5.-實(shí)驗(yàn)小鼠的傳染性疾病

KennethS.Henderson,PhDDirector,ResearchandDevelopment,ResearchAnimalDiagnosticServices實(shí)驗(yàn)小鼠的傳染性疾病2021/3/29星期一1馬

vs.

斑馬常識-

知道什么是常見的–1.2.病變或其他問題通常是由常見病因而非罕見病因引起的.

大多數(shù)病變是非傳染性的證實(shí)一種罕見的感染可能會1.2.3.作為發(fā)表文章的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)流行病學(xué)調(diào)查的依據(jù)讓人興奮!3.4.種群和設(shè)施經(jīng)理需要知道什么是正常，以便根據(jù)對危險(xiǎn)等級的準(zhǔn)確評估制定監(jiān)測頻率。記住—許多傳染病不再只存在于實(shí)驗(yàn)小鼠中，同時(shí)也存在于寵物、飼養(yǎng)員和野生小鼠中。2021/3/29星期一2BetaStrepBOPOPBetaStrepGOPOPC.bovisPPIDonlyHelicobacterPPPPK.oxytocaOPOPK.pneumononiaeOPOPM.pulmonisPPPPPP.aeruginosaOPOPP.pneumotropicaOPPPS.aureusOPOPPneumocystisPPPP?FurMitesPPPPPPinwormsOPOP(PP?)PCryptosporidiumOPOP(PP?)?SpironucleusmurisOP?AdenovirusPPPP?GroupArotavirus(MRV/EDIM)PPPP?MousehepatitisvirusPPPP?MouseparvovirusesPPPP?Mousetheiloviruses(TMEV)PPPP?MurinenorovirusPPPP?I

mmunoco

mp

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de

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ei

nctB

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va

oi

r已報(bào)道或推測的影響健康、研究和行為的因素?

許多病原體被認(rèn)為是條件致病

菌（OP），因?yàn)樗鼈冎挥性谔?/p>

殊環(huán)境下才引起疾病?

一些被認(rèn)為是主要致病菌（PP

），盡管不表現(xiàn)臨床癥狀，但

是在細(xì)胞/分子水平與一些變化

相關(guān)，甚至有改變行為的潛在

可能。?

基因工程小鼠被認(rèn)為免疫不確

定性Agent2021/3/29星期一3病毒流行

–

小鼠

?

全球范圍內(nèi)，有5種病毒仍在實(shí)驗(yàn)小鼠中流行

(不包

括未被發(fā)現(xiàn)的病毒、新興病毒和逆轉(zhuǎn)錄病毒)

?

在我們實(shí)驗(yàn)室檢測非CRL樣品的陽性率—粗略的流

行性統(tǒng)計(jì)1.

諾如病毒

–

MNV2.

細(xì)小病毒

–

MVM,

MPV3.

冠狀病毒

–

MHV4.

A型輪狀病毒

–

EDIM5.

微小RNA病毒

–

TMEV

是其他病毒的10倍以上1-2%,

季節(jié)性增加

<1%

<1%,

季節(jié)性增加

<1%

次流行病毒—腺病毒和仙臺病毒?

其他病毒在實(shí)驗(yàn)小鼠中非常罕見.2021/3/29星期一4MHV?

腸道株相對較常見?

只在免疫缺陷小鼠中引起持續(xù)性感染?

通常局限于腸道(向腸的)

(存在于糞便中)–

幾乎只在免疫缺陷小鼠中出現(xiàn)感染現(xiàn)象（通常在排泄物中）–

大多數(shù)文獻(xiàn)報(bào)道都是關(guān)于呼吸株?

容易通過血清學(xué)方法診斷

(MFIA,

ELISA)?

PCR–

在感染期通過檢測糞便進(jìn)行篩檢–

通過檢測腸系膜淋巴結(jié)確認(rèn)血清學(xué)結(jié)果?

通過凈化消除?

在環(huán)境中易失活2021/3/29星期一52021/3/29星期一62021/3/29星期一7裸小鼠.

不是

MHV.合胞體無特征性病變.2021/3/29星期一8MHV對研究的影響?

