經(jīng)穴臟腑相關(guān)的現(xiàn)代神經(jīng)機(jī)制

經(jīng)穴臟腑相關(guān)的現(xiàn)代神經(jīng)機(jī)制

經(jīng)絡(luò)與腸道的關(guān)系是中醫(yī)經(jīng)絡(luò)理論的核心，是世界上首次提出的身體和腸道相互作用，引起了國(guó)內(nèi)外中西醫(yī)學(xué)術(shù)界的關(guān)注。祖國(guó)醫(yī)學(xué)認(rèn)為“夫十二經(jīng)脈者內(nèi)屬于府藏,外絡(luò)于肢節(jié)”。對(duì)于祖國(guó)醫(yī)學(xué)的該論述,現(xiàn)代科學(xué)雖有“體表內(nèi)臟相關(guān)”報(bào)告,但卻有悖現(xiàn)代神經(jīng)科學(xué)知識(shí)。現(xiàn)代神經(jīng)科學(xué)已知,體表與內(nèi)臟組織的感覺體驗(yàn)分別通過(guò)軀體感覺傳導(dǎo)束和內(nèi)臟感覺傳導(dǎo)束傳向中樞神經(jīng)系統(tǒng),并且強(qiáng)調(diào)這兩種已知的經(jīng)典傳導(dǎo)束涇渭分明、互不相干。因此為了了解中醫(yī)的經(jīng)穴臟腑相關(guān)或西醫(yī)的體表內(nèi)臟相關(guān)的科學(xué)機(jī)制,需要發(fā)現(xiàn)既能傳導(dǎo)體表感覺又能傳導(dǎo)內(nèi)臟感覺的匯聚性雙覺傳導(dǎo)束,才能將來(lái)自體表穴位的針刺/針感信號(hào)與來(lái)自臟腑/內(nèi)臟的感覺信號(hào)傳到中樞神經(jīng)系統(tǒng),并在那里發(fā)生匯聚與相互作用,實(shí)現(xiàn)針刺對(duì)內(nèi)臟的影響。為了驗(yàn)證這一假說(shuō),本項(xiàng)研究按照中西醫(yī)結(jié)合、臨床基礎(chǔ)結(jié)合、形態(tài)機(jī)能結(jié)合等研究原則,綜合應(yīng)用基礎(chǔ)研究及臨床觀測(cè)等現(xiàn)代多學(xué)科實(shí)驗(yàn)技術(shù),在正常動(dòng)物與內(nèi)臟痛動(dòng)物模型上,發(fā)現(xiàn)和鑒定既能傳導(dǎo)體表感覺又能傳導(dǎo)內(nèi)臟感覺的匯聚性雙覺傳導(dǎo)束,觀測(cè)針刺體表穴位或刺激軀體神經(jīng)對(duì)內(nèi)臟痛的影響,檢測(cè)兩類感覺信號(hào)在有關(guān)匯聚性脊髓感覺神經(jīng)元和匯聚性脊神經(jīng)節(jié)感覺神經(jīng)元上的匯聚與相互作用,進(jìn)而檢測(cè)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)體系NMDAR-PKC-NO對(duì)軀體內(nèi)臟(經(jīng)穴臟腑)相關(guān)的影響、借以揭示經(jīng)穴臟腑相關(guān)/體表內(nèi)臟相關(guān)的現(xiàn)代科學(xué)基礎(chǔ);并據(jù)以提出提高臨床針效的分子策略。1dcps神經(jīng)元/傳導(dǎo)束將辣根過(guò)氧化物酶(HRP)凝膠直接埋置于動(dòng)物的高位背索斷端,借以選擇性地單獨(dú)標(biāo)記只經(jīng)背索上行的DCPS神經(jīng)元。