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文檔簡介
接種及培養(yǎng)系列稀釋一接種培養(yǎng)二目錄頁食品中菌落總數(shù)測定程序步驟接種及培養(yǎng)1.系列稀釋:用1mL無菌吸管或微量移液器吸取1:10樣品勻液1mL,沿管壁緩慢注于盛有9mL稀釋液的無菌試管中,振搖試管或換用1支無菌吸管反復(fù)吹打使其混合均勻,制成1:100的樣品勻液。制備10倍系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋一次,換用1次1mL無菌吸管或吸頭。
25ml1ml檢樣225ml生理鹽水9ml生理鹽水食品中菌落總數(shù)測定程序步驟接種及培養(yǎng)2.接種培養(yǎng):選擇2個~3個適宜稀釋度的樣品勻液,吸取1mL樣品勻液于無菌平皿內(nèi),每個稀釋度做兩個平皿。同時,作空白對照。將46℃的平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基傾注平皿,并轉(zhuǎn)動平皿使其混合均勻。凝固后的平板翻轉(zhuǎn),36℃±1℃培養(yǎng)48h±2h。菌落計數(shù)菌落總數(shù)的計算方法一菌落總數(shù)的報告二目錄頁菌落總數(shù)的計算方法一1.一個稀釋度菌落數(shù)在計數(shù)范圍內(nèi)2.兩個連續(xù)稀釋度菌落數(shù)在計數(shù)范圍內(nèi)3.所有稀釋度菌落數(shù)均大于300CFU4.所有稀釋度菌落數(shù)均小于30CFU5.所有稀釋度均無菌落生長6.所有稀釋度均不在30~300CFU之間食品中菌落總數(shù)測定結(jié)果及報告菌落總數(shù)的計算方法1.只有一個稀釋度平板上的菌落數(shù)在適宜計數(shù)范圍內(nèi)計算兩個平板菌落數(shù)的平均值,再將平均值乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù),作為每g(mL)樣品中菌落總數(shù)結(jié)果。稀釋度及菌落數(shù)空白對照菌落總數(shù)/[cfu/g(mL)]報告方式/[cfu/g(mL)]10-110-210-3多不可計120,12425,28
0
122001.2×104食品中菌落總數(shù)測定結(jié)果及報告菌落總數(shù)的計算方法2.有兩個連續(xù)稀釋度的平板菌落數(shù)在適宜計數(shù)范圍內(nèi):稀釋度及菌落數(shù)空白對照菌落總數(shù)/[cfu/g(mL)]報告方式/[cfu/g(mL)]10-110-210-3多不可計246,25045,49
0
268182.7×104食品中菌落總數(shù)測定結(jié)果及報告菌落總數(shù)的計算方法3.所有稀釋度的平板上菌落數(shù)均大于300CFU:對稀釋度最高的平板進行計數(shù),其他平板可記錄為多不可計,結(jié)果按平均菌落數(shù)乘以最高稀釋倍數(shù)計算。稀釋度及菌落數(shù)空白對照菌落總數(shù)/[cfu/g(mL)]報告方式/[cfu/g(mL)]10-110-210-3多不可計多不可計320
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3200003.2×105食品中菌落總數(shù)測定結(jié)果及報告菌落總數(shù)的計算方法4.所有稀釋度的平板菌落數(shù)均小于30CFU:應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計算。稀釋度及菌落數(shù)空白對照菌落總數(shù)/[cfu/g(mL)]報告方式/[cfu/g(mL)]10-110-210-328121
0
