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認(rèn)證信息

認(rèn)證類型：個人認(rèn)證

認(rèn)證主體：譚**（實(shí)名認(rèn)證）

IP屬地：江西

IP屬地：江西 上傳時(shí)間：2023-10-10 格式：DOCX 頁數(shù)：7 大?。?5.07KB 積分：12 舉報(bào) 版權(quán)申訴

正己烷慢性吸入小鼠實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ徒ⅰ菊磕康慕⒄和槁晕肴径镜膭游飳?shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，為研究正己烷長期吸入的毒理損傷機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)方法。方法24只昆明小鼠，隨機(jī)分為4組，靜式染毒，初始濃度為/m3。染毒結(jié)束后，取血標(biāo)本測正己烷濃度；取肺、肝和腎組織常規(guī)固定，包埋，光鏡觀察結(jié)構(gòu)變化。結(jié)果各染毒組小鼠血液中正己烷平均濃度均已明顯高于正常對照組，已達(dá)到染毒要求。鏡下觀察實(shí)驗(yàn)小鼠的肺、肝和腎均出現(xiàn)病理變化，并隨染毒時(shí)間延長呈病理改變加重趨勢。結(jié)論本實(shí)驗(yàn)采用的昆明小鼠正己烷靜式染毒方法，已造成實(shí)驗(yàn)小鼠主要代謝器官進(jìn)行性損傷，可作為研究正己烷毒理損傷機(jī)制的參考模型。

【關(guān)鍵詞】正己烷

正己烷屬飽和脂肪烴類，是一種常用的有機(jī)工業(yè)溶劑。其價(jià)格低廉，在印刷、油漆、電子器材清洗等行業(yè)中被廣泛使用。近年來，長期接觸正己烷引起的慢性中毒事件屢有發(fā)生，且有不斷增多趨勢〔1，2〕。正己烷對機(jī)體損傷過程，是一個長期接觸后的慢性中毒過程。而以往的正己烷動物染毒實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，主要是急性正己烷損傷模型，而且規(guī)格和方法均不統(tǒng)一，不能很好的觀察正己烷慢性吸入后其主要代謝器官產(chǎn)生的損傷變化。本文建立的正己烷慢性吸入致昆明小鼠器官損傷的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，為進(jìn)一步研究正己烷慢性吸入產(chǎn)生的損傷作用及其可能的作用機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)方法。

1材料與方法

11材料選用清潔級昆明小鼠(廣東省實(shí)驗(yàn)動物中心，合格證號：2004A021)共24只，體重g。正己烷為分析純。

12自制染毒裝置染毒箱規(guī)格：50cm×50cm×100cm，總體積為250L。材料為有機(jī)玻璃，箱頂部配有小功率電扇一部和正己烷添加孔，箱正面有一個鼠籠進(jìn)出口。

13實(shí)驗(yàn)動物分組24只昆明小鼠隨機(jī)分為正常對照組和3個染毒組，每組6只。染毒組按染毒時(shí)間長短分為4，8和12周3組。

14染毒劑量和方法采用靜式染毒模式,染毒箱內(nèi)平均初始濃度為176g/m3。每周染毒6d，每天置小鼠于染毒箱內(nèi)8h，即8～12時(shí)和13～17時(shí)，其余時(shí)間小鼠置于染毒箱外正常環(huán)境。第7d，各組實(shí)驗(yàn)小鼠置正常環(huán)境中喂養(yǎng)。對照組小鼠放入同樣規(guī)格另一染毒箱中，操作過程同實(shí)驗(yàn)組，但不接觸正己烷。

15血樣和組織標(biāo)本的采取各組小鼠分別在第4，8和12周末實(shí)驗(yàn)結(jié)束后半小時(shí)內(nèi)取血，并及時(shí)用氣相質(zhì)譜-色譜儀檢測正己烷濃度。采血后取小鼠的肺、肝、腎等主要器官組織，4％多聚甲醛固定，石蠟包埋和常規(guī)蘇木素-伊紅染色。

2結(jié)果

21中毒表現(xiàn)染毒組吸入2周后表現(xiàn)行動逐漸滯緩，4周后毛色變差，進(jìn)食量逐漸減少。隨著染毒時(shí)間延長，染毒組小鼠上述中毒表現(xiàn)逐漸加重，且體重逐漸減輕。但全部染毒組小鼠至取材時(shí)無一意外死亡。對照組健康小鼠，喂養(yǎng)期間無明顯異常。

