醫(yī)學(xué)微生物學(xué)教學(xué)課件：皰疹病毒

皰疹病毒1重點(diǎn)與難點(diǎn)1.單純皰疹病毒的致病性

原發(fā)感染及復(fù)發(fā)感染（病毒潛伏與激活）2.水痘-帶狀皰疹病毒的致病性

原發(fā)感染及復(fù)發(fā)感染（病毒潛伏與激活）3.巨細(xì)胞病毒的致病性

先天性感染、新生兒感染、病毒激活感染4.EB病毒的致病性

原發(fā)感染及復(fù)發(fā)感染（病毒潛伏與激活） EV感染與腫瘤

HHV的特性：包膜：球形,150～200

nm核衣殼：立體對(duì)稱(chēng)基因組：dsDNA，編碼多種蛋白和酶增殖：核內(nèi)復(fù)制，融合成多核巨細(xì)胞感染類(lèi)型：原發(fā)感染、潛伏感染、復(fù)發(fā)感染皰疹病毒亞科“-herpesviridae”皰疹病毒屬“-virus”正式命名“Human-Herpesvirus”常用名Alpha（α）Simplex人皰疹病毒1型（HHV-1）單純皰疹病毒1型（HSV-1）人皰疹病毒2型（HHV-2）單純皰疹病毒2型（HSV-2）Varicello人皰疹病毒3型（HHV-3）水痘帶狀皰疹病毒（VZV）Beta（β）Cytomegalo人皰疹病毒5型（HHV-5）人巨細(xì)胞病毒（HCMV）Roseolo人皰疹病毒6型（HHV-6）人皰疹病毒6型(HHV-6)人皰疹病毒7型（HHV-7）人皰疹病毒7型(HHV-7)Gamma（γ）Lymphocrypto人皰疹病毒4型（HHV-4）EB病毒(EBV)Rhadino人皰疹病毒8型（HHV-8）卡波濟(jì)肉瘤相關(guān)皰疹病毒（KSHV）人皰疹病毒的分類(lèi)Herpessimplexvirus,HSV，（HHV-1，HHV-2）第一節(jié)單純皰疹病毒血清型：HSV-1和HSV-2基因組：150

kb,編碼70多種蛋白

病毒結(jié)構(gòu)蛋白：衣殼蛋白包膜糖蛋白：gC，gL，gE等參與病毒增殖：DNA聚合酶、TK一、生物學(xué)性狀與宿主細(xì)胞相互作用：粘附性糖蛋白：gB、gC、gD和gH，gD誘導(dǎo)產(chǎn)生中和抗體的能力最強(qiáng)。融合蛋白：gB等。免疫逃逸：gC，gE/gL復(fù)合物；血清型分型：gG（型特異性糖蛋白）

gG-1代表HSV-1，gG-2為HSV-2傳播途徑密切接觸傳播：唾液、陰道分泌物，皰疹液，接吻，共用杯子，牙刷等性接觸；垂直傳播皰疹液（手，眼，皮膚）傳播二、致病性與免疫性HSV感染較普遍

密切接觸和性接觸

經(jīng)粘膜和破損皮膚-上皮細(xì)胞內(nèi)復(fù)制皰疹液中充滿(mǎn)病毒顆粒，具有傳染性，皰疹基底部見(jiàn)多核巨細(xì)胞；-神經(jīng)細(xì)胞為潛伏感染皮膚損傷性水皰原發(fā)感染表現(xiàn)：粘膜與皮膚的局部皰疹

HSV-1：腰以上感染為主唇皰疹齦口炎角膜結(jié)膜炎等HSV-2：腰以下及生殖器感染為主生殖系統(tǒng)皰疹、新生兒皰疹等潛伏感染原發(fā)感染后,HSV由感覺(jué)神經(jīng)

感覺(jué)神經(jīng)節(jié)

HSV-1:三叉神經(jīng)節(jié)和頸上神經(jīng)節(jié)

HSV-2:骶神經(jīng)節(jié)

潛伏的HSV不復(fù)制，對(duì)抗病毒藥物不敏感復(fù)發(fā)性感染

非特異性刺激：發(fā)熱、月經(jīng)、感染等

激活潛伏病毒沿感覺(jué)神經(jīng)纖維下行到末梢（原發(fā)部位）感染粘膜或皮膚上皮細(xì)胞

免疫記憶反應(yīng)病程短,組織損傷輕,感染局限免疫IFN和NK細(xì)胞：限制原發(fā)感染發(fā)展中和抗體：阻斷病毒擴(kuò)散細(xì)胞免疫：控制和消除HSV感染檢測(cè)核酸

