2020近岸海域環(huán)境監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范第五部分近岸海域生物質(zhì)量監(jiān)測(cè)

目 次前 言 Ⅱ適用范圍 1規(guī)范性引用文件 1近岸海域生物質(zhì)量監(jiān)測(cè)的一般要求 1生物質(zhì)量樣品采集、保存與運(yùn)輸 2生物質(zhì)量樣品的制備 3生物質(zhì)量樣品的分析 4生物質(zhì)量監(jiān)測(cè)質(zhì)量控制 4附錄A（資料性附錄）生物質(zhì)量監(jiān)測(cè)項(xiàng)目分析方法 6i近岸海域環(huán)境監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范適用范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了近岸海域生物質(zhì)量樣品采集、保存與運(yùn)輸、樣品制備、樣品分析、質(zhì)量控制等方面的內(nèi)容。本標(biāo)準(zhǔn)適用于近岸海域生物質(zhì)量監(jiān)測(cè)。規(guī)范性引用文件本標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容引用了下列文件中的條款。凡未注明日期的引用文件，其有效版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。GB17378.3 3部分：樣品采集、保存與運(yùn)輸GB18421 海洋生物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)HJ168 環(huán)境監(jiān)測(cè)分析方法標(biāo)準(zhǔn)制修訂技術(shù)導(dǎo)則HJ442.1 近岸海域環(huán)境監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范第一部分總則HJ442.2近岸海域環(huán)境監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范第二部分?jǐn)?shù)據(jù)處理與信息管理HJ442.4近岸海域環(huán)境監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范第四部分近岸海域沉積物監(jiān)測(cè)HJ442.10近岸海域環(huán)境監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范第十部分評(píng)價(jià)及報(bào)告HJ730近岸海域環(huán)境監(jiān)測(cè)點(diǎn)位布設(shè)技術(shù)規(guī)范近岸海域生物質(zhì)量監(jiān)測(cè)的一般要求HJ442.1HJ442.2HJ442.10要求執(zhí)行。國(guó)家確定的重要河口海灣和重點(diǎn)區(qū)域例行監(jiān)測(cè)的生物質(zhì)量監(jiān)測(cè)頻次為每年1次，其他1217～8月或貝類(lèi)成熟期。生物成熟期根據(jù)各地的具體情況確定，不同年份的采樣時(shí)間應(yīng)保持一致。采集甲殼類(lèi)、魚(yú)類(lèi)和藻類(lèi)樣品根據(jù)監(jiān)測(cè)目的確定采樣的頻次和時(shí)間，采樣一般在捕撈期；養(yǎng)殖魚(yú)蝦類(lèi)監(jiān)測(cè)一般在成熟期；不同年份的采樣時(shí)間應(yīng)保持一致。例行監(jiān)測(cè)的必測(cè)項(xiàng)目為GB18421規(guī)定的貝類(lèi)污染評(píng)價(jià)項(xiàng)目；選測(cè)項(xiàng)目為監(jiān)測(cè)區(qū)內(nèi)域除GB18421規(guī)定的項(xiàng)目外的其他貝類(lèi)污染因子、其他生物（甲殼類(lèi)、魚(yú)類(lèi)和藻類(lèi)）質(zhì)量等。其他監(jiān)測(cè)任務(wù)的生物質(zhì)量監(jiān)測(cè)項(xiàng)目、時(shí)間、頻次等依據(jù)監(jiān)測(cè)目的確定。