臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢2011.91

臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢主

要內(nèi)容標(biāo)本采集的意義和原則標(biāo)本的運(yùn)送與拒收原則血液標(biāo)本采集尿標(biāo)本采集糞便標(biāo)本采集痰標(biāo)本采集咽拭子標(biāo)本采集臨床感染性疾病的診斷和治療應(yīng)用良好的檢測(cè)技術(shù)和方法，提供準(zhǔn)確的結(jié)果或報(bào)告正確規(guī)范的采集和運(yùn)送標(biāo)本正確地選擇檢查目的和方法

標(biāo)本采集是指采集患者體內(nèi)的一小部分血液、體液、排泄物、分泌物以及組織細(xì)胞等標(biāo)本進(jìn)行檢驗(yàn)，以反映機(jī)體正常的生理現(xiàn)象和病理改變。

標(biāo)本采集

標(biāo)本采集標(biāo)本采集正確與否與檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性有密切的關(guān)系因此，我們應(yīng)掌握正確的標(biāo)本采集方法。協(xié)助明確疾病診斷推測(cè)病程進(jìn)展

制定治療措施觀察病情標(biāo)本采集的意義

遵照醫(yī)囑充分準(zhǔn)備

嚴(yán)格查對(duì)

正確采集

及時(shí)送檢標(biāo)本采集的原則一、按醫(yī)囑采集標(biāo)本醫(yī)生填寫檢驗(yàn)申請(qǐng)單檢驗(yàn)單應(yīng)標(biāo)明姓名、性別、住院號(hào)、床號(hào)、標(biāo)本種類、檢驗(yàn)?zāi)康暮退蜋z日期等。二、評(píng)估(充分準(zhǔn)備、嚴(yán)格查對(duì))Ⅰ采集標(biāo)本前應(yīng)先評(píng)估患者的病情、心理反應(yīng)與合作程度。Ⅱ根據(jù)檢驗(yàn)?zāi)康倪x擇相應(yīng)的標(biāo)本容器Ⅲ在容器外貼上檢驗(yàn)單的副聯(lián)二、評(píng)估(充分準(zhǔn)備、嚴(yán)格查對(duì))Ⅳ向患者解釋采集標(biāo)本的目的方法、以消除顧慮，取得合作。Ⅴ采集時(shí)認(rèn)真核對(duì)床號(hào)、姓名、檢驗(yàn)項(xiàng)目等三、掌握正確的標(biāo)本采集方法

為保證標(biāo)本的質(zhì)量，獲得陽性結(jié)果，應(yīng)掌握正確的標(biāo)本采集方法、采集量和采集時(shí)間并應(yīng)及時(shí)送檢，特殊標(biāo)本還需注明采集時(shí)間。四、及時(shí)送檢采集標(biāo)本后應(yīng)及時(shí)送檢，一般情況下，用于細(xì)菌培養(yǎng)的標(biāo)本保存時(shí)間不應(yīng)超過24h，最好2h內(nèi)能送檢，越快越好，以保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。標(biāo)本的運(yùn)送原則①所有的標(biāo)本都必須立即送往實(shí)驗(yàn)室，最好在2h內(nèi),保存時(shí)間不應(yīng)超過24h.②最佳的臨床標(biāo)本送檢首先取決于所獲取標(biāo)本的量.量少的標(biāo)本應(yīng)在采集后15-30min內(nèi)送檢.③對(duì)環(huán)境敏感的微生物如志賀菌、奈瑟氏菌和流感嗜血桿菌（對(duì)低溫敏感）應(yīng)立即處理，禁止冷藏脊髓液和生殖道、眼部、內(nèi)耳道標(biāo)本。標(biāo)本的拒收原則無標(biāo)簽不檢測(cè)，并與送檢的醫(yī)生和護(hù)士聯(lián)系。送檢延誤