結(jié)果表明,貓的這種神經(jīng)元除主要分布于背角IV層外,在VII層內(nèi)側(cè)部也較為集中;猴的DCPS神經(jīng)元除集中分布于III-IV層外,還有少量神經(jīng)元散在于V、VI、VII、X層以及背外側(cè)白質(zhì),僅在貓或猴的腰膨大處背角,這種HRP標(biāo)記的DCPS細(xì)胞即達(dá)千余個(gè)。這個(gè)數(shù)字與貓的SCT神經(jīng)元數(shù)目相當(dāng)。猴具有DCPS神經(jīng)元的事實(shí),提示人類也很可能存在這種神經(jīng)元。在充分分離與隔離制備的標(biāo)本上,用逆向激動(dòng)技術(shù)鑒定出了120個(gè)DCPS神經(jīng)元,其中只對(duì)低閾非傷害性刺激發(fā)生反應(yīng)的低閾機(jī)械感受型(lowthresholdmechaorecptive,LTM)神經(jīng)元和既對(duì)低閾刺激又對(duì)高閾傷害性刺激發(fā)生反應(yīng)的廣動(dòng)力范圍型(widedynamicrafige,WDR)神經(jīng)元,各占半數(shù)。兩類DCPS神經(jīng)元均接受外周II類傳入,其軸突的傳導(dǎo)速度平均為45m/s,直徑亦相當(dāng)于II類纖維,提示DCPS神經(jīng)元具有非丘系的性質(zhì)。在細(xì)胞內(nèi)記錄的基礎(chǔ)上,進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)HRP染色的結(jié)果觀察到DCPS神經(jīng)元的樹突有四種三維構(gòu)型,并與生理分型有一定相關(guān)關(guān)系;細(xì)胞內(nèi)染色的另一重要發(fā)現(xiàn)是2/3的DCPS神經(jīng)元的軸突自胞體或近胞體樹突發(fā)出后立即再發(fā)出一個(gè)以上的局部軸突側(cè)支,在該細(xì)胞的樹突樹范圍內(nèi)反復(fù)地廣泛分支。這種極其發(fā)達(dá)的局部軸突側(cè)支,同局部的有關(guān)細(xì)胞構(gòu)成突觸或回返性聯(lián)系,從而使作為投射性神經(jīng)元的DCPS神經(jīng)元,也具有中間神經(jīng)元的作用。對(duì)細(xì)胞內(nèi)HRP染色或HRP逆行標(biāo)記的DCPS神經(jīng)元進(jìn)行5-羥色胺(5-HT)免疫細(xì)胞化學(xué)染色時(shí)觀察到,幾乎每一個(gè)貓和猴DCPS的細(xì)胞體或近胞體樹突上,均有5-HT陽(yáng)性軸突膨體與之構(gòu)成接觸;電鏡下可見,這些5-HT陽(yáng)性軸突膨體內(nèi)含有橢圓形或圓形的無(wú)顆粒囊泡,并與DCPS細(xì)胞構(gòu)成對(duì)稱性突觸。進(jìn)一步用微電泳技術(shù)證明,5-HT能明顯抑制DCPS細(xì)胞對(duì)谷氨酸的興奮性反應(yīng),提示DCPS接受腦干5-HT能神經(jīng)元的抑制性支配。2脊孤束-sst神經(jīng)元/通路束用刺激孤束核逆行激動(dòng)大鼠脊髓背角細(xì)胞的方法,在腰骶髓背角III-V層觀察到逆向反應(yīng)細(xì)胞,提示孤束核作為內(nèi)臟感覺核,還從脊髓接受體感信息。我們將這類細(xì)胞正式命名為脊孤束(SST)神經(jīng)元或通路。SST神經(jīng)元的軸突屬Aδ纖維。有趣的是,在SST神經(jīng)元逆向反應(yīng)之后,還跟著出現(xiàn)一個(gè)或多個(gè)突觸后反應(yīng),提示SST神經(jīng)元除作為上行投射系統(tǒng)向孤束核投射傳遞感覺信息外,還反過(guò)來(lái)從孤束核接受下行支配信息,從而形成一種正反饋環(huán)路,SST向孤束核傳遞信息被放大而更臻于精確。