標本溶血對生化檢驗結(jié)果的影響-課件

標本溶血對生化檢驗

結(jié)果的影響講課者：田飛1ppt課件標本溶血對生化檢驗

結(jié)果的影響1ppt課件（一）什么是溶血

溶血是紅細胞破壞,紅細胞的一些組分釋放進入血清或血漿，導(dǎo)致實驗樣品出現(xiàn)特有的紅色增加。很多因素都可以使紅細胞破壞，發(fā)生溶血，從而干擾監(jiān)測，使檢驗結(jié)果失去真實性和準確性，影響疾病的診斷和治療。

2ppt課件（一）什么是溶血溶血是紅細胞破壞,紅2014年生化室拒收標本統(tǒng)計分析

3ppt課件2014年生化室拒收標本統(tǒng)計分析3ppt課件從表格中可以看出，2014年度共有104個拒收標本，而溶血標本占拒收標本的66.3％，因此溶血是臨床生化檢驗中最常見的一種干擾和影響因素。

溶血后顯著增高的有AST、ALT、LDH、K+、TBIL、TP、ALB等；溶血后顯著降低的項目有GLU、CR等。4ppt課件從表格中可以看出，2014年度共有104個拒收標本，而

一溶血對肝功能測定的影響

1.谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）

溶血造成AST升高可能是由以下兩個方面的原因引起(1)人類紅細胞中AST活性約為血清中的40倍，當(dāng)標本溶血時紅細胞破裂后釋放AST，勢必引起血清AST活性的升高從而使溶血標本的結(jié)果明顯高于未溶血標本。

(2)溶血后血清顏色加深，致使測得的吸光度值增高。5ppt課件一溶血對肝功能測定的影響1.谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）溶血3、

乳酸脫氫酶（LDH）

紅細胞和血小板中含有豐富的LDH，紅細胞中LDH的含量是血清的160～200倍，故受溶血影響最大。在測定環(huán)節(jié)上都有可能發(fā)生不同程度的血小板破壞，而影響LDH測定，使其測定結(jié)果偏高。6ppt課件3、乳酸脫氫酶（LDH）

紅細胞和血小板中含有豐富4、GGT（谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶）由于紅細胞內(nèi)GGT含量很低，輕微溶血對其測定結(jié)果影響不大，但重度溶血則有影響7ppt課件4、GGT（谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶）7ppt課件5

、

總蛋白（TP）

總蛋白的測定通常選用雙縮脲法，主波長540nm,而血紅蛋白在555nm有吸收峰，試驗表明如果溶血標本中［Hb］≤0.5g／L時無干擾；而高［Hb］時，會使結(jié)果偏高，可以做樣品空白來消除影響。8ppt課件5

、總蛋白（TP）

總蛋白的測定通常選用雙縮脲6.總膽紅素（TBIL）

重氮法測定總膽紅素，最后生成紅紫色的偶氮膽紅素，主要在波長為540nm～560nm處有光吸收。而血紅蛋白在波長540nm～550nm處有光吸收，恰與偶氮膽紅素的比色波長相近。因此溶血后細胞破裂時大量血紅蛋白進入血清，勢必造成總膽紅素測定值的升高，是總膽紅素測定的正向干擾因素。此外，由于血紅蛋白重氮試劑反應(yīng)形成的產(chǎn)物可破壞偶氮膽紅素，溶血對重氮法測定膽紅素同時存在負向干擾，使測定結(jié)果偏低，但該作用較輕微，因此溶血后由于血紅蛋白對測定結(jié)果的干擾，膽紅素的測定結(jié)果往往偏高。

9ppt課件6.總膽紅素（TBIL）重氮法測定總膽紅素，最后生成紅紫2、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）紅細胞中ALT活性約是血清中7～15倍。嚴重溶血（Hb約6.5g/L）時，可使血清ALT由20u/L增高到26.5u/L（增加約27%）。因此溶血后ALT含量測定的增高主要來源于細胞內(nèi)ALT的大量釋放。可見與AST相比，ALT受溶血影響輕些.10ppt課件10ppt課件二溶血對血脂測定的影響

1、

總膽固醇（TC）

試驗表明如果溶血標本中［Hb］≤1.5g／L無干擾；而高濃度時因Hb的固有顏色干擾，會使結(jié)果偏高。11ppt課件二溶血對血脂測定的影響1、總膽固醇（TC）

試驗2、甘油三酯（TG）除去上述如總膽固醇影響因素外，目前所用甘油磷酸氧化酶—過氧化物酶法和乙酰丙醇顯色法都以測量甘油為基礎(chǔ)，而紅細胞膜磷脂可被磷脂酶作用，產(chǎn)生游離甘油，所以溶血后測定結(jié)果偏高12ppt課件2、甘油三酯（TG）除去上述如總膽固醇影響因素外，目前所用甘3、

載脂蛋白A(APOA)載脂蛋白B（APOB）免疫透射比濁法使用最廣泛，以抗原抗體為基礎(chǔ)，血紅蛋白可使測定結(jié)果升高，故標本溶血后測定結(jié)果偏高。13ppt課件3、載脂蛋白A(APOA)載脂蛋白B（APOB）三、溶血對腎功能測定的影響1、尿素（UREA)無論是二乙?！胤ㄟ€是脲酶法，溶血均可導(dǎo)致光譜藍色部分吸光度值升高對結(jié)果都有干擾，導(dǎo)致結(jié)果偏高14ppt課件三、溶血對腎功能測定的影響1、尿素（UREA)14ppt課件2、

