重金屬砷鹽氰化物檢查法

重金屬砷鹽氰化物檢查法第1頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月重金屬的定義

密度在4.5g/cm3以上的金屬，稱作重金屬。

原子序數(shù)從23(V)至92(U)的天然金屬元素有60種，除其中的6種外，其余54種的相對(duì)密度都大于4.5g/cm3，因此從相對(duì)密度的意義上講，這54種金屬都是重金屬。但是，在進(jìn)行元素分類時(shí)，其中有的屬于稀土金屬，有的劃歸成難熔金屬。最終在工業(yè)上真正劃入重金屬的有10種金屬元素：銅、鉛、鋅、錫、鎳、鈷、銻、汞、鎘和鉍。這10種重金屬除了具有金屬共性及密度大于5以外，并無其他特別的共性。各種重金屬各有各的性質(zhì)。重金屬檢查法第2頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月重金屬的危害無論是空氣、泥土，甚至食水都含有重金屬，如引起衰老的自由基、對(duì)肌膚有傷害的微粒、空氣中的塵埃、汽車排氣等，甚至自來水都給肌膚帶來重金屬，甚至有些護(hù)膚品如潤(rùn)膚乳等的一些重金屬原料如鎘，也是其中之一。重金屬累積后對(duì)人體的危害相當(dāng)大。重金屬不能被生物降解，相反卻能在食物鏈的生物放大作用下，成千百倍地富集，最后進(jìn)入人體。重金屬在人體內(nèi)能和蛋白質(zhì)及酶等發(fā)生強(qiáng)烈的相互作用，使它們失去活性，也可能在人體的某些器官中累積，造成慢性中毒。第3頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月重金屬檢查法本法所指的重金屬系指在實(shí)驗(yàn)條件下能與硫代乙酰胺或硫化鈉作用顯色的金屬雜質(zhì)。由于在藥品生產(chǎn)過程中遇到鉛的機(jī)會(huì)較多，且鉛又易在體內(nèi)積蓄中毒，故以鉛為重金屬的代表，用硝酸鉛作標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液。標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液的制備

稱取硝酸鉛0.1599g，置1000ml量瓶中,加硝酸5ml（防止Pb2+水解）與水50ml溶解后，用水稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。

臨用前，精密量取貯備液10ml，置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得(每1ml相當(dāng)于10μg的Pb)（該濃度為最適檢出濃度）。本液僅供當(dāng)日使用。注：配制與貯存用的玻璃儀器均不得含鉛。第4頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月第一法（以硫代乙酰胺為顯色劑）原理

硫代乙酰胺在弱酸性條件下（pH3.5醋酸鹽緩沖液）水解產(chǎn)生硫化氫，與微量重金屬離子生成黃色至棕黑色的硫化物均勻混懸液，與一定量標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液同法處理后所呈現(xiàn)顏色比較，白色背景，自上而下。CH3CSNH2+H2OCH3CONH2+H2S（硫代乙酰胺）（乙酰胺）藥物：Pb2++H2SPbS↓(黃色~棕黑色)對(duì)照：PbNO3+H2SPbS↓(黃色~棕黑色)注：金屬離子與H2S呈色酸度影響較大，pH3~3.5硫化鉛沉淀較完全，酸度增大呈色變淺，太大甚至不呈色。pH3.5

Ph3.5pH3.5第5頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月實(shí)驗(yàn)過程除另有規(guī)定外，取25ml納氏比色管三支甲管

加標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液一定量與醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml后，加水或各品種項(xiàng)下規(guī)定的溶劑稀釋成25ml乙管

