光譜分析技術(shù)-紫外可見分光光度計(jì)使用（藥檢儀器課件）

朗伯比爾定律朗伯比爾定律學(xué)習(xí)目標(biāo)光的吸收程度與濃度厚度關(guān)系朗伯比爾定律A=-lgT=Kcl朗伯比爾定律A=-lgT=Kcl吸光度朗伯比爾定律A=-lgT=Kcl透光率朗伯比爾定律A=-lgT=Kcl吸收系數(shù)朗伯比爾定律A=-lgT=Kcl溶液濃度朗伯比爾定律A=-lgT=Kcl液層厚度圖片來(lái)源于網(wǎng)絡(luò)布格

PierreBouguer朗伯JohannHeinrichLambert比爾AugustBeer吸收系數(shù)A=KclK=A/cl吸光物質(zhì)在單位濃度及單位厚度時(shí)的吸光度吸收系數(shù)摩爾吸收系數(shù)ε在一定λ下c=1mol/Ll=1cm吸光度K=A/cl吸收系數(shù)在一定λ下c=1g/100mll=1cm吸光度百分吸收系數(shù)比吸收系數(shù)K=A/cl=f（λ，溶劑，溫度，組分性質(zhì)）吸收系數(shù)=f（λ，溶劑，溫度，組分性質(zhì)）吸收系數(shù)↑吸收系數(shù)物質(zhì)對(duì)光吸收能力↑定量測(cè)定靈敏度↑↑吸收系數(shù)λ1λ2λ3E1E3E2物質(zhì)對(duì)光吸收能力↑定量測(cè)定靈敏度↑A=Kclc=A/Kl單色光λ1A1λ2A2λ3A3稀溶液朗伯比爾定律1本講小結(jié)成立前提2A=Kcl常用百分吸收系數(shù)選擇λmax測(cè)定A入射光是單色光

溶液是稀溶液思考題卡比馬唑供試品含量測(cè)定：取供試品溶液，照紫外-可見分光光度法檢測(cè)波長(zhǎng)：在292nmA=0.448C7H10N2O2S的吸收系數(shù)（）=557計(jì)算供試品溶液濃度謝謝觀看吸收系數(shù)紫外可見分光光度法基本原理與概念硫酸銅溶液高錳酸鉀溶液物質(zhì)對(duì)光的吸收原理學(xué)習(xí)目標(biāo)紫外可見分光光度法基本原理與概念光的吸收光的吸收重鉻酸鉀溶液三氯化鐵溶液化合物對(duì)紫外可見光吸收?qǐng)D片來(lái)源于網(wǎng)絡(luò)化合物對(duì)紫外可見光吸收π→π*n→σ*n→π*σπnσ*π*σ→σ*化合物對(duì)紫外可見光吸收π→π*n→σ*n→π*σπnσ*π*飽和烴類σ→σ*150nm化合物對(duì)紫外可見光吸收π→π*n→σ*n→π*σπnσ*π*不飽和鍵共軛結(jié)構(gòu)未成對(duì)電子基本概念1：吸收峰2：谷3：肩峰4：末端吸收吸收光譜圖不同濃度高錳酸鉀溶液紫外吸收曲線基本概念①5mg/ml②10mg/ml③15mg/ml④20mg/ml⑤25mg/ml⑥30mg/ml⑦35mg/ml⑧40mg/ml④①③⑥⑤⑧⑦②不同濃度高錳酸鉀溶液紫外吸收曲線基本概念不同濃度高錳酸鉀溶液紫外吸收曲線基本概念基本概念吸收光譜圖定性定量氟胞嘧啶片【鑒別】供試品溶液λmax=286nmλmin=245nm【含量測(cè)定】取供試品與對(duì)照品溶液λ=286nm測(cè)定A計(jì)算其含量紫外吸收原理1不飽和共軛結(jié)構(gòu)本講小結(jié)紫外基本概念2吸收曲線最大/最小吸收波長(zhǎng)思考題謝謝觀看紫外可見分光光度計(jì)操作規(guī)范紫外可見分光光度法靈敏度高準(zhǔn)確度高操作簡(jiǎn)單重現(xiàn)性好紫外可見分光光度計(jì)規(guī)范操作學(xué)習(xí)目標(biāo)吸收池使用1本講小結(jié)操作要點(diǎn)2潤(rùn)洗比色皿3次儀器預(yù)熱穩(wěn)定后使用正確選擇光譜、光度值功能清潔無(wú)污染手拿粗糙面液體高度4/5無(wú)氣泡配對(duì)使用清潔無(wú)污染粗糙面液體4/5高度

不得有氣泡思考題影響測(cè)定結(jié)果的不規(guī)范操作謝謝觀看國(guó)家藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)紫外可見分光光度計(jì)組成比爾AugustBeer朗伯比爾定律A=-lgT=Kcl1854年第一臺(tái)比色計(jì)杜包斯克Duboscq奈斯勒Nessler美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)局1918年第一臺(tái)紫外可見分光光度計(jì)紫外可見分光光度計(jì)組成學(xué)習(xí)目標(biāo)紫外可見分光光度計(jì)工作原理儀器組成光源單色器吸收池檢測(cè)器數(shù)據(jù)處理及記錄系統(tǒng)儀器組成-光源提供入射光發(fā)射連續(xù)光譜光強(qiáng)度足夠穩(wěn)定性好使用壽命長(zhǎng)儀器組成-光源氘燈波長(zhǎng)范圍200-350nm鎢燈波長(zhǎng)范圍350-1000nm儀器組成-單色器入射狹縫準(zhǔn)直鏡色散原件物鏡出射狹縫光柵儀器組成-單色器入射狹縫準(zhǔn)直鏡色散原件物鏡出射狹縫棱鏡儀器組成-吸收池吸收池比色皿儀器組成-吸收池玻璃可見光區(qū)石英紫外+可見光區(qū)吸收池比色皿儀器組成-吸收池不同規(guī)格吸收池配對(duì)使用儀器組成-吸收池指紋、油污、沉積物清洗吸收池儀器組成-檢測(cè)器光電池光電管光電倍增管：應(yīng)用最廣泛但價(jià)格較高儀器組成-檢測(cè)器光電池光電管光電倍增管：應(yīng)用最廣泛但價(jià)格較高儀器組成-數(shù)據(jù)處理及記錄系統(tǒng)工作原理掃描速度更快

雜散光低

重復(fù)性高

獲得結(jié)果快速儀器組成1本講小結(jié)重要組成部