血液透析內(nèi)毒素檢測的意義

內(nèi)毒素檢測的臨床意義

----血液透析中內(nèi)毒素檢測的重要性熱原反應(yīng)熱原反應(yīng)是血液透析中常見的并發(fā)癥，發(fā)生率約在10％以下。因血液透析涉及環(huán)節(jié)諸多，往往難辨熱原反應(yīng)的直接發(fā)病因素，使防治措施難具針對性。熱原反應(yīng)特點:患者于透析開始1h左右，出現(xiàn)惡寒、寒顫，或伴惡心、嘔吐，體溫升至38℃左右。靜脈推注地塞米松2．5～5．0mg或肌肉注射非拉更25．0mg，30min后，癥狀消失，體溫逐漸降至正常。熱原反應(yīng)的相關(guān)因素透析器因素復(fù)用的透析器和血路管透析液和透析用水凈化劑和消毒劑:次氯酸鈉、雙氧水、氫氧化鈉等常用凈化劑，對透析膜有腐蝕作用，會增大膜孔徑甚至引起破膜；過氧乙酸是高效、廣譜、速效的消毒劑，但其化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定，消毒效果受配制濃度、儲藏時間和室溫的影響。透析機的消毒和使用:在需要連續(xù)工作十幾個小時的狀態(tài)下，兩班之間往往人為忽略消毒程序的運行，有造成醫(yī)源性交叉感染之嫌?；颊咦陨硪蛩?有些患者潛在感染，血液透析時血流動力學(xué)發(fā)生改變，加之肝素抗凝，容易造成局部感染擴散而在透析中出現(xiàn)寒顫、發(fā)熱等癥狀。透析患者并發(fā)敗血癥，也表現(xiàn)為透析中高熱、寒顫，而48％～72％的敗血癥是由血管通路感染引起的。內(nèi)毒素檢測的重要性因此，保證透析液微生物質(zhì)量是對現(xiàn)代血液透析的基本要求。血液透析中對內(nèi)毒素檢測勢在必行。使患者產(chǎn)生低血壓，肌肉痙攣，頭痛，發(fā)熱等癥狀，嚴重的可導(dǎo)致休克。而長期內(nèi)毒素刺激，會造成透析的長期并發(fā)癥如腕管綜合癥和慢性炎癥反應(yīng)等。尤其是內(nèi)毒素，由于其水解后可以穿過透析膜進入到患者的體內(nèi)，導(dǎo)致急性熱源性反應(yīng)。使用被微生物污染的透析用水和透析液可引起患者的多種急、慢性并發(fā)癥，直接影響患者的透析質(zhì)量和生存質(zhì)量，嚴重的甚至危及生命?！?/p>

2005年8月衛(wèi)生部頒布了委托中華醫(yī)學(xué)會制定的《血液透析器復(fù)用操作規(guī)范》中明確規(guī)定：

水質(zhì)要求：應(yīng)定期檢測復(fù)用用水細菌和內(nèi)毒素的污染程度。內(nèi)毒素含量不得超過2EU/ml，干預(yù)限度為1EU/ml。▲《中華人民共和國醫(yī)藥行業(yè)標準》YY0572-2005《血液透析和相關(guān)治療用水》（ISO13959：2002，MOD）中明確規(guī)定：在水處理裝置的輸出端的細菌內(nèi)毒素，應(yīng)不得超過1EU/ml；在血液透析裝置入口的輸送點上的細菌內(nèi)毒素不應(yīng)得超過5EU/ml?！吨腥A人民共和國醫(yī)藥行業(yè)標準》YY0598-2006《血液透析及相關(guān)治療用濃縮物》（ISO13958：2002，MOD）中明確規(guī)定：濃縮物以細菌內(nèi)毒素檢查用水配成透析液后，透析液細菌內(nèi)毒素含量應(yīng)小于0.5EU/ml。國家相關(guān)標準解讀

各國標準美國醫(yī)療儀器協(xié)會（AmericanAssociationofMedicalInstrument，AAMI/CDC）的標準：

細菌生長數(shù)：透析用水不超過200CFU/ml，透析液中不超過100CFU/ml。內(nèi)毒素濃度：透析用水和透析液中不超過0.25EU/ml。德國腎病協(xié)會建議標準：

