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尿糖酮體膽色素第1頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月一、尿糖檢查尿糖?健康人排出量<2.8mmol/24h糖尿:糖定性實驗呈陽性,主要指葡萄糖尿(glucosuria),偶見乳糖尿、戊糖尿、半乳糖尿等。形成機制:血糖濃度大于8.88mmol/L,腎小球濾過的葡萄糖量超過腎小管重吸收能力(腎糖閾),就出現(xiàn)糖尿。
第2頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月出現(xiàn)糖尿的3個因素:血糖濃度(動脈血)腎血流量(腎皮質(zhì)血流量)腎糖閾(8.88mmol/L)腎小球濾過率—腎糖閾腎小管重吸收—腎糖閾第3頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月第4頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月尿糖定性的過篩實驗:①葡萄糖氧化酶試帶法,此法特異性強、靈敏度高、簡便、快速、并可用于尿化學(xué)分析儀。②班氏尿糖定性試驗是測定葡萄糖的非特異試驗。凡尿中存在其它糖(如果糖、乳糖、戊糖等)及其它還原物質(zhì)如肌酐、尿酸、維生素C等也可呈陽性反應(yīng),現(xiàn)多已不用。第5頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月③薄層層析法是鑒別、確保尿糖種類的特異敏感的實驗方法,但操作復(fù)雜,僅在必要時應(yīng)用。第6頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月糖還原實驗:葡萄糖含有醛基在熱堿性環(huán)境中可將Cu2+還原為黃或紅色的氧化亞銅沉淀(班氏法)。將試管內(nèi)班氏試劑加熱至沸騰,仍為透明藍色,繼續(xù)進行實驗。1.尿液葡萄糖測定方法第7頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月加入尿液0.2ml,混勻,煮沸1~2min,自然冷卻,觀察結(jié)果。第8頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月注意事項:1、試劑與尿液的比例為10:12、煮沸時用不時搖動試管以防爆沸噴出。3、必須冷卻后觀察,防止大量尿酸鹽的綠色影響。4、還原性物質(zhì)的影響。第9頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月葡萄糖氧化酶試帶法:
葡萄糖+H2O葡萄糖氧化酶葡萄糖醛酸+H2O2H2O2+色原劑過氧化物酶有色物質(zhì)常用的色源劑有:鄰聯(lián)甲苯胺(如德國寶靈曼公司)碘化鉀(美國的Ames公司)第10頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月第11頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月鄰甲苯胺法:(O-TB法):
葡萄糖與鄰甲苯胺在強酸溶液中加熱,葡萄糖的醛基與鄰甲苯胺縮合形成葡萄糖基胺,后者脫水生成席夫堿,再經(jīng)結(jié)構(gòu)重排,生成有色化合物,在630nm有吸收峰。第12頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月第13頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月氧化酶試紙法陰性,還原實驗法陽性
試紙質(zhì)量問題葡萄糖以外的其他還原糖尿液中含有較高濃度的還原性物質(zhì)存在少量葡萄糖伴有高濃度的還原物質(zhì)氧化酶試紙法陽性,還原實驗法陰性
尿液標(biāo)本被過氧化物或者次氯酸鹽污染尿糖測定結(jié)果分析:第14頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月2.尿液其他糖的檢驗方法果糖:果糖與溶于強酸的間苯二酚溶液加熱后顯紅色反應(yīng)。半乳糖:與硝酸共熱,可被氧化為白色的粘酸結(jié)晶。粘多糖:甲苯胺藍法、十六烷三甲基溴化銨實驗。戊糖:戊糖與鹽酸共沸后生成糠醛,再與二羥基甲苯作用形成綠色化合物。第15頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月3.尿液糖的紙層析法在層析法中有固定相和流動相,兩相間可做相對流動。當(dāng)樣品中各種糖隨流動相通過固定相時,即反復(fù)發(fā)生吸附、脫附、解析或其他親和作用,由于各種糖在上述性能上的差異而產(chǎn)生移動速度的差異,而相互分離。