紫外吸收和熒光光譜法

紫外吸收和熒光光譜法第1頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月原子光譜分子光譜原子發(fā)射光譜法原子吸收光譜法原子熒光光譜法紫外吸收和熒光光譜法紅外吸收光譜法光學(xué)分析法第2頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月紫外可見分光光度法紫外吸收光譜的產(chǎn)生有機(jī)化合物的紫外吸收光譜無機(jī)化合物的紫外吸收光譜紫外-可見分光光度計(jì)分析條件的選擇紫外-可見分光光度的應(yīng)用第3頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月紫外吸收光譜：分子價(jià)電子能級(jí)躍遷。波長范圍：100-750nm.(1)遠(yuǎn)紫外光區(qū):

100-200nm(2)近紫外光區(qū):

200-400nm(3)可見光區(qū):400-750nm250300350400nm1234eλ可用于結(jié)構(gòu)鑒定和定量分析。電子躍遷的同時(shí)，伴隨著振動(dòng)轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)的躍遷;帶狀光譜。第一節(jié).紫外吸收光譜的產(chǎn)生1.概述第4頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月分子內(nèi)能量總和:E分子=E電+E振+E轉(zhuǎn)E電>E振>E轉(zhuǎn)分子光譜1.概述第5頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月2.物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收及吸收曲線E=E2－E1=h量子化；選擇性吸收吸收曲線與最大吸收波長maxM+熱M+熒光或磷光M+

h

→M*基態(tài)激發(fā)態(tài)E1（△E）E2第6頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月吸收曲線的討論：①同一種物質(zhì)對(duì)不同波長光的吸光度不同。吸光度最大處對(duì)應(yīng)的波長稱為最大吸收波長λmax②不同濃度的同一種物質(zhì)，其吸收曲線形狀相似λmax不變。而對(duì)于不同物質(zhì)，它們的吸收曲線形狀和λmax則不同③吸收曲線可以提供物質(zhì)的結(jié)構(gòu)信息，并作為物質(zhì)定性分析的依據(jù)之一。④不同濃度的同一種物質(zhì)，在某一定波長下吸光度A有差異，在λmax處吸光度A的差異最大。此特性可作作為物質(zhì)定量分析的依據(jù)。第7頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月3.紫外可見光譜的特點(diǎn)

1.靈敏度高通常，待測(cè)物質(zhì)的含量1～10-5％時(shí)，能夠用分光光度法準(zhǔn)確測(cè)定。所以它主要用于測(cè)定微量組分。

2.應(yīng)用廣泛

幾乎所有的無機(jī)離子和許多有機(jī)化合物可以用分光光度法進(jìn)行測(cè)定。如土壤中的氮、磷以及植物灰、動(dòng)物體液中各種微量元素的測(cè)定。3.操作簡便、迅速、儀器設(shè)備不太復(fù)雜若采用靈敏度高、選擇性好的有機(jī)顯色劑，并加入適當(dāng)?shù)难诒蝿?，一般不?jīng)過分離即可直接進(jìn)行分光光度法測(cè)定，其方法的相對(duì)誤差通常為5～10％，其準(zhǔn)確度雖不及重量分析法和容量法，但對(duì)于微量組分的測(cè)定，結(jié)果還是滿意的。第8頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月第二節(jié).有機(jī)化合物紫外－可見吸收光譜

有機(jī)化合物中的單鍵電子稱為σ鍵電子，雙鍵電子稱為

π鍵電子，孤對(duì)電子稱為n電子。它們吸收能量后躍遷到反鍵軌道或非鍵軌道上。即有四種軌道躍遷：

σ→σ*

n→σ*n→π*π→π*第9頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月1.σ→σ＊躍遷所需能量最大；σ電子只有吸收遠(yuǎn)紫外光的能量才能發(fā)生躍遷；

飽和烷烴的分子吸收光譜出現(xiàn)在遠(yuǎn)紫外區(qū)；吸收波長λ<200nm；例：甲烷的λmax為125nm,乙烷λmax為135nm。

只能被真空紫外分光光度計(jì)檢測(cè)到；通常作為溶劑使用；sp*s*RKE,BnpE第10頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月2.n→σ＊躍遷所需能量較大