透析用水：細菌生長數(shù)和內(nèi)毒素濃度分別不超過100CFU/ml、0.25EU/ml。透析液：細菌生長數(shù)和內(nèi)毒素濃度分別不超過1000CFU/ml、0.5EU/ml。歐洲藥典用水標準：

細菌生長數(shù)不超過100CFU/ml。內(nèi)毒素濃度不超過0.25EU/ml。

內(nèi)毒素的定義什么是內(nèi)毒素？內(nèi)毒素（Endotoxin,ET）是革蘭氏陰性細菌細胞壁的主要成分，其化學(xué)成分為脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS），由類脂A、核心寡聚糖O及多肽側(cè)鏈組成。體內(nèi)內(nèi)毒素的來源菌體死亡或人工裂解革蘭氏陰性桿菌的釋放腸道內(nèi)毒素的吸收敗血癥時血中細菌的釋放外源性輸入體內(nèi)內(nèi)毒素的來源

內(nèi)毒素的作用機理LPSLPS-LBP（LPS結(jié)合蛋白）LPS-SCO14（細胞膜上的受體）信號傳遞信號傳遞CD14+細胞（Mф，PMN，單核核細胞）CD14－細胞（上皮細胞等）吞噬作用殺菌活性一級介質(zhì)釋放粘附分子表達→細胞反應(yīng)TNF、IL-1IL-6、IL-8瀑布樣反應(yīng)，全身炎性反應(yīng)綜合癥急性炎癥PG、TXA、LTC、PAG、C5a、O2-、NO，彈力酶（二級介質(zhì)）膿毒綜合征（發(fā)熱、低溫、心動過速、尿少、酸中毒、低血壓）DIC內(nèi)毒素休克MOSF（多器官功能衰竭）死亡Shwartzman（什瓦茨曼現(xiàn)象）5內(nèi)毒素的生物學(xué)效應(yīng)

發(fā)熱反應(yīng)1白細胞反應(yīng)2內(nèi)毒素血癥（ETM）與內(nèi)毒素休克（ETS）3彌漫性血管內(nèi)凝血（DIC）4內(nèi)毒素檢測方法目前內(nèi)毒素檢測的方法主要有鱟試驗自動化動力學(xué)方法化學(xué)發(fā)光法光纖維生物傳感法毛細管電泳法ELISA結(jié)合免疫鱟試驗法

儀器簡介北京金山川科技發(fā)展有限公司MB-80SMB-80VMB-80DMB-80EMB-80M

MB－80微生物快速動態(tài)檢測系統(tǒng)

天津一瑞生物工程技術(shù)公司生產(chǎn)MB-80六大特點快速：1個小時完成檢測動態(tài)：動態(tài)檢測定量：定量檢測靈敏：內(nèi)毒素最低檢測量1pg/ml防干擾：檢測不受血中抗生素等的影響應(yīng)用范圍：血液透析液，透析用水,血液、尿液、腦積液、胸積液、腹水等

細菌內(nèi)毒素

因子C 活化因子C

因子B 活化因子B

凝固酶原 凝固酶

凝固蛋白原凝固蛋白（凝膠鱟試劑與內(nèi)毒素的反應(yīng)機理

儀器檢測原理：

動態(tài)比濁法：

動態(tài)定量檢測革蘭陰性菌可溶性抗原（脂多糖），系統(tǒng)通過測定生物試劑與檢測樣品中抗原抗體反應(yīng)生成濁度，采用動態(tài)比濁法，連續(xù)檢測濁度的變化建立時間（T）與微生物含量（C）關(guān)系的標準曲線，通過光電轉(zhuǎn)換原理，經(jīng)軟件系統(tǒng)分析得出具體檢測值，得出檢測樣品中含內(nèi)毒素含量。

檢測方法內(nèi)毒素/葡聚糖定量測定

MB－80微生物快速動態(tài)診斷分析儀天津一瑞生物工程技術(shù)公司生產(chǎn)1.血液標本的處理：抽取新鮮肝素抗凝血2ml，0.1ml血漿加0.9ml血液前處理液，放70℃水浴10min，取出后備用。2.取鱟試劑一支加處理后的血漿0.2ml放混勻器上振蕩30秒.3.放入檢測器，1小時后報告結(jié)果。內(nèi)毒素檢測的臨床意義正常參考值：正常人血漿內(nèi)毒素含量<10pg/ml。10-20pg/ml：不能確定有感染，為病變觀察期，需根據(jù)病情連續(xù)監(jiān)測2-3次才可確認。

那種病人