尿酸(UA)

試驗表明如果溶血標本中［Hb］>1g／L會干擾；是因為測定波長546mm時因Hb固有顏色潛在影響使測定結(jié)果偏高(比色法)。

15ppt課件2、尿酸(UA)

試驗表明如果溶血標本中［Hb］

3、

肌酐（Cre）

苦味酸法測定Cre的特異性較差，易受其它還原性物質(zhì)影響，主要是維生素C、酮體、丙酮酸等假肌酐干擾。假肌酐物質(zhì)亦可與苦味酸形成顏色反應(yīng)，導(dǎo)致測定值發(fā)生偏差。這種假肌酐物質(zhì)紅細胞中最多，血清中較少，故溶血后紅細胞中假肌酐物質(zhì)的釋放是造成測定值發(fā)生偏差的主要原因。

溶血釋放出的物質(zhì)導(dǎo)致Jaffe反應(yīng)而致測定結(jié)果的升高。Jaffe反應(yīng)指血漿中的肌酐與堿性苦味酸鹽反應(yīng)，生成黃紅色的苦味酸肌酐復(fù)合物的反應(yīng)。

16ppt課件3、肌酐（Cre）

苦味酸法測定Cre的特異性較差四、溶血對電解質(zhì)測定的影響1、鉀（K+

）是細胞內(nèi)液的主要陽離子，約98％的鉀存于細胞內(nèi)，紅細胞內(nèi)鉀濃度約為105mmol/L，而血清中僅有3.5

mmol/L～5.4

mmol/L，紅細胞中鉀的含量比血清中高23

倍。因此溶血造成血清鉀明顯升高，增高主要來源于紅細胞內(nèi)鉀的大量釋放，有報道表明血清游離血紅蛋白在

2.5～2.8g

/

L時血清鉀增高14%～16%，血清游離血紅蛋白達6.6g

/

L時血清鉀增高可達41%，所以應(yīng)在樣品采集后1h內(nèi)應(yīng)將紅細胞與血清分離。并且在分析血清鉀的結(jié)果時應(yīng)引起高度注意。

17ppt課件四、溶血對電解質(zhì)測定的影響1、鉀（K+

）是細胞內(nèi)液的主要2、氯（CL-）血漿中氯約為103mmol/L，紅細胞中氯約為49~54mmol/L。溶血會導(dǎo)致細胞內(nèi)的氯離子轉(zhuǎn)移到血清中，從而引起了血清氯離子測定值的升高18ppt課件2、氯（CL-）18ppt課件3

、磷（P

）

試驗表明如果溶血標本中［Hb］≤1g/L影響很小，而在［Hb］2.8g／L時影響較大，所以應(yīng)在采血后30min內(nèi)分離血球，否則會因磷酸酯從RBC中釋放而會使結(jié)果偏高。19ppt課件3

、磷（P）試驗表明如果溶血標本中［Hb］≤五、溶血對葡萄糖測定的影響葡萄糖(GLU)

葡萄糖氧化酶法測定GLU的特異性較強，干擾物較少，但過氧化氫酶易受到其它物質(zhì)的影響，如維生素C、谷胱苷肽均因能競爭H2O2而導(dǎo)致負偏差，樣品中某些強的酶會促使葡萄糖降解而導(dǎo)致測定值明顯下降的。如果在血清或血漿加入NaF、KF作為酵解抑制劑樣品收集后立即去蛋白時，溶血樣品也可以用。20ppt課件五、溶血對葡萄糖測定的影響20ppt課件六、溶血對心肌酶譜測定的影響由于LDH、HBDH在紅細胞內(nèi)的含量皆明顯高于胞外，故溶血后結(jié)果都升高，雖然紅細胞中不含CK，但含有大量的腺苷酸激酶(AK)，可干擾測定CK的偶聯(lián)法的反應(yīng)體系，人為地引起CK結(jié)果的升高。21ppt課件六、溶血對心肌酶譜測定的影響由于LDH、HBDH在紅細胞內(nèi)（二）標本溶血的原因①環(huán)境溫度變化，氣溫較低時血清不易分離，標本需經(jīng)多次離心，離心后容易出現(xiàn)溶血現(xiàn)象。②標本運送過程中導(dǎo)致碰撞，從而使離心后也會出現(xiàn)溶血現(xiàn)象。③特殊人群如肥胖者、小孩等血管不易找到或太細導(dǎo)致抽血時多次操作或壓迫時間過長也會引起溶血現(xiàn)象④采血量不足，相對低滲抗凝導(dǎo)致溶血④針頭過細或抽血速度過快，負壓太大，紅細胞通過針尖時破壞而溶血22ppt課件（二）標本溶血的原因①環(huán)境溫度變化，氣溫較低時血清不易分離，（三）溶血標本的處理1.主動與臨床聯(lián)系，結(jié)合臨床首先排除體內(nèi)溶血的可能，若不是體內(nèi)溶血，建議重新采取標本，否則應(yīng)在檢驗報告單上注明“標本溶血”，以提醒臨床醫(yī)生注意.2利用溶血指數(shù)變化值，根據(jù)各項目的回歸方程，對易受溶血影響的AST、CK、CK-MB、LDH,

K+

的測定結(jié)果進行部分糾正，尤其對輕中度溶血效果較好，但對重度溶血標本則應(yīng)重新復(fù)查。3從方法學(xué)上克服或減少溶血的干擾，如通過設(shè)置樣品空白或改用雙波長比色、導(dǎo)數(shù)分光光度法和動力學(xué)方法，對參與分析法