基因(遺傳)毒性雜質(zhì)資料-課件

基因毒性雜質(zhì)

（GenotoxicImpurities）1ppt課件主要內(nèi)容1背景知識介紹3確定毒性閾值的步驟4最大限度地控制雜質(zhì)2基因毒性雜質(zhì)與限度2ppt課件主要內(nèi)容1背景知識介紹2雜質(zhì)與雜質(zhì)限度3確定毒性閾值的步驟4最大限度地控制雜質(zhì)3ppt課件常見的基因毒性物質(zhì)苯并芘、黃曲霉素、亞硝胺許多化療藥物也具基因毒性，它們的不良反應是由化療藥物對正常細胞的基因毒性所致，如順鉑、卡鉑、氟尿嘧啶等。氨基糖甙類抗生素大劑量、長期使用會引起耳毒性有些特別敏感的病人，僅使用一次或短期使用，就出現(xiàn)了聽力損失。研究表明，他們的一個基因上有一點(mtl555G)與別人不同，這使他們對氨基糖甙類藥物耳毒性的易感性大大增加。4ppt課件什么是基因毒性雜質(zhì)是指能直接或間接損傷細胞DNA，產(chǎn)生致突變和致癌作用的物質(zhì)。常用的縮寫PGLs（potentiallygenotoxicimpurities有潛在基因毒性的雜質(zhì)）GTLs（genotoxicimpurities基因毒性雜質(zhì)）可能產(chǎn)生基因毒性雜質(zhì)的環(huán)節(jié)：新藥合成原料純化儲存運輸（與包裝物接觸）。。。。。。5ppt課件有關基因毒性雜質(zhì)的指南EMEA（歐洲藥品局）2006年首先頒布了《基因毒性雜質(zhì)限度指南》，并自2007年1月1日起正式實施。該指南為限制新活性物質(zhì)中的基因毒性雜質(zhì)提供了解決問題的框架和具體做法。ICH2006年，ICH也公布了相應的要求具體內(nèi)容參見ICHQ3A(R2)

