沉降菌測試標(biāo)準操作規(guī)程

題目：沉降菌測試標(biāo)準操作規(guī)程制定人： 年月日編碼：SOP-ZL-HJ-006-01審核人： 年月日頒發(fā)部門：質(zhì)量管理部批準人： 年月日執(zhí)行時間： 年月日分發(fā)部門：質(zhì)量管理部、檔案室目的：建立潔凈室（區(qū)）中沉降菌的測試標(biāo)準操作規(guī)程，保證藥品在規(guī)定潔凈級別的區(qū)域內(nèi)進行生產(chǎn)。范圍：適用于潔凈室（區(qū)）的沉降菌的測試。職責(zé)：質(zhì)量管理部、QA檢測員內(nèi)容：1、測試方法本測試方法采用沉降法，即通過自然沉降原理收集空氣中的生物粒子于培養(yǎng)基平皿，經(jīng)若干時間，在適宜的條件下讓其繁殖到可見的菌落進行計數(shù)，以平板培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)來判定潔凈環(huán)境內(nèi)的活微生物數(shù)，并以此來評定潔凈室（區(qū)）的潔凈度。2、儀器、設(shè)備、培養(yǎng)基2.1培養(yǎng)皿：①90mm義15mm培養(yǎng)皿2.2培養(yǎng)基:2.2培養(yǎng)基:營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基生化培養(yǎng)箱：必須定期對生化培養(yǎng)箱進行校驗。自動臺式滅菌器：使用時應(yīng)嚴格按照儀器說明書操作。3、測試條件溫度和相對濕度：潔凈室（區(qū)）的溫度和相對濕度應(yīng)與其生產(chǎn)及工藝要求相適應(yīng)，溫度控制在18℃?26℃,相對濕度控制在45%?65%為宜。壓差：空氣潔凈度不同的潔凈室（區(qū)）之間壓差應(yīng)三10Pa。4、測試狀態(tài)：動態(tài)測試和靜態(tài)測試。靜態(tài)測試時，室內(nèi)測試人員不得多于2人；動態(tài)測試時，現(xiàn)場人員數(shù)按《潔凈區(qū)人員控制管理制度》中規(guī)定執(zhí)行，記錄中注明現(xiàn)場人員數(shù)量及測試點位置。5、測試時間：對單向流，測試應(yīng)在凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)運行不少于10分鐘后開始；對非單向流，測試應(yīng)在凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)運行不少于30分鐘后開始。第1頁共9頁

6、采樣點數(shù)量及布置6.1最少采樣點數(shù)目房間面枳（m2）潔凈度級別10010000100000<102—322力0—<20422>20—<40822%0一<1001642>100—<20040103>200—<40080206>400—<10001604013>1000—<200040010032>2000800200636.2最少培養(yǎng)皿數(shù)在滿足最少測點數(shù)的同時，還宜滿足最少培養(yǎng)皿數(shù)，見下表潔凈度級別所需①90mm培養(yǎng)皿數(shù)（以沉降0.5h/靜態(tài)或4h/動態(tài)計）1001410000210000026.3米樣點布置類型第2頁共9頁

6.4采樣點的位置一般布置在離地面0.8-1.5m之間或操作平臺的高度，除受潔凈室（區(qū)）的設(shè)備限制外，應(yīng)在整個潔凈室（區(qū)）均勻布置。每個采樣點一般采樣一次，也可以多于1次。布置采樣點時，應(yīng)避開回風(fēng)口，測試人員應(yīng)在采樣口的下風(fēng)側(cè)。7、培養(yǎng)基制備依據(jù)檢測區(qū)域的取樣點數(shù)，按照《培養(yǎng)基配制標(biāo)準操作規(guī)程》制備適量的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。在超凈工作臺內(nèi)，以無菌操作法將配制好的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基以每皿約15ml的裝量分裝，待培養(yǎng)基凝固后移出潔凈區(qū)。將制備的營養(yǎng)瓊脂平皿倒置于生化培養(yǎng)箱內(nèi)35℃培養(yǎng)48小時，確認無菌落數(shù)后使用。培養(yǎng)皿傳進潔凈室（區(qū)）測試前要進行表面消毒。8、測試將已制備好的培養(yǎng)皿按采樣點布置圖逐個放置，然后從里到外逐個打開培養(yǎng)皿蓋，使培養(yǎng)基表面暴露在空氣中。靜態(tài)測試時，培養(yǎng)皿暴露時間為30min，動態(tài)測試時，培養(yǎng)皿暴露時間為不大于4h。9、培養(yǎng)：取樣結(jié)束后將平皿倒置于生化培養(yǎng)箱內(nèi)35℃培養(yǎng)72小時，并以未采樣的營養(yǎng)瓊脂平皿作對照皿。10、結(jié)果計算用計數(shù)方法得出各個培養(yǎng)皿的菌落數(shù)。用肉眼對培養(yǎng)皿上所有的菌落直接計數(shù)、標(biāo)記或在菌落計數(shù)器上點計，然后用5?10倍放大鏡檢查，有否遺漏。培養(yǎng)皿上有2個或2個以上的菌落重疊，可分辨時仍以2個或2個以上菌落計數(shù)。每個測點的沉降菌平均菌落數(shù)的計算：__M1+M2+...+MnM n式中:平均菌落數(shù)式中:第3頁共9頁M1---1號培養(yǎng)皿的菌落數(shù)M2---2號培養(yǎng)皿的菌落數(shù)Mn---n號培養(yǎng)皿的菌落數(shù)n---培養(yǎng)皿的總數(shù)11、結(jié)果評定每個測點的沉降菌的平均菌落數(shù)必須低于所規(guī)定評定標(biāo)準的界限。在靜態(tài)測試時，若某測點的沉降菌平均菌落數(shù)超過評定標(biāo)準，則應(yīng)重新采樣兩次，兩次測試結(jié)果均合格才能判為符合。若測試結(jié)果超標(biāo)時應(yīng)及時與生產(chǎn)部門聯(lián)系，對該區(qū)域進行消毒或其它處理，然后重新測試至合格。潔凈區(qū)沉降菌控制標(biāo)準潔凈度級別ABCD沉降菌cfu/4小時標(biāo)準<1550100警戒限--34080糾偏限--445901、表中數(shù)值均為平均值。2、單個沉降碟的暴露時間可以少于4小時，同一位置可使用多個沉降碟連續(xù)進行檢測并積累計數(shù)。12、注意事項采樣前應(yīng)仔細檢查每個培養(yǎng)皿的質(zhì)量，如發(fā)現(xiàn)變質(zhì)、破損或污染的應(yīng)剔除。應(yīng)采取一切措施防止采樣過程的污染和其他可能對樣本的污染。測試用具要作滅菌處理，以確保測試的可靠性、正確性。13、檢測頻率：1次/3個月。14、附錄附錄《沉降菌測試記錄》15、歷史修訂記錄和原因版本號修訂原因修訂日期01新訂第4頁共9頁

