革蘭陰性需氧和兼性厭氧性桿菌鑒定-其它苛養(yǎng)菌（微生物檢驗(yàn)課件）

其他革蘭陰性苛養(yǎng)菌嗜血桿菌屬鮑特菌屬軍團(tuán)菌屬布魯菌屬一、嗜血桿菌屬G-小桿菌，多形性有毒菌株形成莢膜培養(yǎng)基中需加入血液，以提供X因子和V因子（巧克力色培養(yǎng)基）

X因子－－血紅素

V因子－－輔酶Ⅰ或輔酶Ⅱ菌落光滑、無(wú)色透明、露滴狀CO2培養(yǎng)“衛(wèi)星現(xiàn)象”衛(wèi)星現(xiàn)象流感嗜血桿菌與金黃色葡萄球菌在血平板上共同孵育時(shí)，由于后者能合成較多的V因子，在金黃色葡萄球菌菌落周?chē)L(zhǎng)的流感嗜血桿菌的菌落較大，離金黃色葡萄球菌菌落越遠(yuǎn)的越小。根據(jù)莢膜抗原分ABCDEF六型，B型毒力最強(qiáng)所致疾病

原發(fā)感染：腦膜炎、鼻咽炎等，多見(jiàn)于兒童

繼發(fā)感染：鼻竇炎等，多見(jiàn)于成人

敏感藥物：氨芐西林、阿莫西林首選微生物學(xué)檢查

標(biāo)本（腦脊液、痰、血液、膿液）涂片染色鏡檢分離培養(yǎng)鑒定試驗(yàn)結(jié)果報(bào)告G-性桿菌多形性“衛(wèi)星現(xiàn)象”檢出流感嗜血桿菌鑒定依據(jù)革蘭陰性小桿菌、多形性培養(yǎng)采用巧克力色培養(yǎng)基，CO2培養(yǎng)血平板上有“衛(wèi)星現(xiàn)象”X、V因子需求試驗(yàn)菌名生長(zhǎng)需要X因子V因子流感＋＋副流感－＋檢驗(yàn)方法X因子V因子需要試驗(yàn)流感嗜血桿菌副流感嗜血桿菌

二、鮑特菌屬G—小桿菌，兩極濃染，有莢膜和菌毛，多無(wú)鞭毛和芽胞專(zhuān)性需氧，營(yíng)養(yǎng)要求較高，常用鮑—金培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，生長(zhǎng)緩慢，3-5天細(xì)小灰色不透明、帶珠光完全溶血菌落致病物質(zhì)包括莢膜、菌毛及多種毒素百日咳毒素絲狀血凝毒素腺苷酸環(huán)化酶毒素氣管細(xì)胞毒素皮膚壞死毒素細(xì)菌附著纖毛上皮細(xì)胞，引起其壞死脫落，使其運(yùn)動(dòng)受抑制，促進(jìn)黏液分泌，但不能及時(shí)排出，局部炎癥、缺血、壞死，引起劇烈陣發(fā)性痙咳傳染源：早期病人、帶菌者傳播途徑：飛沫傳播潛伏期：1-2周病程分三期：（兒童易感）卡他期：低熱、輕咳，1-2W（傳染性強(qiáng)）痙攣期：陣發(fā)性痙咳，吸氣吼聲，10-20次/天（1-6W）恢復(fù)期：陣咳減輕，可有繼發(fā)感染，肺炎、中耳炎等實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本采取用咳碟法病后牢固免疫力白—百—破三聯(lián)疫苗（DPT），治療首選紅霉素三、軍團(tuán)菌屬絕大多數(shù)病例由嗜肺軍團(tuán)菌引起，是引起軍團(tuán)菌病的病原體首發(fā)于1976年的美國(guó)一次軍人聚會(huì)，故稱(chēng)作軍團(tuán)病1982年,在我國(guó)南京首次證實(shí)了軍團(tuán)菌病。形態(tài)染色革蘭陰性，但不易被著色桿菌，形態(tài)有多形性Gimenen染色，菌體呈紅色，背景為綠色不形成芽孢，無(wú)莢膜有端生或側(cè)生鞭毛

