臨床模擬標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢測

臨床模擬標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢測臨床模擬標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢測第1頁病原菌檢驗(yàn)程序藥品敏感試驗(yàn)標(biāo)本直接涂片鏡檢分離培養(yǎng)生化試驗(yàn)血清學(xué)試驗(yàn)動物試驗(yàn)明確診療初步診療分子生物學(xué)技術(shù)其它檢測技術(shù)臨床模擬標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢測第2頁常見染色方法

革蘭染色抗酸染色

臨床模擬標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢測第3頁

革蘭染色

試劑：結(jié)晶紫染液（初染劑）；盧戈氏碘液（媒染劑）；

95%乙醇溶液（脫色液）；稀釋石炭酸復(fù)紅液（復(fù)染液）染色步驟：初染媒染脫色復(fù)染染色結(jié)果：革蘭陽性菌呈紫色或紫紅色；革蘭陰性菌呈紅色臨床模擬標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢測第4頁

抗酸染色

試劑：石炭酸復(fù)紅；

3%鹽酸酒精；堿性美藍(lán)染色步驟：初染脫色復(fù)染染色結(jié)果：抗酸桿菌呈紅色；非抗酸桿菌呈藍(lán)色臨床模擬標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢測第5頁

常見培養(yǎng)基增菌：血平板、巧克力平板、堿性胨水等選擇性：MAC、EMB、SS、HE等判別：KIA、MIU等臨床模擬標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢測第6頁

菌落形態(tài)觀察形態(tài)特征：

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大小、形狀

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表面、邊緣

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顏色、透明度

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粘度溶血現(xiàn)象：α溶血、β溶血、γ溶血色素：脂溶性、水溶性氣味

臨床模擬標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢測第7頁

純菌落

涂片染色，結(jié)合菌落形態(tài)革蘭陰性桿菌革蘭陽性球菌

氧化酶

觸酶

-++-腸桿菌科非發(fā)酵菌葡萄球菌屬鏈球菌屬臨床模擬標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢測第8頁

常見生化試驗(yàn)碳水化合物代謝試驗(yàn)蛋白質(zhì)和氨基酸代謝試驗(yàn)碳源和氮源利用試驗(yàn)各種酶類試驗(yàn)抑菌試驗(yàn)臨床模擬標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢測第9頁

碳水化合物代謝試驗(yàn)糖（醇、苷）類發(fā)酵試驗(yàn)：能分解糖（醇、苷）類產(chǎn)酸時(shí)，培養(yǎng)基中指示劑呈酸性反應(yīng)；若能產(chǎn)氣時(shí)，培養(yǎng)基可出現(xiàn)開裂氣泡等現(xiàn)象；腸桿菌科尤為主要氧化-發(fā)酵試驗(yàn)（O/F）：腸桿菌科與非發(fā)酵菌判別；葡萄球菌與微球菌判別，前者為發(fā)酵型，后者為氧化型ONPG（β半乳糖苷酶試驗(yàn)）：主要用于遲緩發(fā)酵乳糖細(xì)菌快速判定，快速及遲緩發(fā)酵乳糖細(xì)菌為陽性，不發(fā)酵乳糖細(xì)菌為陰性。七葉苷水解試驗(yàn)：D群鏈球菌為陽性甲基紅試驗(yàn)：大腸、沙門、志賀、變形、枸櫞酸桿菌等為陽性；

V-P試驗(yàn)：腸桿菌屬陽性葡萄糖酸鹽試驗(yàn)：用于腸桿菌科分類臨床模擬標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢測第10頁

蛋白質(zhì)和氨基酸代謝試驗(yàn)1.明膠液化試驗(yàn)：多數(shù)假單胞菌能液化明膠，腸桿菌科細(xì)菌如沙雷菌、變形桿菌、陰溝桿菌等可液化明膠2.吲哚（?；|(zhì)）試驗(yàn):腸桿菌科細(xì)菌判定；大腸桿菌陽性3.硫化氫試驗(yàn):沙門菌屬、枸櫞酸桿菌屬、變形桿菌屬陽性4.尿素分解試驗(yàn)：變形桿菌、摩根氏、雷氏普羅維登氏、克雷伯氏為陽性5.苯丙氨酸脫氨酶（TDA）試驗(yàn)：腸桿菌科變形桿菌、普羅維登氏菌、摩根氏菌陽性6.氨基酸脫羧酶試驗(yàn)：腸桿菌科細(xì)菌判定臨床模擬標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢測第11頁

碳源和氮源利用試驗(yàn)1.枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)：克雷伯菌屬、沙門菌屬常為陽性2.丙二酸鹽利用試驗(yàn):腸桿菌科屬間判別臨床模擬標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢測第12頁各種酶類試驗(yàn)1.氧化酶試驗(yàn)：腸桿菌科細(xì)菌與假單胞菌區(qū)分，前者陰性，后者多陽性；奈瑟菌屬、莫拉菌屬也為陽性2.觸酶試驗(yàn)：用于革蘭氏陽性球菌判別，葡萄球菌和微球菌為陽性，鏈球菌和腸球菌為陰性，腸球菌多假陽性3.硝酸鹽還原試驗(yàn)：腸桿菌科為陽性；銅綠、嗜麥芽能產(chǎn)生氮?dú)猓绘溓蚓c球菌陰性，葡萄球菌陽性4.DNA酶試驗(yàn)：金黃色葡萄球菌、變形桿菌陽性5.凝固酶試驗(yàn)：致病性葡萄球菌；金黃色葡萄球菌多陽性6.CAMP試驗(yàn)：B群鏈球菌陽性7.膽汁溶菌酶試驗(yàn)：肺炎鏈球菌陽性8.脂酶、卵磷脂酶試驗(yàn)：主要用于厭氧菌判定;產(chǎn)氣夾膜梭菌卵磷脂酶陽性臨床模擬標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢測第13頁抑菌試驗(yàn)1.O/129試驗(yàn)：弧菌、鄰單胞菌敏感；氣單胞菌屬耐藥2.桿菌肽試驗(yàn)：A群鏈球菌敏感3.奧普托欣Optochin試驗(yàn)：肺炎鏈球菌對Optochin敏感4.新生霉素敏感試驗(yàn)：區(qū)分表皮葡萄球菌與腐生葡萄球菌臨床模擬標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢測第14頁氫氧化鉀拉絲試驗(yàn)

主要用于革蘭陰性菌與易脫色革蘭陽性菌判別。大多數(shù)革蘭陰性菌于5~10s內(nèi)出現(xiàn)陽性反應(yīng)，有則需30~45s，假單胞菌、無色桿菌、黃桿菌、產(chǎn)堿桿菌、莫拉菌等大多數(shù)在10s內(nèi)呈陽性，不