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一、儀器構(gòu)造二、儀器工作原理三、朗伯比爾定律四、含量測定方法一、儀器構(gòu)造吸收池光源單色器吸收池檢測器顯示器光源:提供足夠強(qiáng)度、穩(wěn)定的連續(xù)光譜01常用鎢絲燈和鹵鎢燈,穩(wěn)定光源波長為400~780nm。常用氫、氘等放電光源,可用波長為160~375nm??梢姽庠醋贤夤庠措疅簟贤恹u鎢燈--可見單色器02單色器是將復(fù)合光分散成單色光的裝置,包括入射狹縫、準(zhǔn)直鏡、色散元件、聚焦透鏡、出射狹縫等。吸收池03吸收池又叫比色皿,是用于盛裝分析試液并提供一定光程長度的器皿。適用于可見光及紫外光區(qū)。適用于可見光區(qū)。石英吸收池玻璃吸收池檢測器04將通過吸收池的透射光的光通量轉(zhuǎn)變成電信號的裝置。常用硒電池,壽命短。分為藍(lán)敏和紅敏兩種。光電池光電管檢測微弱強(qiáng)度光,最常見的光電元件。光電倍增管顯示器05把檢測到的光信號顯示出來的裝置。透光率(T)吸光度(A)濃度(C)二、儀器工作原理三、朗伯-比爾定律:式中:A為吸光度;K為吸收系數(shù);C為溶液濃度;L為液層厚度。A=KCL當(dāng)一束平行的單色光通過均勻非散射體系的低濃度溶液時(shí),在單色光強(qiáng)度、溶液溫度等條件不變的情況下,吸光度與液層的厚度和吸光物質(zhì)濃度的乘積成正比吸收系數(shù)01摩爾吸收系數(shù):在一定λ下,c=1mol/L,L=1cm時(shí)的吸光度。單位:L/(mol.cm)02百分吸收系數(shù)/比吸光系數(shù)
:1g/100ml03兩者關(guān)系:《中國藥典》采用百分吸收系數(shù):一定λ下,c=1%(W/V),L=1cm時(shí)的吸光度。單位:100ml/g.cm
四、含量測定(1)標(biāo)準(zhǔn)曲線法(2)對照品法(3)吸收系數(shù)法(2)標(biāo)準(zhǔn)曲線法(工作曲線法):配制一系列不同濃度的對照品溶液測定各對照品溶液的吸光度以吸光度為縱坐標(biāo),濃度為橫坐標(biāo)繪制A-C曲線,稱為標(biāo)準(zhǔn)曲線,并求出回歸方程測定樣品溶液的吸光度,代入回歸方程,求出樣品溶液的濃度標(biāo)準(zhǔn)系列:濃度(mg/L)吸光度A(3)對照品法:按藥品標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定,分別配制供試品溶液和對照品溶液,在規(guī)定的波長處分別測定吸光度,按下式計(jì)算供試品溶液中待測組分的濃度。
式中:AR為對照品溶液的吸光度;AX為供試品溶液的吸光度;CR為對照品溶液的濃度;CX為供試品溶液的濃度。(3)吸收系數(shù)法:按藥品標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的方法配制供試品溶液,在規(guī)定的波長處測定其吸光度(A);根據(jù)
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