游離三碘甲狀腺原氨酸測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

游離三碘甲狀腺原氨酸測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1檢驗原理：采用兩步法免疫檢測，運用化學(xué)發(fā)光微粒子免疫檢測（CMIA）技術(shù)與靈活的檢測模式的結(jié)合，測定人血清和血漿中的游離（未結(jié)合）T3。第一步，將樣本和T3抗體包被的順磁微粒子混合。樣本中的T3（未結(jié)合型）與T3抗體包被的微粒子結(jié)合。沖洗后進(jìn)入第二步，加入吖啶酯標(biāo)記的T3結(jié)合物。隨后將預(yù)激發(fā)液和激發(fā)液加入反應(yīng)混合物中；測量化學(xué)發(fā)光反應(yīng)結(jié)果，以相對發(fā)光單位（RLUs）表示。樣本中的游離T3含量和ARCHITECTi光學(xué)系統(tǒng)檢測到的RLUs值之間成反比。2.試劑主要組成部分：2.1試劑盒微粒子：三碘甲狀腺原氨酸抗體（綿羊）包被的微粒子，儲存于含有綿羊IgG穩(wěn)定劑的2-（N-嗎啡啉）乙磺酸（MES）緩沖液中。最低濃度：0.085%固體物質(zhì)。防腐劑：抗菌劑。結(jié)合物：吖啶酯標(biāo)記的三碘甲狀腺原氨酸結(jié)合物，儲存于含有氯化鈉（NaCl）和聚乙二醇辛基苯基醚（TritonX-100）穩(wěn)定劑的檸檬酸鹽緩沖液中。最低濃度：0.33ng/mL.防腐劑：抗菌劑。2.2需要但未提供的試劑預(yù)激發(fā)液：預(yù)激發(fā)液含有1.32%（W/V）過氧化氫激發(fā)液：激發(fā)液含有0.35N氫氧化鈉濃縮清洗緩沖液：濃縮清洗緩沖液含有磷酸鹽緩沖液。防腐劑：抗菌劑。3.樣本要求：人血清（包括采集于血清分離管中的血清）或采集于肝素、肝素鋰或EDTA鉀抗凝管中的血漿。血清和血漿樣本中應(yīng)不含纖維蛋白、紅細(xì)胞或其他顆粒物質(zhì)。2-8℃可保存6天；-10℃以下可保存6個月。樣本應(yīng)避免反復(fù)凍融。4.檢驗方法：儀器法（詳見雅培i1000標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程）5.參考范圍樣本參考范圍（pg/ml）血清或血漿1.71-3.716.檢驗結(jié)果的解釋6.1游離三碘甲狀腺原氨酸項目通過四參數(shù)Logistic曲線擬合數(shù)據(jù)約簡法（4PLC,Y加權(quán)）生成一條校準(zhǔn)曲線6.2結(jié)果單位轉(zhuǎn)換：濃度（pg/mL）×1.536=濃度（pmol/L）7.檢驗方法的局限性7.1將檢測結(jié)果用于診斷時，應(yīng)與其他數(shù)據(jù)：如癥狀、其他甲狀腺檢查結(jié)果、臨床表現(xiàn)等結(jié)合使用。7.2游離T3檢測結(jié)果與臨床癥狀不符時，需要通過附加試驗來驗證檢測結(jié)果。7.3本項目尚未建立新生兒樣本的性能指標(biāo)。8.產(chǎn)品性能指標(biāo)8.1精密度：精密度≤10%8.2分析靈敏度：游離三碘甲狀腺原氨酸項目的分析靈敏度≤1.0pg/mL。8.3分析特異性：游離三碘甲狀腺原氨酸項目的平均分析特異性通過與其他物質(zhì)的交叉反應(yīng)率來評估，檢測含有1，000，000pg/mL甲狀腺素（T4）的樣本時產(chǎn)生的交叉反應(yīng)率＜10%8.5干擾性項目濃度干擾率血紅蛋白≤500mg/dL＜10%膽紅素≤20mg/dL＜10%甘油三酯≤2000mg/dL＜10%蛋白質(zhì)≤12g/dL＜10%8.6準(zhǔn)確度（相關(guān)性）：ARCHITECT游離三碘甲狀腺原氨酸項目與AxSYM游離三碘甲狀腺原氨酸項目比較的斜率為1.00±0.20，相關(guān)系數(shù)（r）≥0.90.9.臨床意義：3,5,3三碘甲狀腺原氨酸（T3）是一種甲狀腺激素，分子量為651道爾頓，在血清中的半衰期為1.5天。T3以游離型和蛋白結(jié)合型在血液中存在，這兩種形式呈動態(tài)平衡。T3與甲狀腺素結(jié)合球蛋白（TBG）、前白蛋白和白蛋白結(jié)合。對于T3在這些結(jié)合蛋白中的實際分布情況存在著爭議，估計在TBG中占38%-80%，在前白蛋白中占9%-27%，在白蛋白中占11%-35%。僅有0.2%-0.4%的總T3作為未結(jié)合型或游離T3存在于血液中。這部分游離型代表具有生理活性的甲狀腺激素?；加蠫rave病時，游離T3通常比游離甲狀腺素（T4）升高的幅度大。極少數(shù)情況下，大概有5%的甲狀腺功能亢進(jìn)患者會出現(xiàn)游離T3單獨升高的情況（T3型甲狀腺毒癥）。相反，患有毒性多結(jié)節(jié)性甲狀腺腫以及T4治療過量時，游離T4會比游離T3升高的幅度大。血清游離T3檢測可以鑒別診斷這些形式的甲狀腺功能亢進(jìn)。游離T3檢測也可用于監(jiān)測接受抗甲狀腺藥物治療的