度人教版DNA的粗提取與鑒定

§5.1DNA的粗提取與鑒定學(xué)習(xí)目標(biāo)：

1.簡(jiǎn)述DNA的物理化學(xué)性質(zhì)，學(xué)會(huì)對(duì)植物或動(dòng)物組織中的DNA進(jìn)行粗提取。2.簡(jiǎn)述DNA鑒定的原理,說(shuō)出DNA鑒定的過(guò)程。

激情投入，快樂(lè)學(xué)習(xí)，反思進(jìn)步。展示內(nèi)容展示組點(diǎn)評(píng)組1.畫出DNA在Nacl溶液中的溶解度曲線，并解讀該曲線G1G62.DNA和蛋白質(zhì)在酒精溶液中的溶解度的區(qū)別G2G53.DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性如何？G3G44.如何鑒定DNA?G4G35.去除濾液中的雜質(zhì)的三種方案分別是什么？G5G26.DNA進(jìn)一步析出的方法是什么？G6G1展示要求：1、語(yǔ)言簡(jiǎn)潔、準(zhǔn)確。2、非展示同學(xué)認(rèn)真思考，準(zhǔn)備點(diǎn)評(píng)補(bǔ)充和質(zhì)疑。點(diǎn)評(píng)要求：1、點(diǎn)評(píng)同學(xué)聲音洪亮，言簡(jiǎn)意賅。2、非點(diǎn)評(píng)同學(xué)注意傾聽(tīng)、思考，關(guān)鍵內(nèi)容做好筆記，有補(bǔ)充或不明白的地方及時(shí)提出。高效展示Letmetry!探究討論：探究討論1：什么樣的材料更適合提取DNA？對(duì)植物和動(dòng)物細(xì)胞處理的方法是否相同？探究討論3：若用二苯胺鑒定DNA時(shí)試管中不呈現(xiàn)藍(lán)色或藍(lán)色較淺，你覺(jué)得原因可能有哪些？探究討論2：在DNA的進(jìn)一步析出過(guò)程中為什么酒精要冷卻？此步驟中玻璃棒能否快速地?cái)嚢?？為什么?.DNA的溶解性

基礎(chǔ)知識(shí)：2.DNA不溶于酒精溶液DNA不溶于酒精溶液，但細(xì)胞中某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步分離。3.DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性①蛋白酶——水解蛋白質(zhì)，

對(duì)DNA沒(méi)有影響②高溫——大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受60～80℃

而DNA在80℃以上才會(huì)變性③洗滌劑——瓦解細(xì)胞膜，

但對(duì)DNA沒(méi)有影響4.特定的顏色反應(yīng)——鑒定DNA沸水浴條件下，DNA與二苯胺反應(yīng)呈現(xiàn)藍(lán)色。探究討論：探究討論1：什么樣的材料更適合提取DNA？

選用DNA含量相對(duì)較高的組織，易得易破裂你認(rèn)為下列哪些材料更適合提取DNA?菜花、香蕉等植物細(xì)胞；雞血、哺乳動(dòng)物的紅細(xì)胞；在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)的大腸桿菌觀看視頻，思考下列問(wèn)題：（1）對(duì)植物和動(dòng)物細(xì)胞處理的方法是否相同？

（2）結(jié)合課本，試想想視頻中對(duì)植物細(xì)胞處理時(shí)加入的研磨液中可能有哪些成分，作用分別是什么？

（3）鑒定DNA時(shí)，為什么用三支試管？

觀看視頻，思考下列問(wèn)題：（1）對(duì)植物和動(dòng)物細(xì)胞處理的方法是否相同？

（2）結(jié)合課本，試想想視頻中對(duì)植物細(xì)胞處理時(shí)加入的研磨液中可能有哪些成分，作用分別是什么？

不同，動(dòng)物細(xì)胞直接加蒸餾水吸水漲破植物細(xì)胞如菜花還需要加洗滌劑和食鹽并充分?jǐn)嚢韬脱心パ心ヒ褐锌赡芎邢礈靹┖褪雏}洗滌劑作用：溶解細(xì)胞膜食鹽作用:有利于溶解DNA去除濾液中的雜質(zhì)有哪些方案？方案一方案二方案三恒溫水浴鍋DNA的進(jìn)一步析出：探究討論2：在DNA的進(jìn)一步析出過(guò)程中為什么酒精要冷卻？此步驟中玻璃棒能否快速攪拌？酒精冷卻的原因：

