早期不明原因自然流產(chǎn)患者氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)產(chǎn)物水平的研究

早期不明原因自然流產(chǎn)患者氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)產(chǎn)物水平的研究

近年來，早期自然流產(chǎn)的發(fā)病率有所增加。許多患者已發(fā)展為復(fù)發(fā)性流產(chǎn)，嚴(yán)重影響了女性的身心健康。氧化應(yīng)激與炎癥學(xué)說成為產(chǎn)科領(lǐng)域近幾年來的研究熱點。也有研究表明氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)參與了血管內(nèi)皮的損傷,而血管形成與胚胎良好血供是早期胚胎著床及妊娠成功的關(guān)鍵。本研究檢測正常妊娠及不明原因早期自然流產(chǎn)患者血漿8-異前列腺素(8-isoprostane)等氧化應(yīng)激產(chǎn)物和高敏C-反應(yīng)蛋白(high-sensitiveC-reactiveprotein,hs-CRP)等炎癥標(biāo)志物的變化,研究氧化應(yīng)激與炎癥反應(yīng)在早期妊娠不明原因流產(chǎn)發(fā)病中的作用。1數(shù)據(jù)和方法1.1然保持了20例,年齡已20歲選擇2008年12月至2010年12月在我院就診,以B超確診,排除生殖器官解剖異常、內(nèi)分泌、遺傳、全身及生殖泌尿等顯性感染等因素,考慮為早期不明原因自然流產(chǎn)患者(流產(chǎn)組),共40例,年齡21～32歲,孕周為8～10周;同期選取門診正常早孕要求人工流產(chǎn)的婦女(正常早孕組)35例,年齡22～31歲,孕周為孕8～10周以及健康非孕婦女(健康非孕組)20例,年齡21～35歲,作為對照。兩對照組婦女均排除肝、腎疾患史及免疫性疾病史,且至少有一次正常足月分娩史,現(xiàn)無宮內(nèi)感染及其他臨床發(fā)熱征象,無自然流產(chǎn)、死胎、死產(chǎn)史。全部研究對象在收集標(biāo)本前未接受任何藥物治療,在受檢前1個月內(nèi)均無急性病史。1.2免疫酶分析方法空腹8～12h后于清晨(流產(chǎn)組和正常早孕組均于治療前)取肘靜脈血5mL,分離血漿置-70℃保存待檢。8-isoprostane采用特異性的免疫酶分析方法測量,丙二醛(MDA)以硫代巴比妥酸反應(yīng)產(chǎn)物比色法檢測,氧化修飾低密度脂蛋白(ox-LDL)用ELISA法測定,白細胞介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)用ELISA法測定,hs-CRP用透射免疫比濁法測定,所有操作嚴(yán)格按試劑盒說明進行。1.3氧化應(yīng)激產(chǎn)物與炎癥反應(yīng)產(chǎn)物的相關(guān)性數(shù)據(jù)以xˉ±sxˉ±s表示,組間比較采用t檢驗,氧化應(yīng)激產(chǎn)物與炎癥反應(yīng)產(chǎn)物的關(guān)系采用直線相關(guān)分析,P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。2結(jié)果2.1學(xué)意義整體觀念法血漿8-isoprostane、ox-LDL流產(chǎn)組明顯高于兩對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01,P<0.05);而MDA在流產(chǎn)組也高于對照組,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);正常早孕組8-isoprostane、MDA、ox-LDL高于健康非孕組,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),見表1。2.2差異有統(tǒng)計學(xué)意義流產(chǎn)組炎癥反應(yīng)產(chǎn)物hs-CRP、IL-6和TNF-α水平均高于正常早孕組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05,P<0.01);流產(chǎn)組3者的水平也高于健康非孕組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05,P<0.01);而正常早孕組也高于健康非孕組,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),見表2。2.3ox-ldl與hs-crp、il-6、tnf-的相關(guān)性相關(guān)分析表明,流產(chǎn)組血漿8-isoprostane水平與hs-CRP、IL-6、TNF-α呈正相關(guān)(分別為r=0.897,r=0.864,r=0.766,均P<0.05);ox-LDL也與hs-CRP、IL-6、TNF-α呈正相關(guān)(分別為r=0.434,r=0.412,r=0.402,均P<0.05);而MDA與hs-CRP、IL-6、TNF-α無相關(guān)性(分別為r=0.198,r=0.201,r=0.109,均P>0.05)。