2023版藥典培養(yǎng)基適用性驗證

2024版藥典培養(yǎng)基適用性驗證培育基驗證文件

驗證文件名稱驗證文件編碼計數(shù)培育基適用性檢查驗證方案TS-YZ-2522-01

制藥有限公司

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驗證立項申請表

驗證立項題目計數(shù)培育基適用性檢查的驗證立項編號TS-YZ-2522-01驗證形式驗證

立項部門質(zhì)量部申請日期年月日驗證對象計數(shù)培育基適用性

驗證目的及驗證內(nèi)容

需氧菌、霉菌及酵母菌計數(shù)用的培育基應(yīng)進行培育基的適用性檢查。本次驗證的目的是確認(rèn)胰酪大豆胨瓊脂培育基和沙氏葡萄糖瓊脂培育基是否適合需氧菌、霉菌及酵母菌數(shù)測定。

主管部門

審核意見

同意對計數(shù)培育基適用性檢查試驗方案進行驗證。

年月日

對驗證方案的編制及實施要求驗證方案編制應(yīng)科學(xué)，合理，方法應(yīng)切實可行，實施必需根據(jù)方案進行。

驗證總負(fù)

責(zé)人批準(zhǔn)

經(jīng)審核批準(zhǔn)對計數(shù)培育基適用性檢查進行驗證。

簽字：年月日

驗證方案的審批

起草部門簽名日期化驗室

質(zhì)量部

批準(zhǔn)部門簽名日期質(zhì)量部

驗證總負(fù)責(zé)人

驗證方案名目

1、概述

2、驗證目的

3、驗證范圍

4、驗證項目小組成員及職責(zé)

5、驗證合格標(biāo)準(zhǔn)

6、試驗材料

7、菌液制備

8、適用性檢查

9、驗證記錄

10、驗證結(jié)論及綜合評價

計數(shù)培育基適用性檢查的驗證方案

1.驗證目的：

需氧菌、霉菌及酵母菌計數(shù)用的培育基應(yīng)進行培育基的適用性檢查。本次驗證的目的是確認(rèn)胰酪大豆胨瓊脂培育基和沙氏葡萄糖瓊脂培育基是否適合需氧菌、霉菌及酵母菌總數(shù)測定。

2.參照標(biāo)準(zhǔn)：《中國藥典》2024年版四部1105非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查法。

3.驗證項目：胰酪大豆胨瓊脂培育基和沙氏葡萄糖瓊脂培育基的適用性檢查。

4.驗證小組人員及職責(zé)：

人員組成姓名部門職務(wù)/職稱職責(zé)

組長質(zhì)量部副部長

負(fù)責(zé)驗證期間各部門的協(xié)調(diào)及整個驗

證過程的詳細(xì)實施。

成員化驗室主任

負(fù)責(zé)驗證方案的起草及詳細(xì)實施，確

保驗證過程能按方案規(guī)定的程序進

行，負(fù)責(zé)各種驗證資料（檢查結(jié)果）

的整理，負(fù)責(zé)驗證報告的編寫。

化驗室化驗員

化驗室化驗員

負(fù)責(zé)驗證方案的審核及批準(zhǔn)；負(fù)責(zé)出具檢

驗報告；審查驗證報告及發(fā)放驗證報告；

負(fù)責(zé)驗證文件的管理

化驗室化驗員

負(fù)責(zé)驗證報告的編寫規(guī)范；審查驗證

報告及發(fā)放驗證報告。

5.合格標(biāo)準(zhǔn)：被檢固體培育基上的菌落平均數(shù)與對比培育基上的菌落平均數(shù)的比值應(yīng)在0.5～2范圍內(nèi)，且菌落形態(tài)大小與對比培育基上的菌落全都。

6.試驗材料：

6.1.被驗證產(chǎn)品：胰酪大豆胨瓊脂培育基、沙氏葡萄糖瓊脂培育基。

6.2.儀器設(shè)備：

6.2.1.YXQ-LS-100G型立式壓力蒸汽滅菌器

6.2.2.GHT-00雙人凈化工作臺

6.2.3.BSC-110011A2-X生物平安柜

6.2.4.MJ-250I型霉菌培育箱(20～25℃)

6.2.5.LRH-250生化培育箱(30～35℃)

6.2.6.電熱恒溫干燥箱

6.2.7微波爐

6.3.驗證用培育基

名稱生產(chǎn)廠家批號

6.4.驗證用菌株：(第代)

驗證菌株培育基培育溫度培育時間（小時）

7.菌液制備

按6.4規(guī)定程序培育各試驗菌株。取金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽

孢桿菌、白色念珠菌的新奇培育物，用pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液制成約為

50~100cfu∕ml的菌懸液；取黑曲霉的新奇培育物加入3～5ml含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液，將孢子洗脫。然后，采納相宜的方法吸

