密蒙花化學(xué)成分的分離與鑒定

密蒙花化學(xué)成分的分離與鑒定

密蒙花是馬錢科醉魚科的一種植物密蒙花。1儀器、試劑和儀器X-4數(shù)字顯示顯微熔點測定儀(溫度計未校正,北京泰克儀器有限公司);BrukerACF-300核磁共振儀(德國Bruker公司,內(nèi)標(biāo)為TMS);Agilent1100MSDTrap質(zhì)譜儀(美國Agilent公司);RE52CS-1旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮生化儀器廠);SHB-Ⅲ循環(huán)水式多用真空泵(鄭州長城科工貿(mào)有限公司);ZF-Ⅰ型三用紫外分析儀(上海顧村電光儀器廠);優(yōu)普超純水系統(tǒng)(ULUP-Ⅳ-20T,南京超純科技有限公司)。SephadexLH-20(50μm,瑞典AmershamBiosciences公司);YMC*GEL(12nmS-50μm,日本YMC公司);薄層色譜硅膠、柱色譜硅膠(100~200目、200~300目,青島海洋化工廠);顯色劑為1%香草醛-濃硫酸-乙醇溶液。所用試劑均為分析純或色譜純(南京化學(xué)試劑有限公司,國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)。密蒙花藥材購自安徽亳州藥材市場,經(jīng)本人鑒定,由中國藥科大學(xué)秦民堅教授復(fù)核為馬錢科植物密蒙花(BuddlejaofficinalisMaxim.)的干燥花蕾和花序,憑證標(biāo)本存放于中國藥科大學(xué)中藥資源學(xué)系,標(biāo)本編號No.BO20151016。2正丁醇部位浸膏色譜干燥的密蒙花花蕾和花序15kg,用體積分?jǐn)?shù)95%乙醇80℃熱回流提取3次,每次2h,合并提取液,減壓濃縮,得總浸膏3.90kg。將總浸膏用水混懸后,依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,得到石油醚部位575g,乙酸乙酯部位213g,正丁醇部位1302g。正丁醇部位浸膏經(jīng)硅膠100~200目柱色譜,以二氯甲烷-甲醇=20∶1→0∶100梯度洗脫,得14個流分(Fr.1~Fr.14)。Fr.1和Fr.4經(jīng)硅膠柱色譜和SephadexLH-20柱(三氯甲烷-甲醇=1∶1)反復(fù)柱色譜分離純化分別得化合物1(31mg)和2(28mg)及化合物3(15mg)、4(27mg)和16(23mg);Fr.7、Fr.9和Fr.11經(jīng)硅膠柱色譜、ODS(甲醇-水系統(tǒng)梯度洗脫)和SephadexLH-20柱(三氯甲烷-甲醇=1∶1)反復(fù)柱色譜分離純化分別得化合物5(23mg)、6(16mg)和9(200mg),化合物12(280mg)、13(17mg)、14(21mg)和15(79mg)及化合物7(12mg)、8(45mg)、10(17mg)和11(26mg)。3黃酮類化合物化合物1:黃色粉末(甲醇),mp263~265℃,紫外燈254nm下有暗斑,香草醛-濃硫酸顯黃色。ESI-MS給出準(zhǔn)分子離子峰m/z:283[M-H]化合物2:黃色粉末(甲醇),mp345~347℃,紫外燈254nm下有暗斑,香草醛-濃硫酸顯黃色。ESI-MS給出準(zhǔn)分子離子峰m/z:269[M-H]化合物3:黃色粉末(甲醇),mp320~322℃,紫外燈254nm下有暗斑,香草醛-濃硫酸顯黃色。ESI-MS給出準(zhǔn)分子離子峰m/z:285[M-H]化合物4:黃色粉末(甲醇),mp254~256℃,紫外燈254nm下有暗斑,香草醛-濃硫酸顯黃色。ESI-MS給出準(zhǔn)分子離子峰m/z:469[M+Na]化合物5:黃色粉末(甲醇),mp226~228℃,紫外燈254nm下有暗斑,香草醛-濃硫酸顯黃色。ESI-MS給出準(zhǔn)分子離子峰m/z:431[M-H]化合物6:黃色粉末(甲醇),mp256~258℃,紫外燈254nm下有暗斑,香草醛-濃硫酸顯黃色。ESI-MS給出準(zhǔn)分子離子峰m/z:447[M-H]化合物7:黃色粉末(甲醇),mp236~238℃,紫外燈254nm下有暗斑,香草醛-濃硫酸顯黃色,推測其為黃酮類化合物。ESI-MS給出準(zhǔn)分子離子峰m/z:459[M-H]化合物8:黃色粉末(甲醇),mp262~264℃,紫外燈254nm下有暗斑,香草醛-濃硫酸顯黃色。ESI-MS給出準(zhǔn)分子離子峰m/z:445[M-H]化合物9:淡黃色粉末(微溶于甲醇),mp265~267℃,紫外燈254nm下有暗斑,香草醛-濃硫酸顯黃色。ESI-MS給出準(zhǔn)分子離子峰m/z:593[M+H]化合物10:黃色粉末(甲醇),mp260~262℃,紫外燈254nm下有暗斑,香草醛-濃硫酸顯黃色。ESI-MS給出準(zhǔn)分子離子峰m/z:593[M-H]化合物11:黃色粉末(甲醇),mp180~182℃,紫外燈254nm下有暗斑,香草醛-濃硫酸顯黃色。ESI-MS給出準(zhǔn)分子離子峰m/z:737[M-H]化合物12:淡黃色粉末(甲醇),mp145~147℃,紫外燈360nm下有藍(lán)色熒光,香草醛-濃硫酸顯粉色。ESI-MS給出準(zhǔn)分子離子峰m/z:623[M-H]化合物13:紅色粉末(甲醇),mp200~202℃,紫外燈254nm下有暗斑,香草醛-濃硫酸顯綠色。ESI-MS給出準(zhǔn)分子離子峰m/z:675[M+Na]化合物14:暗紅色粉末(甲醇),mp220~222℃,紫外燈254nm下有暗斑,香草醛-濃硫酸顯綠色。ESI-MS給出準(zhǔn)分子離子峰m/z:837[M+Na]化合物15:暗紅色粉末(甲醇),mp194~196℃,紫外燈254nm下有暗斑,香草醛-濃硫酸顯綠色。ESI-MS給出準(zhǔn)分子離子峰m/z:999[M+Na]化合物16:白色粉末(甲醇),mp178~180℃,紫外燈254nm下有暗斑,香草醛-濃硫酸不顯色。ESI-MS給出準(zhǔn)分子離子峰m/z:582[M-H]4密蒙花化合物組成密蒙花是傳統(tǒng)的眼科用藥,在諸多眼科方劑中均有涉及該藥用植物。此外,密蒙花在民間還作為天然的食用染料植物,具有較好的開發(fā)前景。而目前對該藥用植物的化學(xué)成分報道較少,藥效物質(zhì)基礎(chǔ)不明確。本系統(tǒng)化學(xué)成分研究從密蒙花中分離并鑒定了16個化合物,其中11個黃酮類成分,1個苯乙醇苷類成分,3個番紅花色素