IMPURITIESINNEWDRUGSUBSTANCESQ3appendix2reference,Step4version(25.10.06)新藥原料藥中的雜質(zhì)，Q3A(R2),步驟4（06年10月25日）版6ppt課件FDA于2008年12月正式簽發(fā)了類似指南：GuidanceforIndustry――GenotoxicandCarcinogenicImpuritiesinDrugSubstancesandProducts：RecommendedApproaches。主要內(nèi)容包括：指南發(fā)布的背景原料藥和制劑中的基因毒性和致癌雜質(zhì)生成的預防辦法基因毒性和致癌雜質(zhì)的分析方法、處理方法和減少方法上市申請和臨床研究申請的可接受限度草藥原料藥和制劑中基因毒性和致癌雜質(zhì)評估指南有關基因毒性雜質(zhì)的指南7ppt課件主要內(nèi)容賴祖亮@小木蟲2雜質(zhì)與雜質(zhì)限度1背景知識介紹3確定毒性閾值的步驟4最大限度地控制雜質(zhì)8ppt課件FDA原料雜質(zhì)限度StandardlimitsforimpuritiesinAPIsAPI中雜質(zhì)的標準限度/cber/gdlns/ichq3a.pdfMaximunDailyDose1每日最大劑量ReportingThreshold2,3報告限度IdentificationThreshold*鑒定限度QualificationThreshold*毒性限度≤2g/天0.05%0.10%或者每天攝入量1.0mg（取最小值）0.15%或者每天攝入量1.0mg（取最小值）＞2g/天0.03%0.05%0.05%SFDA質(zhì)控限度：質(zhì)量標準中允許的限度，制定限度超過該值，應有充分的依據(jù)。9ppt課件SFDA制劑雜質(zhì)限度報告限度最大日劑量≤1g＞1g限度0.1%0.05%鑒定限度最大日劑量＜1mg1mg～10mg＞10mg～2g＞2g限度1.0%或5μg0.5%或20μg0.2%或2mg0.1%質(zhì)控限度最大日劑量＜10mg10mg～100mg＞100mg～2g＞2g限度1.0%或50μg0.5%或200μg0.2%或3mg0.15%考慮病例數(shù)與療程，同時考慮：遺傳毒性研究；常規(guī)毒性研究；其它特定的毒性終點（酌情而定）。降低到鑒定限度以下降低到質(zhì)控限度以下NoNo是否與臨床不良反應相關？合格NoYes降低到安全限度決策樹10ppt課件毒性閾值如果一個物質(zhì)的體內(nèi)試驗表明對DNA有潛在的破壞性，可能導致腫瘤產(chǎn)生，我們是否可以這樣下結(jié)論：任何攝入水平都具有致癌的風險。不存在明顯的閾值。××11ppt課件毒性閾值我們是不是做一個試驗：劑量從低到高，對其影響性進行線性推斷？生物系統(tǒng)的糾錯功能使試驗不具備可操作性?！烈胍粋€新觀點：確定一個可接受其風險的攝入量突變的機制：細胞水平：基因突變，染色體重排，其他分子水平：切斷或共價修飾DNA的損傷生物系統(tǒng)的糾正措施：修復受損的DNA程序性細胞死亡（凋亡）12ppt課件TTC的概念TTCThresholdofToxicologicalConcern：毒性物質(zhì)限量，也可以稱之為毒理學關注門檻，是一個默認值。一個未知基因毒性數(shù)據(jù)的雜質(zhì)：TTC=1.5微克/天13ppt課件TTC的概念每天攝入1.5微克的基因毒性雜質(zhì)，被認為對于大多數(shù)藥品來說是可以接受的風險。使得人一生的致癌風險小于十萬分之一。現(xiàn)實生活中，人一生得癌癥的概率是四分之一。必須要強調(diào)的是TTC是一個風險管理工具，它采用的是概率的方法。意思為：假如有一個基因毒性雜質(zhì)，并且我們對它的毒性大小不太了解，如果它的每日攝入量低于TTC值，那么它的致癌風險將不會高于10－5的概率。所以TTC不能被理解為絕對無風險的保障。14ppt課件主要內(nèi)容3確定毒性閾值的步驟1背景知識介紹2雜質(zhì)與雜質(zhì)限度4最大限度地控制雜質(zhì)15ppt課件確定毒性閾值的步驟依據(jù)化學結(jié)構(gòu)，將雜質(zhì)分為五類；Step1:Step2:Step3:按照分類，確定驗證的策略(參見決策路線圖)；按照日劑量，確定原料藥中雜質(zhì)的限度(參見表1：短期用藥推薦容許日攝入量)。16ppt課件分類Class1:GenotoxicCarcinogens第1類：已知的、具有基因毒性（突變性）和致癌性的雜質(zhì)Step1:Class2:GenotoxicCarcunknow第2類：已知的、具有基因毒性（突變性），但致癌性未知的雜質(zhì)Class3:Alert-Unrelatedtoparent第3類：具有警示結(jié)構(gòu)、與API無關、基因毒性（突變性）未知的雜質(zhì)Class4:Alert-Relatedtoparent第4類：具有警示結(jié)構(gòu)、與API有關、基因毒性（突變性）未知的雜質(zhì)Class5:NoAlerts第5類：沒有警示結(jié)構(gòu)，沒有基因毒性（突變性）的雜質(zhì)17ppt課件致癌警示結(jié)構(gòu)18ppt課件決策路線圖Step2:雜質(zhì)的分類、驗證和風險評估Class1:GenotoxicCarcinogensNoClass2:GenotoxicCarcunknow(Staged)TTC(seeTable1)NoorunknowYesPDE(e.g.ICHQ3appendix2referenceYesNottestedClass3:Alert-UnrelatedtoparentClass4:Alert-RelatedtoparentControlasanordinaryimpurityEliminateImpurity?RiskAssessment3?ThresholdMechanism?ImpurityGenotoxic?1APIGenotoxic2Class5:NoAlertsNoNo清除雜質(zhì)風險評估用閾值控制該雜質(zhì)是否有基因毒性？該原料是否有基因毒性？19ppt課件疑似基因毒素的日攝入量用藥期限＜14天14天-1月1-3月3-6月6-12月>12月容許日攝入量

(μg/日)12060201051.5Step3:FDAhttp:/downloads/Drugs/GuidanceComplianceRegulatorylnformation/Guidances/ucm079235.pdfTTC值短期用藥的容許攝入量TTC=1.5微克/天表1：短期用藥推薦容許日攝入量20ppt課件最大日攝入量與濃度轉(zhuǎn)化表≥0.5%≥0.5%≤100ppm≤100ppmIncreasedduration=DecreasedADIofImpurity