將10%HRP微電泳導(dǎo)人大白鼠的一側(cè)孤束核后,在脊髓頸、胸、腰、骶各節(jié)段脊髓灰質(zhì)內(nèi)均觀察到HRP標(biāo)記細(xì)胞,并多見于注射部位的同側(cè),以板層III-VI分布最多。3脊頸束-背索突變后sct/dcps神經(jīng)元/傳導(dǎo)束在氯醛糖麻醉貓上用微電極對(duì)脊髓背角神經(jīng)元進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)記錄,觀察其對(duì)刺激外頸核(LCN)和背索核(DCN)的反應(yīng)。從腰膨大水平背角Ⅲ-Ⅳ層共記錄到49個(gè)神經(jīng)元既對(duì)LCN刺激又對(duì)DCN刺激發(fā)生反應(yīng)這些結(jié)果提示;(1)脊頸束/背索突觸后(SCT/DCPS)神經(jīng)元發(fā)出Aδ纖維的軸突向LCN和STN雙重投射;(2)一些SCT/DCPS神經(jīng)元既從LCN又從DCN接受下行傳入支配;(3)另一些脊髓投射神經(jīng)元和中間神經(jīng)元受來(lái)自LCN和DCN的下行纖維雙重支配;(4)來(lái)自軀體和內(nèi)臟的傳入感覺信息在SCT/DCPS神經(jīng)元上發(fā)生匯聚和相互作用。結(jié)果提示SCT-DCPS神經(jīng)元/傳導(dǎo)束屬非丘系也接受/傳導(dǎo)內(nèi)臟覺。4sst-dcps神經(jīng)元/sst-dcps神經(jīng)元/sst-dcps已知脊髓背角與背索核(DCN)之間存在由背角到DCN和由DCN至背角的雙向投射;脊髓背角與孤束核(STN)之間也存在交互支配關(guān)系,同一個(gè)脊髓背角細(xì)胞是否象SCT-DCPS神經(jīng)元那樣同時(shí)向STN和DCN雙重投射呢?在麻醉大鼠上,應(yīng)用電刺激STN和DCN以及細(xì)胞內(nèi)記錄技術(shù),在腰髓背角III-V層,記錄到既對(duì)STN刺激又對(duì)DCN刺激發(fā)生典型逆向反應(yīng)的神經(jīng)元,我們稱之為SST-DCPS神經(jīng)元。有些SST-DCPS神經(jīng)元還對(duì)STN和/或DCN的刺激發(fā)生突觸反應(yīng),提示SST-DCPS神經(jīng)元在支配STN和DCN的同時(shí),還接受STN和/或DCN的支配,從而在SST-DCPS神經(jīng)元與STN和/或DCN之間構(gòu)成某種交互支配或相反投射的聯(lián)系。由于這種交互支配引起的反應(yīng)是雙向興奮,提示SSTDCPS神經(jīng)元與STN和/或DCN之間是一種正反饋聯(lián)系。應(yīng)用熒光雙標(biāo)記法,分別在STN和DCN注射PI和Bb兩種不同的熒光染料,在大鼠注射同側(cè)腰髓背角III-V層,可見到PI-Bb雙標(biāo)細(xì)胞,它們的胞漿由注入STN的PI標(biāo)記呈棕紅色,胞核則由注入DCN內(nèi)的Bb標(biāo)記呈淡蘭色,色彩對(duì)比十分鮮明,從而為SST-DCPS的存在提供了形態(tài)學(xué)證據(jù)。在細(xì)胞內(nèi)記錄的基礎(chǔ)上,將微電極內(nèi)的HRP注入該細(xì)胞,再經(jīng)細(xì)胞內(nèi)染色所顯示的胞體和樹突樹分布表明,SST-DCPS神經(jīng)元的微細(xì)構(gòu)造相當(dāng)于DCPS神經(jīng)元的B型與D型。