PCR或原位雜交檢測(cè)HSV的DNA檢測(cè)抗原刮取皰疹基底部組織熒光素或酶標(biāo)記抗體染色檢查細(xì)胞內(nèi)皰疹病毒抗原分離病毒

標(biāo)本：水皰液、唾液或CSF細(xì)胞：BHK-21，Vero

CPE：細(xì)胞腫脹；融合細(xì)胞；包涵體三、微生物學(xué)檢查法Varicellazostervirus，VZV（HHV-3）第二節(jié)水痘-帶狀皰疹病毒與HSV相似點(diǎn)：①潛伏于神經(jīng)細(xì)胞，引起復(fù)發(fā)感染②細(xì)胞免疫限制和防治重癥水痘③皮膚損傷以水皰為特征，皰液中含大量病毒顆粒④編碼TK等,對(duì)抗病毒藥物敏感與HSV不同點(diǎn)：

①經(jīng)呼吸道以及接觸傳播

②通過(guò)病毒血癥播散至皮膚一、生物學(xué)性狀水痘（原發(fā)感染）好發(fā)于3～6歲兒童冬春季流行二、致病性與免疫性帶狀皰疹（復(fù)發(fā)感染）病毒潛伏在神經(jīng)節(jié)，病毒激活后引發(fā)（緊張壓力或免疫力低下等因素）VZV原發(fā)感染和潛伏感染VZV復(fù)發(fā)性感染診斷：臨床表現(xiàn)典型，無(wú)需進(jìn)行微生物學(xué)檢查病毒檢測(cè)似HSV：核酸、抗原、分離等。治療：①無(wú)環(huán)鳥(niǎo)苷等；②IFN：限制疾病、緩解局部癥狀。預(yù)防：減毒活疫苗；接觸病毒72小時(shí)以?xún)?nèi)，注射VZIG（帶狀皰疹免疫球蛋白）進(jìn)行緊急預(yù)防（被動(dòng)免疫）。三、微生物學(xué)檢查法與防治Humancytomegalovirus,HCMV（HHV5）第三節(jié)人巨細(xì)胞病毒形態(tài)結(jié)構(gòu)：與HSV相似宿主范圍：

僅感染人僅成纖維細(xì)胞中增殖復(fù)制周期為36～48小時(shí)細(xì)胞病變出現(xiàn)需2～6周：細(xì)胞變圓、膨脹、核變大、形成巨細(xì)胞，核內(nèi)出現(xiàn)嗜酸性包涵體一、生物學(xué)性狀HCMV感染病毒增殖:各種腔管道上皮細(xì)胞內(nèi)血、唾液、乳液、尿、陰道分泌物等含病毒傳播途徑:經(jīng)胎盤(pán)傳至胎兒、產(chǎn)道至新生兒乳液和唾液至兒童輸血和器官移植傳播接觸性感染，包括性接觸二、致病性與免疫性原發(fā)感染兒童和成人通常隱性感染；單核細(xì)胞增多癥潛伏感染多數(shù)長(zhǎng)期帶毒；潛伏部位：唾液腺、乳腺、腎、白細(xì)胞等；長(zhǎng)期或間歇地自唾液、乳汁、尿液、精液或?qū)m頸分泌物中排出病毒。復(fù)發(fā)性感染器官移植、AIDS、白血病和淋巴瘤等；長(zhǎng)期用免疫抑制劑、激活潛伏病毒；引起肺炎、結(jié)腸炎和腦膜炎等。新生兒感染：經(jīng)產(chǎn)道感染或出生后數(shù)周由母體（尿或乳汁中的病毒）或護(hù)理人員排出的病毒所引起的感染，少數(shù)表現(xiàn)為短暫的間質(zhì)性肺炎、肝脾輕度腫大、黃疸，多無(wú)明顯癥狀但排毒。先天性感染：經(jīng)胎盤(pán)感染胎兒-死胎或先天性疾病巨細(xì)胞包涵體病：肝脾腫大、黃疸、溶血性貧血等；以及神經(jīng)系統(tǒng)損傷：耳聾和智力低下等。細(xì)胞培養(yǎng)：成纖維細(xì)胞中增殖，生長(zhǎng)慢，CPE需2～6周，可用免疫熒光檢測(cè)病毒抗原ELISA：HCMV-IgM；近期感染；胎兒感染快速診斷：檢測(cè)病毒核酸HCMVCPE

包涵體

三、微生物學(xué)檢查法第四節(jié)EB病毒Epstein-Barrvirus，EBV（HHV4）形態(tài)結(jié)構(gòu)類(lèi)似皰疹病毒，但抗原結(jié)構(gòu)不同一、生物學(xué)性狀常規(guī)方法不能培養(yǎng)潛伏在B細(xì)胞中增殖性感染產(chǎn)生的抗原：早期抗原（earlyantigen，EA）：

DNA聚合酶活性,表示EBV增殖

EA抗體：早期抗體,持續(xù)幾個(gè)月表示近期感染衣殼抗原（viralcapsidantigen，vca）：

結(jié)構(gòu)蛋白，存在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核

VCA-IgM出現(xiàn)早，消失快

VCA-IgG出現(xiàn)晚，持續(xù)幾年EBV膜抗原（membraneantigen,MA）：

在細(xì)胞表面，屬包膜糖蛋白

MA-IgM表示近期感染

MA-IgG可持續(xù)存在潛伏感染

EBV感染B細(xì)胞或上皮細(xì)胞

潛伏感染細(xì)胞含EBV基因組(游離或整合)選擇性表達(dá)潛伏期抗原，刺激B細(xì)胞增生或永生化

EBV潛伏期抗原核抗原（EBnuclearantigen，EBNA）

B細(xì)胞核內(nèi)，為DNA結(jié)合蛋白

維持EBV基因組在感染細(xì)胞內(nèi)

