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文檔簡介
PAGE獸醫(yī)微生物學(xué)期末復(fù)習(xí)緒言1、微生物學(xué)與微生物微生物:存在于自然界中的一群形體微小,結(jié)構(gòu)簡單,繁殖快,分布廣,易于分離培養(yǎng),肉眼看不見的最小生物,統(tǒng)稱為微生物。主要包括:細菌、放線菌、霉形體、螺旋體、衣原體、立克次體、真菌、病毒微生物學(xué):研究微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)、生理生化、作用及與人類、生態(tài)關(guān)系的科學(xué)。2、微生物的發(fā)展:形態(tài)學(xué)時期→生理學(xué)及免疫學(xué)的奠基時期→近代及現(xiàn)代微生物學(xué)3、獸醫(yī)微生物學(xué):主要研究與動物有關(guān)的病原微生物的生物學(xué)性狀,對動物的致病機理、特異性診斷方法以及預(yù)防和治療感染性疾病的措施,以控制甚至消滅此類疾病為目的的一門學(xué)科。第一篇總論第一章細菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu)細菌的形態(tài)1、細菌的大?。簜€體微小,要經(jīng)染色在顯微鏡下才能看清。測定其大小的單位是微米或納米。繁殖方式為簡單的裂殖。細菌:是一類具有細胞壁的屬于原核細胞型的單細胞微生物,其個體微小、形態(tài)簡單,其結(jié)構(gòu)略有分化,具有DNA和RNA,主要靠二裂法繁殖,并可在人工培養(yǎng)基上生長繁殖。2、外形和排列方式:球狀、桿狀、螺旋狀球菌:雙球菌、鏈球菌、四聯(lián)球菌、八疊球菌、葡萄球菌桿菌:單桿菌、雙桿菌、鏈桿菌螺旋狀菌:弧菌、螺菌3、細菌的群體形態(tài):菌落:某個細菌在適合生長的固體培養(yǎng)基表面或者內(nèi)部,在適宜的條件下,經(jīng)過一定時間培養(yǎng),分裂繁殖出巨大數(shù)量的菌體,形成一個肉眼可見、有一定獨立形態(tài)的群體,成為菌落,又稱克隆。若長出的菌落連成一片,稱為菌苔。細菌的結(jié)構(gòu):細胞壁、細胞膜、細胞質(zhì)、核體、間體細胞壁:是菌細胞外層的一層無色透明、堅韌而具一定彈性的膜狀結(jié)構(gòu);具有維持細菌的固有形態(tài)、保護細菌免受損害、對物質(zhì)的進出具有選擇性分子篩的屏障作用。間體:間體:是細胞膜凹入細胞質(zhì)內(nèi)形成的一種囊狀、管狀或?qū)訝畹慕Y(jié)構(gòu),革蘭氏陽性菌較為常見。其功能和真核細胞的線粒體相似,與呼吸有關(guān),并有促進細胞分裂的作用。質(zhì)粒:是染色體外的遺傳物質(zhì),為雙股環(huán)狀DNA。分子量比染色體小,可攜帶某些遺傳信息,例如耐藥因子、細菌毒素及某些菌毛的基因均編碼在質(zhì)粒上??瑟毩?fù)制,失去質(zhì)粒的細菌仍能正常存活。具有與外來基因重組的功能。4、細胞壁:位于細胞最外層,包圍整個菌體的一層堅韌而具有彈性的膜。5、革蘭氏染色原理:[銨結(jié)晶紫(除分支桿菌外,其余均為藍紫色);革蘭氏染液(媒染劑,使染料吸附于細菌表面);95%酒精(脫色);石炭酸復(fù)紅]細菌對革蘭氏染色的不同反應(yīng),是由于它們細胞壁的成分和結(jié)構(gòu)不同而造成的。革蘭氏陽性細菌的細胞壁主要是由肽聚糖形成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)組成的,在染色過程中,當用乙醇處理時,由于脫水而引起網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)中的孔徑變小,通透性降低,使結(jié)晶紫-碘復(fù)合物被保留在細胞內(nèi)而不易脫色,因此,呈現(xiàn)藍紫色;革蘭氏陰性細菌的細胞壁中肽聚糖含量低,而脂類物質(zhì)含量高,當用乙醇處理時,脂類物質(zhì)溶解,細胞壁的通透性增加,使結(jié)晶紫-碘復(fù)合物易被乙醇抽出而脫色,然后又被染上了復(fù)染液(番紅)的顏色,因此呈現(xiàn)紅色。G+細菌:主要成分是肽聚糖,還有大量磷壁酸(細胞壁特有成分)。肽聚糖(peptidoglycan)由糖鏈支架、四肽側(cè)鏈、五肽交聯(lián)橋三部分組成。磷壁酸(teichoicacid)由核糖醇或甘油殘基經(jīng)磷酸二酯鍵相互聯(lián)結(jié)而成。G-細菌:外膜、周質(zhì)間隙。外膜:脂多糖、磷脂、蛋白質(zhì)、脂蛋白。脂多糖(LPS)革蘭氏陰性菌所特有。由類脂A(lipidA)、核心多糖和側(cè)鏈多糖(菌體抗原/O抗原)組成。外膜蛋白(OMP)6、細胞壁缺陷型細菌L型細菌:細胞壁缺失或沒有細胞壁的細菌變形(能長久或短暫的進行有絲分裂)。原生質(zhì)體:G+細菌經(jīng)溶菌酶或青霉素處理后,可完全除去細胞壁,形成僅由細胞膜包住的細胞質(zhì)的菌體。球狀體(原生質(zhì)球):溶菌霉等作用G-細菌,僅能出去細胞壁外層的肽聚糖,形成有外膜包圍的菌體,稱為…。補充:青霉素類抗菌作用的機理:抑制肽聚糖的合成串珠試驗:在有微量青霉素存在時,炭疽桿菌可形成L型菌,菌體呈“串珠狀”,類似“串珠狀菌鏈”;而類炭疽桿菌由于對青霉素不敏感,則不具有此特性。7、特殊結(jié)構(gòu):莢膜、S層、鞭毛、菌毛、芽孢莢膜:一部分細菌在其生活過程中,可在細胞壁的外面產(chǎn)生一種粘液樣的物質(zhì),包圍整個菌體,稱為莢膜。S層:某些細菌的一種特殊的表層結(jié)構(gòu),由單一的蛋白質(zhì)亞單位組成,是一種最簡單的生物膜,其功能除作為分子篩和離子通道外還具有類似莢膜的保護屏障作用,能抗噬菌體、蛭弧菌和蛋白酶。鞭毛:大多數(shù)弧菌/螺菌,某些桿菌和個別球菌,有突出于菌體表面的細長絲狀物,稱為鞭毛。是細菌的運動器官。(鞭毛是細菌的運動器官,具有規(guī)律的收縮,引起菌體的運動;鞭毛與細菌的致病性也有關(guān)系)菌毛:某些G-菌和少數(shù)G+菌,菌體上生有一種比鞭毛數(shù)量多、形狀較直、較細、較短的毛發(fā)狀細絲,也稱為菌毛;可以分為普通菌毛和性菌毛。與運動力無關(guān),普通菌毛與黏附有關(guān),性菌毛與接合有關(guān)。芽胞:某些G+菌在一定環(huán)境條件下,可在菌體內(nèi)形成一個圓形或者卵圓形的休眠體,稱為芽孢。(中央芽胞、偏端芽胞、頂端芽胞、游離芽胞)補充:芽孢具有較厚的芽孢壁,多層芽孢膜,結(jié)構(gòu)堅實含水量少,折光性強,結(jié)構(gòu)多層而且密,各種理化因子不易透入,含水量少,蛋白質(zhì)受熱不容易變性,此外芽孢內(nèi)含有一類特殊的蛋白質(zhì)稱為酸溶性芽孢小蛋白,與芽孢芯髓內(nèi)的DNA緊密結(jié)合使之免受輻射、干燥、高溫等破壞,芽孢不能分裂繁殖是細菌抵抗外界不良環(huán)境保存生命的一種休眠結(jié)構(gòu)。芽孢結(jié)構(gòu)多層而且密,各種理化因子不易透入,含水量少,蛋白質(zhì)受熱不容易變性,芽胞對外界環(huán)境的抵抗力比繁殖體強得多,特別耐高溫和滲透壓作用,一般化學(xué)藥品也不容易滲透進去。殺滅芽胞最有效的方法是高溫滅菌法(判斷高壓滅菌器是否有效常以能否殺滅芽胞為標準)第二章細菌的生長繁殖與生態(tài)8、細菌的化學(xué)組成:水分、礦物質(zhì)、有機物9、細菌的新陳代謝過程可按其功能分為物質(zhì)攝取、生物合成、聚合作用和組裝四個步驟。營養(yǎng)物質(zhì)的吸收與轉(zhuǎn)運:單純擴散、易化擴散、主動運輸、基團轉(zhuǎn)位10、生物合成:作為鑒別細菌的主要措施,細菌生物合成環(huán)節(jié)可被藥物影響。11、個體:無性繁殖,二等分裂,世代時間群體:遲緩期、對數(shù)期(對抗菌藥物較敏感)、穩(wěn)定期(毒素等代謝產(chǎn)物產(chǎn)生)、衰亡期(生長曲線的應(yīng)用)生長曲線:如果將細菌接種在液體培養(yǎng)基并置于適宜的溫度條件,定時取樣檢查活菌數(shù),可發(fā)現(xiàn)其生長過程具有一定的規(guī)律性;以時間為橫坐標,以活菌數(shù)的對數(shù)為縱坐標,可繪制出一條曲線,稱為“生長曲線”。12、人工培養(yǎng)條件:充足的營養(yǎng)物質(zhì)、適宜的溫度、合適的酸堿度(PH7.2-7.6)以及必要的氣體環(huán)境特殊:霍亂弧菌最適為7.8-8.0,乳酸桿菌在PH3.4-4.5時可生長,霉菌則在PH3.0-6,0生長良好氧氣:需氧菌、厭氧菌、兼性厭氧菌、微嗜氧菌培養(yǎng)基,按用途不同可分為:基礎(chǔ)培養(yǎng)基、增菌培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基、厭氧培養(yǎng)基補充:基礎(chǔ):液體、固體和半固體。