5脊頸束-脊孤束-sct/sst神經(jīng)元/stn信號(hào)神經(jīng)元/傳導(dǎo)束在氯醛糖麻醉貓上用微電極對(duì)脊髓背角神經(jīng)元進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)記錄,觀察其對(duì)刺激外頸核(LCN)和孤束核(STN)的反應(yīng)。從腰膨大水平背角Ⅲ-Ⅳ層共記錄到49個(gè)神經(jīng)元既對(duì)LCN刺激又對(duì)STN刺激發(fā)生反應(yīng)該結(jié)果提示:(1)脊頸束/脊孤束(SCT/DCPS)神經(jīng)元發(fā)出Aδ纖維的軸突向LCN和STN雙重投射;(2)一些SCT/DCPS神經(jīng)元既從LCN又從STN接受傳入支配;(3)另一些脊髓投射神經(jīng)元和中間神經(jīng)元受來(lái)自LCN和STN的下行纖維雙重支配;(4)來(lái)自軀體和內(nèi)臟的感覺傳入信息在SCT/DCPS神經(jīng)元上發(fā)生匯聚和相互作用。以上結(jié)果曾作過(guò)多篇總結(jié)6sst-dcps神經(jīng)元/傳導(dǎo)束應(yīng)用順向激動(dòng)和細(xì)胞內(nèi)記錄技術(shù)觀察到,傳統(tǒng)的內(nèi)臟感覺核也接受軀體感覺信息,SST神經(jīng)元對(duì)電刺激足三里穴和孤束核均可發(fā)生順向反應(yīng),提示SST神經(jīng)元接受軀體傳入信息,并將其傳遞到內(nèi)臟感覺核團(tuán)-孤束核;SST神經(jīng)元也可從孤束核接受內(nèi)臟感覺信息;上行的軀體傳入信息與下行的內(nèi)臟傳入信息可在SST神經(jīng)元上匯聚。50個(gè)DCPS神經(jīng)元的細(xì)胞內(nèi)記錄中,約近半數(shù)的神經(jīng)元對(duì)單個(gè)逆向刺激只發(fā)生逆向鋒電位;其余的半數(shù)神經(jīng)元除發(fā)生單個(gè)逆向反應(yīng)外,還接著出現(xiàn)興奮性和抑制性突觸后電位,提示進(jìn)入脊髓的初級(jí)傳入除上行成為經(jīng)典的脊丘系外,還在背角處與DCPS神經(jīng)元構(gòu)成突觸聯(lián)系。在用雙重激動(dòng)和胞內(nèi)記錄技術(shù)鑒定出SST-DCPS神經(jīng)元的基礎(chǔ)上,應(yīng)用外周神經(jīng)電刺激和皮膚感受野自然刺激、數(shù)字式囊壓裝置擴(kuò)張以刺激降結(jié)腸等方法觀察到,SST-DCPS神經(jīng)元既對(duì)軀體刺激發(fā)生反應(yīng),又對(duì)內(nèi)臟刺激反應(yīng);SSTDCPS神經(jīng)元除分別對(duì)內(nèi)臟和軀體感受野自然刺激發(fā)生反應(yīng)外,也可對(duì)軀體和內(nèi)臟神經(jīng)電刺激發(fā)生反應(yīng)。采用跨神經(jīng)節(jié)潰變與HRP和WGA-HRP酶標(biāo)技術(shù),觀察到來(lái)自膀胱的內(nèi)臟傳入與來(lái)自坐骨神經(jīng)的軀體傳入均終止在脊髓L4-S2節(jié)段的同一后連合核(DCN)區(qū)。應(yīng)用條件-檢驗(yàn)刺激技術(shù)觀察時(shí)間依賴性抑制現(xiàn)象,研究傳入信息相互作用。