感染細(xì)胞逃避CTL殺傷

與細(xì)胞永生化有關(guān)

EBNA抗體：感染晚期,持續(xù)存在潛伏膜蛋白（latentmembraneprotein,LMP）

B細(xì)胞表面,致癌蛋白改變細(xì)胞功能,抑制細(xì)胞凋亡阻止?jié)摲《炯せ罟δ蹷urkitt淋巴瘤（非洲兒童惡性淋巴瘤）

96％~100％與EBV相關(guān)瘤細(xì)胞含EBV、DNA和EBNA二、致病性與免疫性鼻咽癌：廣東、湖南等地血清：高效價(jià)抗VCA、EAIgG及IgM。

抗體升高常在腫瘤之前。癌組織：EBNA和LMP陽(yáng)性；PCR查到EBV基因組。鼻咽癌治療后好轉(zhuǎn)，抗體滴度下降。傳染性單核細(xì)胞增多癥

EBV唾液,接吻,共用杯子和牙刷等

口咽部上皮細(xì)胞增殖

感染淋巴組織中的B細(xì)胞

入血

全身性EBV感染表現(xiàn)單核細(xì)胞增多傳染源：抗體陽(yáng)性的隱性感染者和病人。傳播途徑：唾液感染，輸血傳播，未見(jiàn)垂直。免疫性EBV在人群中廣泛存在，EBV抗體陽(yáng)性率達(dá)90%以上中和抗體能阻止外源性病毒再感染；細(xì)胞和體液免疫不能清除體內(nèi)潛伏的EBV。EBV病毒感染致病機(jī)制潛伏期4-7周EBV病毒感染主要臨床表現(xiàn)傳染性單核白細(xì)胞增多癥腺體腫大、發(fā)熱食欲減退、無(wú)力咽痛、淋巴腫大肝脾腫大、肝炎接觸EBV腫瘤（不常見(jiàn)）?cofactorsEBV感染口咽上皮細(xì)胞局部B細(xì)胞經(jīng)血傳播肝淋巴結(jié)、脾唾液排出病毒疾病恢復(fù)后排毒持續(xù)數(shù)月鼻咽癌（東南亞）免疫應(yīng)答T細(xì)胞，抗體裂解感染的B細(xì)胞，逐漸清除感染免疫病理（淋巴腺腫大等）及癥狀（細(xì)胞因子釋放）更多的B細(xì)胞被感染限制性感染EBV基因組成環(huán)形潛伏在B細(xì)胞內(nèi)，感染細(xì)胞不裂解多克隆激活I(lǐng)gG水平升高B細(xì)胞永生化?cofactors潛伏EBV激活（器官移植受體淋巴瘤（免疫缺損患者）Burkitt’s淋巴瘤（非洲）

EBV特異性抗體檢測(cè)

EBV感染：

VCA-IgM陽(yáng)性

VCA抗體陽(yáng)性和EBNA抗體陰性

EBNA抗體陽(yáng)性

VCA抗體和EBNA抗體陽(yáng)性EGA-IgA和VCA-IgA效價(jià)持續(xù)升高，對(duì)鼻咽癌有輔助診斷意義。異嗜性抗體：EBV感染后非特異性活化淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的抗體（非特異性凝集綿羊紅細(xì)胞的IgM型抗體），主要用于傳染性單核細(xì)胞增多癥的診斷。第五節(jié)新型人皰疹病毒人皰疹病毒6型（HHV-6）形態(tài)結(jié)構(gòu)類(lèi)似HSV，嗜CD4+T淋巴細(xì)胞，也可感染單核巨噬細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、上皮細(xì)胞等。傳播途徑：通過(guò)唾液飛沫經(jīng)呼吸道傳播。細(xì)胞免疫：限制感染，促進(jìn)恢復(fù)。嬰兒玫瑰疹（roseola）：潛伏期4～7天。多見(jiàn)于6個(gè)月～2歲嬰幼兒。高熱及呼吸道癥狀，4天左右熱退，頸部、軀干出現(xiàn)斑丘疹，維持24～48小時(shí)。人皰疹病毒7型（humanherpesvirus-7,HHV-7,1990年）AIDS病人T細(xì)胞中分離的新病毒持續(xù)感染唾液腺多數(shù)人唾液分離出HHV-7部分玫瑰疹與HHV-7感染有關(guān)HHV-7與疾病的關(guān)系尚待證實(shí)人皰疹病毒8型（humanherpesvirus-8,HHV-8,1994）AIDS病人卡波濟(jì)肉瘤活檢