第16頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月4.尿糖檢查的臨床意義糖尿非葡萄糖尿葡萄糖尿胰島外性糖尿生理性糖尿攝食性糖尿妊娠性糖尿神經(jīng)精神性糖尿病理性糖尿真性糖尿半乳糖尿果糖尿戊糖尿其他糖尿第17頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月[參考值]定性:陰性定量:<2.8mmol/24h(<0.5g/24h)濃度為0.1-0.8mmol/L(1-15mg/dl)第18頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月
[臨床意義]尿中出現(xiàn)糖可見于以下情況。1.血糖增高性糖尿(1)飲食性糖尿:可因短時間攝入大量糖類而引起。因此為確診有無糖尿,必須檢查清晨空腹的尿液以排除飲食的影響。第19頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月(2)一過性糖尿:也稱應(yīng)激性糖尿。于顱腦外傷、腦血管意外、情緒激動等情況下,延腦血糖中樞受到刺激,導(dǎo)致腎上腺素、胰高血糖至少大量釋放,因而事出現(xiàn)暫時性高血糖和糖尿。第20頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月(3)持續(xù)性糖尿:清晨空腹尿中尿糖呈持續(xù)陽性,最常見于因胰島素絕對或相對不足所致的糖尿病,此時其血糖水平已經(jīng)超過腎閾,24小時尿中排糖近于100克或更多,其每日尿糖總量與病情輕重相平行,因而尿糖測定也是判斷糖尿病治療效果的重要指標(biāo)之一。第21頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月手掌型葡萄糖(glucose)分析儀第22頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月2.血糖正常性糖尿:又稱腎性糖尿,腎小管對葡萄糖的重吸收功能低下所致。其中先天性者稱為家族性腎性糖尿,病人出現(xiàn)糖尿而空腹血糖\糖耐量試驗均正常。注意與真性糖尿鑒別。其要點是腎性糖尿時空腹血糖及糖耐量試驗結(jié)果均為正常.第23頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月思考題:
ⅠⅡⅢⅣ
葡萄糖(試紙法)+--+葡萄糖(鄰甲苯胺)++--葡萄糖(班氏法)
+++-第24頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月二、尿液酮體檢查Urineketonebodies,KET酮體:脂肪酸分解代謝的中間產(chǎn)物
丙酮(CH3COCH3)(2%)乙酰乙酸(CH3COCH2COOH)(20%)β-羥丁酸(CH3CH(OH)CH2COOH)24小時排泄量:丙酮<3mg;乙酰乙酸<9mg;β-羥丁酸<5mg
第25頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月正常人產(chǎn)生的酮體很快被利用,在血中含量極微,約為2.0-4.0mg/L。尿中酮體(以丙酮計)約為50mg/24h。定性測試為陰性。但在饑餓、各種原因引起的糖代謝發(fā)生障礙、脂肪分解增加及糖尿病酸中毒時,因產(chǎn)生酮體速度大于組織利用速度,可出現(xiàn)酮血癥,繼而發(fā)生酮尿(ketonuria,KET)。第26頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月1.尿液酮體檢查方法
Lange法:Rothera改良法原理:尿中的酮體(丙酮和乙酰乙酸)與亞硝基鐵氰化鈉和硫酸銨作用,可產(chǎn)生異硝基、異硝基銨,后者與Fe(CN)53-生成紫色化合物。第27頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月試紙法尿中丙酮和乙酰乙酸在堿性溶液中與亞硝基鐵氰化鈉反應(yīng)生成紫色化合物。
注意事項:1.丙酮和乙酰乙酸的揮發(fā)性要求標(biāo)本新鮮;2.該法對乙酰乙酸的靈敏度最高,
β-羥丁酸不反應(yīng)。第28頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月尿中乙酰乙酸的檢測:(Gerhardt法)試驗原理:尿液中的乙酰乙酸與氯化高鐵作用形成赭紅色乙酰乙酸鐵化合物。該法對乙酰乙酸測定的敏感度為700mg/L,尿液久置后乙酰乙酸可轉(zhuǎn)變?yōu)楸菇Y(jié)果偏低。尿液中的酚類、安替比林、水楊酸鹽和重碳酸鈉等藥物可呈假陽性反應(yīng)。第29頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月2.尿液酮體檢查臨床意義健康人尿中酮體含量甚微。尿中酮體增加時,稱為酮尿。常見于未控制的糖尿病、運動、寒冷刺激、饑餓、嘔吐等。β-羥丁酸的腎閾較高,如尿中出現(xiàn)多量β-羥丁酸,常說明酮血癥加重。第30頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月