出孢子懸液至無菌試管內(nèi)，用含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的pH7.0無菌氯化鈉-蛋

白胨緩沖液制成約為50~100cfu∕ml的黑曲霉孢子懸液。

8.適用性檢查：

8.1.取金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌的菌液（50～100cfu/ml）各

1ml，每株試驗菌平行制備2個平皿，分別注入2個無菌平皿中，馬上傾注胰酪大豆胨瓊脂培育基，并作陰性對比，混勻，凝固，置30～35℃培育24小時，計數(shù)；取白色念珠菌的菌液（50～100cfu/ml）各1ml，分別注入2個無菌平皿中，馬上傾注沙氏葡萄糖瓊脂培育基，并作陰性對比，混勻，凝固，置20～25℃培育72小時，計數(shù)；取黑曲霉菌的菌液（50～100cfu/ml）1ml，注入無菌平皿中，馬上傾注沙氏葡萄糖瓊脂培育基，每株試驗菌平行制備2個平皿，并作陰性對比，混勻，凝固，置20～25℃培育168小時，計數(shù)。

8.2.取金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌的菌液（50～100cfu/ml）各

1ml，分別注入無菌平皿中，馬上傾注胰酪大豆胨瓊脂對比培育基，每株試驗菌平行制備2個平皿，并作陰性對比，混勻，凝固，置30～35℃培育24小時，計數(shù)；取白色念珠菌的菌液（50～100cfu/ml）各1ml，分別注入無菌平皿中，馬上傾注沙氏葡萄糖瓊脂對比培育基，每株試驗菌平行制備2個平皿，并作陰性對比，混勻，凝固，置20～25℃培育72小時，計數(shù)；取黑曲霉菌的菌液（50～100cfu/ml）各1ml，分別注入無菌平皿中，馬上傾注沙氏葡萄糖瓊脂對比培育基，每株試驗菌平行制備2個平皿，并作陰性對比，混勻，凝固，置20～25℃培育168小時，計數(shù)。

9.驗證記錄

10.驗證結(jié)論及綜合評價

評價人：日期：

附表1：

計數(shù)培育基適用性檢查驗證記錄

試驗時間年月日完成時間年月日

驗證菌株平皿號驗證培育基組

（cfu∕ml）

陰性對比

（cfu∕ml）

對比培育基組

(cfu∕ml)

陰性對比

（cfu∕ml）

菌落平均數(shù)的比值

（應(yīng)在0.5～2范圍

大腸埃希菌(培育3天計數(shù))

1--

2--平均值

金黃色葡萄球菌(培育3天計數(shù))

1--

2--平均值

枯草芽孢桿菌(培育3天計數(shù))

1--

2--平均值

白色念珠菌

(培育5天開頭計數(shù))

1--

2--平均值

黑曲霉菌1--

文案大全

(培育5天開頭計數(shù))2--平均值

結(jié)論

復(fù)核人試驗人

復(fù)核人試驗人

文案大全

驗證報告的審批

起草部門簽名日期化驗室

質(zhì)量部

批準(zhǔn)部門簽名日期質(zhì)量部

驗證總負(fù)責(zé)人

驗證報告

1.驗證目的：

需氧菌、霉菌及酵母菌計數(shù)用的培育基應(yīng)進行培育基的適用性檢查。本次驗證的目的是確認(rèn)胰酪大豆胨瓊脂培育基和沙氏葡萄糖瓊脂培育基是否適合需氧菌、霉菌及酵母菌總數(shù)測定。

2.參照標(biāo)準(zhǔn)：《中國藥典》2024年版四部1105非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查法。

3.驗證項目：胰酪大豆胨瓊脂培育基和沙氏葡萄糖瓊脂培育基的適用性檢查。

4.驗證小組人員及職責(zé)：

人員組成姓名部門職務(wù)/職稱職責(zé)

組長質(zhì)量部副部長

負(fù)責(zé)驗證期間各部門的協(xié)調(diào)及整個驗

證過程的詳細(xì)實施。

成員化驗室主任

負(fù)責(zé)驗證方案的起草及詳細(xì)實施，確

保驗證過程能按方案規(guī)定的程序進

行，負(fù)責(zé)各種驗證資料（檢查結(jié)果）

的整理，負(fù)責(zé)驗證報告的編寫。

化驗室化驗員

化驗室化驗員

負(fù)責(zé)驗證方案的審核及批準(zhǔn)；負(fù)責(zé)出具檢

驗報告；審查驗證報告及發(fā)放驗證報告；

負(fù)責(zé)驗證文件的管理

化驗室化驗員

負(fù)責(zé)驗證報告的編寫規(guī)范；審查驗證

報告及發(fā)放驗證報告。

5.合格標(biāo)準(zhǔn)：被檢固體培育基上的菌落平均數(shù)與對比培育基上的菌落平均數(shù)的比值應(yīng)在0.5～2范圍內(nèi)，且菌落形態(tài)大小與對比培育基上的菌落全都。

