手術(shù)感染八項(xiàng)的檢測(cè)方法及臨床意義_第1頁(yè)
手術(shù)感染八項(xiàng)的檢測(cè)方法及臨床意義_第2頁(yè)
手術(shù)感染八項(xiàng)的檢測(cè)方法及臨床意義_第3頁(yè)
手術(shù)感染八項(xiàng)的檢測(cè)方法及臨床意義_第4頁(yè)
手術(shù)感染八項(xiàng)的檢測(cè)方法及臨床意義_第5頁(yè)
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手術(shù)感染八項(xiàng)的檢測(cè)方法及臨床意義手術(shù)感染八項(xiàng)是各醫(yī)院術(shù)前必查的八項(xiàng)感染指標(biāo),包括:乙型肝炎病毒五項(xiàng)血清標(biāo)志物(乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎表面抗體(抗-HBs)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)、乙型肝炎e抗體(抗-HBe)、乙型肝炎核心抗體(抗-HBc)、丙型肝炎病毒抗體(抗-HCV)、艾滋病病毒抗原抗體(抗-HIV)和梅毒血清特異性抗體(抗-TP)。旨在手術(shù)過(guò)程中防范、減少和避免這些病毒在院內(nèi)的交叉感染和傳播以及防范醫(yī)療風(fēng)險(xiǎn)和醫(yī)療糾紛的發(fā)生。本文就我院手術(shù)感染八項(xiàng)的檢測(cè)方法及臨床意義,簡(jiǎn)要介紹如下。一、檢測(cè)方法目前,國(guó)內(nèi)大多數(shù)醫(yī)院手術(shù)感染八項(xiàng)的檢測(cè)方法主要有三種免疫法:兩種酶免疫法(EIA和ELISA)和化學(xué)發(fā)光微粒子免疫檢測(cè)法(簡(jiǎn)稱:化學(xué)發(fā)光法)。前者優(yōu)點(diǎn):特異性和敏感性高、成本較低;缺點(diǎn):操作較復(fù)雜、費(fèi)時(shí),只能定性檢測(cè);后者優(yōu)點(diǎn):特異性和敏感性高、操作簡(jiǎn)便、快速、定量(如:HbsAg和抗-HBs)/半定量分析;缺點(diǎn):檢測(cè)成本較高。二、臨床意義(一)乙肝五項(xiàng)的臨床意義HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe和抗-HBc五項(xiàng)指標(biāo),即通常俗稱的“乙肝五項(xiàng)”或稱“乙肝兩對(duì)半”。如何正確分析這些指標(biāo)的臨床意義,是臨床醫(yī)生經(jīng)常遇到而又覺(jué)得比較復(fù)雜的問(wèn)題。1.乙型肝炎表面抗原(HBsAg)2.3.HBsAg是機(jī)體感染HBV的標(biāo)志,也是在機(jī)體血清中首先出現(xiàn)的病毒標(biāo)志物。HBsAg出現(xiàn)的時(shí)間,與機(jī)體感染HBV的途徑和感染的劑量有關(guān)。如果系輸用HBsAg陽(yáng)性血,2周后即可檢測(cè)到HBsAg,如用RIA法檢測(cè),于接種后6天,血清中即可出現(xiàn)HBsAg陽(yáng)性;如感染劑量少,HBsAg出現(xiàn)陽(yáng)性的時(shí)間可達(dá)3?4個(gè)月,甚至6個(gè)月;一般在感染HBV后4?6周可出現(xiàn)HBsAg陽(yáng)性。