實(shí)驗(yàn)14果蠅飼養(yǎng)與觀察課件

實(shí)驗(yàn)14.果蠅飼養(yǎng)與觀察實(shí)驗(yàn)14.果蠅飼養(yǎng)與觀察11.了解果蠅生活史中各階段的形態(tài)特點(diǎn)；2.識(shí)別雌雄果蠅及常見(jiàn)突變類型；3.掌握果蠅飼養(yǎng)與雜交技術(shù)。一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.了解果蠅生活史中各階段的形態(tài)特點(diǎn)；一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?果蠅：野生型、白眼、黑檀體、殘翅、白眼小翅焦剛毛用具:解剖鏡、放大鏡、小鑷子、麻醉瓶、白瓷板、瓷缸電子天平、電爐。試劑:乙醚、酒精、玉米粉、酵母二、實(shí)驗(yàn)材料、用具及試劑果蠅：野生型、白眼、黑檀體、殘翅、白眼小翅焦剛毛二、實(shí)驗(yàn)材料33.1果蠅的生活史及形態(tài)特征黑腹果蠅（Drosophilamelanogaster2n=8）

節(jié)肢動(dòng)物門、昆蟲(chóng)綱、雙翅目、果蠅科、果蠅屬，與家蠅是不同的種。三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容3.1果蠅的生活史及形態(tài)特征三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容4

包括卵、幼蟲(chóng)、蛹和成蟲(chóng)4個(gè)階段；為完全變態(tài)。最適溫度：20-25℃生活史周期：12-15day(20-25℃)10day(26℃)57day(10℃)交配產(chǎn)卵：羽化8-12h交配羽化兩天后產(chǎn)卵成蟲(chóng)存活：15day(25℃)3.1.1生活簡(jiǎn)史三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括卵、幼蟲(chóng)、蛹和成蟲(chóng)4個(gè)階段；為完全變態(tài)。3.1.5羽化后的雌蠅12小時(shí)后開(kāi)始交配，兩天后產(chǎn)卵。卵長(zhǎng)0.5mm，為橢圓形，腹面稍扁平，被絨毛膜，在背面的前端伸出一對(duì)觸絲（filament）

卵能附著在食物(或瓶壁)上，不致深陷到食物中去。3.1.2卵的形態(tài)與特征三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容羽化后的雌蠅12小時(shí)后開(kāi)始交配，兩天后產(chǎn)卵。3.6三齡幼蟲(chóng)4.5mm在培養(yǎng)基上作溝穿孔卵孵化后，經(jīng)過(guò)兩次蛻皮發(fā)育成三齡幼蟲(chóng)，體長(zhǎng)4-5mm?？梢?jiàn)頭部(前端稍尖部分)、口器(黑點(diǎn))和唾液腺(口器后一對(duì)透明長(zhǎng)袋)，軀體后半部上方的兩側(cè)，透過(guò)體壁可見(jiàn)一對(duì)生殖腺，精巢大而黑、卵巢小而淺，為♀♂鑒別依據(jù)。幼蟲(chóng)活動(dòng)力強(qiáng)而貪食，在培養(yǎng)基上爬行時(shí)留下很多條溝，溝多而且寬時(shí)，表明幼蟲(chóng)生長(zhǎng)良好。3.1.3幼蟲(chóng)形態(tài)與特征三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容三齡幼蟲(chóng)4.5mm在培養(yǎng)基上作溝穿孔卵孵化后，經(jīng)過(guò)兩7幼蟲(chóng)生活7-8天準(zhǔn)備化蛹，化蛹前從培養(yǎng)基上爬出，附著在瓶壁上，逐漸形成一梭形的蛹。蛹前部有兩個(gè)呼吸孔，后部有尾芽，起初蛹?xì)ゎ伾S而柔軟，之后逐漸硬化，變?yōu)樯詈稚?。深色硬化蛹表明即將羽化?.1.4蛹的形態(tài)特征三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容幼蟲(chóng)生活7-8天準(zhǔn)備化蛹，化蛹前從培養(yǎng)基上爬出，83.1.5成蟲(chóng)的形態(tài)與特征幼蟲(chóng)在蛹?xì)?nèi)完成成蟲(chóng)體型和器官的分化，最后從蛹?xì)で岸伺莱?。剛從蛹?xì)び鸹鰜?lái)的果蠅蟲(chóng)體較長(zhǎng)，翅膀尚未展開(kāi)，體表尚未完全幾丁質(zhì)化，故呈半透明的乳白色。透過(guò)腹部體壁，可以看到黑色的消化系統(tǒng)。不久，蟲(chóng)體變?yōu)槎檀謭A形，雙翅展開(kāi)，體色加深。如野生型初為淺灰色，然后呈灰褐色。三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容3.1.5成蟲(chóng)的形態(tài)與特征幼蟲(chóng)在蛹?xì)?nèi)完成成9果蠅生活周期長(zhǎng)短與溫度關(guān)系很密切。30℃以上能使果蠅不育和死亡，低溫使其生活周期延長(zhǎng)、生活力下降，果蠅培養(yǎng)最適溫度為20-25℃。10℃15℃20℃25℃卵