6.試驗材料：

6.1.被驗證產(chǎn)品：胰酪大豆胨瓊脂培育基、沙氏葡萄糖瓊脂培育基。

6.2.儀器設(shè)備：

6.2.1.YXQ-LS-100G型立式壓力蒸汽滅菌器

6.2.2.GHT-00雙人凈化工作臺

6.2.3.BSC-110011A2-X生物平安柜

6.2.4.MJ-250I型霉菌培育箱(20～25℃)

6.2.5.LRH-250生化培育箱(30～35℃)

6.2.6.電熱恒溫干燥箱

6.2.7微波爐

6.3.驗證用培育基

名稱生產(chǎn)廠家批號

6.4.驗證用菌株：(第代)

驗證菌株培育基培育溫度培育時間（小時）

7.菌液制備

按6.4規(guī)定程序培育各試驗菌株。取金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽

孢桿菌、白色念珠菌的新奇培育物，用pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液制成約為

50~100cfu∕ml的菌懸液；取黑曲霉的新奇培育物加入3～5ml含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液，將孢子洗脫。然后，采納相宜的方法吸

出孢子懸液至無菌試管內(nèi)，用含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的pH7.0無菌氯化鈉-蛋

白胨緩沖液制成約為50~100cfu∕ml的黑曲霉孢子懸液。

8.適用性檢查：

8.1.取金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌的菌液（50～100cfu/ml）各

1ml，每株試驗菌平行制備2個平皿，分別注入2個無菌平皿中，馬上傾注胰酪大豆胨瓊脂培育基，并作陰性對比，混勻，凝固，置30～35℃培育24小時，計數(shù)；取白色念珠菌的菌液（50～100cfu/ml）各1ml，分別注入2個無菌平皿中，馬上傾注沙氏葡萄糖瓊脂培育基，并作陰性對比，混勻，凝固，置20～25℃培育72小時，計數(shù)；取黑曲霉菌的菌液（50～100cfu/ml）1ml，注入無菌平皿中，馬上傾注沙氏葡萄糖瓊脂培育基，每株試驗菌平行制備2個平皿，并作陰性對比，混勻，凝固，置20～25℃培育168小時，計數(shù)。

8.2.取金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌的菌液（50～100cfu/ml）各

1ml，分別注入無菌平皿中，馬上傾注胰酪大豆胨瓊脂對比培育基，每株試驗菌平行制備2個平皿，并作陰性對比，混勻，凝固，置30～35℃培育24小時，計數(shù)；取白色念珠菌的菌液（50～100cfu/ml）各1ml，分別注入無菌平皿中，馬上傾注沙氏葡萄糖瓊脂對比培育基，每株試驗菌平行制備2個平皿，并作陰性對比，混勻，凝固，置20～25℃培育72小時，計數(shù)；取黑曲霉菌的菌液（50～100cfu/ml）各1ml，分別注入無菌平皿中，馬上傾注沙氏葡萄糖瓊脂對比培育基，每株試驗菌平行制備2個平皿，并作陰性對比，混勻，凝固，置20～25℃培育168小時，計數(shù)。

9.驗證記錄

10.驗證結(jié)論及綜合評價

附表1：

計數(shù)培育基適用性檢查驗證記錄

試驗時間年月日完成時間年月日

驗證菌株平皿號驗證培育基組

（cfu∕ml）

陰性對比

（cfu∕ml）

對比培育基組

(cfu∕ml)

陰性對比

（cfu∕ml）

菌落平均數(shù)的比值

（應(yīng)在0.5～2范圍

大腸埃希菌(培育3天計數(shù))

1--

2--平均值

金黃色葡萄球菌(培育3天計數(shù))

1--

2--平均值

枯草芽孢桿菌(培育3天計數(shù))

1--

2--平均值

白色念珠菌

(培育5天開頭計數(shù))

1--

2--平均值

黑曲霉菌1--

文案大全

(培育5天開頭計數(shù))2--平均值

結(jié)論

復(fù)核人試驗人

復(fù)核人試驗人

文案大全

制藥有限公司

驗證證書

驗證文件名稱計數(shù)培育基適用性檢查的驗證驗證文件編號TS-YZ-2522-01

驗證對象計數(shù)培育基適用性檢查

驗證結(jié)論合格

證書編號YZ-2522

驗