吸收波長為150～250nm，大部分在遠(yuǎn)紫外區(qū)，近紫外區(qū)仍不易觀察到。含非鍵電子的飽和烴衍生物(含N、O、S和鹵素等雜原子)均呈現(xiàn)n→σ*躍遷。第11頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月3.π→π＊躍遷所需能量較小，吸收波長處于遠(yuǎn)紫外區(qū)的近紫外端或近紫外區(qū)，εmax一般在104L·mol-1·cm-1以上，屬于強(qiáng)吸收。助色基團(tuán)取代π→π*（K帶)發(fā)生紅移（1）不飽和烴π→π*躍遷乙烯π→π*躍遷的λmax為162nm，εmax:1×104L·mol-1·cm-1K帶——共軛非封閉體系的π→π*躍遷第12頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月165nm217nm

?

?

?

(HOMOLVMO)

max

（2）共軛烯烴中的→*根據(jù)分子軌道理論，共軛效應(yīng)使π電子進(jìn)一步離域，在整個(gè)共軛體系內(nèi)流動(dòng)。這種離域效應(yīng)使軌道具有更大的成鍵性，從而降低了能量，使π電子易激發(fā)，吸收帶最大波長向長波方向移動(dòng)，顏色加深（紅移），摩爾吸光系數(shù)增大（εmax一般在104L·mol-1·cm-1）3.π→π＊躍遷第13頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月（3）羰基化合物共軛烯烴中的→*①Y=H,R

n→*

180-190nm→*

150-160nm

n→*

275-295nm②Y=

-NH2–OH-OR

等助色基團(tuán)K帶紅移，R帶藍(lán)移；R帶max=205nm；10-100K

K

R

R

n

n

165nm

n

③不飽和醛酮K帶紅移：165250nmR帶藍(lán)移：290310nm

3.π→π＊躍遷第14頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月（4）芳香烴3.π→π＊躍遷苯在λmax185nm處有一強(qiáng)吸收帶，稱為E1吸收帶（εmax50000）；在λmax204nm處，有一較強(qiáng)吸收帶，稱為E2吸收帶（εmax7000）；在230~270nm處還有一個(gè)較弱的吸收帶（λmax254nm；εmax200）稱為精細(xì)結(jié)構(gòu)吸收帶，也稱B吸收帶（德文，Benzenoid苯的），它是由π→π*躍遷與苯環(huán)的振動(dòng)重疊引起的，常用來鑒別芳香族化合物。第15頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月含有雜原子的雙鍵化合物（如-C=O，-C=N）中雜原子上的n電子躍遷到π*軌道，即分子中含有孤對(duì)電子的原子和π鍵同時(shí)存在時(shí)，會(huì)發(fā)生此躍遷，所需的能量小，吸收波長λ＞200nm，但吸收峰的摩爾吸收系數(shù)ε很小，一般為10~100L·mol-1·cm-1。4.n→π＊躍遷5.吸收帶n→π＊躍遷：R吸收帶

π→π＊躍遷K帶：共軛非封閉體系的π→π*躍遷E1帶：苯在λmax185nm處有一強(qiáng)吸收帶E2帶：苯在λmax204nm處，有一較強(qiáng)吸收帶

B帶：苯在230~270nm處還有一個(gè)較弱的，精細(xì)結(jié)構(gòu)吸收帶

第16頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月發(fā)色團(tuán)與助色團(tuán)發(fā)色團(tuán)：

最有用的紫外—可見光譜是由π→π*和n→π*躍遷產(chǎn)生的。這兩種躍遷均要求有機(jī)物分子中含有不飽和基團(tuán)。這類含有π鍵的不飽和基團(tuán)稱為生色團(tuán)。簡單的生色團(tuán)由雙鍵或叁鍵體系組成，如乙烯基、羰基、亞硝基、偶氮基—N＝N—、乙炔基、腈基—C≡N等。助色團(tuán)：