HBsAg出現(xiàn)陽(yáng)性后1?7周(平均約4周)才出現(xiàn)肝炎癥狀和肝功能異常。經(jīng)血感染者,其潛伏期約為2個(gè)月;經(jīng)口感染者,其潛伏期大約為3個(gè)月。急性乙肝病程一般持續(xù)1—3個(gè)月,80%?90%的患者可以臨床治愈[1]。HBsAg陽(yáng)性在血中一般持續(xù)1—6周,長(zhǎng)者可達(dá)20周(14—148天);在肝炎癥狀出現(xiàn)后1?4周或血清轉(zhuǎn)氨酶達(dá)高峰后1?12周消失,如果HBsAg陽(yáng)性持續(xù)超過(guò)6個(gè)月仍不轉(zhuǎn)陰則稱為持續(xù)陽(yáng)性或慢性攜帶狀態(tài);如系急性乙肝,HBsAg持續(xù)陽(yáng)性超過(guò)6個(gè)月則提示慢性化。我國(guó)HBV感染(急性和慢性)的人群中每年大約有4%?10%的HBsAg陽(yáng)性者轉(zhuǎn)陰,同時(shí)每年又有約4%?10%的人群由易感人群成為受感染者,因而,人群HBV感染狀態(tài)在不斷變化[2]。HBsAg陽(yáng)性持續(xù)的時(shí)間和急性乙肝慢性化的比例與感染者的年齡有關(guān),年齡愈小,形成持續(xù)感染或病情慢性化的概率愈大;圍產(chǎn)期感染的嬰兒80%將成為HBsAg的攜帶者;幼兒期感染者約30%將成為持續(xù)HBsAg攜帶者,正常成年人感染HBV后形成持續(xù)性感染的比例可能在5%以下;社會(huì)普通人群中約35%?50%的HBsAg陽(yáng)性攜帶者是在母嬰圍產(chǎn)期感染的[3]。最近研究表明:成人急性感染HBV后,慢性化者僅為1%?3%,絕大多數(shù)痊愈。Kaganov等[2,3]對(duì)15歲以下真正急性感染的兒童129名隨訪2?24個(gè)月,115名痊愈,且絕大多數(shù)產(chǎn)生了抗-HBs,14名(半歲以下)因暴發(fā)性肝炎死亡,未見(jiàn)慢性化。說(shuō)明絕大多數(shù)急性乙肝預(yù)后良好,無(wú)慢性化。但是,HBV慢性感染者HBsAg轉(zhuǎn)陰十分困難,肝組織學(xué)正常的慢性感染者HBsAg年陰轉(zhuǎn)率為0.8%,肝組織學(xué)證實(shí)為慢性肝炎者為0.5%[4]。HBsAg陽(yáng)性表示有HBV感染,其感染狀態(tài)有兩種情況:①有完整病毒復(fù)制,具有傳染性。此時(shí),其它病毒復(fù)制指標(biāo)亦陽(yáng)性,如HBeAg、HBVDNA、HBVDNA-P和Pre-S1、S2等;②無(wú)完整病毒復(fù)制,不具有傳染性。HBVDNA整合至宿主細(xì)胞基因組的過(guò)程中,表達(dá)其它病毒蛋白的基因丟失,僅有HBsAg表達(dá)而無(wú)完整病毒形成[2]。臨床上,HBsAg陽(yáng)性可見(jiàn)于急性乙肝患者的潛伏期、急性期;慢性乙肝,無(wú)癥狀攜帶者;部分肝硬化和肝癌患者的血清中和受HBV感染的肝細(xì)胞漿中。HBsAg陽(yáng)性一般來(lái)說(shuō)表明機(jī)體內(nèi)存在HBV感染,但陰性也不能完全排除HBV感染。原因是:可能由于HBV和HBsAg含量極少,檢測(cè)方法不夠靈敏而漏檢,或因試劑質(zhì)量和操作問(wèn)題而出現(xiàn)假陰性;S基因變異引起HBsAg的表達(dá)和分泌發(fā)生障礙,體內(nèi)雖存在HBV,但血清中測(cè)不到HBsAg或很少[5,6];S基因變異后所表達(dá)的HBsAg不能被現(xiàn)在廣泛使用的一些試劑所測(cè)出[7,8]。