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文檔簡介

支原體、衣原體的檢測與臨床檢驗科1精選ppt支原體、衣原體定義支原體:是一類無細(xì)胞壁、呈高度多形態(tài)性,能通過濾菌器(0.45um),在人工培養(yǎng)基上能生長的最小原核微生物。衣原體:是一類能通過濾菌器、專性細(xì)胞內(nèi)寄生、有獨特生活周期的原核細(xì)胞型微生物。具有NDA和與革蘭氏陰性菌類似的細(xì)胞壁,對多種廣譜抗生素敏感。2精選ppt支原體、衣原體分類支原體分類:種類繁多,分布廣泛。其對人類致病的主要有肺炎支原體、生殖道支原體、穿透支原體、解脲脲原體和人型支原體。1981至1996年曾報道發(fā)醇支原體、穿透支原體和梨支原體是HIV的協(xié)同因子。衣原體分類:沙眼衣原體、鸚鵡熱衣原體、肺炎衣原體和家畜衣原體。3精選ppt支原體、衣原體檢測方法學(xué)支原體檢測方法:1、分離培養(yǎng)法2、血清學(xué)試驗(抗體測定)3、PCR(只做UU)4、改良肉湯稀釋法(解脲脲原體、人型支原體)優(yōu)點:價格低且可提供藥敏結(jié)果,是目前實驗室最常用方法。4精選ppt沙眼衣原體檢測方法沙眼衣原體的檢測方法:分離培養(yǎng)法(組織細(xì)胞學(xué)是診斷金標(biāo)準(zhǔn))。聚合酶鏈反應(yīng)法(PCR)/連接酶鏈反應(yīng)法(LCR)直接免疫熒光法(DFA)酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)血清抗體檢測(肺炎衣原體、鸚鵡熱衣原體)抗原快速免疫層析法(快速法)5精選ppt目前我實驗室沙眼衣原體檢測方法聚合酶鏈反應(yīng)法(PCR)抗原快速免疫層析法(快速法)酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA:常用方法)6精選ppt沙眼衣原體檢測方法細(xì)胞培養(yǎng)法優(yōu)點:特異性接近100%是沙眼衣原體檢測的“金標(biāo)準(zhǔn)”。缺點:昂貴、費時、要求高,用于研究或確認(rèn)性試驗。PCR、LCR法優(yōu)點:敏感性很高,理論上只要一個原體,可通過擴增而檢測出陽性,也適用于無活性標(biāo)本。

缺點:特異性相對較差,尤其是注意避免外界污染和殘留污染,實驗條件和質(zhì)量控制有嚴(yán)格要求。7精選ppt沙眼衣原體檢測方法直接免疫熒光法(DFA)優(yōu)點:快速、價廉、操作簡便。缺點:結(jié)果判斷受主觀因素影響大,要求較高,在低感染率人群中敏感性差。抗原快速檢測法:是目前基層醫(yī)院最常用沙眼衣原體檢測方法。

優(yōu)點:操作簡便、快速,無需復(fù)雜的儀器和設(shè)備。缺點:標(biāo)本中需要足夠數(shù)量的沙眼衣原體抗原,否則可能出現(xiàn)漏檢,敏感性為30~65%,在試驗結(jié)果陰性時,不能完全排除感染,有可能是沙眼衣原體數(shù)量不足或標(biāo)本采集不當(dāng)?shù)木壒省?精選ppt沙眼衣原體檢測方法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)優(yōu)點:敏感性在70~98%,特異性>97%,可同時檢測大批量樣本,結(jié)果判斷客觀性強。

