免疫球蛋白的檢測(cè)及臨床應(yīng)用課件

免疫球蛋白的

檢測(cè)與臨床應(yīng)用檢驗(yàn)科王濤免疫球蛋白的

檢測(cè)與臨床應(yīng)用檢驗(yàn)科王濤免疫球蛋白（Ig）是由漿細(xì)胞合成和分泌的一組具有抗體活性的蛋白質(zhì)。由兩條重鏈和兩條輕鏈通過二硫鍵連接而構(gòu)成。重鏈分為IgG,IgA,IgM,IgD,IgE.輕鏈分為κ(kappa),λ(Lambda)兩個(gè)類別什么是免疫球蛋白？免疫球蛋白（Ig）是由漿細(xì)胞合成和分泌的一組具有抗體活性的蛋免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)血清免疫球蛋白IgG,IgA,IgM,定量測(cè)定方法一般有單向環(huán)狀免疫擴(kuò)散法，火箭免疫電泳法，ELISA,免疫比濁法，放射免疫分析法等，但臨床常用單向環(huán)狀免疫擴(kuò)散法和免疫比濁法來測(cè)定血清免疫球蛋白含量。檢測(cè)方法血清免疫球蛋白IgG,IgA,IgM,定量測(cè)定方法一般有單向作為血清中最主要的抗體成分，約占人體血清中總免疫球蛋白含量的75%。是唯一能通過胎盤的Ig，IgG是血液和細(xì)胞外液中的主要抗體，也是機(jī)體再次免疫應(yīng)答的主要抗體，大多數(shù)抗感染抗體與自身抗體都為IgG類。16歲以上成年人IgG臨床參考范圍為：6.0~16.0g/LIgGIgG免疫球蛋白的檢測(cè)及臨床應(yīng)用課件在正常人血清中的含量僅次于IgG，占血清免疫球蛋白含量的10～20%。新生兒血清中無IgA抗體，但可從母乳中獲得分泌型IgA。分為血清型IgA和分泌型IgA：其中血清型IgA含量占總IgA的85%左右，雖然血清型IgA雖有IgG和IgM的某些功能，但在血清中并不顯示重要的免疫功能。分泌型IgA存在于分泌液中，如唾液、淚液、初乳、鼻和支氣管分泌液、胃腸液、尿液、汗液等。機(jī)體粘膜局部抗感染免疫的主要抗體。故又稱粘膜局部抗體。16歲以上成年人IgA臨床參考范圍為：0.76~3.9g/LIgA在正常人血清中的含量僅次于IgG，占血清免疫球蛋白含量的10免疫球蛋白的檢測(cè)及臨床應(yīng)用課件IgM是初次體液免疫應(yīng)答中最早出現(xiàn)的抗體，是機(jī)體抗感染的先頭部隊(duì)，血清中檢出IgM，提示新近發(fā)生感染，可用于感染的早期診斷。分泌型IgM為五聚體，是分子量最大的Ig，沉降系數(shù)為19S，稱為巨球蛋白，一般不能通過血管壁，主要存在于血液中。16歲以上成年人IgG臨床參考范圍為：0.4~3.45g/LIgMIgM是初次體液免疫應(yīng)答中最早出現(xiàn)的抗體，是機(jī)體抗感染的先頭免疫球蛋白的檢測(cè)及臨床應(yīng)用課件。。慢性肝臟疾病如慢性活動(dòng)性肝炎，原發(fā)性膽汁性肝硬化，隱匿性肝硬化患者血清中可見三種免疫球蛋白均升高。慢性細(xì)菌感染如慢性支氣管炎，肺結(jié)核，血 IgG可升高，宮內(nèi)感染時(shí)臍血或出生的新生兒血清中IgM含量可增高。IgG、IgA、IgM均升高慢性肝臟疾病如慢性活動(dòng)性肝炎，原發(fā)性膽汁性肝硬化，隱匿性肝硬有先天性和獲得性兩類，先天性低免疫球蛋白血癥，主要見于體液免疫缺陷病和聯(lián)合免疫缺陷病。另一種情況是3種Ig中缺1種或2種，如IgA缺乏患者，易發(fā)生反復(fù)呼吸道感染；IgG缺乏患者，易發(fā)生化膿性感染；IgM缺乏患者，易發(fā)生革蘭陰性菌敗血癥。獲得性低Ig血癥，血清中IgG常小于5g/L，引起原因較多，如大量蛋白流失的疾?。▌兠撔云ぱ?、腸淋巴管擴(kuò)張癥和腎病綜合征）、淋巴系統(tǒng)腫瘤（淋巴肉瘤、霍奇金淋巴瘤）、中毒性骨髓疾病、長期使用免疫抑制劑等。IgG、IgA、IgM降低有先天性和獲得性兩類，先天性低免疫球蛋白血癥，主要見于體液免正常人血清中IgD含量很低，僅占血清免疫球蛋白總量的0.2%。IgD可在個(gè)體發(fā)育的任何時(shí)間產(chǎn)生，半衰期2.8天。血清IgD的生物學(xué)功能尚不清楚，膜結(jié)合型IgD（mIgD）構(gòu)成BCR，是B細(xì)胞分化發(fā)育成熟的標(biāo)志，未成熟的B細(xì)胞僅表達(dá)mIgM，成熟B細(xì)胞可同時(shí)表達(dá)mIgM和mIgD，稱為初始B細(xì)胞（nativeBcell）；活化的B細(xì)胞或記憶B細(xì)胞其表面的mIgD逐漸消失。IgE是正常人血清中含量最少的免疫球蛋白，主要由黏膜下淋巴組織中的漿細(xì)胞分泌。其重要特征為糖含量高達(dá)12%。IgE為親細(xì)胞抗體，可引起I型超敏反應(yīng)。此外，IgE可能與機(jī)體抗寄生蟲免疫有關(guān)。血清IgD和IgE正常人血清中IgD含量很低，僅占血清免疫球蛋白總量的0.2%（一）測(cè)定方法