后兩者雖HBsAg陰性,但往往伴有HBeAg、抗-HBe和抗-HBc等其他HBV感染標(biāo)志物的陽(yáng)性。即使真正陰性,也不能完全排除HBV感染,因?yàn)橛?%的乙肝患者,癥狀開始之前HBsAg已轉(zhuǎn)陰;如抗-HBs或抗-HBe于發(fā)病后2?9個(gè)月出現(xiàn)陽(yáng)性者,仍可診斷為急性乙肝[9]。在暴發(fā)性乙肝中,常???HBs提前出現(xiàn),而HBsAg陰性;輸用HBsAg陰性而抗-HBc陽(yáng)性的血液后,可發(fā)生急性乙型肝炎。采用PCR技術(shù)可以進(jìn)一步證實(shí),某些HBsAg陰性的肝炎患者及獻(xiàn)血人員中的血清中存在HBVDNA:10]。在分析HBsAg陽(yáng)性結(jié)果時(shí),有幾點(diǎn)應(yīng)注意:不能以HBsAg滴度的高低來(lái)判斷肝炎或感染者病情的輕重。因?yàn)镠BV感染者血清中HBsAg的滴度經(jīng)常在波動(dòng),其滴度高低和病情之間并無(wú)直接關(guān)系,HBsAg滴度上升并不表明病情就嚴(yán)重,下降也不表明病情在好轉(zhuǎn);有人甚至認(rèn)為HBsAg滴度和病情呈反比。不能以HBsAg的滴度來(lái)判斷肝炎的類型。HBsAg的滴度高低,也不能用來(lái)判斷傳染性的有無(wú)。HBsAg本身不含病毒核酸,不具傳染性,但HBsAg陽(yáng)性血清,不論其滴度高低都可能含有具有傳染性劑量的病毒顆粒。如果HBVDNA整合至宿主肝細(xì)胞DNA中,血清中無(wú)游離病毒顆粒,此時(shí)HBsAg陽(yáng)性血液則無(wú)傳染性。HBsAg滴度不能作為評(píng)價(jià)或判斷某藥物臨床治療效果的指標(biāo)。前面講過(guò),HBsAg既不反映病情的嚴(yán)重程度,又不含病毒的核酸成份,本身還經(jīng)常波動(dòng),以HBsAg滴度的升降說(shuō)明某種藥物的效果,是沒(méi)有科學(xué)根據(jù)的[11]。乙型肝炎表面抗體(抗-HBs)抗-HBs是一種中和抗體,對(duì)HBV具有保護(hù)性免疫,可中和HBV感染、抵御再次感染。多數(shù)自限性HBV感染的患者,其抗-HBs出現(xiàn)在急性感染的恢復(fù)期,80%的患者于HBsAg消失、臨床癥狀消退數(shù)周至數(shù)月內(nèi)出現(xiàn)抗-HBs。抗-HBs出現(xiàn)的早晚和滴度的高低,與重復(fù)感染有關(guān)。首次感染者,多在4?5個(gè)月出現(xiàn),滴度不高,持續(xù)6個(gè)月?3年;再次感染者,2周后即可檢出高滴度的抗-HBs???HBs陽(yáng)性率在急性乙肝恢復(fù)期最高,其他各型乙肝檢出率均低。一般說(shuō)來(lái),抗-HBs陽(yáng)性血清HBsAg/抗-HBs-IgM陰性,ALT正常???HBs陽(yáng)性可見(jiàn)于:乙型肝炎的恢復(fù)期;HBV既往感染者;乙肝疫苗接種后;部分暴發(fā)性乙型肝炎;自然感染康復(fù)后的患者血清抗-HBs和抗-HBc呈雙陽(yáng)性,由于抗-HBc持續(xù)存在的時(shí)間較長(zhǎng)(〉8?10年),抗-HBs持續(xù)存在的時(shí)間較短(6個(gè)月?3年),故單項(xiàng)抗-HBs陽(yáng)性少見(jiàn)(接種乙肝疫苗除外),單項(xiàng)抗-HBs陽(yáng)性且為低滴度時(shí)多為非特異性反應(yīng)所致假陽(yáng)性[2]。