機能學(xué)設(shè)計性實驗

機能學(xué)設(shè)計性實驗遵義醫(yī)學(xué)院2012級臨床（6）班

胰島素靜脈注射對正常家兔的降血糖作用

立項背景：

1、胰島素于1921年由加拿大人班廷和貝斯特首先發(fā)現(xiàn)，是一種蛋白質(zhì)激素，由胰臟內(nèi)的胰島β細胞分泌。胰島素參與調(diào)節(jié)糖代謝，控制血糖平衡，應(yīng)用于臨床數(shù)十年，使過去不治的糖尿病患者得到挽救。2、胰島素主要作用在肝臟、肌肉及脂肪組織，控制著蛋白質(zhì)、糖、脂肪三大營養(yǎng)物質(zhì)的代謝和貯存。(1)對糖代謝的影響：能加速葡萄糖的利用和抑制葡萄糖的生成，即使血糖的去路增加而來源減少，于是血糖降低。(2)對脂肪代謝的影響：促進脂肪的合成和貯存，抑制脂肪的分解。糖尿病時糖代謝障礙，脂肪大量動員，產(chǎn)生大量游離脂肪酸在肝臟氧化至乙酰輔酶A，然后變?yōu)橥w，若酮體產(chǎn)生過多則出現(xiàn)酮血癥。胰島素能抑制脂肪分解，并促進糖的利用，從而抑制酮體產(chǎn)生，糾正酮血癥。(3)對蛋白質(zhì)代謝的影響。促進蛋白質(zhì)的合成，阻止蛋白質(zhì)的分解。(4)胰島素可促進鉀離子和鎂離子穿過細胞膜進入細胞內(nèi)；可促進脫氧核糖核酸(DNA)、核糖核酸(RNA)及三磷酸腺苷(ATP)的合成。3、胰島素可用于治療各型胰島素缺乏的糖尿病。主要包括以下幾點：（1）一型糖尿?。阂葝u素是目前治療一型糖尿病唯一有效的藥物，不論有無急性和慢性并發(fā)癥，均須終生胰島素替代治療，不可突然終止。（2）二型糖尿?。和ㄟ^控制飲食、體育鍛煉和口服降糖藥治療都不能取得良好療效的2型糖尿病患者。（3）出現(xiàn)并發(fā)癥，如增生型糖尿病視網(wǎng)膜病變、嚴重神經(jīng)病變、糖尿病腎病、心臟病變、嚴重的皮膚病變及肝硬化、肝炎等的糖尿病患者。（4）出現(xiàn)酮癥酸中毒、糖尿病高滲性昏迷和乳酸性酸中毒等各種糖尿病急性或慢性并發(fā)癥的患者。（5）糖尿病合并重癥感染、消耗性疾病、急性心肌梗死、高熱、妊娠、分娩、創(chuàng)傷及接受大型手術(shù)治療等的糖尿病患者。（6）因全胰腺切除而引起的繼發(fā)性糖尿病的患者。（7）由于胰島素能促進鉀離子進入細胞，使血液中鉀離子濃度降低而細胞內(nèi)鉀離子濃度升高，故而可以用于治療高鉀血癥和心肌梗死早期及預(yù)防心肌病變時引起的心律失常實驗動物：健康家兔15只，體重2.0~2.5kg,，雌雄不限。主要儀器：哺乳動物手術(shù)器械一套，RGZ-10型嬰兒秤，兔手術(shù)臺，試管架，離心機，722N分光光度計，試管4支，離心管2支，洗耳球，注射器（5ml、10ml各一支），動脈夾，動脈插管，紗布，10ml移液管，縛腿帶5根，絲線，廢液缸。主要試劑和藥品：胰島素（1ml胰島素+52ml生理鹽水），0.13%葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液，蒸餾水，10%三氯醋酸，10%三氯化鐵，10g/L肝素鈉溶液，250g／L的烏拉坦溶液。研究方法：

把15只家兔分別編號為1～15號，均按以下實驗方法進行實驗，用統(tǒng)計表記錄注射胰島素前后家兔血糖濃度變化，并作假設(shè)檢驗。實驗方法：1、實驗準(zhǔn)備將2支離心管編號為1~2號及四支試管分別編號為1~4號，2只離心管和3、4號試管分別加入10%三氯醋酸7ml，3號、4號離心管分別加蒸餾水及0.13%標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液2ml，將注射器和針頭用肝素潤濕。2、標(biāo)本采集家兔實驗前12h禁食。稱重家兔并記錄，以250g／L烏拉坦于（4ml／kg）耳緣靜脈注射麻醉，仰臥位固定于兔臺。然后行頸總動脈插管術(shù)。首先，注射前取血：從近心端開始，第1ml棄去不用，再取2ml血放入1號離心管中，用玻璃棒攪勻。隨即自耳緣靜脈注射胰島素：以劑量為每千克體重0.75ml注射胰島素。最后，注射后取血：注射胰島素1h后取血2ml于2號離心管，方法同第一步。（3000轉(zhuǎn)每分，離心5分鐘）。3、制備血漿將離心后的上清液分別倒入1、2號試管中，然后定量1~4號試管取液6ml，分別加入10%三氯化鐵12滴，五分鐘后在波長為620nm下比色（3號管調(diào)“0”，讀取1、2、4號試管比色值。），并作好記錄實驗流程圖：家兔的稱重，麻醉固定頸動脈插管取血2ml于1號離心管，注意第1ml棄去耳緣靜脈注射胰島素取血2ml于2號離心管，方法同上進行離心（3000r／min,5min）上清液到入對應(yīng)試管，且4只試管均定量為6ml,分別加入三氯化鐵12滴比色表1家兔血糖測定（ml）

試劑離心管1離心管2空白管3標(biāo)準(zhǔn)管4三氯醋酸7.07.07.07.0葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液——