①低溫可抑制核酸水解酶的活性,防止DNA降解②低溫可降低分子的運(yùn)動(dòng)，易于形成沉淀析出③低溫有利于增加DNA分子的柔韌性，減少斷裂玻璃棒不能快速攪拌的原因：防止DNA分子斷裂，導(dǎo)致DNA分子不能形成絮狀沉淀探究討論3：若用二苯胺鑒定DNA時(shí)試管中不呈現(xiàn)藍(lán)色或藍(lán)色較淺，你覺(jué)得原因可能有哪些？DNA的鑒定：原因可能有：1.材料中核物質(zhì)沒(méi)有充分釋放出來(lái)，如研磨不充分或蒸餾水的量不夠2.加入酒精后搖動(dòng)或攪拌時(shí)過(guò)猛，DNA被破壞3.析出含DNA的黏稠物時(shí)，蒸餾水一次快速加入，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果4.實(shí)驗(yàn)中有多次攪拌，但是其目的及操作方法是不同的，操作時(shí)不注意區(qū)分，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果（3）鑒定DNA時(shí)，為什么用三支試管？第一支試管中加從動(dòng)物細(xì)胞中獲得的DNA提取液第二支試管中加從植物細(xì)胞中獲得的DNA提取液第三支試管中不加DNA提取液，作為

空白對(duì)照，其他條件一致歸納總結(jié)：DNA粗提取和鑒定的主要步驟1、材料的選擇

2、破碎細(xì)胞釋放DNA3、去除濾液中的雜質(zhì)4、DNA的析出與鑒定DNA含量豐富的細(xì)胞含核物質(zhì)DNA的濾液DNA在NaCl中溶解度不同向2mol/lNaCl中加入冷酒精，讓DNA析出物在沸水浴下與二苯胺反應(yīng)顯藍(lán)色當(dāng)堂檢測(cè)：見(jiàn)檢測(cè)案1、關(guān)于DNA的粗提取與鑒定的實(shí)驗(yàn),不是該實(shí)驗(yàn)依據(jù)的實(shí)驗(yàn)原理的一項(xiàng)是(

)。A.DNA在NaCl溶液中的溶解度,隨著NaCl溶液濃度的不同而不同B.利用DNA不溶于酒精的性質(zhì),可除去細(xì)胞中溶于酒精的物質(zhì)而得到較純的DNAC.DNA是大分子有機(jī)物,不溶于水而溶于某些有機(jī)溶劑D.在沸水中DNA遇二苯胺會(huì)出現(xiàn)藍(lán)色反應(yīng)當(dāng)堂檢測(cè)：見(jiàn)檢測(cè)案2、下表有關(guān)“DNA粗提取與鑒定”的相關(guān)操作中所選取的試劑,不正確的是(

)。當(dāng)堂檢測(cè)：選項(xiàng)相關(guān)操作

選取的試劑A

破碎雞血細(xì)胞

蒸餾水B

溶解核內(nèi)DNA

2

mol/L

NaCl溶液C

提取雜質(zhì)較少的DNA

冷卻的95%的酒精D

DNA的鑒定

雙縮脲試劑當(dāng)堂檢測(cè)：3.在DNA的粗提取的步驟中,對(duì)增加DNA提取量不利的是(

)。A.使血細(xì)胞在蒸餾水中充分破裂,充分放出DNA等物質(zhì)B.在濾取含DNA的黏稠物時(shí),要用多層紗布C.在析出含DNA的黏稠物時(shí),要緩緩地加入足量的蒸餾水,稀釋度越小越好D.要用冷酒精沉淀DNA,再將混合物放入冰箱中冷卻4、某同學(xué)在做DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中，加入二苯胺鑒定的結(jié)果是有DNA的試管中溶液顏色很淡，其原因不可能是（）A．經(jīng)蒸餾水處理的紅細(xì)胞，在用玻璃棒攪拌時(shí)，時(shí)間偏少，

使紅細(xì)胞破裂數(shù)量少

B．未進(jìn)行沸水浴或沸水浴時(shí)間短，導(dǎo)致DNA含量少，染色

時(shí)間不夠

C．選擇雞血液時(shí)，選用雞血細(xì)胞液，D．用NaCl溶液進(jìn)行鹽析時(shí)，所配制的NaCl溶液濃度達(dá)不到0.14moL/L，使析出的DNA少C1．填寫本實(shí)驗(yàn)完成下列實(shí)驗(yàn)操作時(shí)所用試劑。

⑴提取雞血細(xì)胞中核物質(zhì)：

⑵溶解核內(nèi)DNA：

⑶析出2mol/LNaCl溶液中