臨床上,有時(shí)能遇到HBsAg與抗-HBs同時(shí)陽(yáng)性,此種模式國(guó)外報(bào)告,在各型肝炎中,總發(fā)生率為32%;國(guó)內(nèi)報(bào)告為5.75%。見(jiàn)于以下幾種情況:抗原和抗體的動(dòng)態(tài)平衡階段;抗-HBs為假陽(yáng)性;不同HBsAg亞型雙重感染或同型HBV的再次感染;機(jī)體免疫功能異常,病毒S基因突變后,明顯改變了HBsAg的抗原結(jié)構(gòu),使它不能與野毒株的抗-HBs發(fā)生中和反應(yīng),結(jié)果出現(xiàn)野毒株的抗-HBs與變異株的HBsAg同時(shí)持續(xù)存在同一體內(nèi)[12]不能處理HBsAg;既往感染HBV-1或接種乙肝疫苗者再感染HBV-2:2]???HBs對(duì)機(jī)體的保護(hù)性作用,近年來(lái)有不同意見(jiàn),有人發(fā)現(xiàn)抗-HBs陽(yáng)性醫(yī)務(wù)人員意外感染HBV可發(fā)生急性乙肝。國(guó)內(nèi)駱抗先等:13]應(yīng)用PCR技術(shù)檢測(cè)9例抗-HBs陽(yáng)性患者,4例HBVDNA陽(yáng)性???HBs對(duì)機(jī)體的保護(hù)性可能與不同HBV亞型感染有關(guān),同一亞型的抗-HBs只對(duì)同一亞型的HBV感染有保護(hù)性,而對(duì)不同亞型的HBV感染則沒(méi)有保護(hù)性或保護(hù)性不強(qiáng)。此外,可能還與血液中有效的抗-HBs濃度太低有關(guān)。乙型肝炎e抗原(HBeAg)HBeAg是乙型肝炎核心抗原的可溶性成份,常常與血清HBVDNA、DNA-P及Dane顆粒同時(shí)存在,為HBV復(fù)制和具有傳染性的標(biāo)志。通常HBeAg遲于HBsAg1周出現(xiàn),先于HBsAg2周消失;若HBeAg持續(xù)陽(yáng)性超過(guò)10周,表明病情可能趨向慢性。血清中HBeAg陽(yáng)性,僅見(jiàn)于:HBsAg陽(yáng)性的急性肝炎、慢性肝炎、無(wú)癥狀HBsAg攜帶者和部分肝硬化、肝癌患者。慢性感染者,隨著年齡增長(zhǎng),HBeAg陽(yáng)性率下降;慢性乙肝患者HBeAg每年自然陰轉(zhuǎn)率為25.6%。無(wú)癥狀攜帶者為9.3%:14]。一般說(shuō)來(lái),HBeAg陽(yáng)性僅見(jiàn)于HBsAg陽(yáng)性血清中,臨床上,有時(shí)也可見(jiàn)到HBsAg陰性而HBeAg陽(yáng)性,其原因:①檢測(cè)HBsAg的方法不夠靈敏;②血清中類風(fēng)濕因子的干擾,導(dǎo)致假陽(yáng)性。③HBsAg己與抗-HBs形成免疫復(fù)合物的形式存在,故測(cè)不出HBsAg。④在HBsAg消失和抗-HBs出現(xiàn)后,HBV仍留在血清中,其Dane顆粒表面的HBsAg被抗-HBs所包裹,以致檢測(cè)不出。⑤試劑質(zhì)量及操作等原因,也可導(dǎo)致HBeAg的假陽(yáng)性[1]。乙型肝炎e抗體(抗-HBe)抗-HBe出現(xiàn)于HBeAg陰轉(zhuǎn)后,抗-HBe的出現(xiàn)表明傳染性下降。過(guò)去認(rèn)為抗-HBe是HBV感染恢復(fù)或無(wú)傳染性的指標(biāo)。