糖尿病酮癥酸中毒:由于糖利用減少,分解脂肪產(chǎn)生酮體增加而引起酮癥。未控制或治療不當(dāng)?shù)奶悄虿〕霈F(xiàn)酸中毒或昏迷時,尿酮體檢查極有價值。應(yīng)與低血糖、心腦疾病乳酸中毒或高血糖高滲透性糖尿病昏迷相區(qū)別。酮癥酸中毒時尿酮體陽性,而后者尿酮體一般不增高。第31頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月
非糖尿病性酮癥者:如感染性疾病肺炎、傷寒、敗血癥、結(jié)核等發(fā)熱期,嚴重腹瀉、嘔吐、饑餓、禁食過久、全身麻酸后等均可出現(xiàn)酮尿,此種情況相當(dāng)常見。妊娠婦女常因妊娠反應(yīng),嘔吐、進食少,以致體脂降低解代謝增多,發(fā)生酮體癥而致酮尿。第32頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月
中毒:如氯仿、乙醚麻醉后、磷中毒等。服用雙胍類降糖藥:如降糖靈等由于藥物有抑制細胞呼吸的作用,可出現(xiàn)血糖下降,但酮尿陽性的現(xiàn)象。第33頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月尿液膽色素檢查尿中膽色素包括膽紅素(bilirubin)、尿膽原(urobilinogen)及尿膽素(urobilin),俗稱尿三膽。由于送檢的多為新鮮尿,尿膽原尚未氧化成尿膽素,故多查前兩者,俗稱尿二膽。第34頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月第35頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月(一)膽紅素檢查(BIL):膽紅素是紅細胞破壞后的代謝產(chǎn)生??煞譃槲唇?jīng)肝處理的未結(jié)合的膽紅素、經(jīng)肝與葡萄糖醛酸結(jié)合形成的結(jié)合膽紅素、與白蛋白結(jié)合的δ-膽紅素。未結(jié)合膽紅素不溶于水,在血中與蛋白質(zhì)結(jié)合不能通過腎小球濾膜。結(jié)合膽紅素分子量小,溶解度高,可通過腎小球濾膜,由尿中排出。
第36頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月由于正常人血中結(jié)合膽紅素含量很低,濾過量極少,因此尿中檢不出膽紅素,如血中結(jié)合膽紅素增加可通過腎小球膜使尿中結(jié)合膽紅素量增加,尿膽紅素試驗量陽性反應(yīng)。第37頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月檢測方法:Harrison法:膽紅素與氯化鋇反應(yīng),形成膽紅素鋇鹽沉淀而濃縮,滴加酸性三氯化鐵試劑使膽紅素氧化成膽綠素而呈綠色。
試紙法(重氮法):在強酸性介質(zhì)中,膽紅素與試紙上的二氯苯胺重氮鹽起偶聯(lián)作用,生成紅色偶氮化合物。第38頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月干化學(xué)法測定的注意事項1、標(biāo)本要新鮮。避免膽紅素—膽綠素,尿膽原—尿膽素。2、高濃度維生素C和亞硝酸鹽,抑制偶氮反應(yīng),出現(xiàn)假陰性。[參考值]膽紅素定性:陰性
第39頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月(二)、尿膽原及尿膽素檢查尿膽原經(jīng)空氣氧化及光線照射后轉(zhuǎn)變成黃色的尿膽素(糞膽素)。第40頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月檢測方法:Ehrlich醛反應(yīng)定性法:尿膽原在酸性溶液中與對二甲氨基苯甲醛反應(yīng),生成紅色化合物。偶氮反應(yīng):尿膽原與重氮化合物的偶聯(lián),產(chǎn)生紅色化合物。注意事項:1.標(biāo)本必須新鮮;2.
內(nèi)源性吲哚、卟膽原等可產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。第41頁,課件共45頁,創(chuàng)作于2023年2月[參考值]尿膽原定性:陰性或弱陽性(1:20稀釋后
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