快速鑒別砂土的方法

快速鑒別砂土的方法

砂仁是臨床常用的中藥。它來自江科豆坤陽(yáng)春砂、綠殼砂和亞甲基砂。l.waetsenjen.海南沙木魚刺l.w干燥成熟的果實(shí)具有益氣、鎮(zhèn)痛、健胃、消食、安頓嘔吐等功效。砂仁在市售商品中偽品較多?！吨袊?guó)藥典》從1990年版起采用提取揮發(fā)油進(jìn)行薄層色譜鑒別,至2005年版未作修訂,其實(shí)驗(yàn)耗時(shí)長(zhǎng),樣品消耗量大。根據(jù)1990、1995、2000、2005年版中國(guó)藥典及文獻(xiàn),砂仁目前的鑒別方法有:性狀鑒別、顯微鑒別、薄層色譜鑒別、GC-FTIR、GC-MS、凝膠電泳技術(shù)等。本文建立的方法,能快速檢出砂仁指標(biāo)成分乙酸龍腦酯,通過色譜指紋信息區(qū)別陽(yáng)春砂和海南砂,并能分辨出陽(yáng)春砂仁栽培變種大青苗和黃苗仔。1管drumminsp.薄層層析硅膠G,分析純(青島海洋化工廠);定量毛細(xì)管(DrummondScientificCo.USA.);乙酸龍腦酯對(duì)照品(由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供,批號(hào):0759-9001),其它試劑均為分析純。2市場(chǎng)或分別提供藥品檢驗(yàn)所提供收集的26份砂仁藥材分別來自于產(chǎn)地廣東省陽(yáng)春縣蟠龍山地區(qū)砂仁種植戶、廣州市清平藥材市場(chǎng)或分別由深圳、韶關(guān)、清遠(yuǎn)、肇慶、江門、海南省等藥品檢驗(yàn)所提供。經(jīng)鑒定為陽(yáng)春砂AmomumvillosumLour.、海南砂AmomumlongiligulareT.L.Wu.、進(jìn)口砂、艷山姜A.zerumbetBurttetSmith。3方法和結(jié)果3.1供試品溶液配制取砂仁藥材,去殼,取種子團(tuán)粉末(通過三號(hào)篩)1g,用70%乙醇潤(rùn)濕粉末,加石油醚(60~90℃)5ml,超聲處理30min(必要時(shí)加冰,控制水溫),濾過,取濾液作為供試品溶液。另精密吸取乙酸龍腦酯對(duì)照品適量,加乙醇制成每1ml含10μl的溶液。照薄層色譜法(《中國(guó)藥典》2005年版一部附錄ⅥB)試驗(yàn),吸取砂仁藥材溶液和乙酸龍腦酯對(duì)照品溶液各5μl,分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上,以環(huán)己烷-醋酸乙酯(22∶1)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以5%香草醛硫酸溶液,在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。3.2提取前區(qū)域斑線的確定見圖1。供試品色譜在與對(duì)照品色譜相應(yīng)位置上顯相同顏色的斑點(diǎn);藥典方法提取揮發(fā)油得到僅3個(gè)斑點(diǎn),本文建立的提取方法能得到10~12個(gè)斑點(diǎn),與藥典規(guī)定的提取揮發(fā)油所得的色譜相比,斑點(diǎn)更加豐富、可辨,具有明顯的指紋差異。而陽(yáng)春砂比海南砂多1~2個(gè)色譜斑點(diǎn);同時(shí)自產(chǎn)地收集的陽(yáng)春砂仁栽培變種大青苗與陽(yáng)春砂仁在薄層色譜上有所區(qū)別。4討論4.1超聲處理是試驗(yàn)品色譜的基礎(chǔ)。