延長免疫反應(yīng)(多數(shù)為基于呼吸株的研究):–

MHV

使NK細(xì)胞衰竭–

激活T和B淋巴細(xì)胞?

約有>

1,000

CD8

T細(xì)胞克隆結(jié)合至MHV的S蛋白抗原表位(JHM

株感染C57BL/6)–

感染單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、骨髓樹突狀細(xì)胞–

延遲同種異體移植排斥2021/3/29星期一9MHV

混合感染的干擾?

以C3H為背景的IFN-γ缺陷（KO）小鼠，患有伴有肉芽腫性腹膜炎的衰竭綜合征–

相對于單獨(dú)感染MHV，協(xié)同感染肝螺桿菌和向腸的

MHV-G的小鼠在感染后第一周的死亡率、病變發(fā)生率及

嚴(yán)重程度較低–

與此相反的，在第28天時(shí)協(xié)同感染的小鼠的肝炎和腦膜炎更嚴(yán)重2021/3/29星期一10細(xì)小病毒

–

關(guān)鍵點(diǎn)?

在研究機(jī)構(gòu)中相對常見

<2%?

幼齡鼠感染小鼠微小病毒（MVM）和小鼠細(xì)小病毒（MPV1-X）后會通過糞便排毒8周或更久?

無臨床癥狀–

免疫缺陷小鼠感染小鼠微小病毒除外?

血清學(xué)診斷

–

應(yīng)用復(fù)合毒株/抗原–

流行性可能很低,

C57BL/6小鼠需要高滴度?

用PCR方法檢測糞便樣品以判斷當(dāng)前感染情況，檢測

腸系膜淋巴結(jié)（MLN）/脾臟以確診（排毒停止后仍保

持陽性結(jié)果）?

通過凈化消除–

病毒可在環(huán)境中保持活性，所以必須凈化2021/3/29星期一11MVM對研究的影響?

免疫學(xué),

細(xì)胞培養(yǎng),

或許腫瘤研究

(所有使用培養(yǎng)適應(yīng)性毒株，而非野毒株的研究)–

能感染多種小鼠細(xì)胞系，也可以感染一些大鼠胚胎細(xì)胞系和轉(zhuǎn)化的人細(xì)胞系（324K，EL-4）–

在體外，MVMi可減少T細(xì)胞應(yīng)答；在體內(nèi)，MVMp后期可減少記憶細(xì)胞的細(xì)胞毒性–

在體外，MVMp可使細(xì)胞骨架失調(diào)（A9細(xì)胞系）–

在一些人腫瘤（血管肉瘤）和小鼠腫瘤中MVMp具有親瘤性和溶瘤細(xì)胞性2021/3/29星期一12MPV對研究的影響?

MPV-1a(細(xì)胞培養(yǎng)適應(yīng)株)調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答

(McKisicet

al,

1993,

1996,

1998)

–

在體外:

抑制T細(xì)胞應(yīng)答?

CD8+

T淋巴細(xì)胞克隆失去功能和活力–

感染MPV-1a后，細(xì)胞因子-

和抗原-誘導(dǎo)的T細(xì)胞增殖在體外受到抑制–

在體內(nèi):?

在BALB/c鼠中可能會增強(qiáng)移植排斥反應(yīng),

但在同一只小鼠中會降低T細(xì)胞的細(xì)胞溶解能力

–

在BALB/c鼠中引起同系移植排斥反應(yīng)?

脾臟和腘淋巴結(jié)增生減少，但是腸系膜淋巴結(jié)增生增加(隨著啟動和刺激之后)2021/3/29星期一13MPV對研究的影響?

MPV-5

–在第14和28天時(shí)，γ-球蛋白緩慢增加

(Cray,

et

al.,

2010)–

在結(jié)腸中的增速比MHV，MPV等病毒慢2021/3/29星期一14有趣的事實(shí)現(xiàn)在更多的實(shí)驗(yàn)室、更多的文章報(bào)道的是MNV對研究的影響，而不是MPV2021/3/29星期一15EDIM

(乳鼠流行性腹瀉,小鼠輪狀病毒,

MRV)

–

關(guān)鍵點(diǎn)?