2.8×102280食品中菌落總數(shù)測定結(jié)果及報告菌落總數(shù)的計算方法5.所有稀釋度(包括液體樣品原液)平板均無菌落生長:以小于1乘以最低稀釋倍數(shù)計算。稀釋度及菌落數(shù)空白對照菌落總數(shù)/[cfu/g(mL)]報告方式/[cfu/g(mL)]10-110-210-3000
0
<10<1×10食品中菌落總數(shù)測定結(jié)果及報告菌落總數(shù)的計算方法6.所有稀釋度的平板菌落數(shù)均不在30CFU~300CFU之間:其中一部分小于30CFU或大于300CFU時,則以最接近30CFU或300CFU的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計算。稀釋度及菌落數(shù)空白對照菌落總數(shù)/[cfu/g(mL)]報告方式/[cfu/g(mL)]10-110-210-3多不可計31015
0
3.1×10431000菌落總數(shù)的報告二1.菌落數(shù)小于100CFU2.菌落數(shù)小于100CFU3.所有平板上為蔓延菌落4.空白對照上有菌落生長5.單位報告食品中菌落總數(shù)測定結(jié)果及報告菌落總數(shù)的報告1.菌落數(shù)小于100CFU時,按“四舍五入”原則修約,以整數(shù)報告。2.菌落數(shù)大于或等于100CFU時,第3位數(shù)字采用“四舍五入”原則修約后,取前2位數(shù)字,后面用0代替位數(shù);也可用10的指數(shù)形式來表示,按“四舍五入”原則修約后,采用兩位有效數(shù)字。3.所有平板上為蔓延菌落而無法計數(shù),則報告菌落蔓延。
食品中菌落總數(shù)測定結(jié)果及報告菌落總數(shù)的報告4.空白對照上有菌落生長,則此次檢測結(jié)果無效。5.稱重取樣以CFU/g為單位報告,體積取樣以CFU/mL為單位報告。稀釋度及菌落數(shù)空白對照菌落總數(shù)/[cfu/g(mL)]報告方式/[cfu/g(mL)]10-110-210-3多不可計180,18440,42
3
無效培養(yǎng)基的制作加熱溶解一包扎滅菌二目錄頁食品中菌落總數(shù)測定程序步驟培養(yǎng)基的制備1.加熱溶解:平板計數(shù)瓊脂(platecountagar,PCA)1.1成分胰蛋白胨5.0g酵母浸膏2.5g葡萄糖1.0g瓊脂15.0g蒸餾水1000mLpH7.0±0.21.2制法將上述成分加于蒸餾水中,煮沸溶解,調(diào)節(jié)pH。分裝試管或錐形瓶,121℃高壓滅菌15min?;蛑苯訉⒏煞奂佑谡麴s水中,煮沸溶解,調(diào)節(jié)pH,分裝于試管或錐形瓶。食品中菌落總數(shù)測定程序步驟培養(yǎng)基的制備2.包扎滅菌:121℃高壓滅菌15min。無菌器材的準(zhǔn)備檢驗設(shè)備的準(zhǔn)備一無菌器皿的準(zhǔn)備二目錄頁食品中菌落總數(shù)測定程序步驟無菌器材的準(zhǔn)備1.檢驗設(shè)備的準(zhǔn)備:恒溫培養(yǎng)箱:36℃±1℃,30℃±1℃
恒溫水浴箱:46℃±1℃感量為0.1g均質(zhì)器振蕩器菌落計數(shù)器食品中菌落總數(shù)測定程序步驟無菌器材的準(zhǔn)備2.無菌器皿的準(zhǔn)備:無菌吸管:1mL(具0.01mL刻度)、10mL(具0.1mL刻度)或微量移液器及吸頭。無菌錐形瓶:容量250mL、500mL。無菌培養(yǎng)皿:直徑90mm。樣品的制備固體和半固體樣品的制備一液體樣品的制備二目錄頁食品中菌落總數(shù)測定程序步驟樣品的制備1.固體和半固體樣品的制備:固體和半固體樣品:稱取25g樣品置盛有225mL磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌均質(zhì)杯內(nèi),8000r/min~10000r/min均質(zhì)1min~2min,或放入盛有225mL稀釋液的無菌均質(zhì)
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