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn),抗-HBe陽(yáng)性的血清仍可能有傳染性,只是遠(yuǎn)較HBeAg陽(yáng)性的血清傳染性為小而已。有人用相同HBsAg滴度的分別含HBeAg和抗-HBe的血清接種猩猩,結(jié)果HBeAg陽(yáng)性血清的傳染性為10-8;而抗-HBe陽(yáng)性的血清為10-2?10-5。在母嬰傳播研究中亦觀察到基本相同的結(jié)果:HBsAg和HBeAg雙陽(yáng)性的母親所生嬰兒80?100%感染HBV;而HBsAg陽(yáng)性,抗-HBe陽(yáng)性的母親所生嬰兒僅有3%被HBV感染。這些結(jié)果說(shuō)明,HBeAg陽(yáng)性血清的傳染性明顯強(qiáng)于抗-HBe陽(yáng)性血清;抗-HBe陽(yáng)性血清亦具有一定的傳染性[11]。一般來(lái)說(shuō),抗-HBe陽(yáng)性患者血清中HBV復(fù)制水平較低,病情趨向穩(wěn)定和恢復(fù),但臨床上仍可見(jiàn)到相當(dāng)一部分抗-HBe陽(yáng)性患者的病情仍波動(dòng),或在發(fā)展。其主要原因是HBV并沒(méi)有因抗-HBe陽(yáng)性而消除,HBV在機(jī)體內(nèi)仍存在和復(fù)制。有研究表明:在抗-HBe陽(yáng)性的慢性活動(dòng)性肝炎中,采用PCR技術(shù)檢測(cè),87%的患者血清中可檢出HBVDNA[10]。肝內(nèi)HBsAg、HBcAg檢測(cè)和HBVDNA原位雜交研究發(fā)現(xiàn):抗-HBe陽(yáng)性慢性肝炎患者中,26.7%HBV復(fù)制活躍,53.3%為不完全復(fù)制與表達(dá),僅20%為非復(fù)制狀態(tài)。慢性乙肝HBeAg向抗-HBe的血清學(xué)轉(zhuǎn)換可伴有ALT水平升高,隨之HBV復(fù)制水平降低,但并不意味著HBV的徹底清除】2,10],肝組織學(xué)正常的HBV攜帶者血清中可檢出HBeAg,而組織學(xué)證實(shí)有慢性活動(dòng)型肝炎存在的患者,其血清中抗-HBe可以陽(yáng)性,說(shuō)明HBeAg不一定是慢性乙肝活動(dòng)的標(biāo)志,抗-HBe亦不能作為健康攜帶的指標(biāo)???HBe一般不與HBeAg同時(shí)陽(yáng)性,如有同時(shí)檢出的報(bào)告,可能為不同亞型(e1、e2、e3)感染所致;抗-HBe與HBeAg同時(shí)陰性也甚少見(jiàn),有此情況可見(jiàn)于:①HBeAg和抗-HBe滴度均過(guò)低,檢測(cè)方法靈敏度不夠;②檢測(cè)時(shí),正處于HBeAg消失而相應(yīng)抗體尚未產(chǎn)生;③某些HBsAg攜帶者有獲得性免疫缺陷綜合征,不能形成抗-HBe[15]。乙型肝炎核心抗體(抗-HBc)抗-HBc是HBV抗體系統(tǒng)中出現(xiàn)較早的抗體,急性HBV感染,HBsAg出現(xiàn)后3?5周,臨床癥狀出現(xiàn)之前即可檢出,且在肝炎恢復(fù)期呈高滴度;HBsAg陽(yáng)性的時(shí)間越長(zhǎng),抗-HBc的滴度越高】2,9]。臨床上,多以競(jìng)爭(zhēng)抑制法檢測(cè)抗-HBc,為總抗體,包括IgG、IgM、IgA和IgE型抗-HBc,早期以抗-HBcIgM為主,持續(xù)6?18周,以后以抗-HBcIgG為主,該抗體可在體內(nèi)持續(xù)數(shù)年甚至數(shù)十年[11]。