腹瀉和脫水僅存在于非免疫母鼠生的、2周齡以下的幼鼠中——最近未見疾病爆發(fā)?

通常免疫功能正常小鼠僅排毒幾周或更短時(shí)間?

感染后容易通過血清學(xué)方法篩查?

PCR敏感性高,

但是很難在糞便中檢測到病毒，因

為排毒很短暫（MLN），但可以從排風(fēng)管道粉塵中

檢測到病毒?

通過凈化消除(不可交叉哺乳)–

病毒可在環(huán)境中持續(xù)存在2021/3/29星期一16輪狀病毒具有季節(jié)性:MRV-53處設(shè)施的血清學(xué)陽性結(jié)果

(1/2012

–

8/2013)23-Dec-20112012

01-Apr-2012

2012

10-Jul-2012

2012

18-Oct-2012

201226-Jan-2013

201306-May-2013

14-Aug-2013

22-Nov-2013Q1

Q3

Q4

QQ

Q1

Q2

Q3

Q22021/3/29星期一17小鼠諾沃克病毒(MNV)

關(guān)鍵點(diǎn)?

非常普遍(10倍于檢測到的其他小鼠病毒)?

除先天免疫系統(tǒng)嚴(yán)重缺陷的品系外，不致病

–

可能與免疫缺陷小鼠肝臟中的白細(xì)胞集群有關(guān)，甚至發(fā)

生于免疫功能正常的小鼠中?????所有野毒株均能引起長期感染,

通過糞便排毒血清學(xué)檢測良好(血清轉(zhuǎn)陽現(xiàn)象較緩慢)PCR檢測非常敏感(糞便)不會持續(xù)通過受污染墊料傳播需要早期交叉哺乳或重新凈化消除

–

凈化環(huán)境無實(shí)際意義2021/3/29星期一18小鼠諾沃克病毒對研究的影響?

一些(很少使用的)毒株會致病?

對先天免疫和/或樹突狀細(xì)胞研究有潛在影響–

宿主防御啟動刺激先天免疫系統(tǒng)產(chǎn)生免疫應(yīng)答

(若無免疫應(yīng)答,

則小鼠死亡)–

在體內(nèi)會感染樹突狀細(xì)胞和巨噬細(xì)胞?

被證實(shí)會干擾一些炎癥和免疫研究2021/3/29星期一19小鼠諾沃克病毒對研究的影響?

mdr1a

-/-

小鼠感染MNV-4會增加幽門螺桿菌誘發(fā)結(jié)腸炎的嚴(yán)重性

(Lencioni

et

al,

Comp

Med,

2008)–

MNV

可改變樹突狀細(xì)胞的抗原遞呈作用，能增強(qiáng)螺桿菌引起腸道疾病的炎癥?

在Smad3-/-

小鼠中MNV-4

對螺桿菌引起的結(jié)腸癌無影響(Lencioni

et

al,

Comp

Med,

2011)2021/3/29星期一20小鼠諾沃克病毒對研究的影響?

MNV-1對小鼠A型流感或牛痘病毒的免疫反應(yīng)無影響

(Hensley

SE,

et

al.

J

Virol

83:7357-7360,

2009)?

MNV-G和MPV共同感染BALB/c和C57BL/6小鼠會延長MPV排毒和增加組織中MPV的DNA含量(Compton,

SR,

et

al.

J

Am

Assoc

Lab

Anim

Sci,

49:11-21,

2010)2021/3/29星期一21小鼠諾沃克病毒對研究的影響?

MNV4(6-10

wk

p.i.)對飲食誘導(dǎo)10周的C57BL/6J肥

胖模型無影響

(體重增加,

肥胖癥,

葡萄糖,

葡萄糖耐

受實(shí)驗(yàn),

胰島素,

甘油三酯)

(Paik,

et

al.

Comp

Med

60:189-195,2010)–

淋巴結(jié)增生及綜合評分有小幅增加–

在腸系膜脂肪、腹腔巨噬細(xì)胞和肝臟中檢測不到MNV?

在ldlr

-/-小鼠中，加重動脈粥樣硬化程度和巨噬細(xì)胞增加(Paik,

et

al.

