第22章-螺旋體課件

概述螺旋體特點

一類細長、柔軟、螺旋狀、運動活潑；原核細胞型微生物；基本結構與細菌相似，如有細胞壁、原始核質(zhì)；以二分裂方式繁殖；對抗生素等藥物敏感；介于細菌與原蟲之間。概述螺旋體特點致病螺旋體的分類屬和代表菌

引起人類疾病

傳播方式或媒介密螺旋體屬（Treponema）

蒼白密螺旋體蒼白亞種梅毒性傳播蒼白密螺旋體地方亞種地方性梅毒黏膜損傷蒼白密螺旋體極細亞種雅司病皮膚損傷品他密螺旋體品他病皮膚損傷疏螺旋體屬（Borrelia）

伯氏疏螺旋體萊姆病硬蜱回歸熱疏螺旋體流行性回歸熱體虱杜通疏螺旋體地方性回歸熱軟蜱奮森疏螺旋體咽峽炎、牙齦炎條件致病鉤端螺旋體屬（Leptospira）

問號狀鉤端螺旋體鉤端螺旋體病接觸疫水

致病螺旋體的分類屬和代表菌引

名稱螺旋數(shù)螺旋特舉例致病螺旋體的螺旋特點

密螺旋體

8~14

規(guī)則，細密；兩端尖直疏螺旋體3~10

不規(guī)則蒼白密螺旋體蒼白亞種鉤端螺旋體數(shù)十個規(guī)則，更細密；一端/兩端呈鉤狀問號狀鉤端螺旋體回歸熱疏螺旋體伯氏疏螺旋體名稱螺旋數(shù)螺旋特舉鉤端螺旋體屬（Leptospira）-問號狀鉤端螺旋體（L.

interrogans）-雙曲鉤端螺旋體（L.biflexa）分兩個種。第一節(jié)鉤端螺旋體鉤端螺旋體屬（Leptospira）-問號狀鉤端螺旋體（L.（一）形態(tài)染色

螺旋細密、規(guī)則，形似細小珍珠排列的細鏈，一端或兩端呈鉤狀；運動活潑，常使菌體呈C、S或8字型，G－，不易著染；Fontana鍍銀染色法染成棕褐色。一、生物學性狀（一）形態(tài)染色一、生物學性狀黃疸出血熱群鉤端螺旋體黃疸出血熱群鉤端螺旋體鉤端螺旋體鍍銀染色鉤端螺旋體鍍銀染色（二）培養(yǎng)

?營養(yǎng)要求復雜，常用Korthof培養(yǎng)基，適宜生長溫度為28～30℃，若11～13℃能生長的為非致病雙曲鉤端螺旋體。最適pH7.2～7.6，小于6.5死亡，最高能耐8.4；

?需氧或微需氧；

?在人工培養(yǎng)基中生長緩慢。一、生物學性狀（二）培養(yǎng)一、生物學性狀（三）抵抗力

?對熱抵抗力弱，60℃1min即死亡。0.2%來蘇、1:2000升汞、1%石炭酸經(jīng)10～30min被殺滅。

?對青霉素敏感。

?在濕土或水中可存活數(shù)月。一、生物學性狀（三）抵抗力一、生物學性狀（四）抗原分類據(jù)群和型特異性抗原分血清群和血清型，問號狀鉤端螺旋體至少可分為25個血清群、273個血清型，其中有我國學者發(fā)現(xiàn)的37個血清型；我國已發(fā)現(xiàn)的致病性鉤端螺旋體至少有19個血清群、161個血清型，是發(fā)現(xiàn)血清型最多的國家。一、生物學性狀（四）抗原分類一、生物學性狀二、致病性與免疫性二、致病性與免疫性（一）致病物質(zhì)

1.內(nèi)毒素樣物質(zhì)(ELS)細胞壁中含類似脂多糖物質(zhì)（LLS），引起的病理變化與典型的內(nèi)毒素相似，只是毒性較低。

2.溶血素波摩那型、犬型、七日熱型產(chǎn)生溶血素，破壞紅細胞膜而溶血。溶血素不耐熱，56℃經(jīng)30分鐘失活，對氧穩(wěn)定，可被胰蛋白酶破壞。（一）致病物質(zhì)（一）致病物質(zhì)

