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文檔簡介
支原體、衣原體的檢測與臨床檢驗科1精選ppt支原體、衣原體定義支原體:是一類無細胞壁、呈高度多形態(tài)性,能通過濾菌器(0.45um),在人工培養(yǎng)基上能生長的最小原核微生物。衣原體:是一類能通過濾菌器、專性細胞內(nèi)寄生、有獨特生活周期的原核細胞型微生物。具有NDA和與革蘭氏陰性菌類似的細胞壁,對多種廣譜抗生素敏感。2精選ppt支原體、衣原體分類支原體分類:種類繁多,分布廣泛。其對人類致病的主要有肺炎支原體、生殖道支原體、穿透支原體、解脲脲原體和人型支原體。1981至1996年曾報道發(fā)醇支原體、穿透支原體和梨支原體是HIV的協(xié)同因子。衣原體分類:沙眼衣原體、鸚鵡熱衣原體、肺炎衣原體和家畜衣原體。3精選ppt支原體、衣原體檢測方法學支原體檢測方法:1、分離培養(yǎng)法2、血清學試驗(抗體測定)3、PCR(只做UU)4、改良肉湯稀釋法(解脲脲原體、人型支原體)優(yōu)點:價格低且可提供藥敏結(jié)果,是目前實驗室最常用方法。4精選ppt沙眼衣原體檢測方法沙眼衣原體的檢測方法:分離培養(yǎng)法(組織細胞學是診斷金標準)。聚合酶鏈反應法(PCR)/連接酶鏈反應法(LCR)直接免疫熒光法(DFA)酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)血清抗體檢測(肺炎衣原體、鸚鵡熱衣原體)抗原快速免疫層析法(快速法)5精選ppt目前我實驗室沙眼衣原體檢測方法聚合酶鏈反應法(PCR)抗原快速免疫層析法(快速法)酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA:常用方法)6精選ppt沙眼衣原體檢測方法細胞培養(yǎng)法優(yōu)點:特異性接近100%是沙眼衣原體檢測的“金標準”。缺點:昂貴、費時、要求高,用于研究或確認性試驗。PCR、LCR法優(yōu)點:敏感性很高,理論上只要一個原體,可通過擴增而檢測出陽性,也適用于無活性標本。
缺點:特異性相對較差,尤其是注意避免外界污染和殘留污染,實驗條件和質(zhì)量控制有嚴格要求。7精選ppt沙眼衣原體檢測方法直接免疫熒光法(DFA)優(yōu)點:快速、價廉、操作簡便。缺點:結(jié)果判斷受主觀因素影響大,要求較高,在低感染率人群中敏感性差??乖焖贆z測法:是目前基層醫(yī)院最常用沙眼衣原體檢測方法。
優(yōu)點:操作簡便、快速,無需復雜的儀器和設備。缺點:標本中需要足夠數(shù)量的沙眼衣原體抗原,否則可能出現(xiàn)漏檢,敏感性為30~65%,在試驗結(jié)果陰性時,不能完全排除感染,有可能是沙眼衣原體數(shù)量不足或標本采集不當?shù)木壒省?精選ppt沙眼衣原體檢測方法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)優(yōu)點:敏感性在70~98%,特異性>97%,可同時檢測大批量樣本,結(jié)果判斷客觀性強。
缺點:不適用于單個樣本的測定,試驗結(jié)果陰性時,有可能是沙眼衣原體數(shù)量不足或標本采集不當?shù)木壒省?精選ppt支原體、衣原體檢測結(jié)果與臨床關系1、正確采集標本是保證結(jié)果準確性的前提。2、支原體、衣原體流行病學與臨床癥狀。3、支原體、衣原體的結(jié)果解釋與臨床治療。10精選ppt采集泌尿生殖道標本正確方法尿道(男性):清潔尿道口,用男性無菌棉拭子插入尿道2-4cm,轉(zhuǎn)動3-5秒輕輕旋轉(zhuǎn)后取出放置在干燥試管中送檢,標本收集前被檢測者至少一小時不排尿。宮頸管(女性):清除陰道及宮頸口分泌物,無菌拭子插入宮頸管內(nèi)1-2cm,輕輕旋轉(zhuǎn)后取出,不可碰陰道壁。精液、羊水、前列腺液:由??漆t(yī)生取樣,無菌潔凈溶器盛裝送檢。11精選ppt采集泌尿道生殖道標本注意事項因支原體對細胞表面有很強親和力,衣原體又是一種嚴格細胞內(nèi)寄生的微生物,易感染柱狀上皮細胞,應盡量多采集細胞,所以宮頸標本的采集應在宮頸口或移行處進行,在患處采用拭子或刮片獲取。拭子進入宮頸或尿道后須停留數(shù)秒并旋轉(zhuǎn)刮取上皮細胞后再取出。陰道及宮頸口分泌物支原體、衣原體含量低,雜菌多,真菌較多,容易污染不可取。膿性分泌物由于缺少感染的上皮細胞不適用于此項檢測,應該在對患處進行清洗后采取標本。12精選ppt采集泌尿道生殖道標本注意事項要與PCR標本區(qū)別,月經(jīng)期、先兆流產(chǎn)婦女禁用;陰道用藥或灌洗后禁用。由于抗原快速檢測方法需要抗原量較大,請使用第一支拭子采集標本,否則可能導致假陰性結(jié)果。