在液體(肉湯)培養(yǎng)基中,加入2-3%瓊脂即為固體培養(yǎng)基,加入0.2-0.5%瓊脂即為半固體培養(yǎng)基接種并觀察細菌在平板上的菌落特征:形態(tài)、大小、邊緣、表面構(gòu)造(濕潤度和光滑度)、隆起度、透明度、顏色等,及在血平板上的溶血現(xiàn)象(β溶血、α溶血)。13、細菌的生化試驗(分解產(chǎn)物的檢測)糖類分解試驗:細菌分解糖的能力是不同的,與其體內(nèi)分解各種糖的酶有關(guān),加入指示劑。結(jié)果:⊕:產(chǎn)酸不產(chǎn)氣;○:產(chǎn)氣;-:陰性(產(chǎn)酸)VP試驗:大腸桿菌與產(chǎn)氣桿菌均分解葡萄糖⊕,為區(qū)分兩菌可采用VP試驗及甲基紅試驗。結(jié)果:生成紅色化合物,稱VP陽性。甲基紅試驗:指示劑甲基紅結(jié)果:大腸桿菌分解G產(chǎn)生丙酮酸,培養(yǎng)液呈酸性pH<5.4,指示劑呈紅色。陽性。枸櫞酸鹽利用試驗:能利用枸櫞酸鹽作為唯一碳源的細菌如產(chǎn)氣桿菌,使培養(yǎng)基變?yōu)閴A性,使指示劑溴麝香草酚藍(BTB)由淡綠轉(zhuǎn)為深藍→陽性結(jié)果:大腸桿菌→陰性吲哚試驗:某些細菌能分解培養(yǎng)基中的色氨酸產(chǎn)生吲哚+對二甲基氨基苯甲醛→玫瑰吲哚(陽性)注意:生化反應(yīng)→鑒別細菌,對革蘭氏染色反應(yīng)和菌體以及菌落形態(tài)相同或者相似的細菌尤為必要。其中吲哚(I)、甲基紅(M)、VP(Vi)、枸櫞酸鹽利用(C)4種試驗常用于鑒定腸道桿菌,合稱為IMViC試驗菌名吲哚甲基紅VP枸櫞酸鹽大腸桿菌(不產(chǎn)硫化氫)++--產(chǎn)氣桿菌--++沙門菌(產(chǎn)硫化氫)-+-+第三章外界因素14、外界因素對細菌的影響常用名詞:殺菌作用(bacteriocidicaction):某些物質(zhì)或因素所具有的在一定條件下殺死微生物的作用。抑菌作用(bacteriostaticaction):某些物質(zhì)或因素所具有的抑制微生物生長和繁殖的作??咕饔?antibioticaction):某些物質(zhì)所具有的抑制或殺滅微生物的作用。滅菌(sterilization):殺滅物體中所有的病原微生物和非病原微生物及其芽胞、孢子。消毒(disinfection):指殺滅物體中的所有病原微生物。防腐(antisepsis):指阻止或抑制微生物生長繁殖的方法。無菌(asepsis):指沒有活的微生物的狀態(tài)。濾過除菌(sterilizationbyfiltration):指通過濾的方法除去材料中的細菌。⑴物理因素:高溫、輻射、濾過、干燥1、高溫干熱滅菌法:火焰滅菌法、熱空氣滅菌法濕熱滅菌法:煮沸滅菌、巴氏消毒法→牛奶&酒精、流通蒸汽滅菌、高壓蒸汽滅菌→芽孢等。2、低溫:菌種保存,快速冷凍和快速解凍,加10%甘油等作保護劑。3、干燥4、輻射光感作用、光復(fù)活作用??梢姽?,陽光,紫外線(200-300nm),其中265~266nm的殺菌能力最強⑵化學(xué)因素A消毒劑的種類及應(yīng)用:1、菌體蛋白變性或凝固,如酚、醇、酸、堿、醛、重金屬等。2、損傷胞漿膜,如表面活性劑、脂溶劑等。3、干擾細菌的酶代謝,如氧化劑、重金屬鹽等。4、改變核酸的功能,如染料、烷化劑等。B影響消毒劑作用的因素:1、消毒劑的性質(zhì)、濃度和作用時間2、微生物的種類和數(shù)量3、溫度4、酸堿度5、有機物6、藥物的相互頡頏⑶生物因素抗生素:某些微生物在代謝過程中產(chǎn)生的能抑制或殺死另一些微生物的物質(zhì)。主要作用機理為:干擾細胞壁的合成、損傷細胞漿面影響通透性、影響菌體蛋白的合成、影響核酸的合成。植物殺菌素:植物中存在的殺菌物質(zhì)細菌素:由細菌產(chǎn)生的具有殺菌作用的蛋白質(zhì)。只能作用同種不同株或親緣關(guān)系較近的細菌。噬菌體(bacteriophage,phage):感染細菌的病毒。補充:A抗原性及抵抗力:具抗原性、可刺激機體產(chǎn)生特異性抗體。B增殖過程:吸附、侵入、增殖、裂解。C、與寄主細菌的關(guān)系:溶菌反應(yīng),溶原性D、實際應(yīng)用:用于細菌的鑒定和分型第四章細菌在自然界分布土壤、水、空氣細菌檢查的方法:細菌總數(shù)、大腸菌群、大腸桿菌指數(shù)、大腸桿菌價補充:水質(zhì)細菌學(xué)檢查三項指標指標名稱意義國家標準菌總數(shù)檢定1ml自來水中所含各種活細菌數(shù)<100個大腸桿菌價能檢出1個大腸桿菌的最小自來水量>300ml大腸桿菌指數(shù)在1000ml自來水中檢出的大腸桿菌數(shù)<3個15、細菌在人體分布正常菌群:正常情況下,寄居于動物體對機體無害且有益和必需的微生物類群。作用:生物拮抗、營養(yǎng)作用、免疫作用、衰老作用菌群失調(diào):指機體、菌群、環(huán)境三者之間的動態(tài)平衡發(fā)生改變,導(dǎo)致宿主機體某個部位的正常菌群中生物的種類、數(shù)量和棲居處發(fā)生改變。菌群失調(diào)癥:指嚴重的菌群失調(diào)使機體發(fā)生功能紊亂表現(xiàn)出明顯臨床癥狀者。菌群失調(diào)癥又叫菌群交替癥(二次感染)。悉生動物:一切生命形態(tài)都知道的動物。無菌動物(GF):不攜帶任何微生物的動物。無特定病原動物(SPF):不存在某些特定的具有病原性或潛在病原性微生物的動物清潔動物:來源于剖腹產(chǎn),飼養(yǎng)于半屏障系統(tǒng),其體內(nèi)外不能攜帶人畜共患病和動物主要傳染病的病原。普通動物:指在開放條件下飼養(yǎng),其體內(nèi)外存在著多種微生物和寄生蟲,但不能攜帶人畜共患病病原微生物的動物。第五章病原菌的致病作用要點提示a、病原菌致病性和毒力的概念:病原菌致病性是指一定種類的病原菌,在一定條件下能在宿主體內(nèi)引起感染的能力,毒力是病原菌致病性程度的大小。b、病原菌侵襲力的概念:侵襲力導(dǎo)致病原菌在機體內(nèi)定殖、突破機體的防御屏障、內(nèi)化作用、繁殖與擴散。c、病原菌逃避宿主防御機制:包括抗吞噬作用和抗體液免疫機制。d、細菌毒素、外毒素、內(nèi)毒素、類毒素和抗毒素的概念,以及內(nèi)、外毒素的區(qū)別。16、感染:指病原微生物在宿主體內(nèi)持續(xù)存在或增殖。發(fā)?。翰≡⑸锔腥竞螅瑢λ拗髟斐擅黠@的損害。病原菌:那些能導(dǎo)致機體發(fā)病的細菌。致病性:一定種類的病原菌在一定的條件下,能在宿主體內(nèi)引起感染的能力。毒力(virulent):病原菌致病力的強弱程度。17、細菌致病性的確定→柯赫氏法則:a、特殊的病原菌應(yīng)存在于同一疾病中,在健康者中不存在。b、此病原菌能被分離培養(yǎng)和純化。c、此純培養(yǎng)物接種易感動物,能導(dǎo)致同樣的病癥。d、自實驗感染的動物體內(nèi)能重新獲得該病原菌的純種。從分子水平解釋科赫法則:a、應(yīng)在治病菌株中檢出某些基因或其產(chǎn)物,而無毒力菌株中無;b、如有毒力菌株的某個基因被損壞,則菌株的毒力應(yīng)減弱或消除,或?qū)⒋嘶蚩寺〉綗o毒菌株內(nèi),后者稱為有毒力菌株;c、將細菌接種動物時,這個基因應(yīng)在感染的過程中表達;d、在接種動物檢測到這個基因產(chǎn)物的抗體或產(chǎn)生免疫保護18、細菌毒力的測定:半數(shù)致死量LD50);半數(shù)感染量(ID50)ID50的計算方法細菌稀釋度感染:接種感染累計未感染累計感染比率感染百分率10-34/4909/910010-43/4515/68310-52/4232/54010-60/4070/70高于50%的感染率-50%/高于50%的感染率-低于50%的感染率=(83-50)/(83-40)=0.7因此,10-4.7的細菌懸液0.1毫升表示1個ID50,即這一稀釋度可以使50%接種動物的發(fā)生感染。19、毒力因子:構(gòu)成細菌毒力的物質(zhì)。包括侵襲力和毒素。侵襲力:病原菌在機體內(nèi)定植,突破機體的防御屏障,內(nèi)化作用,繁殖和擴散,這種能力稱為侵襲力。它由定植、莢膜及其它表面物質(zhì)和酶類構(gòu)成。a、定植:細菌感染的第一步,主要定植于消化道、呼吸道、生殖道、尿道及眼結(jié)膜等。粘附素:凡具有年粘附作用的細菌結(jié)構(gòu)成分?!鶪-菌毛,非菌毛粘附素(OMP、G+脂磷壁酸LTA)b、莢膜:具有抵抗吞噬細胞的吞噬和消化能力。此外,某些細菌的表面物質(zhì)如溶血性鏈球菌的M-蛋白、大腸桿菌的K抗原、傷寒桿菌的Vi抗原等也可抗吞噬。c、酶類:透明膠質(zhì)酶、纖維蛋白溶酶、膠原酶、凝固酶等。