1生物質(zhì)量樣品采集、保存與運(yùn)輸樣品的采集基本原則區(qū)域代表性原則。例行監(jiān)測(cè)的樣品采集，應(yīng)能反映監(jiān)測(cè)海域生物受污染物影響的（避開(kāi)污染源。其他專(zhuān)題監(jiān)測(cè)的樣品采集，應(yīng)選擇符合監(jiān)測(cè)目的和適于專(zhuān)題評(píng)價(jià)的區(qū)域。物種代表性原則。例行監(jiān)測(cè)采集的樣品種類(lèi)，應(yīng)按照GB18421選擇貝類(lèi)樣品；GB17378.3藻類(lèi)生物質(zhì)量監(jiān)測(cè)時(shí)，應(yīng)采集當(dāng)?shù)貎?yōu)勢(shì)種或經(jīng)濟(jì)類(lèi)種類(lèi)。樣品種類(lèi)的選擇種類(lèi)應(yīng)選擇產(chǎn)量豐富，最好是食用的經(jīng)濟(jì)生物；本區(qū)域的定居者，生命周期要求為一年以上；有適當(dāng)?shù)拇笮?，以提供足夠的組織樣品進(jìn)行分析；對(duì)污染物有較強(qiáng)的積累能力；種類(lèi)以貝類(lèi)為主，根據(jù)海區(qū)（灘涂）特征可增選魚(yú)類(lèi)、甲殼類(lèi)和藻類(lèi)；根據(jù)我國(guó)海洋生物鯧魚(yú)、鯔魚(yú)、鲆鰈魚(yú)等；甲殼類(lèi)為梭子蟹、鱘、蝦等；藻類(lèi)為海帶、紫菜、馬尾藻等。具體種類(lèi)可視當(dāng)?shù)貙?shí)際情況確定。樣品的采集采樣方式采樣方式包括底棲拖網(wǎng)捕撈、近岸定點(diǎn)養(yǎng)殖采樣、漁船捕撈、沿岸海域定置網(wǎng)捕撈及垂釣或市場(chǎng)直接購(gòu)買(mǎi)，獲取的樣品應(yīng)為新采集且未受污染的樣品。采樣工具在采樣時(shí)應(yīng)注意采樣工具對(duì)待測(cè)項(xiàng)目的影響，測(cè)定金屬項(xiàng)目不能使用一般的鐵質(zhì)工具和鍍鋅、鍍鉻工具。采樣區(qū)域近岸海域環(huán)境質(zhì)量監(jiān)測(cè)點(diǎn)位的樣品采集，可在點(diǎn)位及附近區(qū)域直接采集；其中臨岸近岸海域環(huán)境質(zhì)量監(jiān)測(cè)點(diǎn)位樣品采集也可在臨近區(qū)域的潮間帶或養(yǎng)殖場(chǎng)等采集。對(duì)監(jiān)測(cè)點(diǎn)位附近不能采集到樣品時(shí)，應(yīng)注明實(shí)際情況。潮間帶區(qū)域的貝類(lèi)應(yīng)定點(diǎn)采集；潮下帶和近岸海域的貝類(lèi)、魚(yú)、蝦、藻類(lèi)樣品在當(dāng)?shù)仞B(yǎng)殖場(chǎng)、漁船、漁港采集。樣品數(shù)量貝類(lèi)采集體長(zhǎng)大致相似的個(gè)體約1.5kg；藻類(lèi)取樣量約100g；甲殼類(lèi)、魚(yú)類(lèi)等生物的2取樣量約1.5kg，以保證足夠數(shù)量（一般需要100g肌肉組織）的完好樣品用于分析測(cè)定。采集到的樣品現(xiàn)場(chǎng)用海水沖洗干凈。用于細(xì)菌學(xué)指標(biāo)檢測(cè)的樣品，采樣全過(guò)程嚴(yán)格執(zhí)行無(wú)菌操作。采用現(xiàn)場(chǎng)采平行樣分析生物體污染濃度分布范圍時(shí)，應(yīng)采集現(xiàn)場(chǎng)平行樣，樣品數(shù)量應(yīng)滿(mǎn)足分析要求的需要。樣品的保存與運(yùn)輸樣品保存（-10℃～-20℃測(cè)定；用于細(xì)菌學(xué)指標(biāo)檢測(cè)的樣品，放入冰瓶冷藏（0℃～4℃）24h。樣品運(yùn)輸樣品采集后，若長(zhǎng)途運(yùn)輸，需把樣品放入冰箱中，始終讓其處于低溫狀態(tài)并防止沾污。生物質(zhì)量樣品的制備貽貝樣的制備用塑料刀或塑料刷除去貝殼外部所有的附著物。用蒸餾水或清潔的海水漂洗每一個(gè)貽用蒸餾水或清潔的表層海水洗貝殼內(nèi)的軟組織，用塑料刀和鑷子取出軟組織，讓水流盡。于勻漿器中勻化樣品，將勻漿樣放回原塑料容器，再稱(chēng)重，并記錄總重量，計(jì)算勻漿重。