加入按各品種項(xiàng)下規(guī)定的方法制成的供試液25ml丙管加入與乙管相同量的供試品，加配制供試品溶液的溶劑適量使溶解，再加與甲管相同量的標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液與醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml后，用溶劑稀釋成25ml第6頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月結(jié)果若供試溶液帶顏色，可在甲管中滴加少量的稀焦糖溶液或其他無干擾的有色溶液,使之與乙管、丙管顏色一致；再在甲、乙、丙三管中分別加硫代乙酰胺試液各2ml，搖勻，放置2分鐘，同置白紙上，自上向下透視，當(dāng)丙管中顯出的顏色不淺于甲管時(shí)，乙管中顯示的顏色與甲管比較，不得更深。如丙管中顯出的顏色淺于甲管，應(yīng)取樣按第二法重新檢查。如在甲管中滴加稀焦糖溶液或其他無干擾的有色溶液，仍不能使顏色一致時(shí)，應(yīng)取樣按第二法檢查。注：稀焦糖溶液

取蔗糖或葡萄糖約5g，置瓷坩堝中，在玻璃棒不斷攪拌下，加熱至呈棕色糊狀，放冷，用水溶解成約25ml，濾過，貯于滴瓶中備用。臨用時(shí)，根據(jù)供試液色澤深淺，取適當(dāng)量調(diào)節(jié)使用。第7頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月注：1.供試品如含高鐵鹽影響重金屬檢查時(shí)，可在甲、乙、丙三管中分別加入相同量的維生素C0.5~1.0g，再照上述方法檢查。（原理：Fe3+和S2-生成單質(zhì)硫，沉淀影響結(jié)果觀察，加維生素C將三價(jià)鐵還原成二價(jià)鐵）

2.配制供試品溶液時(shí)，如使用的鹽酸超過1.0ml（或與鹽酸1.0ml相當(dāng)?shù)南←}酸），氨試液超過2ml,或加入其他試劑進(jìn)行處理者，除另有規(guī)定外，甲管溶液應(yīng)取同樣同量的試劑置瓷皿中蒸干后，加醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml與水15ml，微熱溶解后，移置納氏比色管中，加標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液一定量，再用水或各品種項(xiàng)下規(guī)定的溶液稀釋成25ml。

第8頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月第二法（熾灼殘?jiān)ǎ┻m用藥物

適用于含芳環(huán)、雜環(huán)以及不溶于水、稀酸、乙醇及堿或能與重金屬離子形成配位化合物的有機(jī)藥物。第9頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月步驟除另有規(guī)定外，當(dāng)需改用第二法檢查時(shí)，取各品種項(xiàng)下規(guī)定量的供試品，按熾灼殘?jiān)鼨z查法（附錄80頁）進(jìn)行熾灼處理，然后取遺留的殘?jiān)?；或取熾灼殘?jiān)?xiàng)下遺留的殘?jiān)?，加硝?.5ml，蒸干,至氧化氮蒸氣除盡后（或取供試品一定量，緩緩熾灼至完全炭化，放冷，加硫酸0.5～1.0ml,使恰濕潤(rùn),用低溫加熱至硫酸除盡后，加硝酸0.5ml，蒸干，至氧化氮蒸氣除盡后，放冷，在500～600℃熾灼使完全灰化），放冷，加鹽酸2ml，置水浴上蒸干后加水15ml，滴加氨試液至對(duì)酚酞指示液顯微粉紅色，再加醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml，微熱溶解后，移置納氏比色管中，加水稀釋成25ml，作為乙管；另取配制供試品溶液的試劑，置瓷皿中蒸干后，加醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml與水15ml，微熱溶解后，移置納氏比色管中，加標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液一定量，再用水稀釋成25ml，作為甲管；再在甲、乙兩管中分別加加硫代乙酰胺試液各2ml，搖勻，放置2分鐘，同置白紙上，自上向下透視，乙管中顯出的顏色與甲管比較，不得更深。第10頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月注意事項(xiàng)

含鈉及氟的有機(jī)藥物應(yīng)使用鉑坩堝、石英坩堝或硬質(zhì)玻璃蒸發(fā)皿（因可腐蝕瓷坩堝，帶入大量重金屬）第11頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月第三法（硫化鈉法）適用性

