果蠅的性狀觀察雌雄鑒別和飼養(yǎng)方法

果蠅的性狀觀察雌雄鑒別和飼養(yǎng)方法果蠅的性狀觀察雌雄鑒別和飼養(yǎng)方法第1頁二、試驗原理果蠅（Drosophilamelanogaster）是生物學(xué)研究中一個主要模式生物。約在1909年，摩爾根就開始用果蠅作為材料進行遺傳學(xué)試驗，處理了一系列重大遺傳學(xué)問題。

果蠅作為遺傳材料含有很多突出優(yōu)點：染色體數(shù)目少，2n＝8；含有許多可遺傳突變性狀；世代周期短，在25C

下約9~10天就完成一個世代；個體小，易于喂養(yǎng)，費用低廉；繁殖能力強，一次雜交可產(chǎn)生大量后代供統(tǒng)計分析。果蠅的性狀觀察雌雄鑒別和飼養(yǎng)方法第2頁果蠅生活史

果蠅為昆蟲綱雙翅目昆蟲，生活史經(jīng)過：

卵－幼蟲－蛹－成蟲，是完全變態(tài)昆蟲。

果蠅的性狀觀察雌雄鑒別和飼養(yǎng)方法第3頁DrosophilalifecycleAdult成蟲FertilizationEmbryo1dayFirstinstarlarva1day1daySecondinstarlarvaThirdinstarlarva21/2-

3daysPupa31/2-

41/2daysinpupalstage蛹Egg卵三齡幼蟲一齡幼蟲二齡幼蟲果蠅的性狀觀察雌雄鑒別和飼養(yǎng)方法第4頁果蠅生活周期和溫度關(guān)系

培養(yǎng)溫度

10℃15℃20℃25℃

卵→幼蟲

8天5天

幼蟲→成蟲

57天18天6.3天3.4天

15天7~8天20~25C是果蠅最適生長溫度，生活周期為10天。果蠅的性狀觀察雌雄鑒別和飼養(yǎng)方法第5頁果蠅培養(yǎng)基

果蠅食物主要是酵母，凡是能使酵母發(fā)酵基質(zhì)都能作為培養(yǎng)基，最常見、效果最好是玉米粉培養(yǎng)基。果蠅的性狀觀察雌雄鑒別和飼養(yǎng)方法第6頁三、試驗步驟1.果蠅生活史觀察卵

成熟雌蠅交尾后（2～3d）將卵產(chǎn)在培養(yǎng)基表層。用解剖針針尖在果蠅培養(yǎng)瓶內(nèi)沿著培養(yǎng)基表面挑取一點培養(yǎng)基將其置于載玻片上，然后滴上1滴清水，用解剖針將培養(yǎng)基展開后放在顯微鏡低倍鏡下仔細進行觀察。果蠅卵為橢圓形，長約0.5mm，腹面稍扁平，前端伸出觸絲可使卵附著在培養(yǎng)基表層而不陷入深層。幼蟲

果蠅受精卵經(jīng)過一天發(fā)育即可孵化為幼蟲。幼蟲在培養(yǎng)基內(nèi)及瓶壁上都有，培養(yǎng)基內(nèi)幼蟲普通要小一些。這是因為果蠅幼蟲從一齡幼蟲開始經(jīng)兩次蛻皮，形成二齡和三齡幼蟲，伴隨發(fā)育而不停長大，三齡幼蟲往往爬到瓶壁上來化蛹，其長度可達4～5mm。幼蟲一端稍尖為頭部，黑點處為口器。幼蟲在培養(yǎng)基內(nèi)和瓶壁上蠕動爬行。果蠅的性狀觀察雌雄鑒別和飼養(yǎng)方法第7頁蛹幼蟲經(jīng)過4～5d發(fā)育開始化蛹。普通附著在瓶壁上，顏色淡黃。伴隨發(fā)育繼續(xù)，蛹顏色逐步加深，最終為深褐色。在瓶壁上看到幾乎透明蛹是已經(jīng)羽化完而遺留蛹空殼。

成蟲剛羽化出果蠅蟲體較長，翅膀也沒有完全展開，體表未完全幾丁質(zhì)化所以成半透明透乳白色。伴隨發(fā)育，身體顏色加深，體表完全幾丁質(zhì)化。羽化出果蠅在8～12h后開始交配，成體果蠅在25℃條件下壽命為37d。

果蠅的性狀觀察雌雄鑒別和飼養(yǎng)方法第8頁2.果蠅麻醉

將麻醉瓶小口拔去橡皮塞。滴入數(shù)滴乙醚（注意不能太多，以使乙醚流入瓶內(nèi)）再塞上橡皮塞。將要麻醉果蠅試管在海綿板上敲擊幾下，使其都集中在底部。然后快速拔去棉塞，插入麻醉瓶大口，拍打試管，使果蠅全都倒入麻醉瓶。然后快速蓋上麻醉瓶口蓋子。麻醉到一定程度把果蠅倒在白磁板上。當(dāng)果蠅翅膀上翹45°時，表示已經(jīng)死亡。果蠅的性狀觀察雌雄鑒別和飼養(yǎng)方法第9頁3.雌雄果蠅判別

