖性克隆牛卵巢高產奶牛牛卵巢高產奶牛采集采集采集采集卵母細胞卵母細胞體細胞體細胞體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)MⅡMⅡ期卵母細胞體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)去核去核供體細胞去核卵母細胞供體細胞去核卵母細胞將供體細胞注入去核卵母細胞,電刺激使其兩兩融合將供體細胞注入去核卵母細胞,電刺激使其兩兩融合重構細胞重構細胞體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)早期胚胎早期胚胎移入受體(代孕母牛)體內,發(fā)育,分娩移入受體(代孕母牛)體內,發(fā)育,分娩犢牛犢牛8.動物體細胞核移植過程流程圖(二):治療性克隆去核卵母細胞體細胞病人去核卵母細胞體細胞病人融合融合重構細胞重構細胞體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)胚胎干細胞胚胎干細胞體外培養(yǎng),誘導分化體外培養(yǎng),誘導分化免疫匹配的組織器官免疫匹配的組織器官免疫匹配的移植免疫匹配的移植10.哺乳動物受精卵的發(fā)育受精卵受精卵卵裂(有絲分裂)卵裂(有絲分裂)2細胞2細胞卵裂卵裂16細胞16細胞早期胚胎(發(fā)育在透明帶內進行)全能細胞有絲分裂早期胚胎(發(fā)育在透明帶內進行)全能細胞有絲分裂桑桑椹胚有絲分裂有絲分裂內細胞團(發(fā)育成胎兒的各種組織)內細胞團(發(fā)育成胎兒的各種組織)滋養(yǎng)層(發(fā)育成胎兒的胎膜和胎盤)囊囊胚有絲分裂、分化有絲分裂、分化形成內、中、外3個胚層原腸胚形成內、中、外3個胚層原腸胚有絲分裂、分化有絲分裂、分化組織器官形成組織器官形成有絲分裂、分化有絲分裂、分化成熟胚胎成熟胚胎11.胚胎移植示意圖受體母牛優(yōu)良母牛受體母牛優(yōu)良母牛移植胚胎移植胚胎同期發(fā)情處理(孕激素等)同期發(fā)情處理(孕激素等)超數(shù)排卵(促性腺激素)超數(shù)排卵(促性腺激素)配種優(yōu)良公牛配種優(yōu)良公牛沖卵、收集胚胎沖卵、收集胚胎質量檢查、培養(yǎng)質量檢查、培養(yǎng)妊娠妊娠、分娩優(yōu)良犢牛優(yōu)良犢牛12.試管動物工廠化生產流程圖卵巢新采集的或者冷凍的精液卵巢新采集的或者冷凍的精液離心采集離心采集高濃度精液卵母細胞高濃度精液卵母細胞獲能處理體外培養(yǎng)獲能處理體外培養(yǎng)獲能精子M獲能精子MⅡ卵母細胞收集收
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