通常,高效價(jià)的抗-HBc,見(jiàn)于急、慢性肝炎和HBsAg攜帶者,并表明HBV復(fù)制可能仍活躍,血清具有傳染性;低效價(jià)的抗-HBc則表示既往感染過(guò)HBV,一般無(wú)傳染性???HBc單項(xiàng)陽(yáng)性是臨床中一種常見(jiàn)的模式,其發(fā)生率各地報(bào)告不同,大約為0.9?11.9%,對(duì)于這種單項(xiàng)抗-HBc陽(yáng)性的解釋,美國(guó)疾病控制中心指出[16]:在排除檢測(cè)的假陽(yáng)性(抑制率070%多為假陽(yáng)性)結(jié)果以后,有以下幾種原因:①急性感染的恢復(fù)早期(窗口期)。HBsAg減少或消失,而抗-HBs尚未產(chǎn)生,抗-HBc是唯一能檢出的特異性HBV指標(biāo)。②被動(dòng)獲得的抗-HBc。HBsAg攜帶者母親所生嬰兒,母親體內(nèi)IgG型抗-HBc可經(jīng)胎盤轉(zhuǎn)移給嬰兒,此種母?jìng)骺?HBc在嬰兒體內(nèi)可存在一年以上;輸用抗-HBc陽(yáng)性的血液或血制品。③遠(yuǎn)期感染伴抗-HBs消失。因抗-HBc可持續(xù)存在8?10年以上,而抗-HBs在機(jī)體內(nèi)只持續(xù)存在6個(gè)月?3年。④遠(yuǎn)期感染伴低水平HBsAg。近年來(lái),有學(xué)者認(rèn)為,單項(xiàng)抗-HBc陽(yáng)性為丙型肝炎病毒(HCV)感染的標(biāo)志,認(rèn)為HCV抗原與HBcAg有相同抗原成分。但是,Hoyos等對(duì)心臟手術(shù)患者輸血后非甲非乙型肝炎的前瞻性研究不支持這種觀點(diǎn)[17?19]。綜上所述,乙肝病毒五項(xiàng)血清標(biāo)志物,只是 HBV基因表達(dá)的抗原物質(zhì)和這些抗原刺激機(jī)體所生的相應(yīng)抗體,本身并不是病毒的核酸成分,因此其本身并沒(méi)有傳染性,而只是 HBV感染的標(biāo)志,我們可以通過(guò)分析HBV的這些血清標(biāo)志物來(lái)了解HBV在機(jī)體的感染狀態(tài)。由于單項(xiàng)HBVM陽(yáng)性可見(jiàn)于多種情況,不同HBVM的不同組合模式又有不同的臨床意義,因此,在分析“乙肝五項(xiàng)”的臨床意義時(shí),不能孤立地、片面地去分析其中的某一項(xiàng)指標(biāo),而應(yīng)該參考其它幾項(xiàng),有時(shí)還應(yīng)參考HBVDNA,DNA-P、Pre-S1、S2等檢查,同時(shí)還應(yīng)結(jié)合臨床等綜合分析,才能作出正確的判斷和準(zhǔn)確的評(píng)價(jià)。簡(jiǎn)單判斷乙肝五項(xiàng)的臨床意義:一般說(shuō)來(lái),乙肝五項(xiàng)血清標(biāo)志物中,如果病毒抗原標(biāo)志物(HBsAg/HBeAg)陽(yáng)性,說(shuō)明存在乙肝病毒感染;抗原、抗體均陰性,無(wú)病毒感染;抗原陰性,一項(xiàng)或多項(xiàng)抗體陽(yáng)性,表示既往感染或康復(fù)期,病毒已清除。(二)、丙型肝炎病毒抗體(抗-HCV):HCV感染后的潛伏期為21-84天(平均50天),感染后1-2周內(nèi)血液中即可檢測(cè)到HCVRNA,平均50天血清ALT升高。抗-HCV檢測(cè)試劑不斷改進(jìn),目前,已發(fā)展至第3、4代,檢測(cè)的敏感性和特異性有所提高。雖然,抗體的檢出率得到逐步提高,但仍有不足之處,如病程中抗體出現(xiàn)較遲,平均感染后12周,ALT升高后數(shù)周才檢出抗體。