體型腹部末端背部條紋性梳

♀大無色、端尖7條（可看見5條）無♂小黑色、鈍圓5條（可看見3條）有性梳：雄蠅前肢第5節(jié)附節(jié)上有10根象梳子棕毛果蠅的性狀觀察雌雄鑒別和飼養(yǎng)方法第10頁

雌果蠅體型大于雄果蠅雌果蠅有6節(jié)體節(jié)，腹部底部為產(chǎn)卵管，展現(xiàn)圓錐狀凸出。雄果蠅有4節(jié)體節(jié)，腹部底部為交尾器，呈現(xiàn)黑色圓形外觀。前肢先端第二節(jié)含有性梳。

果蠅的性狀觀察雌雄鑒別和飼養(yǎng)方法第11頁4.突變性狀觀察眼色：紅眼與白眼紅眼與白眼是一對相對性狀，分別由X染色體上基因+與w（或X+

和Xw）決定果蠅的性狀觀察雌雄鑒別和飼養(yǎng)方法第12頁其它眼睛突變

Cinnabar：朱色Sepia:棕褐色果蠅的性狀觀察雌雄鑒別和飼養(yǎng)方法第13頁殘翅（Vestigialwing,vgvg)

長翅和殘翅是一對相對性狀，由位于第二染色體上基因+/vg決定

果蠅的性狀觀察雌雄鑒別和飼養(yǎng)方法第14頁小翅（miniaturewing，mm），由位于X染色體上隱性基因m決定。翅膀比野生型短些，僅長至腹端。Apterous:無翅果蠅的性狀觀察雌雄鑒別和飼養(yǎng)方法第15頁翅膀其它突變Dumpy：粗短；scalloped：圓齒狀果蠅的性狀觀察雌雄鑒別和飼養(yǎng)方法第16頁體色突變黑檀體

（ebonybody,ee)由位于第3染色體上隱性基因決定。

Sable（黒貂色，tan（棕褐色）

果蠅的性狀觀察雌雄鑒別和飼養(yǎng)方法第17頁剛毛

野生型果蠅頭胸部以及復(fù)眼周圍含有平直，先端略彎長型粗黑硬毛。

焦剛毛（singedbristle，sn3sn3），剛毛卷曲，由位于X染色體上隱性基因決定。。

果蠅的性狀觀察雌雄鑒別和飼養(yǎng)方法第18頁剛毛其它突變類型Forked：開叉；spineless無骨；stubble：茬狀果蠅的性狀觀察雌雄鑒別和飼養(yǎng)方法第19頁試驗統(tǒng)計管號眼色翅型體色剛毛雌雄個數(shù)果蠅的性狀觀察雌雄鑒別和飼養(yǎng)方法第20頁5個品系果蠅性狀觀察品系眼色翅膀剛毛體色1紅長翅直灰2紅殘翅直灰3白小翅焦剛毛灰4紅長翅直黑檀體5白長翅直灰果蠅的性狀觀察雌雄鑒別和飼養(yǎng)方法第21頁5.果蠅培養(yǎng)基配制

玉米培養(yǎng)基80ml水＋2g瓊脂＋13g蔗糖放在大燒杯中煮沸。80ml水＋17g玉米粉＋1.4g酵母粉，裝在小燒杯中調(diào)勻。待大燒杯中瓊脂融化后，將小燒杯中調(diào)勻混和液倒入，燒開。每一試管分裝1.5~2cm高度（5~10ml）培養(yǎng)基，注意請勿將培養(yǎng)基碰到管壁。高壓滅菌。果蠅的性狀觀察雌雄鑒別和飼養(yǎng)方法第22頁果蠅雜交試驗基礎(chǔ)步驟選處女蠅

將雌雄果蠅放在一起培養(yǎng)，雌蠅生殖器中有貯精囊，可保留交配所得大量精子，雌蠅一次交配所得精子，足夠它屢次排出卵受精，所以在做雜交試驗時，雌蠅必須選取處女蠅（沒有交配過雌蠅）。雌蠅孵出后12小時內(nèi)不會交配，這個時間內(nèi)把果蠅全部倒出，分出雌雄蠅，單獨喂養(yǎng)，這時搜集雌蠅是處女蠅。果蠅的性狀觀察雌雄鑒別和飼養(yǎng)方法第23頁配制雜交組合把所需品系雄蠅直接放處處女蠅培養(yǎng)瓶中，標注親本基因型及交配日期；（7天）7～8天后，倒掉親本（以免親代和子代混同）；再過4～5天后，F(xiàn)1成蠅性狀觀察；F1自交，無需處女