血液分析儀臨床應(yīng)用

關(guān)于血液分析儀臨床應(yīng)用第1頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三第一部分血液學(xué)基礎(chǔ)1.血液流經(jīng)全身各臟器，是人體最大的循環(huán)系統(tǒng)；2.為全身提供氧氣和營(yíng)養(yǎng)成分；3.帶走二氧化碳和代謝產(chǎn)物4.有動(dòng)脈和靜脈之分第2頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三血液成分EDTA-K2抗凝血

血漿55%

水90%

養(yǎng)分

蛋白質(zhì)

激素

……

細(xì)胞45%

紅細(xì)胞

白細(xì)胞 血小板第3頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三紅細(xì)胞1.紅細(xì)胞為雙凹圓盤狀；2.內(nèi)含血紅蛋白；3.為機(jī)體組織攜帶氧氣和養(yǎng)分；4.正常男性為：4.0-5.5×1012/L

女性為：3.5-5.0×1012/L細(xì)胞膜有脆性，易破碎，因而溶血?jiǎng)ū砻婊钚詣┛扇芙饧t細(xì)胞第4頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三血紅蛋白1.血紅蛋白為紅細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)，具有攜帶氧氣的位點(diǎn)；2.其功能為攜帶氧氣；3.當(dāng)紅細(xì)胞被溶解后，血紅蛋白釋放出；4.正常人含量為：

110-170g/L血紅蛋白有粘性，容易附著第5頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三

血小板血小板功能為參與止血正常參考為：

100-300×109/L

血小板由于本身的功能特性，容易受到刺激后聚集，因而在臨床檢測(cè)中最容易受影響血小板第6頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三白細(xì)胞功能為抵抗機(jī)體免受感染正常參考為：4-10×109/L可分為5個(gè)亞群，各自行使獨(dú)立的功能具有細(xì)胞核，白細(xì)胞第7頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三白細(xì)胞亞群1.中性粒細(xì)胞2.淋巴細(xì)胞3.單核細(xì)胞4.嗜酸細(xì)胞5.嗜堿細(xì)胞12345第8頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三庫(kù)爾特原理負(fù)壓血細(xì)胞懸液外電極內(nèi)電極小孔小孔管小孔電流樣品杯小孔近觀庫(kù)爾特原理三要素：小孔、負(fù)壓、電極檢測(cè)：細(xì)胞大小和數(shù)量第9頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三第二部分血細(xì)胞直方圖在小孔計(jì)數(shù)時(shí)儀器獲得細(xì)胞的數(shù)量和大小(體積)的信息,再進(jìn)一步分類整理,得到在各種不同體積下相應(yīng)的數(shù)量,反應(yīng)在坐標(biāo)上坐標(biāo)橫軸表示細(xì)胞大小,以fl(飛升)為單位坐標(biāo)縱軸表示相應(yīng)數(shù)量第10頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三三分類之白細(xì)胞直方圖第11頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三紅細(xì)胞直方圖典型的紅細(xì)胞直方圖上，可以看到兩個(gè)細(xì)胞群體：1．細(xì)胞主群

從50fL開(kāi)始，兩側(cè)對(duì)稱呈正態(tài)分布的曲線，又稱“主峰”

2．大細(xì)胞群

在主群右側(cè)，又稱“足趾部”，是一些紅細(xì)胞二聚體、三聚體、多聚體的混合物。第12頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三血小板直方圖（擬合曲線）在血小板的直方圖上可見(jiàn)兩條曲線：一條是2fl-20fl的原始數(shù)據(jù)曲線;另一條是0fl-70fl的擬合曲線.第13頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三擬合曲線血小板計(jì)數(shù)的干擾主要來(lái)自:2fl以下：噪音、電磁波的干擾20fl以上：裂紅細(xì)胞;小紅細(xì)胞;白細(xì)胞的干擾第14頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三擬合曲線作用儀器根據(jù)測(cè)量得到的2～20fL范圍內(nèi)血小板分布情況，按照對(duì)數(shù)正態(tài)分布規(guī)律得到0～70fL范圍血小板分布情況（正常人血小板絕大多數(shù)分布在2～20fL

范圍內(nèi)）。如果擬合成功，血小板數(shù)量由擬合曲線下的面積換算得到，即0～70fL范圍的血小板數(shù)量；如果擬合不成功，沒(méi)有擬合曲線，血小板結(jié)果只報(bào)告2～20fL范圍的血小板數(shù)量。通常情況下是低于實(shí)際數(shù)量的第15頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三血小板曲線不擬合的原因1.血小板原始計(jì)數(shù)小于20×109/L；2.血小板曲線不呈現(xiàn)對(duì)數(shù)正態(tài)分布；3.血小板曲線的波峰不在3fL-15fL之間；4.血小板PDW大于20%5.三次計(jì)數(shù)中任何一次沒(méi)有符合上述4點(diǎn)擬合條件第16頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三第三部分血細(xì)胞五分類庫(kù)爾特VCS五分類技術(shù)