毒素類毒素:外毒素在0.4%甲醛溶液作用下,經(jīng)過一段時間可以脫毒,仍保留原有的抗原性,稱之為類毒素。外毒素:某些病原菌在生長繁殖過程中所產(chǎn)生的對宿主細胞有毒性的可溶性蛋白質(zhì),大多數(shù)外毒素在菌體內(nèi)合成后必須分泌于細胞外,故名外毒素,外毒素的毒性極強,有高度的特異性,有良好的免疫原性,可刺激機體產(chǎn)生特異性抗體,而使機體具有免疫保護作用,這種抗體稱為抗毒素。內(nèi)毒素:內(nèi)毒素是特指革蘭氏陰性菌外膜中的脂多糖(LPS)成分,細菌在死亡后破裂或用人工方法裂解菌體之后才能釋放。細菌外毒素和內(nèi)毒素基本特性比較特性外毒素內(nèi)毒素化學(xué)性質(zhì)蛋白質(zhì)脂多糖產(chǎn)生由某些革蘭氏陽性或陰性菌分泌由革蘭氏陰性菌菌體裂解產(chǎn)生理化特性不耐熱,不穩(wěn)定,易受氧化劑破壞耐熱,穩(wěn)定,能被酸水解毒性作用特異性。為細胞毒素、腸毒素或神經(jīng)毒素,對特定的細胞或組織發(fā)揮特定的作用。全身性。致發(fā)熱、腹瀉、嘔吐毒性程度高,往往致死弱,很少致死致熱性對宿主不致熱常致宿主發(fā)熱免疫原性強,刺激機體產(chǎn)生中和抗體較弱,免疫應(yīng)答不足于中和毒性能否產(chǎn)生類毒素能,用甲醛處理不能20、III型分泌系統(tǒng)病原菌與宿主接觸后,啟動這一系統(tǒng),細菌分泌與毒力有關(guān)的多種蛋白質(zhì),與相應(yīng)的伴侶蛋白結(jié)合,從細菌的胞漿直接進入宿主細胞將,發(fā)揮毒性作用。III型分泌系統(tǒng)通常由30-40KB的基因組編碼,以毒力島的形式存在于細菌的大質(zhì)?;蛉旧w中。21、細菌毒力的增強與減弱A、毒力增強的方法:a.連續(xù)通過易感動物;b.被溫和噬菌體感染。B、毒力減弱的方法:a.通過非易感動物;b.在較高溫度下培養(yǎng);c.在含有特殊化學(xué)物質(zhì)的培養(yǎng)基中培養(yǎng);d.在含有特異抗血清、特異噬菌體或抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)。C、基因工程方法增強毒力和減毒例如:AIV→反向遺傳操作系統(tǒng)-N-P-M-G-L-→狂犬病無毒疫苗22、病原菌引起傳染的必要條件a、病原菌有足夠的毒力b、達到一定數(shù)量c、有適宜的浸入門戶23、傳染的表現(xiàn)形式傳染病發(fā)生的三要素:傳染源、媒介、易感動物隱性傳染:不表現(xiàn)或僅表現(xiàn)出較微臨床癥狀顯性傳染:具有明顯臨床癥狀帶菌現(xiàn)象:愈后,病原菌仍存在,并不斷排出體外24、局部傳染與全身傳染a、毒血癥:病原菌在局部生長繁殖過程中產(chǎn)生的毒素侵入血流和淋巴液,運至敏感的組織或器官,引起獨特的中毒癥狀,而細菌不進入血流,如破傷風(fēng)。b、菌血癥:病原菌自局部病灶侵入血流,并不在血液中繁殖,只能短暫經(jīng)過,但也能傳至機體的其它部位。如傷寒病初期。c、敗血癥:病原菌侵入血液,并在血中大量生長繁殖,造成機體嚴重的病理損害,引起顯著的臨床癥狀。d、膿毒血癥:于感染化膿菌發(fā)生敗血癥的同時,化膿菌經(jīng)血液循環(huán)到達其它臟器或組織,引起化膿性全身病變的傳染。第六章細菌的遺傳與變異要點提示:a、質(zhì)粒的類型:按照生物學(xué)形狀分三種、按照與細菌染色體關(guān)系分兩種、按照轉(zhuǎn)移性質(zhì)分兩種,其他類型還有自殺性質(zhì)粒和穿梭質(zhì)粒。因為與現(xiàn)代基因工程有關(guān),概念很重要。b、轉(zhuǎn)位因子的概念和特點需要掌握,其種類包括插入序列、轉(zhuǎn)座子和促變(Mu)噬菌體。c、毒力島的概念是現(xiàn)代細菌學(xué)中很重要的概念,包括六個特點。d、轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、接合是細菌間相互傳遞遺傳物質(zhì)的重要機制。原生質(zhì)體融合是一種人為獲得優(yōu)良性狀細菌的方式。25、細菌遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ):基因組、質(zhì)粒、轉(zhuǎn)座因子、毒力島遺傳:所謂細菌的遺傳系指親代細菌與子代細菌相似性,它使細菌的形狀保持相對穩(wěn)定,是各種細菌存在的根據(jù)變異:所謂細菌的變異是指親代以及子代之間的不相似性,細菌得以發(fā)展進化基因組:細菌的基因組位于核體,是遺傳的主要物質(zhì)基礎(chǔ)。核體又稱染色體,是由兩條環(huán)狀雙螺旋DNA長鏈組成,含細菌的遺傳基因,控制細菌的遺傳和變異核質(zhì):染色體DNA在細菌胞漿中呈螺旋狀纏繞成團,外無核膜包被,故稱核質(zhì)質(zhì)粒:質(zhì)粒是細菌染色體外的遺傳物質(zhì),多為環(huán)狀DNA分子。質(zhì)??梢宰陨韽?fù)制,隨宿主菌分裂傳到子代菌體。轉(zhuǎn)座因子:近年來發(fā)現(xiàn)微生物的某些DNA片段作為一個毒力的單位可在染色體上移動,此種移動甚至可發(fā)生在不同種細胞之間,這種可移動的DNA片段稱之為轉(zhuǎn)座因子。有三種類型:插入序列、轉(zhuǎn)座子、以及某些特殊的噬菌體毒力島(PAI):是指病原菌的某個或某些毒力基因群,分子結(jié)構(gòu)和功能有別于細菌染色體,但位于細菌染色體之內(nèi),因此稱之為“島26、基因突變A:變異類型a、形態(tài)變異:L型、衰老型。b、結(jié)構(gòu)變異:莢膜變異、芽胞變異、鞭毛變異。c、培養(yǎng)特性變異:S-R變異后性狀改變d、菌落變異e、毒力變異:f、生化特性變異:g、耐藥性變異:h、抗原性變異B:變異的本質(zhì):遺傳性變異、非遺傳變異C:誘發(fā)細菌變異的方法:物理方法、化學(xué)方法、基因工程方法27、基因轉(zhuǎn)移:突變-轉(zhuǎn)化-轉(zhuǎn)到-結(jié)合28、細菌遺傳變異研究的實際意義理論上:實踐上:疾病的診斷與防治;制備疫苗菌株、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上的苗種、消除環(huán)境污染29、細菌的分類與命名采用“國際細菌命名法”即“雙名法”:學(xué)名用拉丁文,由屬名和種名兩部分組成,屬名第一個字母必需大寫,其余均小寫30、細菌分類鑒定的標準A、傳統(tǒng)標準:形態(tài)、染色、培養(yǎng)、細胞壁、生理生化和免疫學(xué)特征。B、現(xiàn)代標準:a、DNA(G+C)%值:5%以內(nèi)為同一種,超過10%則為不同屬。b、解鏈(Tm):Tm=69.3+0.41(G+C)c、核酸分子雜交:60-70%以上,同一種;50%以下,不同種。d、16SrRNA寡核苷酸編目:測定核苷酸序。第二篇細菌學(xué)各論李丹毒,白結(jié)核,芽孢球菌除淋膜,若問芽孢菌有何,炭氣腫疽破三梭,這些細菌均陽性,其他細菌陰性多。1、一些檢測方法:血清學(xué)反應(yīng):抗原抗體在體外結(jié)合的反應(yīng),因?qū)嵤┓磻?yīng)的某些重要因素是含抗體的動物血清,故名血清學(xué)反應(yīng)。凝集反應(yīng)→直接凝集反應(yīng):細菌、紅細胞等顆粒性Ag與相應(yīng)Ig混合以后,在電解質(zhì)參與下,經(jīng)過一定時間Ag顆粒相互凝集形成肉眼可見凝集塊。參與凝集反應(yīng)的Ag稱凝集原,Ig稱凝集素。間接凝集反應(yīng):先將可溶性Ag或Ig吸附于一種與免疫無關(guān)的有一定大小的顆粒載體表面制成固相Ag或Ig,再與相應(yīng)的待檢Ig或Ag結(jié)合產(chǎn)生的反應(yīng)。分為兩類:HA&HI沉淀反應(yīng):膠體狀態(tài)的可溶性Ag(如細菌和寄生蟲的浸出液、組織浸出液、培養(yǎng)濾液、動物血清等)與相應(yīng)Ig混合后,經(jīng)一定時間,形成肉眼可見的沉淀物。臨床上常用于診斷炭疽、梅素、鼠疫、豬丹毒、氣腫疽等傳染病。補體結(jié)合反應(yīng)(簡稱補反CFT):是指在補體參加下,以綿羊紅細胞(Ag)和抗綿羊溶血素(Ig)作為指示系統(tǒng)的抗原抗體反應(yīng)。(補體是酶類物質(zhì),但均以無活性的前體形式存在于血清中)中和試驗:病毒或毒素與相應(yīng)Ig以一定比例混合后,經(jīng)過一定時間,病毒喪失對易感動物的致病性,或消除毒素在試管內(nèi)的溶血現(xiàn)象,謂之中和反應(yīng)。該試驗既可在體外進行,也可在體內(nèi)進行,可利用小動物、雞胚、活細胞等作試驗。