用1.5~3倍閾刺激強(qiáng)度的電脈沖交替刺激麻醉、麻痹大鼠的盆神經(jīng)(Pe)和陰部神經(jīng)(Pu),以玻璃微電極在L6-S1節(jié)段脊髓背角匯聚神經(jīng)元上記錄細(xì)胞外放電發(fā)現(xiàn),對(duì)Pu檢驗(yàn)反應(yīng)產(chǎn)生抑制的刺激間期長(zhǎng)于以Pu為條件刺激對(duì)Pe檢驗(yàn)反應(yīng)的間期。7nmda受體的應(yīng)用在脊髓背角用細(xì)胞外記錄技術(shù)記錄到,角叉菜膠一側(cè)足底注射致炎后,電刺激該側(cè)足底內(nèi)外側(cè)神經(jīng)激動(dòng)其中A、C纖維時(shí)發(fā)現(xiàn),角又菜膠致炎導(dǎo)致脊髓背角神經(jīng)元興奮性升高和Windup;NMDA受體參與炎癥痛和Windup形成。在實(shí)驗(yàn)大鼠足底注射角叉菜膠后,脊髓背角神經(jīng)元發(fā)生敏感化,自發(fā)放電及對(duì)傷害性刺激反應(yīng)明顯增強(qiáng)。背角局部經(jīng)微透析給予蛋白激酶C(PKC)非特異性抑制劑氯丙嗪或特異性抑制劑H-7后,自發(fā)及誘發(fā)反應(yīng)均明顯回降,提示PKC激活參與中樞敏感化的形成與維持。用微透析的方法在麻醉麻痹大鼠的脊髓局部應(yīng)用NO供體亞硝基鐵氰化鈉(SNP),以碳絲微電極在腰膨大處記錄細(xì)胞外放電,觀察NO對(duì)機(jī)械刺激大鼠后足部皮膚引起的誘發(fā)反應(yīng)和自發(fā)反應(yīng)的影響。結(jié)果提示不同濃度的NO供體SNP對(duì)非傷害性機(jī)械刺激和傷害性機(jī)械刺激信息傳遞的作用不同;一定濃度的SNP促進(jìn)脊髓自發(fā)放電。大鼠一足用角叉菜膠致炎,痛閾顯著降低后,腹腔注射NMDA受體的非競(jìng)爭(zhēng)性拮抗劑氯胺酮,致炎足痛閾顯著升高;角叉菜膠與氯胺酮同時(shí)給藥組的痛閾幅值升高更為明顯而持久。結(jié)果提示:NMDA受體參與炎癥痛的形成和發(fā)展;提前給予其拮抗劑氯胺酮可提高鎮(zhèn)痛效應(yīng),延緩體表炎癥痛的發(fā)展過(guò)程。觀察大鼠一足角叉菜膠致炎后腹腔注射NMDA受體競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑CGP37849、激動(dòng)劑NMDA與先注射上述藥物后致炎組大鼠致炎足與非致炎足痛閾的變化。前一組致炎后,致炎足痛閾降低,非致炎足痛閾升高。腹腔給藥后,致炎足分別表現(xiàn)為痛閾的回升和進(jìn)一步下降。非致炎足分別表現(xiàn)為痛閾進(jìn)一步增高和降低。后一組致炎后,致炎足痛閾分別表現(xiàn)為輕度下降、明顯下降和降低。非致炎足痛閾分別表現(xiàn)為輕度增高、下降和增高。結(jié)果提示,NMDA受體激動(dòng)劑有助于致炎局部痛敏的發(fā)生和發(fā)展,減弱遠(yuǎn)隔部位的傷害性反應(yīng);NMDA受體拮抗劑則減弱致炎局部的痛敏程度,增強(qiáng)遠(yuǎn)隔部位的抗傷害性反應(yīng)。觀察大鼠一足福爾馬林致炎后,PKC非特異性抑制劑氯丙嗪在組織損傷所致痛覺過(guò)敏中的作用。福爾馬林足底皮下注射使大鼠產(chǎn)生疼痛的早期反應(yīng)和遲發(fā)反應(yīng)(痛覺過(guò)敏),氯丙嗪顯著減輕遲發(fā)反應(yīng),提示PKC在疼痛信息的傳導(dǎo)和中樞敏感化中起重要作用。8pkc信號(hào)分子參與內(nèi)臟炎癥痛覺信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)行為學(xué)實(shí)驗(yàn)觀察到,福爾馬林直腸黏膜下注射致炎后,在乙醚麻醉恢復(fù)后大鼠立即會(huì)出現(xiàn)內(nèi)臟疼痛的行為反應(yīng)。