實驗室質(zhì)量控制及規(guī)范化管理

艾滋病檢測實驗室規(guī)范化管理及質(zhì)量控制艾滋病確證中心實驗室葉黎管理的精髓：減少或預(yù)防失誤的發(fā)生概率失誤帶來的成本增加>用于管理的成本艾滋病檢測實驗室管理依據(jù)《全國艾滋病檢測工作管理辦法》《全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范》……艾滋病檢測實驗室管理一、人員管理“工欲善其事，必先利其器”一、人員管理1、檢驗人員必須接受過省級以上艾滋病檢測技術(shù)培訓(xùn)，并獲得培訓(xùn)證書。2、檢測人員應(yīng)分為檢測人、復(fù)核人、簽發(fā)人。復(fù)核人、簽發(fā)人都應(yīng)具備對檢測過程進(jìn)行分析和解決問題的能力。2、參加職能考核和能力驗證。3、復(fù)訓(xùn)和提高……二、實驗環(huán)境1、應(yīng)劃分清潔區(qū)、半污染區(qū)和污染區(qū)，并有明顯標(biāo)記，有充足的操作空間。符合2級生物安全要求有生物安全標(biāo)識。門要有可視窗，并達(dá)到適當(dāng)?shù)姆阑鸬燃?。墻、天花板、地板光滑易清潔并耐腐蝕，地板防滑。實驗臺面應(yīng)防水、耐腐蝕、適當(dāng)耐熱。每個房間應(yīng)有洗手池（感應(yīng)式或腳踏式，安裝在出口處）、洗眼器。窗戶應(yīng)有防蚊蠅、防裂齒類動物設(shè)施，窗簾要能便于消毒。盡量減少使用玻璃器皿。要有消毒設(shè)備或設(shè)施。……二、實驗環(huán)境

二、實驗環(huán)境2、保持實驗室嚴(yán)格的清潔度二、實驗環(huán)境

二、實驗環(huán)境

辦公室二、實驗環(huán)境3、控制實驗溫度實驗室應(yīng)裝置恒溫設(shè)備，室溫保持在18-23℃。三、儀器設(shè)備管理1、儀器設(shè)備的選用。2、安裝、使用。3、唯一性標(biāo)識。4、撰寫作業(yè)指導(dǎo)書。4、儀器設(shè)備的使用、保養(yǎng)、維護(hù)記錄。5、計量儀器的校準(zhǔn)。三、儀器設(shè)備管理必須經(jīng)國家法定部門定期（每年至少一次）校準(zhǔn)的儀器包括：酶標(biāo)儀、加樣器、溫度計、高壓滅菌器。其它儀器也必須定期校準(zhǔn)（每年一次），可請廠家校準(zhǔn)，如:生物安全柜、離心機(jī)等。三、儀器設(shè)備管理生物安全柜

年檢合格，實驗完畢后不要把消毒劑放在生物安全柜內(nèi)。移液器

必須使用校準(zhǔn)過的移液器，移液器每年至少校準(zhǔn)一次。酶標(biāo)儀

每年必須檢定一次，平常注意防塵，檢查、清洗濾光片。洗板機(jī)

每次用后一定要沖洗，在洗滌時觀察下高低是否合適，灌注液體是否適當(dāng)，是否有管道堵塞，是否有漏液。冰箱孵箱溫度記錄移液器的校準(zhǔn)在室溫22℃無風(fēng)的工作室中，在萬分之一級別天平上放置一個小三角燒瓶，用待校準(zhǔn)的移液器吸取存放過夜的蒸餾水加入燒瓶底部，稱重并計算整餾水重量，連續(xù)稱重10次。加蒸餾水的量根據(jù)待校準(zhǔn)移液器的規(guī)格而不同，10次校準(zhǔn)稱量均在要求的重量范圍內(nèi)為合格。稱重法校準(zhǔn)移液器方案移液器規(guī)格蒸餾水量要求重量范圍0.5～5ul2ul1.75～2.25mg1～10ul10ul9.8～10.2mg40～200ul70ul69.4～70.6mg200～1000ul300ul298.0～302.0mg1～5ml2000ul1990.0～2010.0mg2～10ml3500ul3485.0～3515.0mg四、文件管理

