北師大版選修1生物技術(shù)實踐《測定土壤中微生物的數(shù)量》教學(xué)設(shè)計

北師大版選修1生物技術(shù)實踐《測定土壤中微生物的數(shù)量》教學(xué)設(shè)計一、實驗?zāi)康谋緦嶒灥闹饕康氖峭ㄟ^對土壤中微生物數(shù)量的測定，了解微生物在土壤中的分布和數(shù)量，掌握測量微生物數(shù)量的方法和步驟，加深對生物技術(shù)的理解和實踐。二、實驗原理土壤中的微生物包括細菌、真菌、放線菌等各種微生物，它們在土壤中分布廣泛，數(shù)量豐富。測定土壤中微生物數(shù)量的方法主要包括直接計數(shù)法和培養(yǎng)計數(shù)法。直接計數(shù)法是指在顯微鏡下直接觀察土壤樣品中微生物數(shù)量的方法。這種方法較為簡單、快捷，但由于土壤樣品中微生物數(shù)量較多，觀察起來較為困難，且很難準確計算出微生物的數(shù)量。培養(yǎng)計數(shù)法是利用微生物在營養(yǎng)物質(zhì)豐富的培養(yǎng)基中繁殖生長的特性，通過培養(yǎng)和計數(shù)來測定土壤中微生物的數(shù)量。這種方法相對準確，但需要較長時間來培養(yǎng)和計數(shù)，且只能鑒定出能夠在特定培養(yǎng)基上生長的微生物。本實驗使用的是直接計數(shù)法，具體步驟如下：取少量土壤樣品，將其溫和處理。按照約定方式，制備和染色微生物樣品。在顯微鏡下觀察和計數(shù)微生物。三、實驗材料與設(shè)備土壤樣品離心管顯微鏡注射器吸管牛津杯四、實驗步驟4.1打印樣品取一小塊土壤樣品，用蒸餾水加溫處理，制備菌落計數(shù)樣品。4.2制備微生物樣品取一小部分土樣，用牛津杯盛裝約1ml蒸餾水，搖動數(shù)分鐘后，離心5min沉淀。將上清溶液倒掉。搖動數(shù)分鐘，倒掉清液，加入1ml草酸鈉溶液，于95℃沸騰30s后劇烈震動30s。離心2min，將草酸鈉去除，用0.1MPBS(PH7.2)洗3次，每次離心5min，取上清在顯微鏡下觀察土壤樣品中的微生物。4.3顯微鏡下觀察和計數(shù)微生物用吸管取少量樣品，在牛津杯內(nèi)放置一滴，加入一滴蔗糖水，攪拌均勻。將玻璃蓋片浸泡在甲醇中約30秒，取出晾干后用無粘紙擦干。用注射器吸取一定量的樣品液，滴到干凈的蓋片上，旋轉(zhuǎn)片蓋，使其均勻分布，待細胞完全落在干片上。放到顯微鏡下，以100倍（10X目鏡+10X物鏡）或400倍（10X目鏡+40X物鏡）放大倍數(shù)觀察土壤樣品中的微生物。在視野范圍內(nèi)計數(shù)微生物的數(shù)量。五、實驗注意事項實驗前需認真閱讀實驗原理和實驗步驟，熟悉操作流程。操作時保持清潔，避免外界污染。制備微生物樣品時要注意溫度和操作環(huán)境，避免對微生物造成影響。在顯微鏡下觀察土壤樣品中的微生物時要仔細、耐心地觀察，計數(shù)時要認真記錄。六、實驗結(jié)果處理通過直接計數(shù)法測定出土壤樣品中微生物的數(shù)量，根據(jù)不同的計算方式和標準，可以得到不同的測定值。實驗中，為了減少誤差，需要進行多次測定，并取平均值或最大值作為最終結(jié)果。七、實驗拓展本實驗主要是對土壤中微生物數(shù)量進行測定，但在實際應(yīng)用中，還可結(jié)合其他生物技術(shù)手段，對土壤樣品進行深入分析和研究。比如，可以利用PCR方法對代表性微生物進行定量檢測，或通過基因測序等技術(shù)對不同微生物種類和數(shù)量進行分析和比較。八、參考文獻李斯娜,易天宇.生物技術(shù)基礎(chǔ)