3.細胞毒性因子(CTF)注射小鼠，可出現(xiàn)肌肉痙攣、呼吸困難而死亡。4.細胞致病作用（CPE）物質(zhì)引起細胞退行性病變；注射家兔，可形成紅斑和水腫。（一）致病物質(zhì)（二）所致疾病

鉤端螺旋體病人畜共患傳染病，多宿主（鼠和豬為主），傳播途徑有：

?人與污染水或土壤接觸

?黏膜或皮膚侵入

?消化道黏膜（污染食物/飲水）

?胎盤垂直傳播

?吸血昆蟲（二）所致疾病流行特點季節(jié)性（夏秋）：洪水型—豬，稻田型—鼠地區(qū)性：三多－鼠、豬、水職業(yè)性：農(nóng)民、礦工、飼養(yǎng)員致病性

先形成鉤體血癥，損傷全身毛細血管內(nèi)皮細胞及肝、腎、肺心及中樞神經(jīng)，出現(xiàn)休克、DIC、黃疸、出血、心腎功能不全、腦膜炎等。流行特點臨床特點

起病急，高熱、乏力、全身酸痛、結膜充血、腓腸肌壓痛、表淺淋巴結腫大；三大癥狀：寒熱、身痛、一身乏

三大體征：眼紅、腿疼、淋巴大免疫性

體液免疫為主，病后獲得對同型鉤體的持久免疫力。臨床特點三、微生物學檢查法三、微生物學檢查法（一）標本采集

發(fā)病10天內(nèi)取血液；2周后取尿液；腦膜刺激者取腦脊液。（二）直接鏡檢（三）分離鑒定

接種至Korthof培養(yǎng)基，置28℃孵育陽性標本在2周內(nèi)可見培養(yǎng)液呈輕度混濁；暗視野顯微鏡檢查有動力，則用已知診斷血清鑒定其血清群和血清型。（一）標本采集（四）動物接種

敏感方法，尤適用于有雜菌污染的標本。接種于幼齡豚鼠或金地鼠腹腔，3～5天后用暗視野顯微鏡檢查腹腔液；或3～6天取心血檢查并作分離培養(yǎng)。（五）血清學診斷

病初和發(fā)病后第3～4周各采血清一次。有腦膜刺激癥狀者采取腦脊液。

顯微鏡凝集試驗（microscopicagglutinationtest,MAT）。（四）動物接種顯微鏡凝集試驗用標準株或當?shù)亓餍兄曜餍吞禺愋钥乖謩e與病人不同稀釋度血清混合，37℃孵育2h，暗視野顯微鏡觀察，可見鉤端螺旋體凝集成小蜘蛛狀。一般效價在1:300以上或晚期血清效價有4倍以上增高有診斷意義。間接凝集試驗

可溶性鉤端螺旋體屬特異抗原，吸附于乳膠或活性炭成為顆粒性抗原，與病人血清中相應抗體作用，可出現(xiàn)肉眼可見的凝集。顯微鏡凝集試驗（六）分子生物學診斷

DNA探針雜交用PCR擴增（六）分子生物學診斷防鼠、滅鼠，加強對帶菌家畜的管理接種多價鉤體疫苗：

在常年流行地區(qū)，對易感人群和與疫水接觸者宜接種包含當?shù)亓餍兄暝趦?nèi)的多價鉤端螺旋體疫苗。治療：青霉素首選，注意赫氏反應。四、防治原則防鼠、滅鼠，加強對帶菌家畜的管理四、防治原則第二節(jié)密螺旋體屬密螺旋體分類

－蒼白密螺旋體（T.pallidum）

?蒼白亞種(subsp.pallidum)：亦稱梅毒螺旋體，引起人類梅毒。

?地方亞種（subsp.endemicum）：引起非性傳播梅毒（污染餐具傳播）

?極細亞種（subs.perternue）：雅司?。ㄆつw損傷受染）－品他密螺旋體（T.carateum）

?引起人類品他病本屬主要介紹梅毒螺旋體。第二節(jié)密螺旋體屬密螺旋體分類（一）形態(tài)染色

8～14個致密而規(guī)則的螺旋，兩端尖直。運動活潑，圓柱體表面繞有3～4根周鞭毛，與運動有關。普通染色不易著色，常用Fontana鍍銀染色法，菌體染成棕褐色且變粗。一、生物學性狀（一）形態(tài)染色一、生物學性狀（二）培養(yǎng)特性