四、文件管理文件包括：程序文件、作業(yè)指導(dǎo)、標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP）、記錄和報告、各種制度等等……。艾滋病實驗室要建立覆蓋主要工作內(nèi)容的SOP文件艾滋病篩查實驗室SOP文件至少應(yīng)包括：1）、樣品接收、登記、處理、保存和運輸；2）、檢測方法和步驟；3）、試劑使用和保存；4）、儀器的使用維護(hù)和校準(zhǔn)5）、實驗室數(shù)據(jù)、相關(guān)文件記錄與保存；6）、結(jié)果解釋與報告等；記錄和報告儀器使用記錄的放置和使用。送樣時，名字、地址書寫問題。改報告現(xiàn)在很困難SOP通常包括以下類型檢測細(xì)則：ELISA、快速檢測等儀器操作維護(hù)規(guī)程：酶標(biāo)儀、洗扳機(jī)、移液器、天平、溫度計等檢測流程實驗原始記錄實驗報告根據(jù)自己實驗室需求添加其他種類，如試劑評估規(guī)程、實驗室樣本流轉(zhuǎn)單等SOP編寫通常包括以下內(nèi)容1）、標(biāo)題和編號；2）、編寫和修訂日期；3）、編寫和修訂人員姓名；4）、方法、目的和應(yīng)用范圍；5）、檢測設(shè)備；6）、試劑及有效期；7）、安全防護(hù)相關(guān)步驟；8）、附錄，包括相關(guān)的附加文件如標(biāo)準(zhǔn)表格、設(shè)備和試劑盒說明書等。SOP的編寫及修訂：由各崗位工作人員起草，實驗室主任審定，每年修訂一次。注：實驗過程中應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)操作程序(SOP),不得擅自修改！建立實驗原始記錄系統(tǒng)樣本接收登記表（數(shù)據(jù)庫）實驗原始記錄血清存放記錄配液記錄儀器設(shè)備使用記錄儀器設(shè)備維修記錄冰箱、孵箱、環(huán)境溫度記錄等填寫檢測結(jié)果表字跡清楚，逐項填寫，不應(yīng)有空缺盡量核實身份證號碼實事求是

陽性復(fù)檢單應(yīng)蓋上公章文件存檔專人管理嚴(yán)格遵守保密制度

五、試劑、樣本管理試劑要有進(jìn)出登記，并妥善保存。操作人員本底樣本要每年保存，陽性待送檢樣本的保存……（一定要有登記）。陰性樣本目前沒有規(guī)定保存多久。六、污染物的處理應(yīng)按照《實驗室生物安全通用要求》（GB19489-2004）和消毒技術(shù)規(guī)范（2002版）處置實驗室廢棄物。艾滋病實驗室所產(chǎn)生的所有廢棄物，包括不再需要的樣品、培養(yǎng)物和其他物品，均應(yīng)視為感染性廢棄物，應(yīng)置于專用的密封防漏容器中，安全運至消毒室，經(jīng)高壓消毒后再進(jìn)行處理廢棄。艾滋病檢測實驗室常用的消毒方法1、物理消毒：高壓蒸汽消毒，121℃，保持15～20min;2、化學(xué)消毒：1）、含氯消毒劑（次氯酸鈉，含有效氯2000～5000mg/L；2）、75%乙醇3）、2%戊二醛3、實驗室物品常用的消毒方法：1）、廢棄物缸：5000mg/L次氯酸鈉；2）、生物安全柜臺面和儀器表面：75%乙醇；3）、溢出物：5000mg/L次氯酸鈉4）、污染的臺面和器具：2000mg/L次氯酸鈉，也可以用過氧化氫或過氧乙酸。器械可用2%戊二醛消毒。樣本管理六、質(zhì)量管理

質(zhì)量管理的必要性和重要性？六、質(zhì)量管理要點1、思路要清晰一個樣本從來到實驗室到報告的發(fā)放都要有據(jù)可尋——“溯源”。2、保證生物安全后就該考慮結(jié)果的準(zhǔn)確性。3、多學(xué)習(xí)《全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范》4、參加職能考核和能力驗證（PT）質(zhì)量管理體系（質(zhì)控）包括質(zhì)量保證（QA）質(zhì)量控制（QC）室間質(zhì)量評價（EQA）實驗室質(zhì)量保證實驗室的全部效能和聲譽依賴于其工作質(zhì)量：工作人員的技術(shù)能力；試劑盒和儀器的質(zhì)量；標(biāo)本條件；操作中的對照；數(shù)據(jù)的解釋；結(jié)果的描述。質(zhì)量控制定義質(zhì)量控制是指為確保實驗工作正常進(jìn)行而在每一次實驗過程中必須采取的各種措施。質(zhì)量控制的目的可以了解本次實驗是否有效。所有試驗條件是否正常最終結(jié)果是否可靠。實驗室質(zhì)量控制的基本要求樣品的質(zhì)量規(guī)范化操作試劑做好實驗的內(nèi)、外部對照質(zhì)量控制內(nèi)部對照質(zhì)控血清（試劑盒的對照）外部質(zhì)控血清的來源和選擇通過實驗室制備獲得（比較經(jīng)濟(jì)的方法）通過向有關(guān)機(jī)構(gòu)購買獲得外部對照質(zhì)控血清的保存外部對照質(zhì)控血清的作用以及質(zhì)量要求1、每一次實驗必須使用外部對照質(zhì)控血清，其作用是監(jiān)控實驗的重復(fù)性和穩(wěn)定性，同時可以了解各批試劑盒的批間或孔間差異，繪制質(zhì)孔圖2、質(zhì)控物的管間或瓶間變異必須小于監(jiān)測系統(tǒng)預(yù)期變異（cv<20％），并且質(zhì)控物的成份應(yīng)在穩(wěn)定狀態(tài)中。質(zhì)控物應(yīng)無菌，并不含有影響ELISA反應(yīng)的防腐劑。質(zhì)控品的制備——選擇稀釋濃度用本室常用的一種或兩種試劑對制備好的梯度樣本進(jìn)行檢測，得出S/CO值選擇S/CO值結(jié)果為3-5的稀釋濃度做為該種試劑外部質(zhì)控品的配備濃度。質(zhì)控品的制備——制備和分裝按照選