不接收，提醒送檢者，要求重新采集。送檢容器不當(dāng)或滲漏不接收，告知送檢者，要求重新采集。標(biāo)本的拒收原則標(biāo)本不符合要求

不接收，聯(lián)系送檢者，指出不符合要求之處，要求重新采集符合試驗(yàn)要求的標(biāo)本.同一天內(nèi)收到同一檢測(cè)目的的相同標(biāo)本（血液標(biāo)本除外）不檢測(cè)，與送檢者聯(lián)系并說明標(biāo)本重復(fù)不予處理，并在報(bào)告單上注明標(biāo)本拒收原則制訂的目的我們必須重視標(biāo)本的質(zhì)量，對(duì)不規(guī)范采集、保存和運(yùn)送的標(biāo)本要采取糾正措施。如果檢測(cè)不合格的標(biāo)本，那么得出的結(jié)果會(huì)給醫(yī)生提供錯(cuò)誤的信息，導(dǎo)致誤診和治療不當(dāng)。因此，實(shí)驗(yàn)室必須制訂并嚴(yán)格執(zhí)行標(biāo)本接收和拒收準(zhǔn)則

臨床常見標(biāo)本血液（生化、免疫及微生物檢驗(yàn)）尿液糞便痰及上呼吸道標(biāo)本穿刺液標(biāo)本（腦脊液、膽汁、胸腹水等）膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標(biāo)本生殖道標(biāo)本組織標(biāo)本血標(biāo)本檢驗(yàn)的意義血液是臨床最常見的檢驗(yàn)項(xiàng)目它可以反映血液系統(tǒng)本身的病變還可判斷病人病情進(jìn)展程度為治療疾病提供參考。血標(biāo)本采集方法（一）靜脈血標(biāo)本（最常用）（二）動(dòng)脈血標(biāo)本(血?dú)夥治?（三）毛細(xì)血管標(biāo)本（血常規(guī)）靜脈血標(biāo)本分類及目的全血標(biāo)本血清標(biāo)本血培養(yǎng)標(biāo)本血沉、血常規(guī)、凝血機(jī)制檢測(cè)等血清酶、脂類、電解質(zhì)、肝功能血中的致病菌靜脈血采集操作步驟及要點(diǎn)

攜用物至床邊，核對(duì)床號(hào)、姓名、解釋戴手套，選擇靜脈，常規(guī)系止血帶、消毒皮膚，囑患者握拳行靜脈穿刺、取血、松止血帶、囑患者松拳、按壓針眼、迅速拔針穿刺點(diǎn)按壓2～3min血液注入標(biāo)本瓶?jī)?nèi)方法血清標(biāo)本：

取下針頭，將血液順試管壁緩慢注入干燥試管（最常用）內(nèi)。

注入血標(biāo)本的方法注意事項(xiàng)（1）嚴(yán)禁在輸液、輸血的針頭處抽取標(biāo)本，以免影響檢驗(yàn)結(jié)果。（最好在對(duì)側(cè)采集）注意事項(xiàng)（2）若同時(shí)抽取幾個(gè)項(xiàng)目的血標(biāo)本，一般注入容器的順序?yàn)椋貉囵B(yǎng)瓶→抗凝瓶→干燥試管.動(dòng)作要迅速準(zhǔn)確，避免溶血。血標(biāo)本的微生物學(xué)檢查1.采血時(shí)間及次數(shù)：一般應(yīng)在抗生素治療前，發(fā)熱初期或高峰時(shí)抽血。傷寒患者應(yīng)在發(fā)熱1-2周內(nèi)抽血化膿性腦膜炎、鼠疫或野兔熱患者應(yīng)在發(fā)熱1-2d內(nèi)抽血急性敗血癥應(yīng)在24小時(shí)內(nèi)抽血3次或更多次，并可在不同部位，如左、右手臂或頸部

采血時(shí)間及次數(shù)不明原因發(fā)熱應(yīng)不定期多次、多部位采樣送檢。24小時(shí)內(nèi)不超過3次，如培養(yǎng)陰性應(yīng)繼續(xù)采樣送檢