IncreasingDoseofAPI可參考使用的范圍可參考使用的范圍RegulatorToxicologyandPharmacology.2006,44:198-211EMEA21ppt課件如何確定PDE？PDENOELF1F2F3F4F5允許的日暴露量（mg/day）觀察不到影響的限值（mg/kg/day）物種之間的外推法因子（小鼠12，大鼠5，狗2）個體差異因子（一般為10）毒性研究的周期因子嚴重毒性的因子如果只有LOEL（可觀察到效果最低限值）時的因子NOEL=LD50x70/2000ICHQ3CGuidelineforResidualSolvents殘留溶劑指南：/Regulatorylnformation/Guidances/ucm128223.htm/downloads/Drugs/GuidanceComplianceRegulatorylnformatio6n/Guidances/ucm073394.pdfNOEL×重量調(diào)整因子PDE=F1×F2×F3×F4×F522ppt課件常見的PDE值溶劑名稱PDE值（mg/天）限度（%）第一類溶劑（應避免使用）苯0.020.0002四氯化碳0.040.00041,2-二氯乙烷0.050.00051,1-二氯乙烯0.080.00081,1,1-三氯乙烷15.00.15第二類溶劑（應限制使用）乙腈4.10.041氯苯3.60.036氯仿0.60.006環(huán)己烷38.80.3881,2-二氯乙烯18.70.187溶劑名稱PDE值（mg/天）限度（%）第三類溶劑（GMP或其他質(zhì)量要求限制使用）乙酸50.00.5丙酮50.00.5甲氧基苯50.00.5正丁醇50.00.5仲丁醇50.00.5乙酸丁酯50.00.5叔丁基甲基醚50.00.5異丙基苯50.00.5二甲亞砜50.00.5乙醇50.00.5乙酸乙酯50.00.5藥物中常見殘留溶劑及其限度（節(jié)選）23ppt課件Goldcarcinogenicitydatabase()里面有1574種致癌物質(zhì)的列表，結(jié)構(gòu)式，CAS號，作用部位，TTC值等等一系列信息。近30年的關于基因毒性方面研究的出版物（PDF版）用不同分類方法統(tǒng)計的致癌物質(zhì)列表。不用注冊，可以直接點擊查看、下載全文?；蚨拘晕镔|(zhì)列表24ppt課件目的在于檢測試驗物質(zhì)是否直接或間接引發(fā)基因損傷，并測知其對基因的損傷程度。測試潛在基因毒性雜質(zhì)的順序：計算機篩選（軟件模擬計算）微生物試驗（例如：誘變可能性試驗）動物試驗（通常是小鼠和大鼠）基因毒性試驗

（genotoxicitystudy）可以用于預測基因毒性的軟件MultiCASE,Oncologic,DEREK,TOPKAT;’RTECS’(RegistryofToxicEffectsofChemicalSubstances,subscription);LeadScope;FDAdatabaseswww.emea.europa.eu/pdfs/human/swp/43199407en.pdf/fdmspublic/component/main?main=DocumentDetail&o=09000064807ddb80ToxTreesoftwarefordegradation:Railard,S.P.;Bercu,J.;Baertschi,S.W.;Riley,C.M.Org.ProcessRes.Dev.2010,14,1015.值得注意的是：在活體動物試驗中，有的時候，沒有體現(xiàn)出致突變性，是因為保護機制在起作用。例如：測試丙烯酸，丙烯酸酯和甲基丙烯酸酯體外測試（小鼠淋巴瘤細胞）：發(fā)現(xiàn)DNA損傷活體測試：無誘變作用的證據(jù)25ppt課件結(jié)構(gòu)不同的單個雜質(zhì)的限度應該小于1.5微克/天。有相同作用機制、結(jié)構(gòu)相似的雜質(zhì)，其含量總和的限度應該參考1.5微克/天的限量進行評估。如何評估多個基因毒性雜質(zhì)26ppt課件主要內(nèi)容4最大限度地控制雜質(zhì)1背景知識介紹2雜質(zhì)與雜質(zhì)限度3確定毒性閾值的步驟27ppt課件藥學評價應該根據(jù)現(xiàn)有的處方工藝，提供雜質(zhì)限度的合理性。應該列明所有涉及到的具有基因毒性或致癌性的化學物質(zhì)，如所有試劑、中間體、副產(chǎn)品等。即使這些基因毒性反應物或者有基因毒性結(jié)果的物質(zhì)沒有在API上體現(xiàn)，也都應該被考慮。原料藥合成28ppt課件藥學評價如果在合成路線、起始物料方面沒有更好的選擇，則需要提供一個正當?shù)睦碛伞＜矗骸拔镔|(zhì)中能引起基因毒性和致癌性的結(jié)構(gòu)部分在化學合成中是不可避免的”假如基因毒性雜質(zhì)被認為是不可避免的，那么應該采用技術(shù)手段盡可能的減少基因毒性雜質(zhì)在產(chǎn)品中的含量，使其符合安全的需要或使其降低到一個合理的水平。對于活性中間體、反應物、以及其它化合物的化學穩(wěn)定性都應該進行評估。應該有合理的分析方法去檢測和量化這些雜質(zhì)的殘留量。原料藥合成29ppt課件決策樹基因毒性雜質(zhì)有充分的證據(jù)用于評價基因毒性的閾值由試驗數(shù)據(jù)得到毒性情況。eg.Ames檢測陽性/DNA反應活性計算PDE是否為安全的攝入量控制在安全限度