適用于溶于堿而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的藥物。如磺胺類、巴比妥類。原理

在堿性介質(zhì)中（本試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)用NaOH試液），以硫化鈉為顯色劑，使Pb2+生成PbS微粒的混懸液，與一定量標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液同法處理后所顯顏色比較，不得更深。第12頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月方法除另有規(guī)定外，取供試品適量,加氫氧化鈉試液5ml與水20ml溶解后，置納氏比色管中,加硫化鈉試液5滴,搖勻,與一定量的標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液同樣處理后的顏色比較，不得更深。第13頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月砷，俗稱砒，是一種非金屬元素，元素符號(hào)As，單質(zhì)以灰砷、黑砷和黃砷這三種同素異形體的形式存在。砷鹽是有毒的物質(zhì)，多由藥物生產(chǎn)過程所使用的無機(jī)試劑引入。砷鹽和重金屬一樣，在多種藥物中要求檢查。中國(guó)藥典采用古蔡法和二乙基二硫代氨基甲酸銀(簡(jiǎn)稱Ag-DDC法)法檢查藥物中微量的砷鹽。砷鹽檢查法第14頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月砷毒性單質(zhì)砷無毒性，砷化合物均有毒性。三價(jià)砷比五價(jià)砷毒性大，約為60倍；有機(jī)砷與無機(jī)砷毒性相似。人口服三氧化二砷中毒劑量為5～50mg，致死量為70～180mg(體重70kg的人，約為0.76～1.95mg/kg，個(gè)別敏感者1mg可中毒，20mg可致死，但也有口服10g以上而獲救者)。人吸入三氧化二砷致死濃度為0.16mg/m3(吸入4h)，長(zhǎng)期少量吸入或口服可產(chǎn)生慢性中毒。在含砷化氫為1mg/L的空氣中，呼吸5～10分鐘，可發(fā)生致命性中毒。世界衛(wèi)生組織指出，每升低于10微克的砷含量對(duì)人體是安全的。急救與治療：催吐或洗胃，肌注5%二巰基丙磺酸鈉。第15頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月標(biāo)準(zhǔn)砷溶液的制備

稱取三氧化二砷0.132g，置1000ml量瓶中,加20%氫氧化鈉溶液5ml溶解后，用適量的稀硫酸中和，再加稀硫酸10ml，用水稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。

臨用前，精密量取貯備液10ml，置1000ml量瓶中，加稀硫酸10ml，用水稀釋至刻度，搖勻，即得(每1ml相當(dāng)于1μg的As)。第16頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月第一法（古蔡氏法）原理

金屬鋅與酸作用產(chǎn)生新生態(tài)的氫，新生態(tài)的氫與藥物中微量砷鹽反應(yīng)，生成具揮發(fā)性的砷化氫氣體，遇溴化汞試紙產(chǎn)生黃色至棕色的砷斑，與一定量標(biāo)準(zhǔn)砷溶液在同樣條件下生成的砷斑比較，判定藥物中砷鹽的限量。其反應(yīng)式如下：AsO33-+3Zn+9H+→

AsH3↑+3Zn2++3H2OAsH3+2HgBr2→

2HBr+AsH(HgBr)2(黃色)AsH3+3HgBr2→3HBr+AsH(HgBr)3(棕色)第17頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月裝備A——100ml標(biāo)準(zhǔn)磨口錐形瓶B——中空的標(biāo)準(zhǔn)磨口塞C——導(dǎo)氣管D——具孔的有機(jī)玻璃旋塞E——中央有圓孔的有機(jī)玻璃旋塞測(cè)試時(shí)，于導(dǎo)氣管C中裝入醋酸鉛棉花60mg(裝管高度約60~80mm)，再于旋塞D的頂端平面上放一片溴化汞試紙，蓋上旋塞E并旋緊。第18頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月標(biāo)準(zhǔn)砷斑的制備