V：體積分析

C：細(xì)胞核型分析

S：細(xì)胞內(nèi)部顆粒分析第17頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三接近原態(tài)的白細(xì)胞分析ScatterPak雙試劑系統(tǒng)的作用E-lyse:通過(guò)低滲作用溶解紅細(xì)胞；S-lyse:終止溶解作用，使白細(xì)胞恢復(fù)到接近原態(tài)第18頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三接近原態(tài)的WBC分析接近原態(tài)的白細(xì)胞進(jìn)入流式通道第19頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三逐個(gè)、同時(shí)、直接的三維檢測(cè)第20頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三NEDC

Mean細(xì)胞的三維定位NEOP

MeanNE

RLS

Mean第21頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三細(xì)胞的三維定位第22頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三細(xì)胞的三維定位第23頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三三維空間的多側(cè)面表示-DF1

-體積(V),激光散射(S)嗜酸細(xì)胞中性粒細(xì)胞淋巴細(xì)胞單核細(xì)胞第24頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三DF2

-體積(V),傳導(dǎo)性(C)單核細(xì)胞淋巴細(xì)胞中性粒細(xì)胞嗜酸細(xì)胞嗜堿細(xì)胞第25頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三網(wǎng)織紅細(xì)胞的檢測(cè)網(wǎng)織紅細(xì)胞是介于晚幼紅細(xì)胞和成熟紅細(xì)胞之間的不成熟紅細(xì)胞,通常較成熟紅細(xì)胞稍大,其胞質(zhì)中尚殘存部分嗜堿性物質(zhì)(RNA,核糖體),經(jīng)堿性染料染色后可見(jiàn)深染的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),故名。右圖中標(biāo)記A、B、C的細(xì)胞分別代表不同成熟度的網(wǎng)織紅細(xì)胞的。第26頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三新亞甲藍(lán)-VCS檢測(cè)法以經(jīng)典的超活染料新亞甲藍(lán)（NMB）著色網(wǎng)織紅細(xì)胞內(nèi)殘存的RNA漂洗紅細(xì)胞內(nèi)血紅蛋白(酸性試劑)用VCS三維技術(shù)，檢測(cè)網(wǎng)織紅細(xì)胞第27頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三網(wǎng)織紅細(xì)胞

VCS三維散點(diǎn)圖分析第28頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測(cè)注意點(diǎn)使用抗凝血，樣本采集后8小時(shí)內(nèi)完成檢測(cè)加入染液（A液）后室溫下作用5-60分鐘取2ul，加入2ml漂洗液（B液）后勿混勻，等待30秒鐘30秒鐘一到，立即進(jìn)樣檢測(cè)網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測(cè)的重復(fù)性不太理想（半自動(dòng)）第29頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三第四部分血細(xì)胞參數(shù)介紹WBC、NE%、NE#、LY%、LY#、MO%、MO#、EO%、EO#、BA%、BA#；RBC、Hgb、Hct、MCV、MCH、MCHC、RDWPLT、MPV、PCT、PDWRET%、RET#、MRV、MI第30頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三白細(xì)胞系列參數(shù)WBC：白細(xì)胞數(shù)量，正常人參考為4-10×109/LNE%：中性粒細(xì)胞百分比，正常參考為50%-75%NE#：中性粒細(xì)胞絕對(duì)值LY%：淋巴細(xì)胞百分比，正常參考為20%-40%LY#：淋巴細(xì)胞絕對(duì)值MO%：?jiǎn)魏思?xì)胞百分比，正常參考為3%-10%MO#：?jiǎn)魏思?xì)胞絕對(duì)值EO%：嗜酸細(xì)胞百分比，正常參考為0.5%-5%EO#：嗜酸細(xì)胞絕對(duì)值BA%：嗜堿細(xì)胞百分比，正常參考為0-2%BA#：嗜堿細(xì)胞絕對(duì)值第31頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三紅細(xì)胞系列參數(shù)RBC：紅細(xì)胞數(shù)量，正常參考男性為4.0-5.5×1012/L