幼蟲(chóng)8天5天幼蟲(chóng)

成蟲(chóng)57天18天6.3天4.2天從表中可以看出，25℃時(shí)，從卵到成蟲(chóng)約10天；在25℃時(shí)成蟲(chóng)約活15天。3.1.6溫度與生活史三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容果蠅生活周期長(zhǎng)短與溫度關(guān)系很密切。30℃以上能使果蠅101、生活史短，20-25℃下一個(gè)世代約12-15天；

2、繁殖率高，一對(duì)果蠅可產(chǎn)卵400-500只；

3、飼養(yǎng)方便；

4、突變率高；

5、形態(tài)容易辨認(rèn)。3.1.7果蠅的優(yōu)點(diǎn)三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1、生活史短，20-25℃下一個(gè)世代約12-15天；

2、繁113.1.8果蠅的寄生蟲(chóng)——螨蟲(chóng)三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容3.1.8果蠅的寄生蟲(chóng)——螨蟲(chóng)三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容12頭部：有一對(duì)復(fù)眼，三個(gè)單眼和一對(duì)觸角。胸部：有三對(duì)足，一對(duì)翅和一對(duì)平衡棒。腹部：背面有黑色環(huán)紋，腹面有腹片，外生殖器在腹部末端，全身有許多體毛和剛毛。三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容3.2.形態(tài)構(gòu)造頭部：有一對(duì)復(fù)眼，三個(gè)單眼和一對(duì)觸角。三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容3.2.形133.3成蟲(chóng)雌雄鑒別雌果蠅雄果蠅體形較大體形較小腹部橢圓形，末端稍尖腹部末端鈍圓腹部背面有明顯的五條黑色條紋腹部背面有三條黑色花紋，前兩條細(xì)，后一條寬且延續(xù)至腹面腹部腹面有明顯的6個(gè)腹片(剛毛圍成一圈)四個(gè)腹片無(wú)性梳第一對(duì)跗節(jié)基部的一節(jié)有性梳外生殖器外觀比較簡(jiǎn)單外生殖器外觀較復(fù)雜，剛羽化的幼蠅用低倍鏡可明顯觀察到生殖弧、肛口板及陰莖三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容3.3成蟲(chóng)雌雄鑒別雌果蠅雄果蠅體形較大體形較小腹部橢圓形，14

♀♂個(gè)體大小腹紋53腹部末端尖圓性梳無(wú)有3.3.1雌雄識(shí)別要點(diǎn)三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容

♀♂個(gè)體大小腹紋53腹部末端尖圓性梳無(wú)有3.3.1雌雄15♀個(gè)體大、♂個(gè)體小3.3.1雌雄識(shí)別要點(diǎn)三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容♀個(gè)體大、♂個(gè)體小3.3.1雌雄識(shí)別要點(diǎn)三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容16♂有性梳、♀沒(méi)有3.3.1雌雄識(shí)別要點(diǎn)三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容♂有性梳、♀沒(méi)有3.3.1雌雄識(shí)別要點(diǎn)三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容17♂腹紋3條，末端圓；♀腹紋5條，末端尖♂。3.3.1雌雄識(shí)別要點(diǎn)三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容♂腹紋3條，末端圓；♀腹紋5條，末端尖♂。18成體果蠅雌雄性別的辨別成體果蠅雌雄性別的辨別19♀體生殖孔空；♂體交配器圓3.3.1雌雄識(shí)別要點(diǎn)三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容♀體生殖孔空；♂體交配器圓3.3.1雌雄識(shí)別要點(diǎn)三、實(shí)驗(yàn)203.4果蠅基因組與性別決定三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容染色體組成2n=8核內(nèi)有絲分裂：不涉及細(xì)胞核分裂的染色體分裂方式體聯(lián)會(huì)：唾腺細(xì)胞染色體經(jīng)多次復(fù)制卻不分開(kāi)，依舊緊密地排列在一起就象減數(shù)分裂中的聯(lián)會(huì)現(xiàn)象一樣。染色體組：2n=2x=8,x=4。連鎖群：4對(duì)染色體攜帶基因；連鎖群=4。3.4.1果蠅基因組3.4果蠅基因組與性別決定三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容染色體組成2n21為XY型，但Y染色體在性別上不起決定作用，只與育性有關(guān)。含有Y染色體可產(chǎn)生正常配子，不含Y染色體則配子不育；性別受性指數(shù)決定。X/A=1為雌性；X/A=0.5為雄性；X/A＞1為超雌；X/A＜0.5為超雄；0.5＜X/A＜1則為中間性。雌雄基因平衡理論：X染色體上有很多雌性基因，常染色體上有很多雄性基因，Y染色體上很少或沒(méi)有與性別決定有關(guān)的基因，因此性別決定于基因的平衡。3.4果蠅基因組與性別決定三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容3.4.2果蠅性別決定為XY型，但Y染色體在性別上不起決定作用，只與育性有關(guān)22X染色體上有141個(gè)基因；第2染色體上有228個(gè)基因；第3染色體上有156個(gè)基因；第4染色體上有12個(gè)基因。3.4果蠅基因組與性別決定三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容3.4.2果蠅的連鎖群X染色體上有141個(gè)基因；3.4果蠅基因組與性別決定三、23突變性狀基因符號(hào)形狀特征染色體白眼Whitew復(fù)眼白色X1.5cM檀黑體Ebonye體呈烏木色，黑亮IIIR70.7cM黑體Black