附錄沉降菌測試記錄編碼：SOP-ZL-HJ-006-01-R1測試區(qū)域測試依據(jù)測試人員測試日期培養(yǎng)基用量測試狀態(tài)培養(yǎng)時間培養(yǎng)溫度報告日期測試房間房間編號現(xiàn)場操作人員數(shù)采樣點布置類型沉降菌菌落數(shù)/cfu符合規(guī)定ab測點1測點2測點3測點4更鞋間PLES123是口否口男一更PLES124是口否口女一更PLES125是口否口男二更PLES126是口否口女二更PLES127是口否口手消毒間PLES128是口否口外用酊劑線PLES129是口否口酊劑配制間PLES130是口否口酊劑灌裝間PLES131是口否口預(yù)留間1PLES132是口否口溶液劑灌裝間PLES133是口否口理瓶、洗瓶間PLES138是口否口瓶子暫存間PLES139是口否口洗衣整衣間PLES140是口否口消毒液配制間PLES141是口否口不合格品存放PLES142是口否口潔具存放間PLES143是口否口模具存放間PLES144是口否口第5頁共9頁

容器存放PLES145是口否口容器洗滌PLES146是口否口內(nèi)包材存放間PLES147是口否口溶液劑配制間PLES148是口否口半固體配制間PLES149是口否口廢棄間PLES150是口否口中檢室PLES151是口否口中間站PLES152是口否口稱量間、（前室）PLES153是口否口稱量、配料間PLES154是口否口粉碎、過篩間PLES155是口否口半固體灌裝間PLES156是口否口原輔料暫存間PLES157是口否口緩沖室PLES158是口否口走廊是口否口陰性對照是口否口潔凈度級別ABCD沉降菌cfu/4小時標(biāo)準<1550100警戒限--34080糾偏限--44590備注采樣點布置類型:12:__1 23(4第6頁共9頁

沉降菌測試記錄11編碼：SOP-ZL-HJ-006-01-R1測試區(qū)域測試依據(jù)測試人員測試日期培養(yǎng)基用量測試狀態(tài)培養(yǎng)時間培養(yǎng)溫度報告日期測試房間房間編號現(xiàn)場操作人員數(shù)采樣點布置類型沉降菌菌落數(shù)/cfu符合規(guī)定ab測點1測點2測點3測點4一更PLEZ120是口否口二更1PLEZ121是口否口二更2PLEZ122是口否口緩沖間1PLEZ123是口否口緩沖間2PLEZ124是口否口微生物限度室PLEZ125是口否口凈化操作臺PLEZ125是口否口陽性對照室PLEZ126是口否口凈化操作臺PLEZ126是口否口陰性對照是口否口潔凈度級別ABCD沉降菌cfu/4小時標(biāo)準<1550100警戒限--34080糾偏限--44590備注采樣點布置類型：第7頁共9頁沉降菌測試記錄采樣點布置類型：12采樣點布置類型：12:__3(4編碼：SOP-ZL-HJ-006-01-R1測試區(qū)域測試依據(jù)測試人員測試日期培養(yǎng)基用量測試狀態(tài)培養(yǎng)時間培養(yǎng)溫度報告日期測試房間房間編號現(xiàn)場操作人員數(shù)