發(fā)酵對海蛇生品與生品的影響

發(fā)酵對海蛇生品與生品的影響

關于扁平海生動物：扁平海生動物（gry）。藥性:味咸,性平。功能與主治:祛風濕,通絡止痛,解毒。主治風濕痹痛,肌膚麻木,疥癬,皮膚濕癢,瘡癤?？梢姾Ｉ哂兄鴱V闊的市場潛力,但其本身含有腥味,影響進一步的開發(fā)利用。通過研究,確定了發(fā)酵去除其腥味的工藝。據(jù)文獻報道,發(fā)酵去腥應用很少,且其機理不清楚,故筆者分別從性狀、顯微、薄層及紅外掃描對其進行研究,比較海蛇發(fā)酵前后的差異,確定發(fā)酵對海蛇的影響。1材料表面1.1海蛇科平哌海蛇本品購于海南省海口市東門市場,經(jīng)成都中醫(yī)藥大學盧先明教授鑒定為海蛇科平頦海蛇[Lapemishardwickii(Gray)]的干燥全體。其多于夏、秋季捕捉,捕得后用沸水燙死,除去內臟,烘干或鮮用。1.2海蛇段、、的制備用凈海蛇段,依照如下操作,制得海蛇發(fā)酵品。①取5g酵母菌,加2﹪蔗糖液50ml敞開活化30min.②取海蛇段1kg,將①的處理液轉移至海蛇藥材中,并加入3000ml2﹪蔗糖液和pH=5緩沖液2000ml.充分攪拌,使液體均勻分布于海蛇體。③敞開放置在35～40℃培養(yǎng)箱內,發(fā)酵100min,每20min攪拌1次。④取出海蛇,盡量除去其攜帶的水,即得。1.3化學試劑纈氨酸(批號:24-200104)、丙氨酸(批號:624-200104),均購自中國藥品生物制品檢定所,其余均為分析純。2方法和結果2.1橫斑間距12海蛇生品全體長69.2～91.5cm.頭較長,鼻孔向上,鼻鱗彼此相接。體側扁,全體帶有深欖色寬橫斑,橫斑間距1～2鱗寬,在體側下方尖出呈三角形,有的形成完整環(huán)紋。體背鱗片菱形,呈鑲嵌狀排列,除去內臟的腹面,肌肉土黃色,可見排列均勻而微隆起的肋骨。質堅韌,不易折斷。氣腥,味咸。海蛇發(fā)酵品:海蛇干體長約0.6cm橫切小段。表面橄欖黃,較生藥材顏色淺,發(fā)白,無腥味,有酵母粉的淡淡清香味,味咸。2.2海蛇肉粒的結構本品粉末黃色或淡黃色,氣腥,味淡。①角質鱗片淡灰色或近無色或淡黃色或紅棕色,側面觀具半圓形或乳頭狀突起;表面觀呈類圓形,分布有淡灰色或淡棕色細顆粒狀物。②皮膚碎片淡黃色或近無色或近紅棕色,表面密布棕色或黑色色素顆粒,常聚集成網(wǎng)狀或分枝狀,細胞界限較清楚。③橫紋肌纖維較多,淡黃色或近無色,呈條狀或方狀,直徑4～15μm,具極細的橫紋,明暗相間,橫紋平直或稍彎,有的邊緣不平整,斷面觀少見。④骨碎片近無色或淡灰色,呈不規(guī)則的碎塊。骨陷窩長梭形,大多同方向排列,骨小管稀而稍粗,于橫、縱斷面均明顯可見。二者均具有基本的角質鱗片,皮膚碎片,橫紋肌纖維,骨陷窩與骨小管,只是在結構上有微小差別。發(fā)酵品角質鱗片較生品少,且其淡灰色居多,無紅棕色;側面觀乳頭狀突起不明顯,表面觀類圓形突起很大,未看到有棕色顆粒密布。發(fā)酵品皮膚碎片和骨碎片較多,其骨陷窩與骨小管常一起,而生品只能看到外露的骨陷窩,長梭形,大多同方向排列?？梢姲l(fā)酵會使得海蛇結構上產(chǎn)生一定變化。結果見圖1.2.3海蛇氨基酸成分測定海蛇(海蛇發(fā)酵品)粉末(過藥典三號篩)1g,加甲醇10ml,超聲處理30min,濾過,濾液水浴蒸干,加1ml甲醇溶解,作為供試品溶液。取0.001g纈氨酸,0.001g丙氨酸,分別加1ml甲醇溶解,制成1mg/ml對照品液。照薄層色譜法實驗,吸取上述溶液各1μl,分別點于同一硅膠G薄層板上,以正丁醇-冰醋酸-水(4︰1︰1)與顯色劑(0.5%茚三酮醇液)以10︰1的混合液及正丁醇-冰醋酸-乙醇-水(5︰1︰1︰2)與顯色劑同樣的混合液為展開劑,展開,取出,晾干,105℃烘箱內烘至顯清晰的斑點。2種展開系統(tǒng)供試品色譜中,生品、發(fā)酵品與對照品色譜相應的位置上均顯紫紅色的斑點,說明二者含有同樣的化學成分,只是發(fā)酵品的含量很明顯低于生品。其原因可能是在發(fā)酵處理過程中,有些成分溶于水,而損失部分含量?？梢姲l(fā)酵未影響海蛇的氨基酸成分結構,只是含量有一定減少。結果見圖2.2.4比較海蛇生產(chǎn)前后的紅外光譜2.4.1fw-4-采用高效液相色譜法儀器:Prestige-21型紅外光譜儀(島津國際貿易上海有限公司),FW-4壓片機(天津天光光學儀器有限公司),遠紅外燈,瑪瑙研缽。試藥:溴化鉀分析純。三批(090101、090102、090103)放大試驗海蛇生品與發(fā)酵品粉末,過六號篩。2.4.2樣品的制備取KBr粉末與藥材粉末以1︰200混勻,置烘箱烘干。測定時,取適量粉末置瑪瑙研缽中研細,即得(操作在紅外燈下進行)。2.4.3紅外光譜測定取分析純KBr約100mg,研細,裝入壓片模具,用壓片機加壓至30MPa,維持壓力2min后卸掉壓力,得厚約1mm的透明KBr片進行紅外光譜測定,作為空白對照。2.4.4生品與發(fā)酵品的圖譜取各批次海蛇生品與發(fā)酵品樣品適量.按2.4.3項下操作,進行樣品紅外光譜測定。絕大多數(shù)有機化合物的基頻振動出現(xiàn)在4000～400cm-1區(qū)域。6種樣品均有明顯的兩種吸收峰:2900～3400cm-1,1540～1660cm-1.推測090101生品與發(fā)酵品,090102生品與發(fā)酵品含有酰胺鍵,而090103生品與發(fā)酵品含有-CH3及-C=O.090101生品與發(fā)酵品在3000cm-1以上的吸收峰有差別,前者為3279.44cm-1,后者為3422.36cm-1.在2350cm-1處,二者亦有一定差別,前者為波峰,后者為波谷。090102生品與發(fā)酵品對比情況同090101.090103生品與發(fā)酵品圖譜基本相同?？梢姲l(fā)酵對海蛇化學成分的官能團有一定影響,結果見圖3.3海蛇和海蛇降低化學成分的臨床價值通過對海蛇生品與發(fā)酵品的性狀、顯微、薄層及紅外掃