b體呈深色I(xiàn)IL48.5cM殘翅Vestigicalvg翅退化，部分殘留IIR60.7cM焦剛毛Singedsn剛毛卷曲x21.0cM小翅Miniatarem翅較短X36.1cM3.4常見(jiàn)的果蠅突變類型三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容突變性狀基因符號(hào)形狀特征染色體白眼Whitew復(fù)眼白244.1.1培養(yǎng)基的配制果蠅以酵母菌為食，常采用發(fā)酵的培養(yǎng)基繁殖酵母菌來(lái)飼養(yǎng)果蠅。培養(yǎng)基常用玉米粉、米粉或香蕉配制，本實(shí)驗(yàn)采用玉米培養(yǎng)基，其配方如下：四、實(shí)驗(yàn)步驟4.1果蠅的飼養(yǎng)水80ml玉米粉8.25g糖6.2g瓊脂0.62g丙酸0.5ml酵母少許4.1.1培養(yǎng)基的配制四、實(shí)驗(yàn)步驟4.1果蠅的飼養(yǎng)水254.1.2配制方法四、實(shí)驗(yàn)步驟4.1果蠅的飼養(yǎng)將80ml水分成兩份：一份用于溶解瓊脂和糖，另一份煮玉米粉，待兩份分別溶解煮好后再合到一起煮沸，很粘稠為度。關(guān)掉火后再加入丙酸，充分?jǐn)嚢韬笤俜盅b培養(yǎng)瓶；待培養(yǎng)基冷卻后，在培養(yǎng)基表面灑上一層酵母粉。4.1.2配制方法四、實(shí)驗(yàn)步驟4.1果蠅的飼養(yǎng)26四、實(shí)驗(yàn)步驟4.1果蠅的飼養(yǎng)4.1.3注意事項(xiàng)⑴分裝前將飼養(yǎng)瓶、棉塞、吸水紙及其它用具和器皿高壓滅菌（15磅，15min）。⑵分裝時(shí)，勿使飼料粘附瓶壁。⑶待飼料冷卻后，灑上一層酵母粉或滴幾滴酵母液于飼料表面。用吸水紙擦凈瓶壁上水汽，塞上棉塞。準(zhǔn)備滅菌的棉塞準(zhǔn)備滅菌濾紙包好的棉塞121℃滅菌20min四、實(shí)驗(yàn)步驟4.1果蠅的飼養(yǎng)4.1.3注意事項(xiàng)⑴分裝27將果蠅轉(zhuǎn)移到新配制的培養(yǎng)基中繁殖。注意轉(zhuǎn)移手法，防止果蠅從兩瓶接口飛走。可用黑紙包住親本果蠅瓶，讓其飛入新培養(yǎng)基瓶。轉(zhuǎn)移的親本及新培養(yǎng)基果蠅的轉(zhuǎn)移四、實(shí)驗(yàn)步驟4.1果蠅的飼養(yǎng)4.1.4果蠅繼代轉(zhuǎn)移培養(yǎng)將果蠅轉(zhuǎn)移到新配制的培養(yǎng)基中繁殖。注意轉(zhuǎn)移手28四、實(shí)驗(yàn)步驟4.1果蠅的飼養(yǎng)4.1.5果蠅繼代培養(yǎng)25℃培養(yǎng)7-10天，能見(jiàn)幼蟲(chóng)爬到瓶璧或?yàn)V紙上化蛹時(shí)，處死親代果蠅。四、實(shí)驗(yàn)步驟4.1果蠅的飼養(yǎng)4.1.5果蠅繼代培養(yǎng)2529四、實(shí)驗(yàn)步驟4.2果蠅性狀觀察4.2.1果蠅麻醉果蠅性狀觀察、性別鑒定以及雜交親本接種等操作宜先將果蠅麻醉，使其保持安靜狀態(tài)。