盡量使用絳棉或腈綸拭子,棉花中帶有抑制衣原體的成分,且棉花吸水性強,使用后標本量往往達不到試驗要求。標本采集后應盡快送檢,4℃放置不宜超過24h,13精選ppt支原體、衣原體檢測結(jié)果與臨床關系1、正確采集標本是保證結(jié)果準確性的前提。2、支原體、衣原體的臨床癥狀。3、支原體、衣原體的結(jié)果解釋與臨床治療。14精選ppt支原體感染臨床癥狀與傳播方式支原體因種類不同可引起肺炎、支氣管炎、咽炎、泌尿生殖道感染、與不孕不育、不良妊娠等有關。傳播方式:主要有性接觸傳播和垂直傳播,性接觸是支原體感染和傳播的重要途徑。15精選ppt沙眼衣原體感染臨床癥狀男性:尿道炎、附睪炎、直腸炎、結(jié)膜炎。女性:宮頸炎、尿道炎、子宮內(nèi)膜異位(衣原體感染女性發(fā)生率約為40%)、盆腔炎(50%由衣原體引起)、宮外孕(70%以上與衣原體感染有關)、生育能力下降或不孕、腹膜炎和結(jié)膜炎。嬰兒:新生兒眼炎和肺炎。16精選ppt沙眼衣原體感染流行病學沙眼衣原體感染是最常見的性傳播疾病在國外,沙眼衣原體感染率為10.4%∽16.4%。在我國,非淋菌性尿道炎已是感染率最高的性傳播疾病,而沙眼衣原體是非淋的主要病原體。20歲以下的女性是沙眼衣原體感染最高危的人群,這可能與年輕女性宮頸的解剖結(jié)構有關??诜茉兴幖皳碛卸鄠€性伴也增加感染的風險。17精選ppt沙眼衣原體檢測重要性CT是我國常見的性傳播疾病,其發(fā)病率高,流行廣泛,已成為較為嚴重的公共衛(wèi)生問題。大部分情況下(80%被感染女性和50%被感染男性),感染衣原體后都沒有明顯的臨床癥狀。引發(fā)的問題:潛在的感染源不利于及時防治由其引起的不孕不育等嚴重并發(fā)癥。容易反復感染,進而引起嚴重的宮外孕和宮頸癌,可促進HIV和HPV病毒感染。衛(wèi)生部于2007年頒布《全國性病監(jiān)測點監(jiān)測方案》,新增加了生殖道CT感染作為單監(jiān)測的病種。18精選ppt支原體、衣原體檢測結(jié)果與臨床關系1、正確采集標本是保證結(jié)果準確性的前提。2、支原體、衣原體流行病學與臨床癥狀。3、支原體、衣原體的結(jié)果解釋與臨床治療。19精選ppt支原體培養(yǎng)結(jié)果的解釋Uu和Mh的檢測相對較容易,但結(jié)果解釋應慎重:支原體培養(yǎng)陽性,說明有支原體感染,如患者有臨床癥狀,但其他病原體陰性,則應考慮支原體引起致病的可能,在部份正常人群中可以存在支原體。正常無菌部位:不成問題,血液、輸卵管或子宮內(nèi)膜來的標本需要治療。可能為共生菌存在的部位,定量指標非常有用。20精選ppt支原體定量指標推存值尿道標本:≥104ccu/mlUu第1段尿、精液:≥103ccu/mlUu子宮頸:≥104ccu/mlMh21精選ppt衣原體結(jié)果解釋生殖道標本衣原體結(jié)果如為陽性即可能感染衣原體,如結(jié)果為陰性,不能完全排除沙眼衣原體感染,需結(jié)合臨床癥狀全面考慮。22精選ppt支原體、衣原體治療23精選ppt支原體生物學特性與用藥關系支原體個體微小,無細胞壁是與細菌區(qū)別的主要特點,對作用于細胞壁的抗菌藥物不敏感,天然耐受所有β-內(nèi)酰胺類、磺胺嘧啶、甲氧芐啶和利福平。凡能作用于核蛋白體或影響蛋白質(zhì)合成的物質(zhì),如大環(huán)內(nèi)酯類、四環(huán)素和氟喹諾酮類可破壞支原體的細胞膜,使其死亡。治療原則:對作用于細胞壁的抗生素不敏感,對作用膜蛋白、漿蛋白敏感。24精選ppt2012年1-2月支原體藥敏試驗耐藥率抗生素陽性株總數(shù)耐藥株總數(shù)耐藥率(%)中敏率(%)敏感率(%)阿奇霉素3558724.5123.3852.11紅霉素35514841.6923.3834.93環(huán)丙沙星35523666.677.6325.71環(huán)脂紅霉素3557019.720.5679.72加替沙星35517248.4524.5127.04甲砜霉素3558423.6633.2443.10交沙霉素35561.690.0098.31克拉霉素3557420.900.5678.53羅紅霉素3558624.2313.2462.54美滿霉素355154.231.9793.80強力霉素355185.071.6993.24左旋氧氟沙星35515543.6623.6632.6825精選ppt支原體感染治療根據(jù)藥敏結(jié)果選擇敏感藥物進行治療:首選:四環(huán)素類如強力霉素、美滿霉素,大環(huán)內(nèi)酯類如交沙霉素。次選:克拉霉素、阿
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