水質總大腸菌群和糞大腸菌群(紙片快速法)檢測方法確認表

方法名稱水質總大腸菌群和糞大腸菌群的測定（紙片快速法）申請人項目負責人員制定原因驗證檢測方法符合實驗室要求、確保數(shù)據(jù)準確性與有效性方法適用范圍適用于地表水、地下水及廢水中的總大腸菌群和糞大腸菌群的快速測定。方法來源HJ755-2015《水質總大腸菌群和糞大腸菌群的測定紙片快速法》儀器、試劑和環(huán)境的要求1?儀器和設備1.1高壓蒸汽滅菌器1.2培養(yǎng)箱1.3冰箱1.4米樣瓶1.5試管1.6水質總大腸菌群和糞大腸菌群測試紙片2.試劑：2.1硫代硫酸鈉2.2乙二胺四乙酸二鈉采樣和測試過程中，所用到的玻璃器皿需滅菌后方可使用。方法描述按MPN法，將定量的水樣以無菌操作的方式接種到吸附有適量指示劑（溴甲酚紫和2,3,5-氯化三苯四氮唑即TTC）以及乳糖等營養(yǎng)成分的無菌濾紙上，在特定的溫度（37°C或44.5°C）培養(yǎng)24h，當細菌生長繁殖時，產(chǎn)酸使pH值降低，溴甲酚紫指示劑由紫色變黃色，同時，產(chǎn)氣過程相當?shù)拿摎涿冈谶m宜的pH范圍內，催化底物脫氫還原TTC形成紅色的不溶性三苯甲（TTF）。即可在產(chǎn)酸后的黃色背景下顯示出紅色斑點（或紅暈）。通過上述指示劑的顏色變化就可對是否產(chǎn)酸產(chǎn)氣作出判斷，從而確定是否有總大腸菌群或糞大腸菌群存在，再通過查MPN表就可得出相應總大腸菌群或糞大腸菌群的濃度值。

檢測結果的判斷結果判讀：（1）制片上出現(xiàn)紅斑或紅暈且周圍變黃，為陽性。（2）紙片全片變黃，無紅斑或紅暈，為陽性。（3）紙片部分變黃，無紅斑或紅暈，為陰性。（4）紙片的紫色背景上出現(xiàn)紅斑或紅暈，而周圍不變黃，為陰性。（5）紙片無變化，為陰性。結果計算：根據(jù)不冋接種量的陽性紙片數(shù)量，查MPN表得到MPN值，按公式換算并報告1L水樣中總大腸菌群或糞大腸菌群數(shù)：C=100*M/Q式中：C—水樣總大腸菌群或糞大腸菌群濃度（MPN/L）M—查MPN表得到的MPN值（MPN/100ml）Q—實際水樣取大接種里（ml）100—為10*10ml,其中，10將MPN值的單位MPN/100ml轉換為MPN/L，10ml為MPN表中最大接種量。結果表示：測定結果保留一位有效數(shù)字，大于等于100時以科學計數(shù)法表示，結果的單位為MPN/L。平均值以幾何平均計算。附件說明表1運行說明經(jīng)驗證該方法符合我實驗室使用。審批意見技術經(jīng)理：日期：總經(jīng)理：日期：表1燧大可能敲（WPN）表（■水樣接種豪為5^10ml,5i^fIml.5ffr0.1ml）MPNIOOmlMPN.JOOml1.0mlLmJ0.Iml下覘上凰10mlIm]CMml.下脫門00<2300SI190012<0.57301]]曲004<0.57302IS331003530316004730420005930523010了<0.5■T310112250114]131114454016<0.515312175460]37313206600149314230151.1.215n0204<03]|3201443402161532117546022732mo6600239323240r41.1.342702512325310J06<0.51533017546031Y33■1217630s2933240J311333280341333432035]533536040834021763041g34■124fi720421.1.3斗九0431334332

獰接種iEH性fit懿：MPNi100ml備橫云:禾陽住悅轂MPNdOQml1ftmlImlOJnil下ft!上:H10mlImlDJinl.下區(qū)0441?3443604517345犯05G935025S7?051LI35129052I；■RJ5232053153533705417■RJ54410551935545]002<0.S740013nJ31]014■<0.51140]17546]026<0.S1540221763]03811940■325875]041040430]051240536]1G4<0.511410：7546]116<0.5154I121763]12fi119412269袂.]13104I331]141241436]1514斗1542]206<0.51542022了]21&11942]269攤]2210”23422321191]2古1242■"I3S]241542444]251742550]30?、119420279SO]31W22343]331193]3212422加13110]331543345]41742452]3519斗3559#薛按址運耳性曲數(shù)MPN-100ml各接址足閉性份做MPN100mllOjrilLml0J11.11下限上Bi10m]IlmLOJml上尿]4QH225440341293]4:1j44J■401J0]421544￡471431744*541斗419斗斗46214522斗斗56915Q134504116120]511545]48]521745256]5319斗5364]5斗2245斗7215524455SI2005<0.5135002277020■715013111892029221502431511020312->2350358J9]40204145047624]8D7士05165059521071r5103311932192215114616]2021212328512632115D21314513842620021417514LIO215195151302209221570■49J■]3022■1232852123170222144S4527刑2S220223175231203328D22419524150SS37D225225751804452023012T-285f07925]?D73144S4531HO；1250

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