（1）準(zhǔn)備一只麻醉瓶，并配脫脂棉塞；（2）去掉培養(yǎng)瓶塞，立即與麻醉瓶口相對(duì)，培養(yǎng)瓶在上一手穩(wěn)住兩瓶，另一手輕拍培養(yǎng)瓶使果蠅落入麻醉瓶中。麻醉轉(zhuǎn)移果蠅手法四、實(shí)驗(yàn)步驟4.2果蠅性狀觀察4.2.1果蠅麻醉30四、實(shí)驗(yàn)步驟4.2果蠅性狀觀察4.2.1果蠅麻醉（3）滴數(shù)滴乙醚于麻醉瓶棉塞內(nèi)塞住，約30s，果蠅處于麻醉狀態(tài)。不能麻醉過(guò)度；蠅翅與蠅體呈45o角翹起時(shí)表明麻醉過(guò)度死亡。（4）麻醉后的果蠅放在白瓷板或白紙板上，用毛筆刷移動(dòng)檢查，肉眼或放大鏡觀察。不再用的果蠅務(wù)必處死防雜。滴加乙醚數(shù)滴果蠅的麻醉劑四、實(shí)驗(yàn)步驟4.2果蠅性狀觀察4.2.1果蠅麻醉（3）滴31⑸死亡果蠅的標(biāo)志四、實(shí)驗(yàn)步驟4.2果蠅性狀觀察4.2.1果蠅麻醉蠅翅與蠅體呈45o角翹起麻醉過(guò)度的果蠅⑸死亡果蠅的標(biāo)志四、實(shí)驗(yàn)步驟4.2果蠅性狀觀察4.2.132四、實(shí)驗(yàn)步驟4.3突變性狀觀察4.3.1野生型+野生型紅眼睛灰身體長(zhǎng)翅型直剛毛四、實(shí)驗(yàn)步驟4.3突變性狀觀察4.3.1野生型+野生型33四、實(shí)驗(yàn)步驟4.3突變性狀觀察4.3.2突變性狀焦剛毛白眼小翅snwm白眼雌雄小翅與尾部約等長(zhǎng)wsnm分別在X染色體1.521.036.1cM處焦剛毛：剛毛似火燙焦四、實(shí)驗(yàn)步驟4.3突變性狀觀察4.3.2突變性狀焦剛毛白眼34四、實(shí)驗(yàn)步驟4.3突變性狀觀察4.3.3突變性狀殘翅Vestigicalvg四、實(shí)驗(yàn)步驟4.3突變性狀觀察4.3.3突變性狀殘翅Ves35四、實(shí)驗(yàn)步驟4.3突變性狀觀察4.3.4突變性狀黑檀體(e)和黑體(b)黑檀體Ebony(e)3號(hào)染色體70.7cM處黑體(b)在2號(hào)染色體48.5cM處四、實(shí)驗(yàn)步驟4.3突變性狀觀察4.3.4突變性狀黑檀體(e36四、實(shí)驗(yàn)步驟4.3突變性狀觀察4.3.5焦剛毛(sn)突變性狀種類四、實(shí)驗(yàn)步驟4.3突變性狀觀察4.3.5焦剛毛(sn)突373、眼睛的顏色2、翅的大小1、身體的顏色四、實(shí)驗(yàn)步驟4.3突變性狀觀察4.3.6突變性狀小結(jié)3、眼睛的顏色2、翅的大小1、身體的顏色四、實(shí)驗(yàn)步驟4.338觀察后的結(jié)果填入下表類型特征

黑身白眼小翅白眼殘翅紅眼黑檀體野生型體色黑色(b)正常(+)正常(+)黑色(e)正常(+)眼色白色(w)白色(w)紅色(+)紅色(+)紅色(+)翅形正常(+)小翅(m)小翅(vg)正常(+)正常(+)剛毛形態(tài)正常(+)正常(+)