IgD的測(cè)定方法有放射免疫分析法，乳膠顆粒免疫比濁分析法、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)。在臨床用得最多的是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測(cè)定IgD。（二）臨床意義

目前IgD的生物功能尚未完全闡明，血清中IgD升高主要見于妊娠末期，IgD型骨髓瘤，甲狀腺炎和大量吸煙。IgD降低見于原發(fā)性無丙種球蛋白血癥、肺硅沉著病（矽肺）、細(xì)胞毒藥物治療后。IgD測(cè)定及臨床意義（一）測(cè)定方法IgD測(cè)定及臨床意義（一）測(cè)定方法1.總IgE的測(cè)定方法

有化學(xué)發(fā)光免疫分析法、放射免疫分析法、乳膠顆粒免疫比濁法及酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。在臨床上用化學(xué)發(fā)光免疫分析法和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測(cè)定總IgE較為常見。2.特異性IgE的檢測(cè)方法

主要有免疫斑點(diǎn)法和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)。商品化的試劑盒提供了多種特異性的變應(yīng)原，包括食物、吸入物以及藥物過敏原，利用這些特異性變應(yīng)原就可以檢測(cè)血清中特異性IgE。IgE測(cè)定及臨床意義（一）測(cè)定方法IgE測(cè)定及臨床意義（二）臨床意義1.I型變態(tài)反應(yīng)性疾病，如特發(fā)性哮喘、特發(fā)性皮炎、過敏性鼻炎等IgE常升高。2.非變態(tài)反應(yīng)性疾病，如IgE骨髓瘤、寄生蟲感染等IgE升高。3.急性或慢性肝炎、SLE、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等疾病IgE可升高。4.IgE降低見于原發(fā)性無丙種球蛋白血癥、腫瘤及化療藥物應(yīng)用后。IgE測(cè)定及臨床意義（二）臨床意義IgE測(cè)定及臨床意義與重鏈結(jié)合成免疫球蛋白的輕鏈稱為結(jié)合輕鏈，未與重鏈結(jié)合的輕鏈稱為游離輕鏈。游離輕鏈的量最終取決于B細(xì)胞的合成分泌與腎臟清除的動(dòng)態(tài)平衡結(jié)果，臨床上多種疾病都可導(dǎo)致血清中游離輕鏈濃度異常，例如：免疫抑制，自身免疫，腎臟清除率降低及漿細(xì)胞病等。什么是游離輕鏈?與重鏈結(jié)合成免疫球蛋白的輕鏈稱為結(jié)合輕鏈，未與重鏈結(jié)合的輕鏈游離輕鏈通過腎小球?yàn)V過而從血液中快速清除，然后被近端腎小管重吸收和分解，因此游離輕鏈的檢測(cè)可以實(shí)時(shí)評(píng)估病情進(jìn)展，研究表明大量的游離輕鏈可以被腎臟吸收，所以只有非常少的游離輕鏈逃過近端腎小管的重吸收，在正常的尿中含有極少量的游離輕鏈。游離輕鏈通過腎小球?yàn)V過而從血液中快速清除，然后被近端腎小管重本周氏蛋白血清蛋白電泳免疫固定電泳免疫比濁法檢測(cè)游離輕鏈游離輕鏈的檢測(cè)本周氏蛋白游離輕鏈的檢測(cè)高敏感性：可達(dá)到5-10mg/L高特于性高檢測(cè)速率定量檢測(cè)：可同時(shí)檢測(cè)κ型和λ型輕鏈的水平以及兩者的比值，有利于鑒別診斷和監(jiān)測(cè)病情的變化免疫比濁法檢測(cè)高敏感性：可達(dá)到5-10mg/L免疫比濁法檢測(cè)Κ型游離輕鏈或λ型游離輕鏈中某一個(gè)指標(biāo)濃度異常增高和比值異常，常提示有單克隆類疾病，如多發(fā)性骨髓瘤，巨球蛋白血癥，原發(fā)性淀粉樣變性，輕鏈沉積病等。Κ型或λ型游離輕鏈同時(shí)增高，可能原因有感染，腎功能受損或結(jié)締組織類疾病。Κ型游離輕鏈或λ型游離輕鏈中某一個(gè)指標(biāo)濃度異常增高和比值異常多發(fā)性骨髓瘤(multiplemyeloma,MM)是一種漿細(xì)胞單克隆惡性增生性疾病,其特征為由晚期B細(xì)胞分化的腫瘤性漿細(xì)胞分泌單克隆免疫球蛋白或重鏈,并伴有溶骨性病變和/或骨質(zhì)疏松。多發(fā)性骨髓瘤多發(fā)性骨髓瘤(multiplemyeloma,MM)是一血常規(guī)