急性心內(nèi)膜炎應(yīng)在治療前1-2小時(shí)內(nèi)分別在3個(gè)不同部位抽血，分別進(jìn)行培養(yǎng)。亞急性心內(nèi)膜炎及布魯菌感染的患者，除在發(fā)熱采血外，并要多次抽血（24h內(nèi)3-4次）和增加抽血量（可增至10ml）。

血標(biāo)本2.抽血部位及抽血量

以無菌方法從患者肘靜脈采血。采血量以培養(yǎng)基的1/5~1/10為宜，成人一次采血5-10ml，兒童3-5ml，嬰兒為1-2ml。血液抽出后，立即以無菌手續(xù)注入血培養(yǎng)瓶，充分混合后送檢。骨髓標(biāo)本的微生物學(xué)檢查

采集部位：骨髓穿刺法從髂骨采集標(biāo)本。

采集時(shí)間：在用藥前、發(fā)熱初期或高熱期

當(dāng)骨髓炎時(shí)或長(zhǎng)期使用抗菌藥物患者，抽取骨髓培養(yǎng)陽性率遠(yuǎn)高于血液培養(yǎng)

全自動(dòng)血培養(yǎng)儀BacT/Alert120培養(yǎng)基的選擇：

普通需氧培養(yǎng)瓶：采血量4ml,用于未使用抗菌素患者的需氧培養(yǎng)。主要用于小兒。

建議不管患者是否使用過抗生素，是做細(xì)菌培養(yǎng)還是真菌培養(yǎng)成人采血量5ml小兒

采血量4ml注意事項(xiàng)

①嚴(yán)格做好患者抽血部位的無菌操作。嚴(yán)禁在輸液、輸血的針頭處抽取標(biāo)本，以免影響檢驗(yàn)結(jié)果（要在對(duì)側(cè)采集）。②注入標(biāo)本后的血培養(yǎng)瓶務(wù)必立即送至臨床細(xì)菌室，如因某種原因不能立即送檢時(shí)，應(yīng)將已接種樣本的培養(yǎng)瓶放在室溫，切勿放冰箱存放。

注意事項(xiàng)③每次領(lǐng)培養(yǎng)瓶不宜過多，以防過期，未使用的培養(yǎng)瓶亦應(yīng)室溫保存（15-30℃），切勿放冰箱保存。

二、尿液標(biāo)本的采集

留取尿液標(biāo)本作物理、化學(xué)、細(xì)菌和顯微鏡等檢查以助診斷和觀察療效。尿液標(biāo)本采集時(shí)間：

一般原則

通常應(yīng)采集晨起第一次尿液送檢。原則上應(yīng)選擇在抗菌藥物應(yīng)用之前采集尿液。尿液標(biāo)本的采集時(shí)間結(jié)核分枝桿菌感染

留取晨尿或24小時(shí)尿的沉渣部分10-15ml作涂片檢查，若為培養(yǎng)，患者應(yīng)停藥1-2天后再采樣，以提高陽性率

沙門菌、鉤端螺旋體感染

感染后2周左右采集

采集方法

中段尿采集方法（最常用）集尿法結(jié)核分枝桿菌檢查時(shí)，可用一清潔容器，留24小時(shí)尿取其沉渣10-15ml送檢導(dǎo)尿法、腎盂尿采集法、膀胱穿刺采集法中段尿采集方法

女性：成年女性外陰部先以肥皂水清洗，再以無菌水沖洗，然后排尿棄去前段尿，留取中段尿10ml左右于無菌試管內(nèi)送檢

男性：先用肥皂水清洗尿道口，后用清水沖洗，留取中段尿

兒童、嬰兒：先以無菌生理鹽水清洗外陰部或外生殖器，將無菌試管對(duì)準(zhǔn)尿道口，待尿排出后送檢

注意事項(xiàng)

嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，因?yàn)槟蛞簶?biāo)本的采集和培養(yǎng)中最大的問題是污染雜菌