2、球菌→陽性:葡萄球菌、鏈球菌、肺炎球菌;陰性:淋球菌、腦膜炎球菌以下細菌各論復(fù)習(xí)按照老師的提綱一、革蘭陽性球菌葡萄球菌的致病性及毒力因子:毒力因子主要包括酶(凝固酶、耐熱核酸酶、纖維蛋白溶酶、透明質(zhì)酸酶)和毒素(a毒素、腸毒素),可引起兩類疾病: 侵襲性疾?。褐饕鸹撔匝装Y。通過各種途徑侵入機體,導(dǎo)致皮膚或器官的多種感染,甚至敗血癥。 毒素性疾病:由葡萄球菌產(chǎn)生的外毒素引起。鏈球菌的分類及致病性(一)根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)分a.屬特異性抗原(P抗原):核蛋白抗原b.群特異性抗原(C抗原):多糖抗原c.型特異性抗原:蛋白質(zhì)抗原,又稱表面抗原。(二)根據(jù)溶血現(xiàn)象分類a.α型溶血性鏈球菌菌落周圍有不透明草綠色溶血環(huán)。多為條件性致病菌。b.β型溶血性鏈球菌菌落周圍形成完全透明的無色的溶血環(huán)。致病力強。c.γ型鏈球菌不產(chǎn)生溶血素,菌落周圍無溶血環(huán),也稱為不溶血性鏈球菌。無致病性,常存在于乳類和糞便中,偶爾引起感染。致病物質(zhì) 脂磷壁酸(LTA):重要的粘附素 M蛋白:細胞壁中的蛋白質(zhì)組份,具有抗吞噬和抗吞噬細胞內(nèi)的殺菌作用。 一旦病菌大量繁殖則產(chǎn)生鏈球菌溶血素(O和S)、致熱外毒素等毒性物質(zhì),透明質(zhì)酸酶、鏈激酶、DNA酶等侵襲性物質(zhì)二、腸桿菌培養(yǎng)特性:1.普通培養(yǎng)基上生長良好,光滑、濕潤、半透明、灰白色菌落;2.麥康凱瓊脂上形成紅色菌落,伊紅美藍瓊脂上產(chǎn)生黑色帶金屬光澤菌落;3.致病菌株在綿羊血平板上呈β型溶血;生化特性:大腸桿菌,能分解葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣,大多數(shù)能分解乳糖,不產(chǎn)生H2S。分型:兩類——細菌寄生部位改變;病原性大腸桿菌(1)產(chǎn)腸毒素大腸桿菌(ETEC)(2)腸致病性大腸桿菌(EPEC)(3)腸出血型大腸桿菌(EHEC)O157:H7(4)腸侵襲型大腸桿菌(EIEC):導(dǎo)致炎癥性腹瀉(5)腸聚集型大腸桿菌(EAEC)毒力因子:粘附素、腸毒素致病機理:細菌經(jīng)口腔進入易感宿主小腸,菌毛黏附素與小腸上皮細胞微絨毛和表面受體結(jié)合,從而定居腸內(nèi)大量繁殖,產(chǎn)生并釋放腸毒素,對靶細胞產(chǎn)生毒性作用。B亞單位與受體結(jié)合,A亞單位進入細胞內(nèi),活化腺苷酸環(huán)化酶,導(dǎo)致cAMP濃度升高,腸細胞分泌機能亢進沙門菌培養(yǎng)及生化特性:在選擇培養(yǎng)基上因不發(fā)酵乳糖而呈無色菌落。IMViC試驗:-+-+;多數(shù)菌株H2S陽性。致病性:是一種重要的人畜共患病原菌,很容易在動物與動物、動物與人、人與人之間間接或直接傳播。根據(jù)對宿主適應(yīng)性不同,可分為:1.專嗜性:如雞白痢、雞傷寒沙門氏菌2.偏嗜性:如豬霍亂沙門氏菌3.泛嗜性:如鼠傷寒、腸炎沙門氏菌三、弧菌致病性:主要危害鰻、香魚、鮭鱒魚等海水魚或咸水湖泊的養(yǎng)殖魚。引致口部及體表出血性潰瘍、肌肉、鰭部局灶性壞死及全身癥狀。霍亂是一種急性腹瀉疾病,經(jīng)水傳播是最主要的傳播途徑,常由不潔的海鮮食品引起,病發(fā)高峰期在夏季,能在數(shù)小時內(nèi)造成腹瀉脫水甚至死亡嗜水氣單胞菌:引致敗血癥或皮膚潰瘍等局部感染,是水生動物尤其是魚類最常見的致病菌。人類感染引致急性胃腸炎等,是食品衛(wèi)生檢驗的對象四、巴氏桿菌培養(yǎng)特性:對營養(yǎng)要求較嚴格。在普通培養(yǎng)基上生長貧瘠,血液或血清培養(yǎng)基中生長良好,長成灰白色露珠狀針尖大小菌落,不溶血,麥康凱培養(yǎng)上不生長。致病性:本菌是多種動物的重要病原菌,主要引起出血性敗血癥、肺炎,如豬肺疫、禽霍亂等。實驗動物中小鼠非常易感。診斷:1.涂片或觸片鏡檢——染色(美藍或瑞氏),兩極著色2.分離培養(yǎng)——麥康凱瓊脂不生長,血平板不溶血3.動物試驗——病料懸液或培養(yǎng)物接種小白鼠,引起小白鼠迅速死亡五、布氏桿菌培養(yǎng)特性:1.本菌專性需氧,在初代分離培養(yǎng)時尚需5%-10%CO2,泛酸鈣和內(nèi)消旋赤蘚糖醇可刺激某些菌株生長。在培養(yǎng)基中加入少量血液、血清或肝浸液可促進生長,不溶血。生長緩慢,常需5-10d甚至20-30d。2.液體培養(yǎng)基上呈輕微渾濁生長,時間長可形成很厚的菌膜;在固體培養(yǎng)基上有光滑型(S)、粗糙型(R)、黏液型(M)菌落,大小不一。致病性:1、光滑型流產(chǎn)布氏桿菌入侵機體黏膜后,被吞噬細胞吞噬成為胞內(nèi)寄生菌,并在淋巴結(jié)生長繁殖形成感染灶。可侵入血液出現(xiàn)菌血癥,內(nèi)毒素致使機體發(fā)熱。2、動物體內(nèi)常局限于網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)、乳腺及生殖器官(與赤蘚醇含量較高有關(guān)),故病畜主要表現(xiàn)為睪丸炎、附睪炎、乳腺炎、子宮炎等。孕期動物對布氏桿菌最敏感,感染后常引起流產(chǎn)。診斷:(一)細菌學(xué)診斷——鏡檢、分離培養(yǎng)、動物實驗(二)血清學(xué)診斷——凝集實驗、補體結(jié)合實驗、變態(tài)反應(yīng)防控:不提倡抗生素治療,接種疫苗有顯著效果;嚴格采取畜群全面檢疫及淘汰病畜措施。弱毒疫苗:1、M90株弱毒活疫苗:馬爾他布氏桿菌I型強毒株通過雞體傳代減毒育成,皮下注射或氣霧的方式運用。2、S2株弱毒活疫苗:由豬源菌株經(jīng)培養(yǎng)基連續(xù)傳代致弱而成。經(jīng)飲水、氣霧或皮下注射免疫。六、彎曲菌形態(tài):是一類呈弧狀或s形的G-菌生長特性:致病性:該菌借助于鞭毛和外膜蛋白與空腸上皮細胞結(jié)合,侵入生長繁殖,產(chǎn)生腸毒素、細胞毒素和內(nèi)毒素等物質(zhì),引起腸炎和腸道外感染。腹瀉是空腸彎曲菌感染最常見的臨床表現(xiàn),轉(zhuǎn)為粘液膿血樣便,甚至血便。有發(fā)熱腹痛、惡心不適等癥狀。可在1周內(nèi)消退,20%患者癥狀可持續(xù)1-3周。螺桿菌形態(tài):螺旋狀彎曲生長特性:單端或雙端有多根帶鞘鞭毛;無芽孢;革蘭陰性;微需氧,對濕度(85%以上)和營養(yǎng)要求較高,需含血液才能生長,常用血瓊脂培養(yǎng)基,需經(jīng)72h才長出菌落;37℃能生長,在25℃和42℃致病性:與萎縮性胃炎、胃、十二指腸潰瘍和胃癌等疾病相關(guān)。七、李氏桿菌致病性:兼性胞內(nèi)寄生菌,被宿主細胞吞噬而不被破壞。一般經(jīng)口感染,輕則引起腸炎;若細菌侵入腸黏膜上皮細胞及肝、脾巨噬細胞并定殖則可引起菌血癥并引發(fā)全身感染如敗血癥等。另一途徑通過鼻黏膜和眼結(jié)膜,在損傷的黏膜經(jīng)神經(jīng)末梢侵入中樞神經(jīng)系統(tǒng)。表現(xiàn)為轉(zhuǎn)圈病丹毒絲菌致病性:通過消化道感染,進入血液引起動物高熱,可產(chǎn)生透明質(zhì)酸酶和神經(jīng)氨酸酶,加強了血管通透性和降解宿主組織粘蛋白 本菌在自然界分布十分廣泛,可寄生于哺乳動物、禽和魚類。其中豬分離率最高,人可經(jīng)外傷感染,發(fā)生皮膚病變,稱“類丹毒”?!罾钍蠗U菌與豬丹毒絲菌的區(qū)別(見細菌、病毒總結(jié))八、芽孢桿菌形態(tài):革蘭氏陽性大桿菌,菌體平直,兩端平截。在組織和血液中,單在或短鏈,相連的菌端平截呈竹節(jié)狀培養(yǎng)特性1.需氧菌或兼性厭氧,最適生長溫度30℃ 強毒菌株形成灰白色不透明、扁平、表面干燥,邊緣卷發(fā)狀粗糙型(R)菌落 無毒或弱毒菌株形成稍小而隆起、表面較為光滑濕潤、邊緣比較整齊的光滑型(S)菌落。2.在血瓊脂上一般不溶血,但個別菌株也可輕微溶血。3.液體培養(yǎng)基中呈絮狀沉淀生長4.明膠穿刺培養(yǎng),呈倒松樹狀,表面液化呈漏斗狀5.在含青霉素的培養(yǎng)基中,可形成串珠反應(yīng),與其它需氧芽孢桿菌區(qū)別。致病性:此菌毒力主要與莢膜和毒素有關(guān),莢膜可增強細菌抗吞噬能力,使之易于擴散;炭疽毒素是造成感染、動物致病和死亡的主要原因。食草動物炭疽常表現(xiàn)為急性敗血癥。豬炭疽多表現(xiàn)為慢性的咽部局限感染,犬、貓和食肉獸則多表現(xiàn)為腸炭疽。診斷:1.細菌學(xué)檢查(1)鏡檢:大桿菌,兩端平截,竹節(jié)狀(2)分離培養(yǎng):用普通瓊脂或血瓊脂(3)純培養(yǎng):串珠試驗、生化試驗(4)動物試驗:將檢驗材料制成懸液或純培養(yǎng)物給小鼠注射,24-36h,小鼠死于敗血癥2.