精密量取標(biāo)準(zhǔn)砷溶液2ml，置A瓶中，加鹽酸5ml與水21ml，再加碘化鉀試液5ml與酸性氯化亞錫試液5滴，在室溫放置10min后，加鋅粒2g，立即將裝妥的導(dǎo)氣管C密塞于A瓶上，并將A瓶置25~40℃水浴中，反應(yīng)45min取出溴化汞試紙，即得。若供試品需經(jīng)有機(jī)破壞后再行檢砷，則應(yīng)取標(biāo)準(zhǔn)砷溶液代替供試品，照該品種項(xiàng)下規(guī)定的方法同法處理后，依法制備標(biāo)準(zhǔn)砷斑。說明：醋酸鉛棉花系指脫脂棉1.0g，浸入醋酸鉛試液與水的等容混合液12ml中，濕透后，擠壓除去過多的溶液，并使之疏松，在100℃以下干燥后，貯于玻璃塞瓶中備用。第19頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月說明碘化鉀及氯化亞錫的作用五價(jià)砷在酸性溶液中也能被金屬鋅還原為砷化氫，但生成砷化氫的速度較三價(jià)砷慢，故在反應(yīng)液中加入碘化鉀及氯化亞錫將五價(jià)砷還原為三價(jià)砷，碘化鉀被氧化生成的碘又可被氯化亞錫還原為碘離子．后者與反應(yīng)中產(chǎn)生的鋅離子能形成穩(wěn)定的配位離子，有利于生成砷化氫的反應(yīng)不斷進(jìn)行。氯化亞錫與碘化鉀還可抑制銻化氫的生成，因銻化氫也能與溴化汞試紙作用生成銻斑。鋅粒及供試品中可能含有少量硫化物，在酸性液中能產(chǎn)生硫化氫氣體，與溴化汞作用生成硫化汞的色斑，干擾試驗(yàn)結(jié)果，故用醋酸鉛棉花吸收硫化氫。由于砷斑的顏色不夠穩(wěn)定，在反應(yīng)中應(yīng)保持干燥及避光，反應(yīng)完畢后，立即與標(biāo)準(zhǔn)砷斑比較。第20頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月檢查法另取各品種項(xiàng)下規(guī)定方法制成的供試品溶液，置A瓶中，照標(biāo)準(zhǔn)砷斑制備，自“再加碘化鉀試液5ml”起，依法操作。將供試品砷斑與標(biāo)準(zhǔn)砷斑比較，不得更深。注：多數(shù)環(huán)狀結(jié)構(gòu)的有機(jī)藥物，因砷在分子中可能以共價(jià)鍵形式存在，要先進(jìn)行有機(jī)破壞，否則檢出結(jié)果偏低或難以檢出。常用的有機(jī)破環(huán)方法有堿破壞法和酸破壞法。中國(guó)藥典采用堿破壞法，即于供試品中加氫氧化鈣或無水碳酸鈉，先小火灼燒使炭化，再于500~600℃熾灼至完全灰化。第21頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月第二法（二乙基二硫代氨基甲酸銀）原理