有一些含有n電子的基團(tuán)(如—OH、—OR、—NH２、—NHR、—X等)，它們本身沒有生色功能(不能吸收λ>200nm的光)，但當(dāng)它們與生色團(tuán)相連時(shí)，就會(huì)發(fā)生n—π共軛作用，增強(qiáng)生色團(tuán)的生色能力(吸收波長向長波方向移動(dòng)，且吸收強(qiáng)度增加)，這樣的基團(tuán)稱為助色團(tuán)。第17頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月紅移與藍(lán)移

有機(jī)化合物的吸收譜帶常常因引入取代基或改變?nèi)軇┦棺畲笪詹ㄩLλmax和吸收強(qiáng)度發(fā)生變化:

λmax向長波方向移動(dòng)稱為紅移，向短波方向移動(dòng)稱為藍(lán)移(或紫移)。吸收強(qiáng)度即摩爾吸光系數(shù)ε增大或減小的現(xiàn)象分別稱為增色效應(yīng)或減色效應(yīng)第18頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月飽和烴只有σ鍵電子，發(fā)生σ→σ*躍遷，吸收波長在遠(yuǎn)紫外區(qū)（10-200nm）。由于小于160nm紫外光被氧氣吸收，需要在高真空中進(jìn)行，因此應(yīng)用不多。但是H被O、X、N、S取代后，發(fā)生n→σ*，吸收波長向長方向移動(dòng)，即紅移。使吸收波長向長波長方向移動(dòng)的雜原子基團(tuán)稱為助色基團(tuán)，例如－NH2-、－OH、－OR等。飽和烴CH3ClCH3BrCH3In→σ*躍遷173nm204nm258nmCH3ICH2I2

CHI3

n→σ*躍遷259nm292nm349nm第19頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月不飽和烴含π鍵，產(chǎn)生躍遷π→π*。不飽和基團(tuán)是使化合物的最大吸收峰波長移動(dòng)到紫外可見區(qū)域，因此被稱為生色團(tuán)。例如C=O、－COOH等，生色團(tuán)可發(fā)生n→π*、π→π*躍遷。共軛烯烴各能級(jí)間距離較近，電子容易激發(fā)，生色作用大為增強(qiáng)。共軛雙鍵中π→π*躍遷所產(chǎn)生的吸收帶叫做K吸收帶。強(qiáng)度大，摩爾吸光系數(shù)在>104。不飽和烴C2H4（孤立單鍵）CH2=CH-CH=CH2π→π*躍遷λmax=165nm，εmax=1.553×104λmax=217nm，εmax=2.1×104第20頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月芳香烴及其雜環(huán)化合物

苯：E1帶180184nm

=47000E2帶200204nm=7000

苯環(huán)上三個(gè)共扼雙鍵的→*躍遷特征吸收帶；B帶230~270nm

=200

→*與苯環(huán)振動(dòng)引起；含取代基時(shí)，B帶簡化，紅移。第21頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月電荷遷移躍遷配位場(chǎng)躍遷

d－d、f－f躍遷。ε較小，較少應(yīng)用于分析。第三節(jié).無機(jī)化合物紫外－可見吸收光譜第22頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月常用溶劑例如己烷、庚烷、環(huán)己烷、二氧六環(huán)、水、乙醇等。部分溶劑，特別是極性溶劑，由于氫鍵或本身的偶極距，使得溶質(zhì)極性增強(qiáng)。引起：n→π*、

π→π*吸收帶遷移。引起精細(xì)結(jié)構(gòu)的變化。溶劑選用：－滿足溶解下要求極性盡量?。軇┑奈辗秶荒芘c實(shí)驗(yàn)重疊第四節(jié).影響紫外－可見吸收光譜的因素第23頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月1.溶劑極性對(duì)最大吸收波長λmax的影響n→*躍遷：藍(lán)移；；