血清學(xué)檢查(1)Ascoli沉淀反應(yīng)用加熱抽提待檢炭疽菌體多糖抗原與已知抗體進行的沉淀試驗。(2)協(xié)同凝集試驗(3)串珠熒光抗體檢查(4)瓊脂擴散試驗防控:第Ⅱ號炭疽芽胞苗、無毒炭疽芽胞苗預(yù)防接種;高免血清進行緊急預(yù)防接種;青霉素作為首選藥物進行治療梭菌屬產(chǎn)氣莢膜梭菌1、形態(tài)菌體直桿狀,革蘭氏染色陽性。多數(shù)菌株可形成莢膜,無鞭毛。2、培養(yǎng)特性在普通培養(yǎng)基上可生長,若加葡萄糖、血液,則生長更好。菌落多為圓形、光滑、隆起、灰白色的圓屋頂樣,也可形成圓盤形、邊緣成鋸齒狀、表面有輻射狀條紋的大菌落。厭氧肉肝湯中培養(yǎng),呈均勻渾濁,并產(chǎn)生大量氣體。血平板上,多數(shù)菌株有雙層溶血環(huán),內(nèi)環(huán)完全溶血,外環(huán)不完全溶血。在乳糖牛奶卵黃瓊脂平板上,菌落周圍出現(xiàn)乳白色渾濁圈。3、致病性A型:人氣性壞疽和食物中毒B型:羔羊痢疾C型:綿羊猝狙D型:牛腸毒血癥E型:犢牛、羔羊腸毒血癥4、微生物學(xué)診斷a.直接涂片鏡檢:G+大桿菌,并有莢膜b.分離培養(yǎng):接種血平板,有雙層溶血環(huán)c.純培養(yǎng):引起牛奶暴烈發(fā)酵d.動物試驗:小鼠、家兔或鴿e.腸毒素檢查:取回腸內(nèi)容物加適量滅菌生理鹽水稀釋,經(jīng)離心沉淀后取上清液分成兩份,一份不加熱,一份加熱,分別靜脈注射家兔或小鼠。如有毒素存在,不加熱組動物常于數(shù)分鐘至數(shù)小時內(nèi)死亡,而加熱組動物不死亡。肉毒梭菌1、形態(tài)本菌多呈直桿狀,單在或成雙,革蘭氏陽性。著生周鞭毛,能運動。2、培養(yǎng)特性專性厭氧營養(yǎng)要求不高,在普通培養(yǎng)基中均能生長,β溶血。3、致病性所有溫血動物和冷血動物對肉毒毒素均有感受性4、微生物學(xué)診斷從可疑媒介物或患病人畜胃腸內(nèi)容物及血清中檢查肉毒毒素,是主要的微生物學(xué)診斷手段。破傷風(fēng)梭菌1、形態(tài)兩端鈍圓、細長的桿菌,無莢膜,多具周鞭毛而能運動。2、培養(yǎng)特性嚴格厭氧菌,接觸氧后很快死亡。普通培養(yǎng)基上即能生長,形成不規(guī)則菌落,中心緊密、四周疏松似羽毛。不易獲得單個菌落,擴散成薄膜狀覆蓋整個平板表面。3、致病性a.破傷風(fēng)痙攣毒素:引起神經(jīng)興奮性的異常增高和骨骼肌痙攣。b.破傷風(fēng)溶血素:不耐熱,對氧敏感,可溶解馬及家兔的紅細胞,與破傷風(fēng)梭菌的致病性無關(guān)。4、微生物學(xué)診斷不需要九、分枝桿菌牛分枝桿菌形態(tài)結(jié)構(gòu):細長、微彎的桿菌,無芽孢和鞭毛。培養(yǎng)及生化特性:專性需氧菌,對營養(yǎng)要求嚴格,在添加特殊營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基(羅杰二氏培養(yǎng)基)上才能生長,但生長緩慢。 菌落粗糙,呈顆粒、結(jié)節(jié)或花菜樣,乳白色或米黃色。 液體培養(yǎng)基中易形成菌膜浮于液面。致病特點:細胞內(nèi)寄生和形成局部病灶。細菌主要通過呼吸道侵入機體肺泡,被巨噬細胞吞噬但不被消化降解,并在其內(nèi)繁殖形成病灶,產(chǎn)生干酪樣壞死。壞死灶被吞噬細胞、T細胞和B細胞等包圍形成結(jié)核結(jié)節(jié)。免疫力低下者此局限性病灶可能破潰,菌體排入支氣管,隨痰咳出體外;或病灶液化,擴散進入血流及其他器官,造成機體死亡。對于免疫正常者,局限性病灶在活化的巨噬細胞作用下其內(nèi)細菌停止生長,病灶鈣化而痊愈。診斷:細菌鑒定__1.涂片鏡檢:抗酸染色紅色2.分離培養(yǎng):強酸或強堿處理后接種羅杰二氏培養(yǎng)基3.細菌鑒定:培養(yǎng)特性、生化特性4、動物接種:用于細菌的分離和毒力測定。常用的動物為豚鼠和兔。免疫學(xué)診斷__1.結(jié)核菌素試驗嬰幼兒陽性結(jié)果可結(jié)合臨床癥狀做出診斷。在成人可作為判定機體細胞免疫的一種指標。2.ELISA檢測抗PPD的IgG,肺結(jié)核病人的陽性率為80-90防控:卡介苗(BCG)接種,免疫期:4-5年。治療:①第一線抗結(jié)核藥物包括異煙肼、利福平、利福定、乙胺丁醇和鏈霉素。②第二線抗結(jié)核藥物有對氨水楊酸、吡嗪酰胺、乙硫異煙胺和環(huán)絲氨酸等。十、螺旋體 致病性:1、皮膚病變:常為首發(fā)癥狀,特征性表現(xiàn)為慢性游走性紅斑,初起為紅色斑疹或丘疹,逐漸擴大成環(huán)殂損害。一般出現(xiàn)在蜱叮咬后3—32天,好發(fā)于軀干、大腿、腹股溝,、腋下等處。2、神經(jīng)系統(tǒng)病變:約見于15%的患者,與皮疹同時或消退后1—6周出現(xiàn)。表現(xiàn)為腦膜炎、腦神經(jīng)炎、舞蹈癥、小腦共濟失調(diào),出現(xiàn)腦膜刺激征、昏迷、面癱或三叉神經(jīng)痛等。3、心臟病變:見于8%左右的患者,常于皮損出現(xiàn)3周后發(fā)生房室傳導(dǎo)阻滯、心肌炎、心包炎或全心炎等。4、關(guān)節(jié)病變:約見于60%的患者,多累及大關(guān)節(jié),尤其是膝關(guān)節(jié),反復(fù)發(fā)作腫脹、疼痛,10%的患者可轉(zhuǎn)變?yōu)槁躁P(guān)節(jié)炎。5、其他表現(xiàn):發(fā)熱、乏力、肌痛、惡心、嘔吐、結(jié)膜炎、虹膜炎、淋巴結(jié)及肝脾大等。十一、支原體形態(tài):多形性,外圍只有胞漿膜,無細胞壁,常呈球狀、兩極狀、環(huán)狀、桿狀偶見分枝絲狀,無鞭毛,革蘭氏染色呈陰性,著色不良,姬姆薩或瑞氏染色良好,呈淡紫色。支原體的細胞膜具有三層結(jié)構(gòu),內(nèi)、外層主要是蛋白質(zhì),中間層主要是脂質(zhì)(固醇含量高)。無細胞壁培養(yǎng)特性:1、由于基因組小,合成能力較弱,營養(yǎng)要求較高,需添加外源脂肪酸、甾醇、輔酶I、氨基酸等。 生長緩慢(2-6d長出微小菌落),菌落呈“荷包蛋狀”(豬肺炎支原體除外),菌落中心深入培養(yǎng)基中,致密、色暗;周圍長在培養(yǎng)基表面,較透明。3、典型菌落呈油煎蛋樣4、可在雞胚的卵黃囊或絨毛尿囊膜上生長,有些菌株可致雞胚死亡。也能在細胞培養(yǎng)中生長,不一定引起細胞病變,但可妨礙病毒的細胞培養(yǎng)。5、液體培養(yǎng)基中,生長數(shù)量少,不易見渾濁,僅有小顆粒沉于管底。致病性:病原性支原體常常定居于多種動物呼吸道、泌尿生殖道、消化道粘膜表面及乳腺、眼等,引起牛傳染性胸膜肺炎、豬喘氣病、禽敗血霉形體感染等,傳播途徑主要是呼吸道。單獨感染時,常常癥狀輕微或無臨床表現(xiàn),當細菌或病毒等繼發(fā)感染或受外界不利因素作用引起疾病。特點是潛伏期長,慢性及地方性流行。主要毒力因子:胞黏素,與黏膜呼吸道上皮細胞的纖毛有關(guān),粘附導(dǎo)致纖毛損害并脫落從而使肺易發(fā)繼發(fā)感染。衣原體形態(tài):圓形或橢圓形培養(yǎng)特性:須利用宿主細胞的三磷酸鹽和中間代謝產(chǎn)物作為能量來源。對某些抗生素敏感致病性:衣原體引致多種動物和人的多種炎癥,并可影響生殖系統(tǒng)。致病機理復(fù)雜,涉及黏附、細胞內(nèi)生長及持續(xù)感染及散播等過程,而且與宿主免疫系統(tǒng)相互作用。它會分泌一種外膜蛋白糖脂外抗原使相鄰細胞變得易感。立克次體形態(tài):多形性,主要是球桿狀。培養(yǎng)特性:酶系統(tǒng)不完整,依賴宿主細胞提供ATP、輔酶I和輔酶A等才能生長;對理化因素抵抗力不強,尤對熱敏感,對某些廣譜抗生素敏感,但對磺胺藥不敏感,反而能促進其生長。致人畜疾病的立克次體多寄生于網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)、血管內(nèi)皮細胞或紅細胞,寄生于虱、蚤、蜱、螨等節(jié)肢動物中,通過叮咬感染人和動物。致病性:立克次體主要寄生于節(jié)肢動物的腸壁上皮細胞中或進入它們的唾液腺或生殖道內(nèi)。人畜主要經(jīng)這些動物的叮咬而感染。侵入皮膚的立克次體先在局部淋巴組織或小血管內(nèi)皮細胞中生長繁殖,引起內(nèi)皮細胞腫脹、增生、壞死;微循環(huán)發(fā)生障礙以及形成血栓;紅細胞滲出血管周圍組織,引起特征性皮疹。若菌體經(jīng)血流在全身各器官的小血管內(nèi)皮細胞中大量增殖后再釋入血流會引起第二次菌血癥,使各血管形成血栓、壞死等。第三篇真菌生長、繁殖特性及致病性。第四篇病毒學(xué)復(fù)習(xí)要點:a、病毒子的概念、病毒各結(jié)構(gòu)及功能。b、病毒對稱形式及其概念。c、病毒核酸特點、感染性核酸的概念及條件。