在患者出現(xiàn)癥狀時(shí),僅 50%-70%的患者血清中可檢測(cè)出抗-HCV,感染3月后,血清中抗-HCV的檢出率可達(dá)90%。部分患者由于免疫缺陷,不出現(xiàn)抗體;抗體也不能區(qū)別急性、慢性和既往感染,抗體水平與病情缺乏一致性,因此,也不能作為判斷病情輕重、預(yù)后及治療的指標(biāo)。1、檢測(cè)方法:檢測(cè)丙型肝炎病毒抗體試驗(yàn)于1990年在美國(guó)食品與藥品管理局(FDA)首次注冊(cè),自那時(shí)起,新版的此類試驗(yàn)和其他FDA批準(zhǔn)的抗-HCV試驗(yàn)已廣范運(yùn)用于臨床診斷和無(wú)癥狀病人的篩檢。目前臨床常用的檢測(cè)方法:(1)、抗-HCV篩檢法:酶免疫法(HCV-EIA210;HCV-ELISA310)和加強(qiáng)的化學(xué)發(fā)光免疫法(CIA)。(2)、抗-HCV旁證試驗(yàn):重組免疫印跡試驗(yàn)(RIBA)-高特異性抗-HCV旁證試驗(yàn)結(jié)果分析和PCR技術(shù)定性/定量檢測(cè)HCVRNA。2、 臨床意義:(1) 、抗-HCV篩檢法:陽(yáng)性結(jié)果:HCV現(xiàn)癥感染、既往感染、假陽(yáng)性;陰性結(jié)果:無(wú)HCV感染、HCV感染窗口期、微量HCV感染、(2) 、重組免疫印跡試驗(yàn)(RIBA)-高特異性抗-HCV旁證試驗(yàn):陽(yáng)性結(jié)果:HCV現(xiàn)癥感染、既往感染;陰性結(jié)果:無(wú)HCV感染、HCV感染窗口期、微量HCV感染???HCV的臨床意義應(yīng)該結(jié)合抗-HCV旁證試驗(yàn)(重組免疫印跡試驗(yàn)(RIBA)-高特異性抗-HCV旁證試驗(yàn)結(jié)果分析和PCR技術(shù)定性/定量檢測(cè)HCVRNA)和肝功能試驗(yàn)綜合分析判斷。3、 臨床常見(jiàn)類型:(1)抗-HCV篩檢法(+)+RIBA(+)+HCVRNA(+)+ALT/AST(+):現(xiàn)癥感染,肝炎活動(dòng)期;(2)抗-HCV篩檢法(+)+RIBA(+)+HCVRNA(+)+ALT/AST(-):現(xiàn)癥感染,病毒攜帶;肝炎非活動(dòng)期;(3)抗-HCV篩檢法(+)+RIBA(+)+HCVRNA(-)+ALT/AST(+)除外其他原因:現(xiàn)癥感染,肝炎活動(dòng);(4) 抗-HCV篩檢法(+)+RIBA(+)+HCVRNA(-)+ALT/AST(-):既往感染;微量HCV攜帶,需定期復(fù)查;(5) 抗-HCV篩檢法(+)+RIBA(-)+HCVRNA(-)+ALT/AST(+):假陽(yáng)性;其他原因致肝功異常;(6) 抗-HCV篩檢法(+)+RIBA(-)+HCVRNA(-)+ALT/AST(-):假陽(yáng)性;(7) 抗-HCV篩檢法(-)+RIBA(-)+HCVRNA(+)+ALT/AST(+):急性感染窗口期;微量HCV感染;隱匿性肝炎;(8) 抗-HCV篩檢法(-)+RIBA(-)+HCVRNA(+)+ALT/AST(-):微量HCV感染攜帶;抗-HCV篩檢法(-)+RIBA(-)+HCVRNA(-)+ALT/AST(+):未感染HCV;其他原因致肝功異???HCV篩檢法(-)+RIBA(-)+HCVRNA(-)+ALT/AST(-):未感染HCV;4、PCR技術(shù)定性/定量檢測(cè)HCVRNA的臨床意義:、明確感染和病毒血癥。