→*躍遷：紅移；；第24頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月溶劑的極性會(huì)影響π→π*和n→π*躍遷。當(dāng)物質(zhì)溶解在溶劑中時(shí)，溶劑分子將該溶質(zhì)分子包圍，即溶劑化，從而限制了溶質(zhì)分子的自由轉(zhuǎn)動(dòng)，使轉(zhuǎn)動(dòng)光譜消失。溶劑的極性大，使溶質(zhì)分子的振動(dòng)受到限制，由振動(dòng)引起的精細(xì)結(jié)構(gòu)也不出現(xiàn)。當(dāng)物質(zhì)溶解在非極性溶劑中時(shí)，其光譜與該物質(zhì)的氣態(tài)光譜相似，可以觀測(cè)到孤立分子產(chǎn)生的轉(zhuǎn)動(dòng)-振動(dòng)的精細(xì)結(jié)構(gòu)。2.溶劑的極性影響吸收光譜的精細(xì)結(jié)構(gòu)第25頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月第五節(jié).紫外-可見分光光度計(jì)紫外-可見分光光度計(jì)基本構(gòu)造儀器類型第26頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月紫外-可見分光光度計(jì)基本構(gòu)造光源吸收池檢測(cè)器信號(hào)顯示系統(tǒng)單色器第27頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月1.光源作用：提供能量激發(fā)被測(cè)物質(zhì)分子，使之產(chǎn)生電子譜帶要求：發(fā)射足夠強(qiáng)的連續(xù)光譜，有良好的穩(wěn)定性及足夠的適用壽命類型：可見與近紅外區(qū)：鎢燈400～1100nm紫外區(qū)：氫燈或氘燈180～400nm第28頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月2.單色器作用：從連續(xù)光源中分離出所需要的足夠窄波段的光束常用的元件：棱鏡、光柵第29頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月3.吸收池功能：用于盛放試樣，完成樣品中待測(cè)試樣對(duì)光的吸收常用的吸收池：石英（紫外區(qū)）玻璃（可見區(qū)）吸收池光程：1cm、2cm、3cm等第30頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月4.檢測(cè)系統(tǒng)作用：接受、記錄信號(hào)組成：檢測(cè)器、放大器、讀數(shù)和記錄系統(tǒng)常用檢測(cè)器：光電管藍(lán)敏光電管210～625nm

紅敏光電管625～1000nm光電倍增管第31頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月5.儀器類型第32頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月單光束分光光度計(jì)優(yōu)點(diǎn)：結(jié)構(gòu)簡單，價(jià)格便宜缺點(diǎn)：受光源影響波動(dòng)大第33頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月雙光束分光光度計(jì)優(yōu)點(diǎn)：可直接讀數(shù)；可進(jìn)行掃描測(cè)量；可進(jìn)行自動(dòng)測(cè)量；消除了儀器光強(qiáng)變化帶來的誤差光源試樣溶液IS參比溶液IR單色器I0試樣溶液的吸光度第34頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月雙光束分光光度計(jì)動(dòng)畫示意圖第35頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月雙波長分光光度計(jì)優(yōu)點(diǎn)

不用參比溶液，只用一個(gè)待測(cè)試液，直接而完全地扣除背景，從而提高了靈敏度，適合于微量組分的測(cè)量?？蛇M(jìn)行雙組分同時(shí)測(cè)定而無需解方程第36頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月雙波長分光光度計(jì)示意圖第37頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月第六節(jié).紫外可見分光光度法應(yīng)用光譜定性分析基礎(chǔ)：吸收曲線的形狀和最大吸收波長用于有機(jī)化合物的結(jié)構(gòu)鑒定；同分異構(gòu)體的鑒別、物質(zhì)結(jié)構(gòu)測(cè)定。光譜定量分析的基礎(chǔ)：某一波長下測(cè)得的吸光度與物質(zhì)濃度關(guān)系的工作曲線，一般以max處的吸光度與物質(zhì)濃度之間的關(guān)系作工作曲線第38頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月定性分析有機(jī)化合物的定性分析立體結(jié)構(gòu)和互變結(jié)構(gòu)的影響純度檢查第39頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月1.有機(jī)化合物的定性分析在200~800nm范圍內(nèi)無吸收峰，該有機(jī)化合物可能是鏈狀或環(huán)狀的脂肪族化合物，或是它的簡單的衍生物，如醇、胺、氯代烷及不含雙鍵的共軛體系。在210~250nm范圍內(nèi)有強(qiáng)吸收帶（ε=2×104~1×104），可能含有兩個(gè)共軛雙鍵。在210~300nm有強(qiáng)吸收帶，可能含有3~5個(gè)共軛雙鍵。在250~300nm有吸收峰，表示有羰基存在；有中強(qiáng)吸收峰且有振動(dòng)結(jié)構(gòu)時(shí)，表示有苯環(huán)?？色@得的結(jié)構(gòu)信息第40頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月(1)確認(rèn)max，并算出㏒ε，初步估計(jì)屬于何種吸收帶；(2)觀察主要吸收帶的范圍，判斷屬于何種共軛體系；(3)乙酰化位移B帶：262nm(ε302)274nm(ε2040)261nm(ε300)(4)pH值的影響加NaOH紅移→酚類化合物，烯醇。加HCl藍(lán)移→苯胺類化合物。光譜解析注意事項(xiàng)第41頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月2.立體結(jié)構(gòu)和互變結(jié)構(gòu)的影響順反異構(gòu)：