正常參考女性為3.5-5.0×1012/LHgb：外周血中血紅蛋白濃度，正常參考為110-160g/LHct：血細(xì)胞壓積，也可指紅細(xì)胞壓積，正常參考為0.35-0.50MCV：平均紅細(xì)胞體積，正常參考為80-100fLMCH：平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量，指平均每個(gè)紅細(xì)胞含的血紅蛋白量，正常參考為27-34pgMCHC：平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度，指紅細(xì)胞中血紅蛋白濃度，正常參考為320-360g/LRDW：紅細(xì)胞分布寬度，正常參考為11.5%-15%第32頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三血小板系列參數(shù)PLT：血小板數(shù)量，正常參考為100-300×109/LMPV：平均血小板體積，正常參考為6.5-12.5fLPct：血小板壓積，正常參考為0.108%-0.271%PDW：血小板分布寬度，正常參考為11.5%-18%第33頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三網(wǎng)織紅細(xì)胞系列參數(shù)RET%：網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比，正常參考為0.5%-2.5%RET#：網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對(duì)值MRV：平均網(wǎng)織紅細(xì)胞體積，正常參考為100-125fLMI：網(wǎng)織紅細(xì)胞不成熟度，即不成熟網(wǎng)織紅細(xì)胞占所有網(wǎng)織紅細(xì)胞的比率，正常參考為0.2-0.4第34頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三第五部分HMX常見(jiàn)的旗標(biāo)和代碼旗標(biāo)(數(shù)值后):R結(jié)果需復(fù)核*R計(jì)數(shù)受干擾H結(jié)果高于參考范圍上限L結(jié)果低于參考范圍下限代碼(替代數(shù)值):-----三次計(jì)數(shù)比統(tǒng)一…..不完全計(jì)算+++++結(jié)果超出操作范圍:::::流式通道堵塞?????數(shù)據(jù)無(wú)效第35頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三白細(xì)胞計(jì)數(shù)值后出現(xiàn)*R的臨床意義說(shuō)明白細(xì)胞在35fl處的檢測(cè)受到干擾.在白細(xì)胞計(jì)數(shù)孔有35fl大小的顆粒通過(guò)并被當(dāng)作白細(xì)胞計(jì)數(shù),且超過(guò)一定數(shù)量,觸發(fā)報(bào)警在白細(xì)胞直方圖上看,曲線在35fl處上抬第36頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三正常情況第37頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三異常情況第38頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三導(dǎo)致*R出現(xiàn)的可能原因小白細(xì)胞有核紅細(xì)胞、抗溶紅細(xì)胞紅細(xì)胞聚集,大血小板,血小板聚集溶血?jiǎng)┹斔拖到y(tǒng)故障第39頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三RDW后出現(xiàn)R的臨床意義紅細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)儀器計(jì)數(shù)24fl～360fl的顆粒,繪出直方圖,正常紅細(xì)胞直方圖應(yīng)為兩端封閉、單峰、呈高斯分布的曲線.RDW反應(yīng)紅細(xì)胞大小分布的偏離情況,其意義相當(dāng)于CV%(變異系數(shù)).導(dǎo)致的原因：輸血紅細(xì)胞凝集紅細(xì)胞碎片大血小板血小板凝集成塊處理方法：涂片鏡檢紅細(xì)胞是否大小不一第40頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三第41頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三PLT結(jié)果后出現(xiàn)R旗標(biāo)的

臨床意義儀器進(jìn)行血小板計(jì)數(shù)時(shí),計(jì)數(shù)2fl～20fl的血小板數(shù)量,再擬合出一條0fl～70fl的曲線,目的是為了排除計(jì)數(shù)干擾.但條件不滿足時(shí)儀器不能給出擬合曲線,這時(shí)候血小板數(shù)值后出現(xiàn)R.第42頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三第43頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三導(dǎo)致血小板后出現(xiàn)R的原因小紅細(xì)胞或紅細(xì)胞碎片;白細(xì)胞碎片;大血小板,血小板凝集;血小板大小不一(輸血后);電磁波或噪音干擾小孔計(jì)數(shù)第44頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三處理方法1.手工涂片鏡檢,如發(fā)現(xiàn)小紅細(xì)胞,細(xì)胞碎片等異常細(xì)胞,則手工計(jì)數(shù)血小板;2.如果大血小板影響到白細(xì)胞或紅細(xì)胞數(shù)值,重新復(fù)核;3.如果出現(xiàn)衛(wèi)星血小板,將標(biāo)本以枸櫞酸鈉抗凝,檢測(cè)血小板數(shù)值,但最終數(shù)值須乘以1.1(10%稀釋比例).第45頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三+++++出現(xiàn)的臨床意義+++++(代碼)：結(jié)果超出儀器的操作范圍對(duì)白細(xì)胞而言計(jì)數(shù)值大于99.9×109/L；對(duì)紅細(xì)胞而言計(jì)數(shù)值大于7.00×1012/L；對(duì)血小板而言計(jì)數(shù)值大于999×109/L.處理方法：用ISOTONIII液稀釋標(biāo)本至線性范圍內(nèi)再測(cè)注:1.先做一空白循環(huán)以防止攜帶污染