貼上樣品標(biāo)簽，待測(cè)或冷凍保存。甲殼類(lèi)樣品的制備用塑料刀將腹部與頭胸部及尾部分開(kāi)，小心將其內(nèi)臟從腹部取出，腿全部切除。將腹部翻下，用塑料刀沿腹部外甲邊緣切開(kāi)，用塑料鑷子取下內(nèi)側(cè)外甲并棄去。用另一把塑料刀松動(dòng)腹部肌肉，并用鑷子取出肌肉。用鑷子將肌肉移入塑料容器中，稱(chēng)重并記錄鮮重。蓋緊容器，貼上樣品標(biāo)簽，待測(cè)或冷凍保存。中小型魚(yú)樣制備用蒸餾水或清潔表層海水洗滌魚(yú)樣，將它放在工作臺(tái)上，用塑料刀切除胸鰭并切開(kāi)背鰭附近自頭至尾部的魚(yú)皮。在鰓附近和尾部，橫過(guò)魚(yú)體各切一刀；在腹部，鰓和尾部?jī)蓚?cè)各切一刀。四刀只切在魚(yú)體一側(cè)，且不得切太深，以免切開(kāi)內(nèi)臟，沾污肉片。用鑷子將魚(yú)皮與肉片分離，謹(jǐn)防外表皮沾污肉片。用另一把塑料刀將肌肉與脊椎分離，并用鑷子取下肌肉。將組織盛于塑料容器中，稱(chēng)重并記錄重量。若一側(cè)的肌肉量不能滿(mǎn)足分析用量，取另一側(cè)肌肉補(bǔ)充。用勻漿器勻化魚(yú)組織，將勻漿轉(zhuǎn)入已知重量的塑料容器中，蓋緊，并稱(chēng)重，記下勻漿重和其他數(shù)據(jù)。貼上樣品標(biāo)簽，待測(cè)或冷凍保存。3大型魚(yú)樣制備若必要，將冷凍的樣品放在0℃～4℃冰箱中過(guò)夜，使部分解凍以便于切片。用蒸餾水或清潔海水洗滌魚(yú)樣，置于清潔的工作臺(tái)上。剔除殘存的皮和骨，用塑料刀切去表層，再用另一把塑料刀重復(fù)操作一次，留下不受污染的均勻的肌肉組織。將肌肉組織放入塑料容器中，蓋緊，稱(chēng)重，將全部數(shù)據(jù)記入記錄表，貼上樣品標(biāo)簽，待測(cè)或冷凍保存。生物質(zhì)量樣品的分析方法選擇監(jiān)測(cè)分析方法按照HJ442.1的相關(guān)要求選擇。常用現(xiàn)場(chǎng)測(cè)試和實(shí)驗(yàn)室分析方法參見(jiàn)附錄A。方法驗(yàn)證按照HJ442.1的相關(guān)要求，在初次使用方法、條件發(fā)生變化時(shí)，需要開(kāi)展方法的驗(yàn)證或確認(rèn)并符合相關(guān)要求后，方可用于樣品測(cè)定。生物質(zhì)量監(jiān)測(cè)質(zhì)量控制基本要求組織機(jī)構(gòu)、人員、儀器設(shè)備等基本要求按照HJ442.1相關(guān)規(guī)定執(zhí)行。樣品采集質(zhì)量控制樣品采集應(yīng)避免采樣工具對(duì)樣品沾污，在獲取單個(gè)樣品不足以進(jìn)行分析時(shí)，應(yīng)采多個(gè)生物體用于試樣的制備；運(yùn)輸和保存需要避免保存容器和保存條件對(duì)樣品沾污，同時(shí)避免樣品發(fā)生質(zhì)變。實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)室的分析人員自控和實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部他控按以下要求進(jìn)行。按照要求，開(kāi)展方法的驗(yàn)證和確認(rèn)；生物質(zhì)量樣品分析質(zhì)量控制一般采用實(shí)驗(yàn)室平行樣分析、標(biāo)準(zhǔn)樣品分析等方法進(jìn)行，方法有加標(biāo)回收率要求的可采用加標(biāo)回收樣品控制，分析中應(yīng)注意單個(gè)生物體和多個(gè)生物體樣品的制備、樣品前處理一致性等；分析人員自控一般采用明碼樣控制，實(shí)驗(yàn)室他控可采用密碼和明碼兩種方式；HJ442.42比例隨機(jī)抽取檢查樣，分別另編樣品號(hào)，與原樣品同等測(cè)試，開(kāi)展實(shí)驗(yàn)室他控；生物質(zhì)量樣品平行雙樣（包括抽查樣）的相對(duì)偏差允許值，分析方法有要求的按HJ442.43執(zhí)行；每批實(shí)驗(yàn)室平行雙樣合90%70%～90%30%的樣品進(jìn)行490%50%～70%50%90%50%時(shí)，應(yīng)全部重新分析，直至結(jié)果合格為止；報(bào)送數(shù)據(jù)時(shí)，一般報(bào)送每個(gè)平行雙樣HJ442.2相關(guān)規(guī)定執(zhí)行；實(shí)驗(yàn)室他控每批樣品應(yīng)插入2～3個(gè)海洋生物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/標(biāo)準(zhǔn)樣品或質(zhì)控樣進(jìn)行分析，用于檢驗(yàn)有無(wú)系統(tǒng)誤差，樣品數(shù)量較少時(shí)，不應(yīng)少于1個(gè)；一般按照采用的標(biāo)準(zhǔn)方法要求，以及標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/標(biāo)準(zhǔn)樣品或質(zhì)控樣標(biāo)準(zhǔn)范圍判斷；HJ168和采用的分析方法，確定數(shù)據(jù)有效位數(shù)，確認(rèn)數(shù)據(jù)有效位數(shù)的最后一位與檢出限有效位數(shù)的最后一位一致，有效數(shù)字位數(shù)與要求一致；HJ442.2相關(guān)規(guī)定執(zhí)行。5附錄A（資料性附錄）生物質(zhì)量監(jiān)測(cè)項(xiàng)目分析方法近岸海域生物質(zhì)量監(jiān)測(cè)各項(xiàng)目的分析方法如表A.1所示。表A.1 生物質(zhì)量監(jiān)測(cè)項(xiàng)目分析方法觀測(cè)項(xiàng)目推薦的分析方法最多有效位數(shù)小數(shù)點(diǎn)后最多位數(shù)檢出限（量）（w/10-6）采用標(biāo)準(zhǔn)石油烴熒光分光光度法310.2GB17378.6-2007(13)汞冷原子吸收法320.01GB17378.6-2007(5.2)原子熒光法330.002GB17378.6-2007(5.1)測(cè)汞儀法3-5×10-6HY/T147.3銅無(wú)火焰原子吸收分光光度法310.4GB17378.6-2007(6.1)火焰原子吸收分光光度法312.0GB17378.6-2007(6.3)鎘無(wú)火焰原子吸收分光光度法330.005GB17378.6-2007(8.1)鉛無(wú)火焰原子吸收分光光度法320.04GB17378.6-2007(7.1)鉻無(wú)火焰原子吸收分光光度法320.04GB7378.6-2007(10.1)二苯碳酰二肼分光光度法320.40GB7378.6-2007(10.2)鋅火焰原子吸收分光光度法310.4GB17378.6-2007(9.1)砷氫化物-原子吸收分光光度法310.4GB17378.6-2007(11.3)原子熒光法310.2GB17378.6-2007(11.1)鐵電感耦合等離子體質(zhì)譜法3-3×10-5～2.8×10-3HY/T147.3-2013（6）六六六氣相色譜法3-3pg～9pgGB17378.6-2007(14)滴滴涕氣相色譜法3-5pg～40pgGB17378.6-2007(14)酞酸酯類(lèi)化合物氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用法3-均為5.0×10-3HY/T147.3-2013（8.1）氣相色譜法3-2.0×10-3和8.0×10-3HY/T147.3-2013（8.2）有機(jī)磷農(nóng)藥氣相色譜法3-3×10-4～4.5×10-3HY/T147.3-2013（9）有機(jī)錫氣相色譜法3-3×10-4～6×10-4HY/T147.3-2013（10）6觀測(cè)項(xiàng)目推薦的分析方法最多有效位數(shù)小數(shù)點(diǎn)后最多位數(shù)檢出限（量）（w/10-6）采用標(biāo)準(zhǔn)多溴聯(lián)苯醚氣相色譜質(zhì)譜法3-1×10-5～2×10-5HY/T147.3-2013（11）多氯聯(lián)苯氣相色譜法3-43.1pgGB17378.6-2007（15)氣相色譜質(zhì)譜法3-0.5μg/kg（定量限）GB5009.190-2014多環(huán)芳烴高效液相色譜法-紫外檢測(cè)器3-1.0×10-3～6