3討論3.1正常早孕患者血漿炎癥反應(yīng)變化氧化應(yīng)激就是指體內(nèi)氧化與抗氧化作用失衡,傾向于氧化,進而激活或損傷內(nèi)皮細胞。孕早期囊胚在著床后早期,絨毛滋養(yǎng)細胞侵入母體子宮螺旋動脈管腔,使其轉(zhuǎn)化為低阻力松弛管腔,閉合了螺旋動脈,限制了母體血液流入胎盤。因此,胎盤在一個低氧環(huán)境中發(fā)育,從而使分化細胞免受大劑量活性氧損傷而受到保護,同時胎盤組織抗氧化作用也隨之增強。因此,正常妊娠期氧化和抗氧化作用保持相對平衡,不會產(chǎn)生氧化應(yīng)激。我們檢測正常早期妊娠外周血中氧化應(yīng)激產(chǎn)物MDA、ox-LDL、8-isoprostane,發(fā)現(xiàn)正常早孕組上述3種產(chǎn)物均高于健康非孕組,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05);且正常早孕組上述3種產(chǎn)物均低于早孕流產(chǎn)組,其中ox-LDL、8-isoprostane差異有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05),MDA差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);表明正常早期妊娠期存在氧化應(yīng)激,但維持在較低水平,氧化和抗氧化作用保持相對平衡,使妊娠得以繼續(xù)。炎癥反應(yīng)是指患者無全身或局部顯性感染征象,但是存在低水平、持續(xù)的炎癥狀態(tài),表現(xiàn)為炎癥因子如hs-CRP、IL-6、TNF-α等輕度升高。CRP主要是肝臟在IL-1和IL-6刺激下產(chǎn)生的,是反映全身炎癥反應(yīng)的敏感標(biāo)志物。隨著一些高靈敏度檢測方法的出現(xiàn),低水平的CRP亦可被檢測出來,因此被稱為hs-CRP。IL-6是一種糖蛋白,主要由淋巴細胞及單核巨噬細胞分泌,是一種重要的促炎因子,有廣泛的生物學(xué)作用,它可誘導(dǎo)B細胞分化并產(chǎn)生免疫球蛋白,促進T細胞增殖生長等。TNF-α是一種多肽類物質(zhì),主要由單核巨噬細胞產(chǎn)生,參與機體多種生理與免疫過程的重要介質(zhì),IL-6與TNF-α在妊娠、分娩及胎兒生長發(fā)育中均具有重要作用。我們的研究發(fā)現(xiàn),35例正常早孕患者血漿TNF-α、hs-CRP、IL-6的水平均高于健康非孕組,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05),表明正常早期妊娠期存在炎癥反應(yīng);但自然流產(chǎn)患者血漿TNF、hs-CRP、IL-6的水平均高于正常早孕組和健康非孕組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05,P<0.05,P<0.01,P<0.01,P<0.05,P<0.01),表明正常早期妊娠期炎癥反應(yīng)維持在較低水平,對調(diào)節(jié)胎盤組織的正常生長和功能發(fā)揮,參與正常妊娠的維持起著一定的作用。3.2早期妊娠合并心臟病理變化的機制我們發(fā)現(xiàn),炎癥標(biāo)志物與氧化應(yīng)激產(chǎn)物在早期妊娠流產(chǎn)中均顯著升高,盡管MDA與hs-CRP、TNF-α、IL-6無明顯相關(guān)性,但炎癥標(biāo)志物hs-CRP、TNF-α、IL-6與氧化應(yīng)激標(biāo)志物8-isoprostane、ox-LDL均具有相關(guān)性,說明早期流產(chǎn)同時存在氧化應(yīng)激與炎癥反應(yīng),且二者相關(guān)性好。據(jù)文獻和以上研究結(jié)果,我們認(rèn)為,炎癥和氧化應(yīng)激反應(yīng)在早期妊娠流產(chǎn)的發(fā)生發(fā)展中可能起如下作用:受炎癥刺激物作用和氧化應(yīng)激產(chǎn)物8-isoprostane、ox-LDL刺激,一方面,TNF-α吸引中性粒細胞、單核細胞向損傷區(qū)域聚集,釋放炎癥介質(zhì);TNF-α、IL-6刺激肝臟產(chǎn)生CRP,并誘導(dǎo)巨噬細胞、血管內(nèi)皮細胞產(chǎn)生并釋放一氧化氮、中性粒細胞產(chǎn)生大量氧自由基,導(dǎo)致白細胞侵潤、炎癥產(chǎn)物CRP沉積和氧自由基聚集,又使體內(nèi)過氧化反應(yīng)得到增強;另一方面,TNF-α抑制脂蛋白脂肪酶活性,導(dǎo)致脂質(zhì)代謝異常;同時8-isoprostane、ox-LDL也是炎癥過程潛在的誘導(dǎo)劑,它直接損傷巨噬細胞、內(nèi)皮細胞表達黏附分子、細胞因子、促炎因子及其它炎癥反應(yīng)的中介物,這些細胞因子之間也可以互相誘生形成復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)體系,共同促進炎癥進程;內(nèi)皮細胞還通過上調(diào)其表面黏附分子促進白細胞的附壁和黏附,