嗜肺軍團(tuán)菌革蘭染色培養(yǎng)特性營(yíng)養(yǎng)要求高專(zhuān)性需氧需2.5～5％CO2生長(zhǎng)緩慢。3-5天常用培養(yǎng)基及菌落特征

BCYE培養(yǎng)基：灰白色、圓形光滑濕潤(rùn)菌落

F-G培養(yǎng)基：針尖大小、紫外線(xiàn)下發(fā)出黃色熒光軍團(tuán)菌菌落形態(tài)(BCYE瓊脂培養(yǎng)基)抗原結(jié)構(gòu)Ｏ抗原：具有型特異性軍團(tuán)菌病約90%的是由嗜肺軍團(tuán)菌所致,已發(fā)現(xiàn)15個(gè)血清型，其中以L(fǎng)p1血清型最常見(jiàn),Lp6次之。抵抗力分布廣泛、抵抗力強(qiáng)水中存活時(shí)間長(zhǎng)，蒸餾水100天，下水道污水可存活一年軍團(tuán)菌病的主要污染源是供水系統(tǒng)及冷卻塔和空調(diào)系統(tǒng)

定期清洗空調(diào)預(yù)防軍團(tuán)菌病臨床意義致病物質(zhì)：內(nèi)毒素、外毒素、侵襲性酶?jìng)魅就緩剑汉粑溃ㄎ牒熊妶F(tuán)菌的氣溶膠）所致疾?。很妶F(tuán)菌病肺炎型非肺炎型（類(lèi)似感冒）免疫性：感染者血清中出現(xiàn)特異性IgG、IgM抗體大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)、喹諾酮類(lèi)有效。對(duì)青霉素、頭孢類(lèi)無(wú)效微生物學(xué)檢查標(biāo)本（痰、支氣管分泌物、血液、）涂片染色鏡檢（Gimenen染色）分離培養(yǎng)（BEYE瓊脂）鑒定試驗(yàn)結(jié)果報(bào)告形態(tài)染色菌落特征氧化酶、觸酶熒光抗體染色等血清學(xué)試驗(yàn)檢測(cè)指標(biāo)：檢測(cè)患者血清中特異性抗體方法：ELISA意義：檢測(cè)特異性IgM：診斷軍團(tuán)菌病檢測(cè)特異性IgG：軍團(tuán)菌病流行病學(xué)調(diào)查四、布魯菌屬羊布氏桿菌（主要）牛布氏桿菌豬布氏桿菌犬布氏桿菌（少見(jiàn)）引起布魯菌?。ú顭幔┛梢鹑诵蠊不疾∥覈?guó)流行菌種主要是羊、牛、豬布魯菌，以羊布魯菌最常見(jiàn)屬細(xì)胞內(nèi)寄生菌生物學(xué)性狀1、G—短小球桿菌，無(wú)芽孢，無(wú)鞭毛；2、需氧菌，初次分離需5-10%CO2，營(yíng)養(yǎng)要求較高，常用肝浸液培養(yǎng)基。生長(zhǎng)較緩慢，5-7天微小灰色菌落，無(wú)生長(zhǎng)30天報(bào)結(jié)果，不溶血。3、生化反應(yīng)多數(shù)氧化酶、觸酶：＋氧化分解葡萄糖多數(shù)還原硝酸鹽分解尿素（脲酶活性：豬>羊>牛）4、抗原與分型，A抗原和M抗原，不同菌含量不同可供鑒別菌種A抗原：M抗原羊布魯菌1：20牛布魯菌20：1豬布魯菌2：15、抵抗力強(qiáng)

內(nèi)毒素——致病作用（發(fā)熱、白細(xì)胞↑、肝脾腫大等）由于反復(fù)菌血癥，使病人熱型呈波浪狀發(fā)熱時(shí)，血培養(yǎng)陽(yáng)性率高（70%）易轉(zhuǎn)為慢性，引起全身遷延性病變，較難根治。7.免疫性:胞內(nèi)寄生菌，以細(xì)胞免疫為主6.致病物質(zhì)：莢膜、侵襲性酶和內(nèi)毒素微生物學(xué)檢查及防治原則分離培養(yǎng)與鑒定