通常應(yīng)取晨起第一次尿液送檢

多數(shù)藥物均通過尿液排泄，因此采集尿液應(yīng)在用藥前進(jìn)行

三、糞便標(biāo)本的采集收集糞便標(biāo)本，做實(shí)驗(yàn)室檢查，有助于評(píng)估病人排泄功能及準(zhǔn)確評(píng)估疾病。糞便標(biāo)本采集時(shí)間：

1．采樣原則

腹瀉病人應(yīng)在急性期采集（3天以內(nèi)），以提高檢出率，亦最好在用藥之前。2．沙門菌感染

腸熱癥在2周以后；胃腸炎病人在急性期，早期采集新鮮糞便

采集方法

自然排便采集法

自然排便后，挑取其膿血、粘液部分2-3g，液狀糞便取絮狀物2-3ml，盛于滅菌容器內(nèi)或保存液中送檢

直腸拭子方法

如不易獲得糞便時(shí)，或排泄困難的患者及嬰兒，可用直腸拭子采取，即以無菌棉拭子用生理鹽水濕潤(rùn)后，插入肛門內(nèi)4-5cm（幼兒2-3cm）輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)取出，插入無菌試管內(nèi)送檢。注意事項(xiàng)

雖糞便含有多種雜菌，但應(yīng)盡量采用無菌容器（一次性無菌平皿）。

為提高檢出率，要采集新鮮糞便作培養(yǎng)，且應(yīng)挑取其膿血、粘液部分。

四、痰及上呼吸道標(biāo)本的采集采集痰標(biāo)本作細(xì)菌培養(yǎng)，或涂片后經(jīng)特殊染色以檢查細(xì)菌、真菌或抗酸桿菌等，以助診斷；從咽部及扁桃體采取分泌物作細(xì)菌培養(yǎng)或病毒分離痰及上呼吸道標(biāo)本

采集時(shí)間:痰：一般以晨痰為好；支氣管擴(kuò)張癥患者，清晨起床后進(jìn)行體位引流，可采集大量痰標(biāo)本。咽拭標(biāo)本：時(shí)間上雖無嚴(yán)格限制，但應(yīng)于抗菌藥物治療前為好。咽部又是呼吸和食物的通路，因此亦以晨起后采集為宜

采集方法：

痰液標(biāo)本：

自然咳痰法：患者清晨起床后，先用朵貝爾氏液（復(fù)方硼砂溶液）漱口，再以開水或生理鹽水漱口，以減少口腔常居菌群的污染，然后用力自氣管深部咳出第一口痰于無菌痰懷內(nèi)送檢

采集方法：小兒取痰法：用壓舌板向后壓舌，用棉拭子伸入咽部，小兒經(jīng)壓舌刺激咳嗽時(shí)，可噴出肺部或氣管分泌物粘在拭子上，送檢

采集方法：

上呼吸道標(biāo)本（咽拭子）

采集上呼吸道標(biāo)本通常采用無菌棉拭子。采集前患者應(yīng)用開水或生理鹽水反復(fù)漱口，由檢查者將舌向外拉，使腭垂盡可能向外牽引，將棉拭子通過舌根到咽后壁或腭垂的后側(cè)，涂抹數(shù)次，但拭子要避免接觸口腔和舌粘膜

注意事項(xiàng)：

1．

采集標(biāo)本以清晨為佳，以減少口腔正常菌群的污染，采集前先用漱口液充分漱口。2．

做結(jié)核分枝桿菌和真菌培養(yǎng)的標(biāo)本若不能及時(shí)送檢，應(yīng)放4℃冰箱保存，以免雜菌生長(zhǎng)。（血培養(yǎng)瓶室溫）3．

作結(jié)核分枝桿菌檢查，痰量要多或留取24小時(shí)痰液，以提高陽性檢出率。穿刺液標(biāo)本

腦脊液

采集時(shí)間：

懷疑為腦