順式：λmax=280nm；εmax=10500反式：λmax=295.5nm；εmax=29000互變異構(gòu)：

酮式：λmax=204nm

烯醇式：λmax=243nm

第42頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月3.純度檢查第43頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月定量分析透射比和吸光度Lambert-Beer定律偏離Lambert-Beer定律的因素實(shí)驗(yàn)條件的選擇多組分的定量分析方法第44頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月1.透光率和吸光度當(dāng)一束平行的單色光照射均勻的有色溶液時(shí)，光的一部分被吸收，一部分透過溶液，一部分被比色皿的表面反射。如果入射光的強(qiáng)度為I0，吸收光的強(qiáng)度為Ia，透過光的強(qiáng)度為It，反射光的強(qiáng)度為Ir，則:

I0＝Ia＋I(xiàn)t＋I(xiàn)r在吸光光譜分析中，由于采用同樣質(zhì)料的比色皿進(jìn)行測(cè)量，反射光的強(qiáng)度基本上相同，其影響可以相互抵消，上式可簡化為:

I0＝Ia＋I(xiàn)t

透光率或透光度:透過光的強(qiáng)度It與入射光的強(qiáng)度Io之比，用T表示。

T＝It/Io吸光度A：單色光通過溶液時(shí)被吸收的程度，其定義為入射光的強(qiáng)度Io與透射光的強(qiáng)度It之比

A＝lg(I

/It)

=

lg(1/T)第45頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月2.Lambert-Beer定律Lambert指出，當(dāng)用適當(dāng)波長的單色光照射一固定濃度的溶液時(shí)，其吸光度與光透過的液層厚度（b）成正比

A＝k’bBeer指出當(dāng)用一適當(dāng)波長的單色光照射厚度一定的均勻溶液時(shí)，吸光度與溶液濃度成正比，即：A＝k’’c當(dāng)溶液的濃度（c）和液層的厚度（l）均可變時(shí)，它們都會(huì)影響吸光度的數(shù)值，合并兩式，得到Lambert-Beer定律，數(shù)學(xué)表達(dá)式為：A＝kbc第46頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月吸收系數(shù)

在朗伯-比耳公式A＝kbc，k值決定于b，c所用的單位。吸光系數(shù)a：當(dāng)濃度c以g·L-1、液層厚度b以cm表示時(shí)，常數(shù)k是以a表示，單位為L·g-1·cm-1。朗伯－比耳公式可表示為:A＝abc摩爾吸光系數(shù)ε：若c以mol·L-1為單位時(shí)，以符號(hào)ε表示，其單位為L·mol-1·cm-1。ε的物理意義表達(dá)了當(dāng)吸光物質(zhì)的濃度為1mol·L-1，液層厚度為1cm時(shí)溶液的吸光度。在這種條件下上式可改寫為:A=εbc第47頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月3.偏離朗伯－比耳定律的原因在實(shí)際應(yīng)用時(shí)，通常是使液層厚度保持不變，然后測(cè)定一系列濃度不同的標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度，根據(jù)A=kbc=k’c關(guān)系式，以濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)作圖，應(yīng)得到一通過原點(diǎn)的直線，稱為標(biāo)準(zhǔn)曲線或工作曲線。但是，在實(shí)際工作中，當(dāng)有色溶液的濃度較高時(shí)，往往不成直線，這種現(xiàn)象稱為偏離朗伯－比耳定律。第48頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月引起偏離Lambert-Beer定律的原因(1).與測(cè)定樣品溶液有關(guān)的因素溶液中的化學(xué)變化如締合、離解、溶劑化、形成新的化合物、互變異構(gòu)等，使吸光度不隨溶液濃度而成正比地改變，而導(dǎo)致偏離朗伯－比耳定律。