Comp

Med

61:330-338,

2011)2021/3/29星期一22小鼠諾沃克病毒對研究的影響?

Cadwell

et

al,

2010,

Cell

141:1135-1145–

ATG16L1

亞效等位基因小鼠模型具有克羅恩氏?。–rohn’s

Disease）的易感基因–

作者發(fā)現(xiàn)該易感基因+MNV（維持株）會導(dǎo)致潘納斯細(xì)胞（Paneth

cells）異常–

易感基因+MNV+DSS導(dǎo)致克羅恩氏病的特點(diǎn)?

抗生素抑制–

SPF級小鼠,

共生菌群的可能作用?

依賴于腫瘤壞死因子α（TNFα）和γ干擾素（IFNγ）2021/3/29星期一23小鼠腦脊髓炎病毒(TMEV)–

關(guān)鍵點(diǎn)?

不常見，但仍然會偶爾發(fā)現(xiàn)?

小鼠腦脊髓炎病毒與大鼠疑似泰勒病毒相似(但它們有

區(qū)別)?

可通過糞便長期排毒?

除免疫缺陷鼠外，很少致?。òc瘓）?

血清學(xué)是好的檢測方法，其傳染到哨兵鼠的效率低?

PCR

–

糞便

–

排氣管道粉塵樣本?

通過凈化消除,

或許交叉哺乳也可以

–

環(huán)境凈化2021/3/29星期一24乳酸脫氫酶增高病毒(LDEV,

LDV)

–

關(guān)鍵點(diǎn)?????不常見

–

與腫瘤細(xì)胞系相關(guān)通常不排毒,

但是通過咬傷或交配可能感染終生感染

–

感染巨噬細(xì)胞可引起免疫缺陷鼠癱瘓血清學(xué)檢測（只在近期開始使用）–

但是不會傳染給

哨兵鼠?

可監(jiān)測血清里乳酸脫氫酶（LDH）水平進(jìn)行篩查

–

也可以通過溶血和其他人工手段促進(jìn)升高進(jìn)行評估?

PCR

(血清/組織)

效果很好，因?yàn)楦腥臼浅掷m(xù)的2021/3/29星期一25螺桿菌屬

–

關(guān)鍵點(diǎn)?

流行率很高且在多數(shù)嚙齒類動物中普遍存在?

均引起大腸終身感染，有的也感染肝臟–

通過糞便排毒?

敏感品系的慢性炎癥

(免疫缺陷鼠,

C57BL/6,

A/J)?

對干燥非常敏感–

在控制良好的、使用IVC籠具的設(shè)施中不傳播?

用PCR檢測種群動物糞便進(jìn)行監(jiān)測?

通過凈化和交叉哺乳消除2021/3/29星期一26肝螺桿菌?

免疫缺陷小鼠的直腸脫垂–

近期研究顯示其它幽門桿菌與直腸脫垂有關(guān)(C.

Miller,

et.

al.,

2014)?

增生性盲腸結(jié)腸炎–

具有提示性，但不能確診2021/3/29星期一27背景病變?

免疫缺陷小鼠會發(fā)生直腸脫垂，未感染螺桿菌屬的小鼠有時(shí)也會發(fā)生（偶爾）2021/3/29星期一28肝螺桿菌2021/3/29星期一29螺桿菌屬

–

研究影響?

直接影響,

根據(jù)以上提到的各種情況,

螺桿菌屬可激活包括三級淋巴濾泡發(fā)育在內(nèi)的宿主防御系統(tǒng)的特異和非特異免疫反應(yīng)?

感染的間接影響不導(dǎo)致病變，因而不好描述，但可能影響其他腸道菌群2021/3/29星期一30螺桿菌屬

–

研究影響?

肝螺桿菌

可促進(jìn)A/JCr小鼠的盲腸表達(dá)炎性介質(zhì)。

雌性比雄性表達(dá)量高?

A/JCr

或

SCID小鼠單獨(dú)感染嚙齒類螺桿菌不會引

起肝炎或腸炎，但是與肝螺桿菌混合感染時(shí)會加劇

炎癥和炎癥介質(zhì)的表達(dá)?