22血液中正己烷濃度檢測染毒組4,8,12周全血標(biāo)本中正己烷平均濃度分別為67833，77667和43000μg/L,明顯高于對照組(01μg/L)，達(dá)到染毒要求。

23顯微鏡觀察對照組小鼠肝、肺、腎結(jié)構(gòu)正常，未見明顯病理變化。染毒組小鼠的肝、肺和腎結(jié)構(gòu)均逐漸出現(xiàn)病理變化，且隨著染毒時(shí)間的延長，變化呈不斷加重趨勢。(1)肝臟：肝細(xì)胞體積增大，胞漿疏松。隨染毒時(shí)間延長，嗜酸性變的肝細(xì)胞數(shù)量增多，集中于中央靜脈周圍；肝細(xì)胞脂肪性變的數(shù)量也逐漸增多，較集中在肝小葉邊緣部位，12周組中大量肝細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)較大脂肪滴。(2)肺臟：肺部出現(xiàn)炎癥，隨著染毒時(shí)間延長，肺泡隔和細(xì)支氣管周圍細(xì)胞的浸潤逐漸增多，且出現(xiàn)代償性肺氣腫，部分肺泡擴(kuò)張并間隔斷裂，逐漸融合成較大的囊腔。12周組中炎癥細(xì)胞浸潤嚴(yán)重，肺泡隔明顯增厚。(3)腎臟：染毒8周組腎小管上皮出現(xiàn)嗜酸性變細(xì)胞，12周組嗜酸性變細(xì)胞明顯增多，12周組腎小管水腫明顯，部分集合管上皮出現(xiàn)嗜酸性變細(xì)胞，腔內(nèi)有少量分泌物和蛋白管型。

圖1染毒8周(A)及12周(B)肝臟病理變化

圖2染毒4周(A)及12周(B)肺臟病理變化

圖3染毒12周(A)、(B)腎臟病理變化

3討論

“正己烷在正常環(huán)境中主要由肺吸入，經(jīng)肝臟代謝后由肺和腎排出體外。實(shí)驗(yàn)報(bào)道，急性吸入可以造成肺、肝和腎等代謝器官損傷〔2〕。”本實(shí)驗(yàn)根據(jù)毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)相關(guān)文獻(xiàn)〔3，4〕，參考以往正己烷研究文獻(xiàn)〔5〕，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)條件和初始濃度設(shè)計(jì)，目的在于盡量模擬生產(chǎn)作業(yè)的接觸方式，構(gòu)建正己烷慢性吸入動物模型，觀察其主要代謝器官的形態(tài)學(xué)改變。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)較為合適，3組染毒小鼠在整個染毒過程中無一意外死亡。染毒小鼠全血標(biāo)本中正己烷濃度均達(dá)到染毒要求，各組染毒小鼠的肺、肝和腎均有較明顯的病理學(xué)變化，尤其是肺臟隨著染毒時(shí)間的延長，肺泡間隔逐漸增厚，炎癥細(xì)胞浸潤逐漸增多，這是正己烷吸入對肺進(jìn)行性損傷所致；肝臟和腎臟的結(jié)構(gòu)損傷也都隨著時(shí)間延長而加重。有報(bào)道，正己烷可以造成肝細(xì)胞的脂質(zhì)過氧化損傷〔6〕。本實(shí)驗(yàn)也觀察到肝小葉周邊大量肝細(xì)胞發(fā)生脂肪性變，表明正己烷吸入后可以影響肝細(xì)胞的正常脂質(zhì)代謝而最后造成肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)的損傷，對此我們將進(jìn)一步利用免疫組化等形態(tài)學(xué)技術(shù)進(jìn)行探討。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本文建立的昆明小鼠正己烷慢性吸入模型是有效的，正己烷慢性吸入可致昆明小鼠肺臟、肝臟和腎臟等主要代謝器官進(jìn)行性的損傷，為進(jìn)一步對正己烷毒理損傷機(jī)制的研究提供了實(shí)驗(yàn)參考模型。

【參考文獻(xiàn)】

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〔2〕楊永國，黃中新，程欣.正己烷吸入致大鼠肺和肝腎損害的研究［J］.中華勞動衛(wèi)生與職業(yè)病,2006,24(5):292-294.

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〔4〕徐厚恩，張銑.衛(wèi)生毒理學(xué)基礎(chǔ)［M］.北京：北京醫(yī)科大