PKC激動(dòng)劑PMA能明顯增加內(nèi)臟炎癥痛疼痛評(píng)分,增強(qiáng)疼痛反應(yīng);其抑制劑H-7和氯丙嗪能顯著減少疼痛評(píng)分,減弱疼痛反應(yīng),提示PKC在福爾馬林致急性內(nèi)臟炎癥痛感受中起重要作用。電生理實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)PKC在福爾馬林致內(nèi)臟炎癥痛的產(chǎn)生和維持中起重要作用。蛋白印跡實(shí)驗(yàn)觀察到,福爾馬林直腸黏膜下致炎后,PKC膜轉(zhuǎn)位(即激活明顯增加),其激動(dòng)劑PMA明顯增加其膜轉(zhuǎn)位,增強(qiáng)PKC活性;H-7顯著減少膜轉(zhuǎn)位,降低其活性,提示PKC內(nèi)臟炎癥痛中活性增加,參與痛覺信號(hào)的轉(zhuǎn)導(dǎo)。對(duì)PKC超家族各種亞型研究表明PKCε、PKCγ在福爾馬林致內(nèi)臟炎癥痛中起重要作用,PKCα、βⅠ、βⅡ可能在內(nèi)臟炎癥痛覺傳導(dǎo)中未發(fā)揮信號(hào)作用。福爾馬林直腸黏膜下致炎后,大鼠L6~S1-2節(jié)段脊髓NOS活性、NO產(chǎn)量和cGMP含量均明顯增強(qiáng)/增多,說(shuō)明NO/cGMP信號(hào)系統(tǒng)參與內(nèi)臟炎癥痛信號(hào)的轉(zhuǎn)導(dǎo),并且PKC抑制劑燈盞花素乙能明顯減弱NOS活性,減少NO產(chǎn)量和cGMP含量,抑制PKC信號(hào)分子的活性,可進(jìn)一步通過(guò)抑制NO/cGMP信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)達(dá)到減輕內(nèi)臟炎癥痛的效果。行為學(xué)研究發(fā)現(xiàn),高閾值型(N型)鈣通道抑制劑SNX-111能明顯減輕內(nèi)臟炎癥痛覺反應(yīng);SNX-111減少大鼠L6~S1-2節(jié)段脊髓細(xì)胞內(nèi)Ca9pu與pe刺激反應(yīng)用感受野自然刺激方法,在89個(gè)S1脊神經(jīng)節(jié)(DRG)A型神經(jīng)元細(xì)胞內(nèi)記錄結(jié)果表明,75/89個(gè)神經(jīng)元對(duì)刷毛、觸壓、夾擠等皮膚感受野自然刺激發(fā)生興奮性反應(yīng),其中22/75個(gè)神經(jīng)元還對(duì)直腸氣囊刺激發(fā)生反應(yīng),軀體與內(nèi)臟傳入的傳導(dǎo)速度分別平均為23m/s和21m/s。另有14個(gè)神經(jīng)元在無(wú)任何可見的刺激條件下自發(fā)放電,其中9個(gè)對(duì)直腸氣囊刺激發(fā)生反應(yīng)。用神經(jīng)電刺激萬(wàn)法,在182個(gè)S1脊神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元的細(xì)胞內(nèi)記錄結(jié)果表明,74個(gè)神經(jīng)元既對(duì)陰部神經(jīng)(Pu)刺激反應(yīng),也對(duì)盆內(nèi)臟神經(jīng)(Pe)刺激發(fā)生反應(yīng)。Pu與Pe刺激引起的細(xì)胞內(nèi)動(dòng)作電位的傳導(dǎo)速度分別平均為38.1m/s和21.9m/s。