DB42T2106-2023芋疫病抗性室內(nèi)離體接種鑒定技術(shù)規(guī)程

ICS65.020.20CCSICS65.020.20CCSB16湖 北 省 地 方 標(biāo) 準(zhǔn)DB42/T2106—2023芋疫病抗性室內(nèi)離體接種鑒定技術(shù)規(guī)程Codeofpracticeforidentificationoftarotoleafblightinroom20232023092720231127湖北省市場監(jiān)督管理局發(fā)布目 次前言 III112范引文件 13語定義 14作程 15原分與定 16種制備 27內(nèi)體種定法 28性定價(jià)準(zhǔn) 3附錄A（料）芋病典病，原的態(tài)描和子定 4附錄B（料）芋病抗離鑒記表 6參考獻(xiàn) 7前 言本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件起草單位：武漢市農(nóng)業(yè)科學(xué)院、華中農(nóng)業(yè)大學(xué)。本文件實(shí)施應(yīng)用中的疑問，可咨詢湖北省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳，聯(lián)系電話bsnab@126.com；對本文件的有關(guān)修改意見建議請反饋至武漢市農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜研究所，聯(lián)系電話郵箱：watc1989@163.com。原物分原物分接種體繁殖調(diào)查與病情分級室內(nèi)離體接種鑒定評價(jià)結(jié)果記載芋疫病抗性室內(nèi)離體接種鑒定技術(shù)規(guī)程范圍本文件適用于芋品種及種質(zhì)資源對芋疫霉菌抗性的室內(nèi)離體接種鑒定及評價(jià)。（NY/T2327 芋疫病taroleafblight由芋疫霉菌（PhytophthoracolocasiaeRacib.）侵染芋葉片、葉柄或球莖引起的病害。接種體inoculum芋疫病taroleafblight由芋疫霉菌（PhytophthoracolocasiaeRacib.）侵染芋葉片、葉柄或球莖引起的病害。接種體inoculum用于接種以引起病害的病原物或病原物的一部分。4操作流程5病原物分離與鑒定A.1）DNAA.2和A.3V8（90℃下暗培養(yǎng)7d（=5mm）V8（1mL、CaCO32g800mL15g，121℃20min。V84℃～8℃30d1鑒定材料準(zhǔn)備NY/T232760d～120d2mm接種方法V87（=5V824水中含0.05282412h/12h。病情調(diào)查961mm調(diào)查每份鑒定材料接種病原物后的發(fā)病情況，依據(jù)表1病情級別劃分標(biāo)準(zhǔn)，逐份調(diào)查和登記病情級別，計(jì)算出病情指數(shù)（DI）。病情指數(shù)按式（1）計(jì)算： ????=∑(??×??)×100···································································(1)9×??式中：DI—病情指數(shù)；s—n——表1病斑直徑劃分病情級別病情級別病斑直徑（mm）0病斑直徑≤515＜病斑直徑≤10310＜病斑直徑≤20520＜病斑直徑≤30730＜病斑直徑≤409病斑直徑>40（DI2表2芋疫病抗性接種鑒定的評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)病情指數(shù)（DI）抗性評價(jià)DI=0免疫（I）0＜DI≤20高抗（HR）20＜DI≤40抗?。≧）40＜DI≤60中抗（MR）60＜DI≤80感?。⊿）DI>80高感（HS）附錄A（資料性）芋疫病典型病癥，病原菌的形態(tài)描述和分子鑒定3mm～5圖A.1）（圖A.2）。圖A.1圖A.2（Phytophthoracolocasiae×A1A2V6V828pH值為CTABDNA稀釋至50ng/LDNintrnalyrnscriedpacr,TITS45’-TCCTCCGCTTATTAGTATGC-3’和ITS55’-GTGAATCATCGAATCTTTGAAC-3’ITS。用50μL：2μL模板DNA，10μL1μLDNAμL10mM的μL10μmol/LITS4ITS527μLPCR℃2變性1015℃1min，325μL的PCRPCR測序。測序結(jié)果去除兩端質(zhì)量差的堿基后與NCBI數(shù)據(jù)庫進(jìn)行BLAST（/Blast.cgi）比對。附錄B（資料性）芋疫病抗性離體鑒定記載表表B.1給出了芋疫病抗性離體鑒定結(jié)果記載表格。表B.1芋疫病抗性離體鑒定結(jié)果記載表編號品種/種質(zhì)名稱病情級別相應(yīng)的發(fā)病葉盤數(shù)病情指數(shù)抗性評價(jià)0級1級3級5級7級9級1.鑒定地點(diǎn)：2.定植日期：3.接種日期：4.接種病原菌分離物編號：5.調(diào)查日期：鑒定人：鑒定