d、病毒結(jié)構(gòu)蛋白和非結(jié)構(gòu)蛋白的概念。e、病毒復(fù)制、一步生長曲線、感染比和隱蔽其的概念。f、病毒吸附概念、特異性吸附的機理,血凝和血吸附的概念。g、病毒穿入與脫殼的機制。h、病毒按照核酸類型的分類。i、雙股DNA病毒復(fù)制的基本過程。j、病毒組裝和釋放的機制。k、病毒的基本特征。重點是豬瘟病毒、口蹄疫病毒、偽狂犬病毒、豬細小病毒、豬圓環(huán)病毒2型、豬繁殖和呼吸綜合征病毒、狂犬病病毒、禽流感病毒、新城疫病毒、傳染性囊病病毒、馬立克氏病毒、鴨肝炎病毒、鵝細小病毒、朊病毒等的分類地位、主要特征、所致疾病、微生物學(xué)診斷和防治方法。1、病毒是一群體積微小、結(jié)構(gòu)簡單、只有一種核酸(DNA或RNA),易感活細胞內(nèi)寄生、以復(fù)制方式增殖的非細胞型微生物。特點:(1)、病毒一般只含有一種核酸.(2)、病毒是嚴格的胞內(nèi)寄生物。(3)、病毒沒有核糖體和轉(zhuǎn)移RNA,其酶系統(tǒng)也不完全。(4)、病毒不能長大,不進行有絲分裂。(5)、因病毒結(jié)構(gòu)不同于細菌等微生物,其對抗菌素不敏感,但部分病毒對干擾素敏感。(6)、有些病毒的DNA能整合到宿主細胞的DNA中,常誘發(fā)潛伏性感染或腫瘤。2、病毒的形態(tài):螺旋對稱、二十面對稱、有囊膜病毒子、磚塊狀病毒子、蝌蚪狀病毒子。3、病毒核酸:單股DNA、雙股DNA;單股RNA、雙股RNA、病毒核酸大部分為線狀,部分是環(huán)狀。傳染性核酸:有些病毒去除囊膜和衣殼,裸露的DNA或RNA也能感染細胞,這樣的核酸稱為傳染性核酸。條件:病毒核酸能作為mRNA或者能利用宿主細胞的RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄病毒的mRNA病毒核酸不分節(jié)段4、病毒的分類:國際病毒分類委員會(ICTV)是國際公認的病毒分類與命名的權(quán)威機構(gòu)。目—詞尾“-virales”;科—詞尾“-viridae”;亞科—詞尾“-virinae”;屬—詞尾“-virus”,但在設(shè)立一個新的病毒屬時必需有一個同時被承認的代表種(typespecies)。例如:Circoviridae環(huán)狀病毒科Circovirus環(huán)狀病毒屬5、病毒的增殖復(fù)制:病毒在活細胞內(nèi),以其基因為模板,在酶的作用下,分別合成病毒基因及蛋白質(zhì),再組裝成完整的病毒顆粒。復(fù)制周期:從病毒進入宿主細胞開始,經(jīng)過基因組復(fù)制和病毒蛋白合成,至釋放出子代病毒的全過程。病毒的復(fù)制周期主要包括吸附和穿入、脫殼、生物合成、組裝和釋放四個連續(xù)步驟。病毒的一步生長曲線:以感染時間為橫坐標,病毒效價為縱坐標,繪制出的病毒特征曲線。6、病毒的培養(yǎng):a、動物培養(yǎng)b、胚胎培養(yǎng)c、組織培養(yǎng)第22、23章要點提示a、病毒DI顆粒、抗體逃避變異株、條件致死突變株的概念。b、DNA、RNA病毒突變率及其原因。c、病毒基因重組的概念,舉例說明病毒分子內(nèi)重組和基因重配的概念。d、細胞培養(yǎng)的特點,培養(yǎng)細胞類型和方法及其概念。e、病毒殺細胞作用、生產(chǎn)性感染和允許性感染的概念。f、CPE的概念,不同病毒感染類型對細胞的影響。g、舉例說明病毒引起的殺細胞變化的類型。h、PFU的概念,空斑試驗的用途。i、包涵體的概念及其本質(zhì)。j、干擾素的概念。第24、25、26章要點提示a、病毒致病機理的內(nèi)容。b、以輪狀病毒為例,說明病毒對機體的直接損失機理及補償。c、病毒持續(xù)性感染、潛伏感染、長程感染和遲發(fā)性臨床癥狀的急性感染的概念。d、病毒分離材料的處理方法。e、病毒滴度、TCID50的概念。以下來自郭霄峰老師的課件雙股DNA第一節(jié)痘病毒科(Poxviridae)感染人和動物后常引起局部或全身化膿性皮膚損害的病毒。學(xué)名中的“Pox”來自英語,意“痘”或“膿皰”。一、主要特征最大的DNA病毒。呈磚形式橢圓形。有核心、側(cè)體和包膜,核心為蛋白結(jié)合的DNA。DNA為線型雙鏈。有30種以上的結(jié)構(gòu)蛋白和幾種酶,核心蛋白中含依賴于DNA的RNA多聚酶。病毒在細胞質(zhì)內(nèi)增殖,形成包涵體。病毒的繁殖:可在雞胚絨毛尿囊膜上生長,形成痘斑。還可在同種動物的單層細胞如腎、胚胎組織、雞成纖維細胞中生長,產(chǎn)生細胞病變。抵抗力:1、室溫:耐受干燥幾個月。2、干燥條件下:可耐100℃3、潮濕條件下:60℃4、對常用消毒劑具有較強抵抗力,但50%酒精和0.01%KMnO4可在1小時內(nèi)使其滅5、于-70℃可以活存好多年。保存于50%甘油中的痘病毒,可于0六、微生物學(xué)診斷:1、取材2、病毒的分離、培養(yǎng)3、病毒的鑒定第二節(jié)非洲豬瘟(Africanswinefevervirus)ASFV——非洲豬瘟病毒科以全身出血、呼吸障礙和神經(jīng)癥狀為主要特征二、病毒的生物學(xué)特征二十面體的衣殼和含類脂的囊膜?;蚪M為單股線性DNA,三、致病性ASFV高致病力毒株主要感染單核巨噬細胞系統(tǒng),可引起組織嚴重壞死、出血,最終導(dǎo)致死亡。ASFV的復(fù)制能力和引起巨噬細胞病變的能力是衡量病毒毒力的主要因素。五、流行病學(xué)ASFV主要可以感染野豬、家豬和軟蜱。六、培養(yǎng)特性病毒可在雞胚卵黃囊培養(yǎng)繁殖,也可在體外培養(yǎng)的豬骨髓細胞和白細胞以及PKl5、BHK-21、Vero傳代細胞上增殖,并產(chǎn)生明顯的細胞病變和紅細胞吸附現(xiàn)象,這種吸附現(xiàn)象可被同型的抗血清所抑制。而豬瘟病毒無此吸附作用,可以區(qū)別。七、微生物學(xué)診斷1.病原分離鑒定:取病、死豬的淋巴結(jié)、骨髓、肝、脾、肺等器官組織和血液、體液及各種分泌物和排泄物,經(jīng)處理后接種于雞胚卵黃囊或接種于豬白細胞或骨髓原代細胞分離病毒,可以在電鏡下觀察。2.實驗動物鑒定:最可靠的診斷方法,兩組豬進行接種感染試驗。在這兩組豬中,一組是對豬瘟易感的,另一組是注射過豬瘟疫苗而對豬瘟有免疫性的。若都發(fā)病,則為asfv,只有一組發(fā)病,則為豬瘟病毒。3.血清學(xué)試驗病毒抗原的測定可用紅細胞吸附和紅細胞吸附抑制試驗,直接免疫熒光試驗。4.PCR更快速、敏感??捎糜诓煌珹SFV株的檢測.八、ASF的防治1、無有效的藥物治療2、無有效的疫苗3、預(yù)防措施4、撲滅措施:及時發(fā)現(xiàn),診斷和上報疫情..封鎖隔離。消毒。撲殺,焚燒是預(yù)防及控制本病之唯一有效的方法.第三節(jié)偽狂犬病病毒Pseudorabiesvirus,PRV——皰疹病毒科以發(fā)熱、奇癢(豬除外)及脊髓炎為主要癥狀的一種疾病一、形態(tài)和理化學(xué)特征病毒粒子呈橢圓或圓形外觀。囊膜表面有呈放射狀排列的纖突。有衣殼。外衣殼下還有兩層以上的蛋白質(zhì)膜PRV的基因組為線性雙股DNA分子二、抗原性在病毒與宿主的相互作用中,病毒的糖蛋白起著重要作用,它們不僅介導(dǎo)對靶細胞的感染,而且還是被感染的宿主免疫系統(tǒng)識別的主要抗原PRV糖蛋白gⅡ(gB)是病毒的一種主要囊膜糖蛋白,該糖蛋白不僅誘導(dǎo)產(chǎn)生中和抗體,而且對病毒的復(fù)制和病毒感染過程是必需的。PRV的gⅢ(gC)糖蛋白它的主要功能是介導(dǎo)病毒吸附到宿主細胞上,與病毒感染的第一步有關(guān)。PRV的gp50(gD)糖蛋白是中和抗體的主要靶目標,也是參與病毒復(fù)制的必需成分,它還參與吸附與穿透的病毒感染過程。三、培養(yǎng)本病毒具有泛嗜性,能在多種組織培養(yǎng)細胞內(nèi)增殖,但表現(xiàn)的敏感度不同,其中以兔腎和豬腎細胞(包括原代細胞或傳代細胞系)最適于病毒的增殖五、微生物學(xué)診斷1.病毒的分離:應(yīng)用9~11日齡雞胚作絨毛尿囊膜接種,也是一種常用的病毒分離培養(yǎng)方法。感染雞胚常在絨毛尿囊膜上出現(xiàn)白色痘斑樣病變,并且迅速侵襲神經(jīng)組織,導(dǎo)致胚胎頭蓋骨突起等特征性的病理變化。2. 病毒的鑒定:除病毒的形態(tài)結(jié)構(gòu)、理化學(xué)和培養(yǎng)特性鑒定外,應(yīng)進行病毒中和試驗,也就是應(yīng)用已知標準毒株的免疫血清對新分離病毒作中和試驗。ELISA法、免疫熒光染色法、PCR六、免疫1、病后康復(fù)動物具有高度的免疫性,人工接種強毒(包括經(jīng)鼻途徑)不能引起發(fā)病?;蛉笔缁顫饪s疫苗(TK)第四節(jié)、雞(禽)傳染性喉氣炎病毒(AvianInfectiousLaryngotracheitisVirus)——皰疹病毒科培養(yǎng)特性:9-11天齡的雞胚、雞胚腎細胞、雞胚肝細胞和雞肝傳代細胞致病性:引起雞的喉頭、氣管充血出血。