金屬鋅與酸作用產(chǎn)生新生態(tài)的氫，新生態(tài)的氫與藥物中微量砷鹽反應(yīng)，生成具揮發(fā)性的砷化氫氣體，砷化氫氣體與二乙基二硫代氨基甲酸銀（Ag-DDC）溶液作用，還原Ag-DDC為紅色膠態(tài)銀，直接比色或于510nm處測(cè)定吸收度，與標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較。第22頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月裝備A——100ml標(biāo)準(zhǔn)磨口錐形瓶B——中空的標(biāo)準(zhǔn)磨口塞C——導(dǎo)氣管D——平底玻璃管測(cè)試時(shí)，于導(dǎo)氣管C中裝入醋酸鉛棉花60mg(裝管高度約80mm)，并于D管中精密加入二乙基二硫代氨基甲酸銀試液5ml。第23頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月標(biāo)準(zhǔn)砷對(duì)照液的制備精密量取標(biāo)準(zhǔn)砷溶液2ml，置A瓶中，加鹽酸5ml與水21ml，再加碘化鉀試液5ml與酸性氯化亞錫試液5滴，在室溫放置10min后，加鋅粒2g，立即將裝妥的導(dǎo)氣管C密塞于A瓶上，并將A瓶置25~40℃水浴中反應(yīng)45min，取出D管，添加三氯甲烷至刻度，混勻，即得。若供試品需經(jīng)有機(jī)破壞后再行檢砷，則應(yīng)取標(biāo)準(zhǔn)砷溶液代替供試品，照該品種項(xiàng)下規(guī)定的方法同法處理后，依法制備標(biāo)準(zhǔn)砷斑。第24頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月檢查法另取各品種項(xiàng)下規(guī)定方法制成的供試品溶液，置A瓶中，照標(biāo)準(zhǔn)砷斑制備，自“再加碘化鉀試液5ml”起，依法操作。將所得溶液與標(biāo)準(zhǔn)砷對(duì)照液同置白色背景上，從D管上方觀察、比較，所得溶液的顏色不得比標(biāo)準(zhǔn)砷對(duì)照液更深。必要時(shí)，可將所得溶液轉(zhuǎn)移至1cm吸收池中，照紫外-可見分光光度法，于510nm波長(zhǎng)處，以二乙基二硫代氨基甲酸銀試液（Ag-DDC）作空白，測(cè)定吸收度，與標(biāo)準(zhǔn)砷對(duì)照液按同法測(cè)得的吸收度比較，即得。第25頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月氰化物的定義氰化物特指帶有氰基（CN）的化合物，其中的碳原子和氮原子通過叁鍵相連接。通常為人所了解的氰化物都是無機(jī)氰化物，俗稱山奈（來自英語音譯“Cyanide”），常見的有氰化鉀和氰化鈉。它們多有劇毒，故而為世人熟知。另有有機(jī)氰化物，是由氰基通過單鍵與另外的碳原子結(jié)合而成。視結(jié)合方式的不同，有機(jī)氰化物可分類為腈（C-CN）和異腈（C-NC），相應(yīng)的，氰基可被稱為腈基（-CN）或異腈基（-NC）。很多氰化物，凡能在加熱或與酸作用后或在空氣中與組織中釋放出氰化氫或氰離子的都具有與氰化氫同樣的劇毒作用。氰化物檢查法第26頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月氰化物是一種劇毒物質(zhì)，在個(gè)別藥品或其制劑中，由于所用的原料、生產(chǎn)過程的副產(chǎn)物或貯存期間的分解等原因，可能引入痕跡量的氰化物；因此，中國(guó)藥典規(guī)定了氰化物檢查。檢查采用兩種方法，應(yīng)根據(jù)藥典品種項(xiàng)下規(guī)定的方法選用。第27頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月第一法原理本法是在微酸性條件下產(chǎn)生的氫氰酸與堿性硫酸亞鐵作用生成亞鐵氰化物，再與三氯化鐵反應(yīng)生成普魯士藍(lán)，檢出量約為5ug的CN。儀器裝置照砷鹽檢查法項(xiàng)下第一法的儀器裝置，但在使用時(shí)，導(dǎo)氣管C中不裝醋酸鉛棉花，并在旋塞D的頂端平面上的溴化汞試紙改用堿性硫酸亞鐵試紙。（臨用前，取濾紙片，加硫酸亞鐵試液與氫氧化鈉試液各1滴，使?jié)裢?，即得。）檢查法除另有規(guī)定外，取各品種項(xiàng)下規(guī)定量的供試品，置A瓶中，加水10ml與10﹪酒石酸溶液3ml，迅速將儀器裝置的導(dǎo)管C密塞于