Pu與Pe刺激引起的動(dòng)作電位可相互碰撞抵消,提示分叉初級(jí)傳入的存在。將FB和NY和兩種熒光染料分別注入會(huì)阻部皮下和膀胱壁粘膜下層后,在共聚焦顯微鏡雙通道掃描下,于L6-S2DRG內(nèi)可見FB+NY雙標(biāo)細(xì)胞,總占數(shù)463個(gè)標(biāo)記細(xì)胞的9%提示,來(lái)自軀體與內(nèi)臟組織可通過(guò)分叉初級(jí)傳入,在同一個(gè)脊神經(jīng)節(jié)A型神經(jīng)元上匯聚。主要采用細(xì)胞內(nèi)記錄和放免測(cè)定兩種技術(shù),在在體貓和離體大鼠脊神經(jīng)節(jié)兩種制備標(biāo)本上,觀察并記錄了脊神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元的細(xì)胞內(nèi)動(dòng)作電位和脊神經(jīng)節(jié)內(nèi)神經(jīng)肽免疫活性在不同刺激條件下的變化。細(xì)胞內(nèi)記錄表明,脊神經(jīng)節(jié)在完全與外界隔離和不進(jìn)行刺激的條件下也出現(xiàn)活躍的自發(fā)放電活動(dòng);誘發(fā)放電的頻率跟隨不能的范圍甚廣。隨著刺激頻率的增快,動(dòng)作電位潛伏期發(fā)生動(dòng)搖,波幅下降,波形解體,由全峰電位(S)波分解成NM和M波;出現(xiàn)去極化前電位和EPSP以及低幅短程的去極化;同一脊神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元對(duì)其外周突和中樞突刺激的反應(yīng)不盡相同,甚至完全不同;在高鎂低鈣溶液灌注下,動(dòng)作電位可被阻斷,突觸總和受阻。放免測(cè)定表明,脊神經(jīng)節(jié)內(nèi)存在SP、VIP和β-End等神經(jīng)肽;低中強(qiáng)度刺激下,脊神經(jīng)節(jié)內(nèi)的SP和VIP陽(yáng)性產(chǎn)物均最著升高,但β-End顯著降低;較強(qiáng)刺激下SP顯著降低、VIP和β-End陽(yáng)性產(chǎn)物顯著升高。這些結(jié)果提示脊神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元存在第二條通路和化學(xué)性及/或電偶聯(lián)性突觸或接頭;SP、VIP和End等神經(jīng)肽可被外周刺激調(diào)制。10匯聚性脊神經(jīng)神經(jīng)元/傳導(dǎo)束/視閾事件在離體DRGA型神經(jīng)元上,通過(guò)高鎂低鈣溶液灌注,借以阻斷突觸化學(xué)傳遞和交替刺激坐骨神經(jīng)(Sc)與后根(Dr)可見,Sc與Dr的傳導(dǎo)速度之間的r值分別為0.96和0.93,均呈高度線性相關(guān),Dr端的斜率明顯降低;DRG神經(jīng)元細(xì)胞內(nèi)動(dòng)作電位振幅降低,持續(xù)期加長(zhǎng),EPSP樣低幅去極化出現(xiàn)機(jī)率明顯增多;對(duì)Sc刺激頻率的跟隨能力由正常灌注的118.4Hz顯著降至76.5Hz,對(duì)Dr刺激頻率的跟隨能力由正常的140.6Hz明顯降至50Hz;部分DRGA型神經(jīng)元甚至在Dr1Hz刺激下,動(dòng)作電位即不復(fù)出現(xiàn)。在高鎂低鈣灌注下,脊神經(jīng)節(jié)C型神經(jīng)元的傳導(dǎo)速度由灌注前的0.48m/s顯著減慢至灌注后的0.39m/s:鋒電位的持續(xù)期間和活動(dòng)面積明顯延長(zhǎng)和增加,并大多被穹隆樣低幅去極化所取代;鋒電位或穹隆樣去極化對(duì)刺激頻率的跟隨能力顯著降低。