微生物學(xué)診斷:病毒的分離:病毒的鑒定:血清學(xué)方法:分子生物學(xué)方法:七、免疫預(yù)防:1、疫苗2、疫苗返強的可能性3、基因工程疫苗4、載體第五節(jié)馬立克氏病毒(Marek’sdiseasevirus)——皰疹病毒科一.病毒的特性:病毒在體內(nèi)的存在形式有兩種,一種是無囊膜裸露的顆粒;另一種為有囊膜的成熟的完整的病毒粒子。二.培養(yǎng):雞胚卵黃囊接種和絨毛尿囊膜接種診斷:1、病毒的分離:2、病毒的鑒定:3、血清學(xué)試驗:七、免疫預(yù)防:疫苗第六節(jié)鴨瘟病毒(DuckPlagueVirus)——皰疹病毒科一、病毒特性:病毒大小為200nm左右,有囊膜,核酸類型是雙股DNA二、培養(yǎng):鴨胚、雞胚、鴨胚成纖維細胞。三、抗原性:只有一個血清型。四、致病性:主要引起鴨和鵝的急性敗血癥。五、診斷:病毒的分離:病毒的鑒定:血清學(xué)方法:六、免疫第七節(jié)犬皰疹病毒I型(CanineherpesvirusI)主要感染4周的犬,表現(xiàn)為全身性出血癥并死亡。性成熟的犬為生殖道疾病。第八節(jié)貓皰疹病毒I型(FelineherpesvirusI)貓的呼吸道疾病近50%由該病毒所致。幼貓為急性上呼吸道感染,表現(xiàn)為打噴嚏、咳嗽、流涕及發(fā)熱。4周以下的貓可死于鼻氣管炎及支氣管炎。6月以上的貓主要為溫和型或亞臨床感染。孕貓流產(chǎn)。第九節(jié)犬傳染性肝炎病毒(Infectiouscaninehepatitisvirus)——腺病毒科主要侵害1歲以內(nèi)的幼犬,常引起急性壞死性肝炎和角膜混濁(即藍眼病)一、病原特性核衣殼二十面對稱,每個五鄰體上有突出的纖絲,未端為球體病毒基因組為單分子線性雙股DNA二、病毒培養(yǎng)可在犬腎和犬睪丸細胞中生長,出現(xiàn)細胞病變,產(chǎn)生嗜酸性核內(nèi)包涵體。在電鏡下,可發(fā)現(xiàn)細胞核內(nèi)有結(jié)晶狀排列的病毒子。三、致病性早期:不適、缺乏食欲、體溫很高、齒齦和結(jié)膜灰白、嘔吐、腹瀉及腹痛。四、診斷ELISA、HA-HI、中和試驗、PCR。五、免疫可用II型弱毒疫苗。第十節(jié)減蛋綜合癥病毒(Eggdropsyndromevirus)——腺病毒科病的主要特征是產(chǎn)蛋量驟然下降、蛋殼異常、蛋體畸形、蛋質(zhì)低劣。一、病毒特性屬于腺病毒屬禽腺病毒Ⅲ群,為一種無囊膜的雙股DNA病毒二、病毒的培養(yǎng)該病毒能在鴨腎細胞、鴨胚成纖維細胞、雞胚肝細胞、雞腎細胞和鵝胚成纖維細胞上生長,增殖良好。接種在7~10日齡鴨胚中生長良好,并可使鴨胚致死,其尿囊液具有很高的血凝滴度,接種5~7胚齡雞胚卵黃囊,則胚體萎縮。在雛雞肝細胞、雞胚成纖維細胞、火雞細胞上生長不良,在哺乳動物細胞中培養(yǎng)不能生長。三、致病性主要易感動物是雞。其自然宿主是鴨或野鴨。本病常缺乏明顯的病理變化,其特征性病變是輸卵管各段粘膜發(fā)炎、水腫、萎縮,病雞的卵巢。萎縮變小,或有出血,子宮粘膜發(fā)炎,腸道出現(xiàn)卡他性炎癥。四、診斷1、病毒的分離鑒定2、HA-HI3、中和試驗五、免疫產(chǎn)前接種滅活疫苗,能降低發(fā)病率,但不能防止病毒傳播。單股DNA細小病毒為單股線狀DNA,圓環(huán)病毒是已知最小的動植物病毒,為單股環(huán)狀DNA病毒細小病毒科一病毒特性無囊膜,二十面體。核酸為單股線狀DNA。培養(yǎng)特性必須在細胞培養(yǎng)的同時接種病毒,這樣才能達到使病毒增殖良好的目的。豬細小病毒porcineparvovirus,PPV1、病毒特征外觀呈六角形或圓形,無囊膜,二十面體等軸對稱,核心為單股線狀DNA二、培養(yǎng):豬腎細胞,要求在多數(shù)細胞處于旺盛的有絲分裂期進行病毒接種三、診斷(1)分離病毒和血凝抑制試驗。(2)中和試驗,免疫熒光抗體染色法直接檢查單層細胞培養(yǎng)物四、免疫與預(yù)防(1)自然感染免疫法即在后備種豬群中放進一些血清陽性的經(jīng)產(chǎn)母豬,或?qū)⒑髠淠肛i放在感染圈內(nèi)飼養(yǎng)約1個月,使后備母豬受到自然感染而產(chǎn)生主動免疫力。(2)免疫接種弱毒疫苗、滅活疫苗犬細小病毒(canineparvovirus,CPV)犬的一種重要傳染病,臨床以嘔吐、便血、敗血癥為特征,發(fā)病急死快一、病毒特性外觀圓形或六邊形,血凝性較強二、培養(yǎng)犬腎細胞、貓腎細胞。查明是否有病毒就要取接種后3~5天的細胞單層用免疫熒光抗體染色,陽性的發(fā)出明亮熒光三、致病性CPV只感染犬,具有高度接觸傳染性,各年齡階段的犬均易感,成年犬很少出現(xiàn)臨床癥狀臨床表現(xiàn):體溫升高,精神沉郁,脫水,嘔吐,排出粘液樣或帶血糞便(出血性腸炎)。病理變化以空腸、回腸的腸炎變化最明顯四、診斷病犬糞便處理后電鏡下觀察,見直徑約20nm,圓形或六邊形病毒粒子。六、免疫進行免疫接種CPV滅活疫苗或弱毒疫苗。鵝細小病毒(gooseparvovirus,GPV)一、病毒特性外觀圓形或六角形,20~25nm,單股DNA,GPV只有一個血清型,與本屬其它病毒不呈現(xiàn)交叉血清學(xué)反應(yīng),GPV未發(fā)現(xiàn)有凝集血細胞的性能。二、培養(yǎng)對GPV進行初代分離時,只能應(yīng)用鵝胚和番鴨胚病料懸液接種入13~14日齡鵝胚尿囊腔內(nèi),5~7天孵育,約半數(shù)鵝胚死亡(免疫過的母鵝所產(chǎn)卵不死亡,禁用)GPV能適應(yīng)鵝胚成纖維細胞,該病毒對細胞的專一性要求高,在雞胚、鴨胚成纖維細胞上均不長。三、致病性此期病鵝最典型的變化是在小腸出現(xiàn)富有特征性的凝固性栓子。這些腸段膨大增粗,可比正常增大1~3倍,腸壁菲薄,觸摸有緊實感,外觀如香腸狀,這種變化,主要發(fā)生在小腸中下段的空腸和回腸部,但也可在其它腸段出現(xiàn)。小腸內(nèi)形成莢膜四、免疫用滅活病毒接種產(chǎn)蛋鵝,可保護雛鵝。目前多使用小鵝瘟弱毒苗用于種鵝(番鴨)和雛鵝(番鴨)的免疫接種圓環(huán)病毒科20面體對稱結(jié)構(gòu),無囊膜,單股負鏈環(huán)狀DNA。雞傳染性貧血病毒(chickenanemiavirus,CAV)一、病毒特性CAV無囊膜三、培養(yǎng)CAV只能在培養(yǎng)雞馬立克氏病毒及某些白血病病毒的腫瘤淋巴細胞系中生長CAV還可通過雞胚傳代,接種部位為卵黃囊,四、致病性感染途徑主要消化道,其次是呼吸道。貧血是該病主要特征性變化。特征性解剖病變是骨髓萎縮,股骨骨髓脂肪色,淡黃色或淡紅色。胸腺明顯萎縮,重量降低,深紅褐色診斷流行病特點:2~3周齡雛雞最容易發(fā)生,臨床癥狀有嚴重貧血,紅細胞數(shù)顯著下降,剖檢變化有:骨髓呈黃、白色,胸腺萎縮。再生性障礙貧血,全身淋巴組織萎縮,皮下肌肉出血。1、病毒分離鑒定:(1)病雞所有組織都可作為病毒分離材料,以肝臟含毒量最高。2、采用試驗動物分離病毒肌注1日齡SPF雛雞,0.1ml/只,14~16天后測定紅細胞壓積值,觀察骨髓變化,若5只中有1只紅細胞壓積值下降并出現(xiàn)骨髓病變,即可判定陽性3、血清學(xué)檢測:病毒中和試驗(VN)、間接熒光抗體(FA)和ELISA檢測雞血清或卵黃中的CAV抗體免疫與預(yù)防豬圓環(huán)病毒(porcinecircovirus,PCV)主要感染8-13周齡的仔豬。臨床癥狀:1、消瘦、生長發(fā)育不良或停滯;2、進行性呼吸困難;3、全身淋巴結(jié)腫大;4、腹瀉,有的便秘;5、貧血與黃疸;6、伴有先天性振顫。病理變化:1、淋巴結(jié)腫大4-5倍;2、肺部有散在隆起的橡皮狀硬塊;3、脾臟腫大;4、腎腫大,蒼白,有散在白色病灶;5、肝臟雜色樣鑲嵌;6、胃靠近食管區(qū)有潰瘍形成;7、腸黏膜充血或出血。診斷