大多數(shù)MM患者血紅蛋白(hemoglobin,Hb)含量和紅細(xì)胞(redbloodcell,RBC)計(jì)數(shù)會(huì)有一定范圍的降低,大多數(shù)患者表現(xiàn)為正細(xì)胞正色素性貧血,也有小部分出現(xiàn)小細(xì)胞低色素性貧血癥狀,貧血程度會(huì)隨著病情的進(jìn)展逐漸加重。白細(xì)胞計(jì)數(shù)多正常,但也可增高或降低。血小板計(jì)數(shù)早期正常或增高,病情進(jìn)展時(shí)可減少。外周血涂片成熟RBC的形態(tài)大致正常,常見RBC重疊排列呈緡線狀。多發(fā)性骨髓瘤實(shí)驗(yàn)室常規(guī)檢查項(xiàng)目血常規(guī)

多發(fā)性骨髓瘤實(shí)驗(yàn)室常規(guī)檢查項(xiàng)目白蛋白/球蛋白比值(A/G)

在疾病初期,大部分MM患者的球蛋白增高,直接導(dǎo)致總蛋白明顯增加,白蛋白水平正常或降低。隨著病情的進(jìn)展,肝細(xì)胞合成功能降低導(dǎo)致白蛋白生成降低,且MM患者蛋白丟失增加,攝入減少,也會(huì)使白蛋白降低,導(dǎo)致A/G倒置。多發(fā)性骨髓瘤實(shí)驗(yàn)室常規(guī)檢查項(xiàng)目白蛋白/球蛋白比值(A/G)

多發(fā)性骨髓瘤實(shí)驗(yàn)室常規(guī)檢查項(xiàng)目腎功能檢測(cè)

MM患者腎臟損害的發(fā)生由多種因素導(dǎo)致,其中骨髓瘤細(xì)胞所分泌的單克隆免疫球蛋白輕鏈在腎臟的沉積是導(dǎo)致MM腎病的主要原因。實(shí)驗(yàn)室檢查特征表現(xiàn)為血尿素氮及肌酐水平增高、肌酐清除率降低等,晚期甚至可出現(xiàn)尿毒癥。多發(fā)性骨髓瘤實(shí)驗(yàn)室常規(guī)檢查項(xiàng)目腎功能檢測(cè)

多發(fā)性骨髓瘤實(shí)驗(yàn)室常規(guī)檢查項(xiàng)目免疫球蛋白檢測(cè)

IgG型MM患者64%~80%出現(xiàn)IgG含量增高而IgA和IgM含量降低,IgA型MM患者只有58%出現(xiàn)IgA含量增高,IgG和IgM含量減低的占75%~100%;100%IgM型MM患者的IgM含量都增高,其它2種免疫球蛋白降低的占61%~75%;71%~100%的輕鏈型MM患者IgA、IgG、IgM含量都部分降低。在對(duì)MM的免疫球蛋白含量的檢測(cè)中,IgG型和IgM型陽性率最高,IgA型次之,而輕鏈型由于其免疫球蛋白含量增高不明顯,導(dǎo)致陽性率不高。免疫球蛋白定量檢測(cè)不能提示單克隆免疫球蛋白的存在,但當(dāng)某種類型免疫球蛋白含量極度增高的同時(shí),其它類型免疫球蛋白含量極度減低,應(yīng)高度懷疑MM。多發(fā)性骨髓瘤實(shí)驗(yàn)室常規(guī)