例，重鉛酸鉀在弱酸性介質(zhì)中有如下平衡：Cr2O72-+H2O＝2HCrO4-在450nm波長處測(cè)量不同濃度重鉻酸鉀溶液的吸光度。由于在濃度低時(shí)重鉻酸根的離解度大，而濃度高時(shí)離解度小，同時(shí)由于鉻酸氫根離子（HCrO4-）的摩爾吸光系數(shù)比重鉻酸根離子的摩爾吸光系數(shù)要小得多，因此低濃度時(shí)重鉻酸根離子的吸光度降低十分顯著，這就使工作曲線偏離朗伯和耳定律。第49頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月

(2).與儀器有關(guān)的因素朗伯－比耳定律只適用于單色光。但實(shí)際上單波長的光不能得到。目前各種方法所得到的入射光是具有一定波長范圍的波帶，而非單色光。因而發(fā)生偏離朗伯一比耳定律的現(xiàn)象。單色光的純度愈差，吸光物質(zhì)的濃度愈高，偏離朗伯-比耳定律的程度愈嚴(yán)重。在實(shí)際工作中，若使用精度較高的分光光度計(jì)，可獲得較純的單色光。

引起偏離Lambert-Beer定律的原因第50頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月4.實(shí)驗(yàn)條件的選擇波長通常選擇最強(qiáng)吸收帶的最大吸收波長（max）狹縫寬度合適的狹縫寬度就是在吸光度不減小時(shí)的最大狹縫寬度。吸光度值由于光源不穩(wěn)定以及實(shí)驗(yàn)條件的偶然變動(dòng)等因素對(duì)試樣測(cè)定結(jié)構(gòu)影響較大，因此要使待測(cè)溶液測(cè)量的相對(duì)誤差小于5%，則待測(cè)溶液的透射比選在70%～10%，吸光度為0.15～1.00。參比溶液當(dāng)試樣組成較簡單時(shí)，可采用溶劑作為參比溶液，可以消除溶劑，吸收池等因素的影響。第51頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月5.定量分析方法單一組分分析朗伯比爾定律：A-c標(biāo)準(zhǔn)曲線多組分分析不重疊部分重疊相互重疊選擇適當(dāng)?shù)牟ㄩL，按單一組分測(cè)定在A和B組分的最大吸收波長處1和2，分別測(cè)定混合物的吸光度，列式求解第52頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月a不重疊b部分重疊c重疊第53頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月相互重疊的多組分分析在A和B組分的最大吸收波長處1和2，分別測(cè)定混合物的吸光度，列式求解第54頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月例

用光程為1cm的吸收池，在兩個(gè)測(cè)定波長處測(cè)定含有K2Cr2O7和KMnO4兩種物質(zhì)溶液的吸光度?；旌衔镌?50nm處的吸光度為0.38，在530nm處的吸光度為0.71，求混合物的組成。

已知1.010-3mol/L的K2Cr2O7在450nm處吸光度為0.20，而在530nm處為0.05；1.010-4mol/L的KMnO4在450nm處無吸收，在530nm處吸光度為0.42。第55頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月KMnO4K2Cr2O7450nm530nm530nm第56頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月混合物的吸光度可建立以下方程：450nm530nm代入數(shù)據(jù)后得第57頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月分子熒光光譜法(FluorescenceSpectrometry,FS)第58頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月基本原理光致發(fā)光（二次發(fā)光）過程：物質(zhì)吸收電磁輻射后受到激發(fā)