離體實(shí)驗(yàn)結(jié)果也提示,A和C型DRG神經(jīng)元均存在突觸或接頭性活動(dòng)。上述結(jié)果首次明確概括出“脊神經(jīng)節(jié)是一個(gè)名副其實(shí)的,具有突觸整合活動(dòng)的外周核團(tuán)”以上研究結(jié)果說(shuō)明:(1)脊髓背角存在SST和DCPS等2種單投射性脊髓感覺神經(jīng)元/傳導(dǎo)束;(2)脊髓背角存在SCTDCPS、SST-DCPS、SST-SCT等3種雙投射性脊髓感覺神經(jīng)元/傳導(dǎo)束;(3)這些單或雙投射性脊髓感覺神經(jīng)元/傳導(dǎo)束既接受/傳遞軀體感覺也接受/傳遞內(nèi)臟感覺信息;(4)脊神經(jīng)節(jié)中存在突觸活動(dòng);(5)脊神經(jīng)神經(jīng)元既接受傳遞軀體感覺也接受傳遞內(nèi)臟感覺;(6)SST、DCPS、SCT-DCPS、SST-DCPS、SST-SCT等脊髓感覺神經(jīng)元/傳導(dǎo)束以及脊神經(jīng)神經(jīng)元均為匯聚性軀體-內(nèi)臟感覺神經(jīng)元;(7)穴位/軀體感覺、臟腑/內(nèi)臟感覺兩種傳入輸入?yún)R聚性感覺神經(jīng)元上相互作用;(8)膜信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)體系NMDAR-PKC-NO參與和影響經(jīng)穴臟腑相關(guān)或軀體內(nèi)臟相關(guān)作用。這些成果為經(jīng)穴臟腑相關(guān)的中醫(yī)針灸學(xué)基本課題提供了現(xiàn)代解剖生理學(xué)依據(jù)和現(xiàn)代感覺神經(jīng)科學(xué)說(shuō)明西方醫(yī)學(xué)界的軀體內(nèi)臟相互作用實(shí)即中醫(yī)的經(jīng)穴臟腑相關(guān),已在國(guó)外引起學(xué)界的關(guān)注,但尚缺乏詳盡而系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)研究,本研究的有關(guān)發(fā)現(xiàn)對(duì)軀體內(nèi)臟相互作用/經(jīng)穴臟腑相關(guān)提供系統(tǒng)而充實(shí)的實(shí)驗(yàn)依據(jù),使其成為指導(dǎo)有關(guān)臨床實(shí)踐的系統(tǒng)理論,深化和發(fā)展現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的有關(guān)領(lǐng)域,并擴(kuò)大經(jīng)穴臟腑相關(guān)的國(guó)際影響。本研究的有關(guān)發(fā)現(xiàn)對(duì)深化和發(fā)展中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)學(xué)與神經(jīng)科學(xué)研究和開辟新的研究領(lǐng)域具有重要的推動(dòng)作用,對(duì)修正和豐富有關(guān)感覺傳遞的解剖學(xué)、組織學(xué)、生理學(xué)以及神經(jīng)病學(xué)和神經(jīng)外科學(xué)具有重要的學(xué)術(shù)價(jià)值。針灸、按摩以及經(jīng)皮神經(jīng)刺激等廣為普及的中西療法,由于本文作者系統(tǒng)