、早期診斷抗-HCV陰性急性肝炎。、診斷抗-HCV陰性免疫功能低下的慢性肝炎。、慢性HCV感染母親的嬰兒,明確母嬰傳播。、抗病毒治療前明確治療指征,治療后評(píng)價(jià)治療效果。、艾滋病病毒抗體(抗-HIV)檢測(cè):1、檢測(cè)方法:迄今為止,血清學(xué)實(shí)驗(yàn)依然是HIV實(shí)驗(yàn)室診斷的主要依據(jù)。血清學(xué)實(shí)驗(yàn)即HIV抗體檢測(cè),是HIV感染診斷的常規(guī)方法,分為初篩試驗(yàn)和確診試驗(yàn)兩個(gè)步驟。(1)、HIV抗體篩查試驗(yàn):包括:酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、明膠顆粒凝集試驗(yàn)(PA)、免疫層析/滲濾試驗(yàn)、快速檢測(cè)試驗(yàn)(RT)ELISA-抗-HIV檢測(cè),是國(guó)際上檢測(cè)HIV抗體最早、使用最廣泛的檢測(cè)方法。從1985年第一代到目前第四代、第五代試劑盒,敏感性和特異性明顯提高,HIV檢測(cè)的窗口期不斷縮短。雖然ELISA-抗-HIV檢測(cè)有較高的敏感性和特異性,但也有少量假陰性和假陽(yáng)性。假陰性主要在窗口期或發(fā)病后期抗體滴度下降時(shí)出現(xiàn);假陽(yáng)性主要是因?yàn)樽陨砻庖卟?、腎病、肝病、接種疫苗等影響,但一般來(lái)說(shuō),假陽(yáng)性的滴度通常不高。(2)、HIV抗體確認(rèn)試驗(yàn):HIV抗體確認(rèn)試驗(yàn)包括:免疫印跡法(WesternBlot,WB);免疫熒光法(IFA);條帶免疫試驗(yàn)(LIF);放射免疫沉淀試驗(yàn)(RIPA)等。國(guó)內(nèi)常用的確認(rèn)試驗(yàn)是免疫印跡法(WB),具有高度特異性。HIV特異性抗體檢測(cè)ELISA(高敏感性),加上WB(高特異性),診斷準(zhǔn)確率大于99%,假陽(yáng)性率約為0.00006%,造成錯(cuò)誤診斷的機(jī)會(huì)幾乎是零。2、窗口期HIV感染的診斷:抗-HIV陰性,不一定沒(méi)有感染,可能處于病毒感染的窗口期,即從機(jī)體HIV病毒感染到產(chǎn)生抗體的這段時(shí)間,窗口期的實(shí)質(zhì)是特異性病毒抗體從無(wú)到有、從少到多的轉(zhuǎn)變過(guò)程,決定窗口期長(zhǎng)短的因素有兩個(gè),一是機(jī)體對(duì)病毒感染產(chǎn)生抗體應(yīng)答的程度,另一個(gè)是檢測(cè)方法的敏感性。一般平均為2~3月(可以1~9月),但95%以上的HIV-1感染者產(chǎn)生抗體的時(shí)間是在6個(gè)月以內(nèi)。診斷的方法有:(1) 、P24抗原檢測(cè):機(jī)體感染HIV后,P24抗原是較早能從血清中檢出的病原學(xué)標(biāo)志,感染后約2~3周即可檢出,1~2月左右進(jìn)入抗原高峰,然后隨著抗體的產(chǎn)生形成抗原抗體復(fù)合物,由于抗體的中和作用,P24抗原濃度下降至難以測(cè)出的水平。P24抗原檢測(cè)其敏感性可達(dá)88.7%,特異性可達(dá)100%。(2) 、HIVRNA檢測(cè):利用分子生物學(xué)PCR技術(shù)可以定性和定量檢測(cè)艾滋病病毒核酸(HIVRN

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