2.不能報(bào)告白細(xì)胞分類結(jié)果檢查儀器稀釋液和溶血?jiǎng)┹斔拖到y(tǒng)有無(wú)故障第46頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三代碼-----出現(xiàn)的臨床意義-----出現(xiàn)代表三次計(jì)數(shù)不統(tǒng)一可能導(dǎo)致的原因：小孔堵塞或部分堵塞;標(biāo)本有凝塊或絲狀纖維蛋白;白細(xì)胞聚集,紅細(xì)胞凝集;大血小板,血小板凝集;標(biāo)本稀釋后未氣泡混勻.處理方法：參照維修手冊(cè)清洗小孔;查看標(biāo)本有無(wú)凝塊,涂片鏡檢有無(wú)細(xì)胞聚集;檢測(cè)標(biāo)本混勻系統(tǒng).第47頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三第48頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三代碼…..出現(xiàn)的臨床意義…..出現(xiàn)表示數(shù)據(jù)不完整,不完全計(jì)數(shù)通常當(dāng)一個(gè)參數(shù)由于三次計(jì)數(shù)不統(tǒng)一或超過(guò)范圍得不到確切數(shù)值時(shí),其衍生參數(shù)后將出現(xiàn)……,如WBC+++++,則其衍生參數(shù)NE#、LY#、MO#、EO#、BA#后將出現(xiàn)…..第49頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三第50頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三…..也可表示吸樣錯(cuò)誤…..出現(xiàn)也可表示吸樣錯(cuò)誤,當(dāng)發(fā)生吸樣錯(cuò)誤時(shí),所有參數(shù)的結(jié)果后都會(huì)帶有…..導(dǎo)致的可能原因有：樣本有凝塊,堵塞吸樣針;樣本量不夠;樣本的RBC和HGB濃度過(guò)低(嚴(yán)重貧血病人標(biāo)本),血樣探測(cè)器檢測(cè)失敗;儀器吸樣系統(tǒng)堵塞.第51頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三發(fā)生吸樣錯(cuò)誤的處理方法1.查看樣本有無(wú)凝塊,如果有重取標(biāo)本,沒(méi)有則重新檢測(cè),再出現(xiàn)如上問(wèn)題則涂片鏡檢有無(wú)凝塊或細(xì)胞聚集;2.檢測(cè)標(biāo)本量是否夠;3.對(duì)于嚴(yán)重貧血病人樣本采用手動(dòng)進(jìn)樣方式.4.檢測(cè)儀器吸樣系統(tǒng),如發(fā)生堵塞則清洗.第52頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三代碼:::::出現(xiàn)的臨床意義在白細(xì)胞五項(xiàng)分類及網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)中,當(dāng)流式通道堵塞產(chǎn)生:::::代碼.在散點(diǎn)分布圖上可有三種堵塞報(bào)警：-FC,流式通道完全堵塞(無(wú)檢測(cè));-PC1,流式通道檢測(cè)時(shí)間延長(zhǎng);-PC2,流式通道檢測(cè)時(shí)間縮短.第53頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三第54頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三第55頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三導(dǎo)致PC/:::::的原因-FC：完全堵塞;-PC1：流式通道或標(biāo)本通道部分堵塞導(dǎo)致分類時(shí)間延長(zhǎng);-PC2：紅細(xì)胞未完全溶解導(dǎo)致分類時(shí)間縮短,或鞘液系統(tǒng)問(wèn)題.臨床上高膽固醇和高甘油三酯血癥、血紅蛋白病、藥物治療后、進(jìn)行性肝病等都可導(dǎo)致PC2.第56頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三出現(xiàn)PC/:::::的處理方法1.手工涂片進(jìn)行白細(xì)胞分類;2.用乳膠和5C質(zhì)控清洗流式通道;3.查看ScatterPak液有否過(guò)期,檢查ScatterPak液輸送系統(tǒng)有無(wú)故障.第57頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三血常規(guī)樣本的制備抗凝劑的使用問(wèn)題長(zhǎng)期放置對(duì)分類的影響樣本本身的干擾問(wèn)題檢測(cè)溫度的影響第六部分臨床應(yīng)用問(wèn)題探討第58頁(yè)，講稿共64頁(yè)，2023年5月2日，星期三血常規(guī)樣本的制備靜脈采血、并立即和抗凝劑充分混勻抗凝劑濃度必須適宜試管必須潔凈，最好為一次性真空采血管通常樣本采集后24小時(shí)內(nèi)