在百分本文采用石油醚和乙醚兩種溶劑,對(duì)以下提取方式進(jìn)行比較:①浸漬過夜;②超聲處理30min;③70%乙醇潤(rùn)濕后加溶劑超聲處理30min;④藥典方法(提取揮發(fā)油)。由揮發(fā)油提取的供試品色譜除原點(diǎn)外只有3個(gè)斑點(diǎn),而其他三種方法提取的供試品色譜均為10~12個(gè)斑點(diǎn)。其中①浸漬過夜;②超聲處理30min所得的色譜乙酸龍腦酯大小、顏色與對(duì)照品色譜斑點(diǎn)相比甚弱;用70%乙醇潤(rùn)濕后加溶劑超聲處理30min得到的色譜圖最為理想,其樣品主斑點(diǎn)明顯比其它提取方式的清晰,并具有豐富的指紋信息。4.2在提取溶劑的比較中采用石油醚(60~90℃)和乙醚兩種溶媒,得到的色譜圖相似,由于乙醚在超聲處理時(shí)易揮發(fā)損失,故建議使用石油醚。4.3macheny-nage的hplus-ferting-20高效板曾使用①硅膠G自制板;②MACHERY-NAGEL的DC-FertigplattenSILG-25(普通板);③MACHERY-NAGE的HPTLC-FertigplattenNano-DURASIL-20(高效板);④普通預(yù)制板(煙臺(tái)市化學(xué)工業(yè)研究院);⑤高效預(yù)制板(煙臺(tái)市化學(xué)工業(yè)研究院);⑥硅膠G預(yù)制板(MERCK),色譜效果總體相似,以硅膠G自制板首選,其次為MN普通板、MN高效板。4.4色譜大小對(duì)從土砂中砂片的色譜影響來自產(chǎn)地種植戶的陽(yáng)春砂與來自清平藥材市場(chǎng)和各藥檢所收集的砂仁色譜相差不大;艷山姜(購(gòu)自清平藥材市場(chǎng))所顯示的斑點(diǎn)有8個(gè),但乙酸龍腦酯斑點(diǎn)極弱;進(jìn)口砂所顯示的斑點(diǎn)有9個(gè),乙酸龍腦酯主斑點(diǎn)較弱。4.5砂大青苗和陽(yáng)春砂黃苗仔本文從產(chǎn)地種植戶處收集到陽(yáng)春砂仁有大青苗(正種)及黃苗仔(栽培變種)。文獻(xiàn)曾以電鏡掃描種子表面紋理特征和果皮內(nèi)表面紋理特征進(jìn)行鑒別;文獻(xiàn)則主要根據(jù)藥材性狀將栽培變種分為長(zhǎng)果型和圓果型,并以電鏡掃描花粉粒的特征鑒別它們,但認(rèn)為這兩品種的差異是否穩(wěn)定尚需進(jìn)一步調(diào)查和研究。參考文獻(xiàn)描述,本文收集到的樣品,陽(yáng)春砂大青苗為長(zhǎng)果型,陽(yáng)春砂黃苗仔為圓果型,兩者在薄層色譜上有區(qū)別,本文首次在成分上區(qū)別兩栽培變種,為陽(yáng)春砂的種質(zhì)鑒定提供了新依據(jù)。1.陽(yáng)春砂(黃苗仔):陽(yáng)春三丫嶺種植戶Ⅰ;2.陽(yáng)春砂(大青苗):陽(yáng)春三丫嶺種植戶Ⅱ;3.陽(yáng)春砂:陽(yáng)春泡虎頂種植戶;4.陽(yáng)春砂:陽(yáng)春擰拓岑盅種植戶;5.陽(yáng)春砂:陽(yáng)春豬籠坑種植戶;6.陽(yáng)春砂:陽(yáng)春坑仔種植戶;7.陽(yáng)春砂:陽(yáng)春下塘種植戶;8.海南砂:購(gòu)自清平市場(chǎng);9.砂仁藥材:購(gòu)自清平市場(chǎng)(高州產(chǎn));10.砂仁藥材:購(gòu)自清平市場(chǎng)(廣寧產(chǎn));11.砂仁藥材:購(gòu)自清平市場(chǎng)(云南產(chǎn));12.乙酸龍腦酯對(duì)照品:中檢所;13.砂仁藥材:分別由深圳、韶關(guān)、清遠(yuǎn)、肇慶、江門藥檢所收集,按《中國(guó)藥典》方法揮發(fā)油提取,所得TLC均只有三個(gè)斑點(diǎn);14.砂仁藥材:深圳市藥檢所