缺點:不適用于單個樣本的測定,試驗結(jié)果陰性時,有可能是沙眼衣原體數(shù)量不足或標(biāo)本采集不當(dāng)?shù)木壒省?精選ppt支原體、衣原體檢測結(jié)果與臨床關(guān)系1、正確采集標(biāo)本是保證結(jié)果準(zhǔn)確性的前提。2、支原體、衣原體流行病學(xué)與臨床癥狀。3、支原體、衣原體的結(jié)果解釋與臨床治療。10精選ppt采集泌尿生殖道標(biāo)本正確方法尿道(男性):清潔尿道口,用男性無菌棉拭子插入尿道2-4cm,轉(zhuǎn)動3-5秒輕輕旋轉(zhuǎn)后取出放置在干燥試管中送檢,標(biāo)本收集前被檢測者至少一小時不排尿。宮頸管(女性):清除陰道及宮頸口分泌物,無菌拭子插入宮頸管內(nèi)1-2cm,輕輕旋轉(zhuǎn)后取出,不可碰陰道壁。精液、羊水、前列腺液:由??漆t(yī)生取樣,無菌潔凈溶器盛裝送檢。11精選ppt采集泌尿道生殖道標(biāo)本注意事項因支原體對細(xì)胞表面有很強親和力,衣原體又是一種嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生的微生物,易感染柱狀上皮細(xì)胞,應(yīng)盡量多采集細(xì)胞,所以宮頸標(biāo)本的采集應(yīng)在宮頸口或移行處進行,在患處采用拭子或刮片獲取。拭子進入宮頸或尿道后須停留數(shù)秒并旋轉(zhuǎn)刮取上皮細(xì)胞后再取出。陰道及宮頸口分泌物支原體、衣原體含量低,雜菌多,真菌較多,容易污染不可取。膿性分泌物由于缺少感染的上皮細(xì)胞不適用于此項檢測,應(yīng)該在對患處進行清洗后采取標(biāo)本。12精選ppt采集泌尿道生殖道標(biāo)本注意事項要與PCR標(biāo)本區(qū)別,月經(jīng)期、先兆流產(chǎn)婦女禁用;陰道用藥或灌洗后禁用。由于抗原快速檢測方法需要抗原量較大,請使用第一支拭子采集標(biāo)本,否則可能導(dǎo)致假陰性結(jié)果。盡量使用絳棉或腈綸拭子,棉花中帶有抑制衣原體的成分,且棉花吸水性強,使用后標(biāo)本量往往達不到試驗要求。標(biāo)本采集后應(yīng)盡快送檢,4℃放置不宜超過24h,13精選ppt支原體、衣原體檢測結(jié)果與臨床關(guān)系1、正確采集標(biāo)本是保證結(jié)果準(zhǔn)確性的前提。2、支原體、衣原體的臨床癥狀。3、支原體、衣原體的結(jié)果解釋與臨床治療。14精選ppt支原體感染臨床癥狀與傳播方式支原體因種類不同可引起肺炎、支氣管炎、咽炎、泌尿生殖道感染、與不孕不育、不良妊娠等有關(guān)。傳播方式:主要有性接觸傳播和垂直傳播,性接觸是支原體感染和傳播的重要途徑。15精選ppt沙眼衣原體感染臨床癥狀男性:尿道炎、附睪炎、直腸炎、結(jié)膜炎。女性:宮頸炎、尿道炎、子宮內(nèi)膜異位(衣原體感染女性發(fā)生率約為40%)、盆腔炎(50%由衣原體引起)、宮外孕(70%以上與衣原體感染有關(guān))、生育能力下降或不孕、腹膜炎和結(jié)膜炎。嬰兒:新生兒眼炎和肺炎。16精選ppt沙眼衣原體感染流行病學(xué)沙眼衣原體感染是最常見的性傳播疾病在國外,沙眼衣原體感染率為10.4%∽16.4%。在我國,非淋菌性尿道炎已是感染率最高的性傳播疾病,而沙眼衣原體是非淋的主要病原體。20歲以下的女性是沙眼衣原體感染最高危的人群,這可能與年輕女性宮頸的解剖結(jié)構(gòu)有關(guān)??诜茉兴幖皳碛卸鄠€性伴也增加感染的風(fēng)險。17精選ppt沙眼衣原體檢測重要性CT是我國常見的性傳播疾病,其發(fā)病率高,流行廣泛,已成為較為嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題。大部分情況下(80%被感染女性和50%被感染男性),感染衣原體后都沒有明顯的臨床癥狀。引發(fā)的問題:潛在的感染源不利于及時防治由其引起的不孕不育等嚴(yán)重并發(fā)癥。容易反復(fù)感染,進而引起嚴(yán)重的宮外孕和宮頸癌,可促進HIV和HPV病毒感染。衛(wèi)生部于2007年頒布《全國性病監(jiān)測點監(jiān)測方案》,新增加了生殖道CT感染作為單監(jiān)測的病種。18精選ppt支原體、衣原體檢測結(jié)果與臨床關(guān)系1、正確采集標(biāo)本是保證結(jié)果準(zhǔn)確性的前提。2、支原體、衣原體流行病學(xué)與臨床癥狀。3、支原體、衣原體的結(jié)果解釋與臨床治療。19精選ppt支原體培養(yǎng)結(jié)果的解釋Uu和Mh的檢測相對較容易,但結(jié)果解釋應(yīng)慎重:支原體培養(yǎng)陽性,說明有支原體感染,如患者有臨床癥狀,但其他病原體陰性,則應(yīng)考慮支原體引起致病的可能,在部份正常人群中可以存在支原體。正常無菌部位:不成問題,血液、輸卵管或子宮內(nèi)膜來的標(biāo)本需要治療??赡転楣采嬖诘牟课唬恐笜?biāo)非常有用。20精選ppt支原體定量指標(biāo)推存值尿道標(biāo)本:≥104ccu/mlUu第1段尿、精液:≥103ccu/mlUu子宮頸:≥104ccu/mlMh21精選ppt衣原體結(jié)果解釋生殖道標(biāo)本衣原體結(jié)果如為陽性即可能感染衣原體,如結(jié)果為陰性,不能完全排除沙眼衣原體感染,需結(jié)合臨床癥狀全面考慮。22精選ppt支原體、衣原體治療23精選ppt支原體生物學(xué)特性與用藥關(guān)系支原體個體微小,無細(xì)胞壁是與細(xì)菌區(qū)別的主要特點,對作用于細(xì)胞壁的抗菌藥物不敏感,天然耐受所有β-內(nèi)酰胺類、磺胺嘧啶、甲氧芐啶和利福平。凡能作用于核蛋白體或影響蛋白質(zhì)合成的物質(zhì),如大環(huán)內(nèi)酯類、四環(huán)素和氟喹諾酮類可破壞支原體的細(xì)胞膜,使其死亡。治療原則:對作用于細(xì)胞壁的抗生素不敏感,對作用膜蛋白、漿蛋白敏感。24精選ppt2012年1-2月支原體藥敏試驗?zāi)退幝士股仃栃灾昕倲?shù)耐藥株總數(shù)耐藥率(%)中敏率(%)敏感率(%)阿奇霉素3558724.5123.3852.11紅霉素35514841.6923.3834.93環(huán)丙沙星35523666.677.6325.71環(huán)脂紅霉素3557019.720.5679.72加替沙星35517248.4524.5127.04甲砜霉素3558423.6633.2443.10交沙霉素35561.690.0098.31克拉霉素3557420.900.5678.53羅紅霉素3558624.2313.2462.54美滿霉素355154.231.9793.80強力霉素355185.071.6993.24左旋氧氟沙星35515543.6623.6632.6825精選ppt支原體感染治療根據(jù)藥敏結(jié)果選擇敏感藥物進行治療:首選:四環(huán)素類如強力霉素、美滿霉素,大環(huán)內(nèi)酯類如交沙霉素。次選:克拉霉素、阿

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