1、PCV感染的診斷可用豬腎原代細胞或豬腎細胞系統(tǒng)培養(yǎng)分離病毒。2、電鏡法在電鏡下可以看到豬圓環(huán)病毒特有的直徑為17nm的球型結(jié)構(gòu)。3、間接免疫熒光法(IIFA)IIFA主要用于檢測PCV抗體,是一種非??煽康奶禺愒\斷方法。4、免疫組化法(IHC)主要用于檢測PCV抗原,并進行病毒的組織學(xué)定位,具有特異、確實的優(yōu)點,但對實驗人員的要求較高。5、酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)1、ELISA檢測方法要比IIFA靈敏、特異、準確。2、此外,ELISA反應(yīng)對PPV、PRRS沒有交叉反應(yīng)。3、簡便、快捷、可靠,應(yīng)用前景廣闊雙股RNA病毒呼腸孤病毒科(藍舌病毒、輪狀病毒)環(huán)狀病毒屬藍舌病毒(BTV)一、病毒的特性屬呼腸孤病毒科、環(huán)狀病毒屬,無囊膜,近似球形,有外、中、內(nèi)3層衣殼,是一種蟲媒病毒二、培養(yǎng)特性BHK-21、Vero細胞、雞胚、初生哺乳期小鼠和倉鼠體內(nèi)增殖。三、致病性高熱,口、鼻黏膜高度充血,唇部水腫、繼而發(fā)生壞疽型性鼻炎,口腔黏膜潰瘍,蹄部炎癥以及骨骼肌變形。四、診斷1.病毒的分離、鑒定:雞胚接種、病毒中和試驗2.血清學(xué)方法:瓊脂擴散試驗、ELISA3.分子生物學(xué):PCR五、防治1.治療:尚無有效治療方法。對病羊應(yīng)加強營養(yǎng),精心護理,對癥治療。2.預(yù)防:發(fā)生本病的地區(qū),應(yīng)撲殺病畜清除疫源,消滅昆蟲媒介,必要時進行預(yù)防免疫。用于預(yù)防的疫苗有弱毒活疫苗和滅活疫苗等。輪狀病毒(rotavirus,RV)——呼腸病毒科輪狀病毒屬一、分類根據(jù)病毒衣殼VP6抗原分為A~G7個群二、病毒特性1、球形,無包膜,雙層衣殼。內(nèi)衣殼的殼粒沿著病毒體邊緣呈放射狀排列,形同車輪輻條,故稱為輪狀病毒。2、培養(yǎng)特性:恒河猴胚腎細胞、非洲綠猴腎傳代細胞3、抵抗力:對理化因素有較強的抵抗力。耐酸、堿、pH3.5-10。室溫感染性可保持7個月,經(jīng)乙醚、氯仿、反復(fù)凍融、超聲、37℃1小時等處理仍具有感染性。95%的乙醇或564、臨床意義輪狀病毒胃腸炎是病毒性胃腸炎中最常見的一種。5、診斷:a.顯微鏡檢:采集水樣便后,負染后鏡檢。b.免疫學(xué)檢測:雙抗夾心ELISA、反向間接血凝、乳膠凝集等方法檢測病毒抗原,可以定量。c.核酸檢測也可用核酸雜交或RT-PCR等技術(shù)進行檢測和分型鑒定。5、防治a.治療:對癥治療,加強護理,停乳,給糖鹽水或給葡萄糖-甘氨酸電解液,防止脫水,酸中毒,繼發(fā)感染。
b.預(yù)防:早吃初乳單股負鏈RNA病毒——信使與mRNA基因序列相反副粘病毒科☆第一節(jié)新城疫病毒(Newcastlediseasevirus,NDV)世界上家禽和其他一些禽類的最重要的兩大疾病之一(另一個是高致病力禽流感)。一、NDV的形態(tài)結(jié)構(gòu):NDV屬于副粘病毒科副粘病毒屬。NDV完整的病毒粒子近圓形或圓形,有不同長度的細絲。NDV由螺旋形對稱盤繞的核衣殼和囊膜組成。囊膜表面有放射狀排列的纖突,含有刺激宿主產(chǎn)生血凝抑制和病毒中和抗體的抗原成分,具有凝集紅細胞的活性.病毒核酸類型為單股,負鏈,不分節(jié)段的RNA病毒。二、病毒的分類:A、速發(fā)嗜內(nèi)臟型:高致病性疾病,腸道有典型的出血性病變。B、速發(fā)嗜神經(jīng)型:在出現(xiàn)呼吸道癥狀和神經(jīng)癥狀后死亡率較高C、中發(fā)型:呼吸道癥狀和神經(jīng)癥狀,但通常死亡率較低D、緩發(fā)型:呼吸道輕微或不明顯感染E、緩發(fā)型嗜腸型:無明顯癥狀的腸道感染三、病毒的血凝:能凝集雞、火雞、鴨、人等的紅血球。四、病毒的培養(yǎng):雞胚、細胞五、病毒的致病性:主要特征是呼吸困難,下痢,神經(jīng)紊亂,粘膜和漿膜出血。六、病毒的診斷:1、病毒的分離:2、病毒的鑒定:3、強弱毒的鑒別:傳統(tǒng)的方法:雞胚平均致死時間試驗(MDT)(小于60)、1日齡雞腦內(nèi)致病指數(shù)試驗(ICPI)(接近2)、6周齡雞靜脈致病指數(shù)試驗(IVPI)(接近3)等七、預(yù)防1、血清抗體的監(jiān)測:2、免疫:弱毒疫苗、中等毒力疫苗、飲水免疫、氣霧免疫第二節(jié)邁南格爾病毒(Menanglevirus)一、病毒的形態(tài):該病毒屬副粘病毒科,一般比正粘病毒科的粒子大,病毒粒子表面具有類脂質(zhì)囊膜和螺旋狀核衣殼。核酸基因組不分段,單股線狀RNA,病毒抗原性穩(wěn)定,具有神經(jīng)氨酸酶活性。二、臨床癥狀:僅限于繁殖障礙病,包括產(chǎn)仔率下降,窩產(chǎn)仔數(shù)減少,出生仔豬成活率減少,木乃伊胎兒和死產(chǎn)仔豬畸形數(shù)增加,偶然發(fā)生流產(chǎn)。五、鑒別診斷:MeV引起的發(fā)病胎兒和死產(chǎn)仔豬畸形相似于由乙腦(引起腦水腫和全身水腫),豬瘟(腦發(fā)育不全)和SIV(肺發(fā)育不全)所制疾病,但MeV感染多引起更廣泛的中樞神經(jīng)系統(tǒng)變性,并出現(xiàn)關(guān)節(jié)彎曲骨骼畸形及偶然的肺發(fā)育不全,因此不難區(qū)別。小反芻獸瘟病毒——對山羊以及綿羊致病第三節(jié)犬副流副病毒2型引起犬的隱性感染或者輕微的呼吸道疾病,并可致中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病,影響嗅覺。病毒還可感染人。第四節(jié)犬瘟熱病毒急性型體溫升高(雙相熱),第二階段的體溫升高時伴有嚴重的白細胞減少癥,并有呼吸道癥狀或胃腸道癥狀。亨德拉病毒尼帕爾病毒——表面有纖突,用血清學(xué)方法確診彈狀病毒科☆狂犬病毒(RabiesVirus)一、病毒的形態(tài):病毒粒子呈子彈狀。有囊膜及膜粒,圓柱狀的核衣殼螺旋對稱?;蚪M為單股負鏈RNA外包蛋白質(zhì)囊膜(envelop),膜上有由糖蛋白構(gòu)成的纖突(spikes),其具有紅血蛋白凝集性質(zhì)。在唾液腺和中樞神經(jīng)(尤其在腦海馬角、大腦皮層、小腦)細胞的胞漿內(nèi)形成狂犬病特異的包涵體,叫內(nèi)基氏小體(呈圓形或卵圓形,染色后呈嗜酸性反應(yīng))。對10%肥皂水敏感二、致病性狗、貓及食肉動物最易感,其他溫血動物包括人也易感。禽類可實驗感染,鯢最不敏感。病毒可通過咬傷、吸入和眼及口腔粘膜侵入。潛伏期長短不一,主要取決于傷口的部位、深淺、面積以及隨唾液進入體內(nèi)的病毒量。一般說來,傷口離中樞愈近,進入體內(nèi)的病毒愈多,潛伏期就愈短;反之,潛伏期就愈長。犬平均為2~8周,最短8天,長可達數(shù)月至一年以上。病毒從入侵部位沿外周神經(jīng)干向心傳播三、病毒的診斷臨床診斷比較困難,根據(jù)臨床癥狀和病理變化,結(jié)合病史綜合分析可做出初步診斷,但要確診主要還是通過實驗室檢查。對于可疑動物,診斷時一定要慎重,首先應(yīng)將動物嚴格隔離控制觀察14天以上,在此期間動物死亡或撲殺后,細心割取頭頸部送實驗室,摘取全腦浸泡在50%甘油生理鹽水中送檢。目前,用于實驗室診斷狂犬病的方法很多,其中應(yīng)用較廣的有鼠中和實驗(MNT)、免疫熒光實驗(FAT)、間接免疫熒光實驗(RFAT)、快速熒光灶抑制實驗(RFFIT)、放射免疫分析(RIA)以及酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)和酶免疫斑點法等。聚合酶聯(lián)鏈式反應(yīng)(PCR),四、免疫預(yù)防迄今為止,世界上還尚無治療狂犬病的特效藥,仍以預(yù)防為主。分節(jié)段的負股RNA病毒正粘病毒科☆第一節(jié) 禽流感病毒AvianInfluenzaVirus(AIV)一、禽流感病毒的生物學(xué)特性1、病毒粒子呈球形.桿狀或長絲狀。核衣殼呈螺旋對稱型,病毒具有囊膜,囊膜鑲嵌著兩種重要的纖突,分別為血凝素(hemagglutinin,HA)和神經(jīng)氨酸酶(neuraminidase,NA)。病毒核酸由八個負鏈RNA片段組成(第四個片段控制血凝素HA,第六個控制神經(jīng)氨酸酶NA)2、命名規(guī)則為:病毒型/宿主來源/地域來源/毒株編號/被分離的年份(病毒的亞型)例如:A/Hongkong/156/97(H5N1)表示:1997年于香港從人分離到的H5N1血清亞型A型流感病毒,毒株序號為1563、抗原特異性抗原漂變指編碼HA和NA的基因發(fā)生點突變而導(dǎo)致HA或NA抗原性的微小變化??乖浦妇幋aHA和NA的基因發(fā)生基因重組或交換而導(dǎo)致HA或NA抗原的完全改變,它致使病毒發(fā)生型的變異。4、AIV血凝活性能凝集多種動物的紅細胞,并能被特異的抗血清抑制。禽流感凝集的紅細胞與雞新城疫病毒凝集的種類有所不同,所以可鑒別兩種病毒。二、培養(yǎng)體系禽胚(尤其是雞胚)仍然是流感病毒最敏感的培養(yǎng)體系之一。犬腎細胞(Madindarbycaninekidney,MDCK)培養(yǎng)和分離的流感病毒,其抗原性和HA1的氨基酸序列更接近原始毒株。四、診斷與防制胰腺出血壞死;腳的角質(zhì)層有出血點,出血斑塊(雞)(一)血清學(xué)試驗血凝及血凝抑制試驗瓊脂擴散試驗熒光抗體技術(shù)酶聯(lián)免疫吸附試驗Directigena試劑盒
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