實驗三-水中細(xì)菌總數(shù)的測定

實驗三、水中細(xì)菌總數(shù)的測定（平板混勻法）我國飲用水標(biāo)準(zhǔn)細(xì)菌總數(shù)主要作為判斷被檢水樣污染程度的標(biāo)志。在水質(zhì)衛(wèi)生學(xué)檢驗中，細(xì)菌總數(shù)是指1ml水樣在牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基中，于37℃經(jīng)24小時培養(yǎng)后，所生長的細(xì)菌菌落的總數(shù)。我國生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)（GB5749-2006）中規(guī)定生活飲用水的細(xì)菌總數(shù)lml中不得超過100CFU(colonyformingunit)。一、實驗?zāi)康亩嶒瀮x器與材料三、實驗操作步驟四、實驗結(jié)果五、思考題一、實驗?zāi)康?/p>

掌握水樣的取樣方法；掌握水體中細(xì)菌總數(shù)的測定方法；了解國家的相關(guān)法規(guī)。二、實驗儀器與材料1.儀器：高壓蒸汽滅菌器、恒溫箱、冰箱、體視鏡(放大鏡)、帶刻度試管（3）、培養(yǎng)皿（4）、微量移液器（配槍頭）、三角瓶（2）、計數(shù)器。2.培養(yǎng)基牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基三、實驗操作步驟1.水樣的采集供細(xì)菌學(xué)檢驗用的水樣，必須按一般無菌操作的基本要求進(jìn)行采樣，并保證在運(yùn)送、貯存過程中不受污染。為了要正確反映水質(zhì)在采樣時的真實情況，水樣在采取后應(yīng)立即送檢；一般從取樣到檢驗不應(yīng)超過4小時。條件不允許立即檢驗時，應(yīng)存于冰箱，但也不應(yīng)超過24小時，并應(yīng)在檢驗報告單上注明。（1）自來水的取樣方法先將自來水龍頭用火焰燒灼三分鐘滅菌，然后再開放水龍頭使水流5分鐘，以排除管道內(nèi)積存的死水，再用無菌容器接取水樣，以待分析。如水樣內(nèi)含有余氯，則采樣瓶未滅菌前按每采500ml水樣加3％硫代硫酸鈉(Na2S2O3·5H2O)溶液lml的量預(yù)先加入采樣瓶內(nèi)，用以采樣后中和水樣內(nèi)的余氯，以防止其繼續(xù)存在有殺菌作用。（2）待檢水樣的采集方法可應(yīng)用采樣器，器內(nèi)的采樣瓶應(yīng)先滅菌。采水樣時，直接將水灌入已滅菌的采樣瓶，不需再用樣水洗采樣瓶。采樣后，采樣瓶內(nèi)的水面與瓶塞底部間應(yīng)留有一些空隙，以便在檢驗時可充分搖動混勻水樣。2.水中細(xì)菌總數(shù)的測定（1）水樣的稀釋（梯度稀釋法）根據(jù)水被污染程度的不同，可用無菌吸管作10倍系列稀釋。具體步驟如下：取水樣10ml，盛于有90ml無菌水的三角瓶內(nèi)，充分振搖15分鐘，此即為10-1濃度的稀釋液。靜置15秒后，用無菌吸管取10-1稀釋液2ml加至18ml無菌水試管中，充分搖勻，此即為10-2濃度稀釋液。另取無菌吸管，依次作10倍知釋，制成10-3、10-4……等一系列稀釋液，通常稀釋至10-6濃度。10-2