目前人工培養(yǎng)方法尚未真正成功。接種兔睪丸或眼前房，兔睪丸活體培養(yǎng)，但生長緩慢，多用來保存菌種；家兔上皮細胞中能有限生長，繁殖慢，約30h分裂一次。（三）抵抗力

抵抗力極弱，對冷、熱及干燥特別敏感；血液中的螺旋體4℃放置3天后才死亡，故冷藏3天以上的血液無傳染梅毒的危險。（二）培養(yǎng)特性（一）致病因素

1.莢膜樣物質(zhì)

為酸性粘多糖，具有抗吞噬作用

2.主要外膜蛋白

粘附作用，激活人皮膚微血管內(nèi)皮上的血管粘附分子-1（VCAM-1）和細胞間粘附分子-1（ICAM-1）的表達，促進T細胞增殖，釋放炎癥因子（TNF-α和IL-1α）。3.透明質(zhì)酸酶

分解透明質(zhì)酸有利于擴散并造成組織損傷。二、致病性與免疫性（一）致病因素二、致病性與免疫性（二）所致疾病：據(jù)感染方式分

1.先天性梅毒

亦稱胎傳梅毒，易致流產(chǎn)、早產(chǎn)或死胎；也可致先天畸形，出生后被稱為梅毒兒，常呈鋸齒形牙、間質(zhì)性角膜炎、神經(jīng)性耳聾等癥狀。（二）所致疾病：據(jù)感染方式分2.后天性梅毒：分三期I期梅毒：

多見外生殖器，出現(xiàn)無痛性、直徑約1cm的硬性下疳，含有大量梅毒螺旋體，此時傳染性極強。4～8周后，下疳自然愈合。經(jīng)2～3個月無癥狀潛伏期后進入第二期。2.后天性梅毒：分三期II期梅毒：感染性強，破壞性小。全身皮膚黏膜出現(xiàn)梅毒疹，周身淋巴結腫大，不經(jīng)治療一般在1～3個月后癥狀自然消退而痊愈，經(jīng)2～4年,又可被激活進入第三期。II期梅毒：感染性強，破壞性小。全身皮膚黏膜出現(xiàn)梅毒疹，

III期（晚期）梅毒：感染性小，破壞性大。感染2年（亦可達10～15年）后，可侵犯內(nèi)臟器官或組織，出現(xiàn)慢性肉芽腫病變。重癥患者引起心血管及中樞神經(jīng)系統(tǒng)病變，出現(xiàn)梅毒瘤、動脈瘤、脊髓瘤。III期（晚期）梅毒：感染性小，破壞性大。感染2年（亦（三）免疫性

1.以細胞免疫為主。2.傳染性免疫：

一般認為當體內(nèi)持續(xù)有螺旋體存在時，對再感染有免疫力，一旦螺旋體被殺滅，其免疫力亦隨之消失。3.產(chǎn)生兩類抗體

?特異性制動抗體

?反應素：非特異性抗體，能與生物組織中的類脂抗原（如牛心?。┌l(fā)生非特異性結合反應，可利用其進行血清學診斷。（三）免疫性（一）標本采集Ⅰ期梅毒：硬下疳滲出液Ⅱ期梅毒：梅毒疹滲出液或局部淋巴結抽出液（二）顯微鏡檢查暗視野顯微鏡觀察螺旋體的動力和形態(tài)

Fontana鍍銀染色法三、微生物學檢查法（一）標本采集三、微生物學檢查法（三）血清學診斷

非密螺旋體抗原試驗：測非特異性抗體抗原（正常牛心脂質(zhì)）→測血清中的反應素（抗脂質(zhì)抗體）

1.VDRL（veneraldiseaseresearchlaboratory）試驗和RPR（rapidplasmareagin,改良的VDRL）試驗：適合梅毒患者的初篩。前者在玻片上進行，后者在專用紙卡反應圈（內(nèi)徑18mm）內(nèi)進行。I期梅毒陽性率約70％，II期梅毒可達100％，III期梅毒陽性率低。三、微生物學檢查法（三）血清學診斷三、微生物學檢查法（三）血清學診斷