對感染肝螺桿菌的A/J小鼠的肝臟進(jìn)行基因分析，顯示特定的腫瘤標(biāo)志物會隨著肝細(xì)胞非典型增生而增加2021/3/29星期一31肝螺桿菌

和癌癥?

肝細(xì)胞癌–

原始報(bào)告顯示A/J小鼠肝癌的增長率通常較低–

從那時(shí)起，得到了其他研究的證實(shí)，并與基因表達(dá)譜中觀察到的變化相一致?

結(jié)腸癌–

感染某些易感品系，尤其是129SvEv

或

BALB/c背景的IL-10

-/-小鼠→

IBD類疾病→

發(fā)育異常→

結(jié)腸癌?

乳腺炎–

RAG2-/-

Apc(min/+)小鼠的乳腺炎發(fā)生率較高（繼發(fā)于炎癥）2021/3/29星期一32嗜肺巴氏桿菌

–

關(guān)鍵點(diǎn)?

非常常見,

尤其在轉(zhuǎn)基因小鼠中（伴隨小鼠諾沃克病毒+螺桿菌）?

免疫缺陷小鼠–

與膿腫相關(guān)–

肺孢子蟲等病原體的繼發(fā)感染源–

對免疫功能正常的鼠基本不致病?

診斷

–

通過污染墊料不能很好的傳播–

細(xì)菌培養(yǎng)

–

結(jié)膜,

鼻咽部,

盲腸,

陰道,

子宮–

經(jīng)常過度生長，以致鑒定錯(cuò)誤比較常見–

PCR

–

使用糞便,

口腔拭子,

皮膚拭子進(jìn)行篩查；通過病變進(jìn)行診斷；排風(fēng)管道粉塵檢測也可行。?

通過胚胎凈化消除,

也可用抗生素–

不能在環(huán)境中持續(xù)存在2021/3/29星期一33嗜肺巴斯德桿菌2021/3/29星期一34牛棒狀桿菌

感染

–

關(guān)鍵點(diǎn)?

大棒狀桿菌

(革蘭氏陽性桿菌)

–

許多常見棒狀桿菌是非致病的

–

對無毛和免疫缺陷小鼠致病

?

一旦感染,

感染似乎是終身的

?

免疫功能正常小鼠似乎不會（長期）攜帶?

診斷––––“鱗屑”的爆發(fā)是該病的信號，尤其是經(jīng)過組織學(xué)證實(shí)的組織學(xué)

=

彌漫性棘層肥厚

&

革蘭氏陽性桿菌細(xì)菌培養(yǎng)

(要當(dāng)心自動編號系統(tǒng)出現(xiàn)編號錯(cuò)誤)PCR

–

皮膚拭子,

糞便,

環(huán)境拭子?

通過凈化消除–

環(huán)境污染非常難消除2021/3/29星期一35暴露

0天癥狀可能出現(xiàn)

7-10天14-20天牛棒狀桿菌感染的生活史

排毒和組織損傷至少持續(xù)30

天，持續(xù)感染

癥狀消失2021/3/29星期一362021/3/29星期一37“正常”牛棒狀桿菌2021/3/29星期一38牛棒狀桿菌對研究的影響?

直接影響:–

體重丟失–

攝水量增加–

異種移植物生長緩慢–

對化療的敏感性增加–

新生鼠死亡率增加?

間接影響:–

免疫學(xué)方面等

–

未知2021/3/29星期一39蟯蟲病

(蟯蟲)?

生物學(xué):–

蟯蟲

(四翼無刺線蟲，隱藏管狀線蟲(小鼠),鼠蟯蟲(大鼠)–

生活史?

四翅類無刺線蟲將蟲卵排入糞便中，孵化6-7天?

管狀線蟲將蟲卵附著在肛周毛發(fā)上，孵化幾個(gè)小時(shí)?

管狀線蟲屬潛伏期12-15

天

，無刺線蟲屬潛伏期23-25天2021/3/29星期一40蟯蟲病?

流行病學(xué):–

通過接觸具有傳染性的物質(zhì)進(jìn)行傳播–

蟲卵