2.密螺旋體抗原試驗

采用Nichols株梅毒螺旋體或重組蛋

白作為抗原，測定病人血清中特異性抗體。

熒光密螺旋體抗體吸收試驗（fluorescent

treponemalantibody-absorption,

FTA-ABS）

梅毒螺旋體血凝試驗（treponema

pallidumhemagglutinationassay,TPHA）（三）血清學診斷預防：加強性衛(wèi)生教育和嚴格社會管理。治療：梅毒確診后，宜用青霉素等藥物及早予以徹底治療。治療原則：早期，足量，正規(guī)。四、防治原則預防：加強性衛(wèi)生教育和嚴格社會管理。四、防治原則有3～10個稀疏而不規(guī)則的螺旋，運動活潑。對人致病的主要有伯氏疏螺旋體、回歸熱螺旋體、奮森螺旋體等。第三節(jié)疏螺旋體屬有3～10個稀疏而不規(guī)則的螺旋，運動活潑。第三節(jié)

萊姆病的主要病原體。

1977年在美國萊姆鎮(zhèn)（Lyme,atownofsoutheastConnecticut,USA）發(fā)現(xiàn)，從硬蜱及患者體內(nèi)分離出伯氏疏螺旋休。

1985年我國在黑龍江省林區(qū)首次發(fā)現(xiàn)萊姆病，1988年從病人血液中分離出病原體，迄今已有十多個省和自治區(qū)證實。一、伯氏疏螺旋體萊姆病的主要病原體。一、伯氏疏螺旋體（一）形態(tài)染色

兩端稍尖，運動活潑，周漿鞭毛數(shù)不等，與運動有關。

Giemsa或Wright染色均佳。一、生物學性狀革蘭染色Wright染色（一）形態(tài)染色一、生物學性狀革蘭染色Wright染色（二）培養(yǎng)特性

BSK培養(yǎng)：該培養(yǎng)基含長鏈飽和與不飽和脂肪酸、氨基酸、牛血清白蛋白及熱滅活兔血清等豐富的營養(yǎng)物質(zhì)。微需氧，5％～10％CO2促進生長。分裂繁殖一代需12～18

h。一般培養(yǎng)2～3周，長出細小而邊緣整齊的小菌落。（三）分類根據(jù)DNA-DNA同源性及16SrRNA基因序列分析結果，可將菌株分為10個不同基因種。（二）培養(yǎng)特性（一）致病性

?能選擇性吸附在膠原纖維相關的核心蛋白多糖。

?在體外，它們能與整合素、錨定蛋白、粘多糖相結合。

?在體內(nèi)，表達脂蛋白能激活多種細胞，引起劇烈的炎癥反應。二、致病性與免疫性（一）致病性二、致病性與免疫性（二）所致疾病

萊姆病

經(jīng)3～30天潛伏期，在叮咬部位可出現(xiàn)慢性移行性紅斑（erythemamigrans）。經(jīng)2～3周，皮損消退，留有斑痕與色素沉著。

早期癥狀表現(xiàn)為乏力、頭痛、發(fā)熱、頸硬及關節(jié)炎等。晚期癥狀主要表現(xiàn)為慢性關節(jié)炎、神經(jīng)系統(tǒng)與皮膚異常、心內(nèi)膜炎等。

二、致病性與免疫性（二）所致疾病二、致病性與免疫性（三）宿主及傳播媒介

蜱（tick）：在美國主要是肩突硬蜱和太平洋硬蜱，在歐洲主要是蓖子硬蜱，我國北方林區(qū)主要是全溝硬蜱。二、致病性與免疫性（三）宿主及傳播媒介二、致病性與免疫性慢性移行性紅斑慢性移行性紅斑ELISA

方法簡便，特異性和敏感性較高，為多數(shù)實驗室所采用。特異性IgM的主要靶抗原是表面蛋白（21

kDa和35

kDa）和鞭毛抗原（37kDa和41kDa），IgG抗體的靶抗原則為鞭毛蛋白（37kDa和41kDa）和外膜蛋白C（OspC，21kDa）。IFAPCR三、微生物學檢查法ELISA三、微生物學檢查法疫區(qū)人員加強個人防護，避免硬蜱的叮咬。滅活疫苗于1992年獲準在美國家犬中使用。人用重組蛋白疫苗（OspA、OspC）正在臨床試驗中。早期萊姆病可口服四環(huán)素、強力霉素、羥氨芐青霉素及紅霉素等。晚期萊姆病由于多種深部組織損害，故一般用青霉素聯(lián)合頭孢三嗪等靜脈滴注。四、防治原則疫區(qū)人員加強個人防護，避免硬蜱的叮咬。四、防治原引起人類回歸熱的病原體。