采后處理對(duì)不同品種火龍果皂苷v含量的影響

采后處理對(duì)不同品種火龍果皂苷v含量的影響

動(dòng)脈支架是一種傳統(tǒng)的藥物食品源植物，在廣西人民的醫(yī)療歷史已有300多年。羅漢果味甘、性涼、有清熱解暑、潤(rùn)肺止渴作用,被譽(yù)為“東方神果”,深受國(guó)際市場(chǎng)歡迎。近期的研究表明,羅漢果皂苷(Mogroside)是羅漢果的主要活性成分［1－4］。七十年代以來(lái),國(guó)外學(xué)者相繼開(kāi)展了對(duì)羅漢果皂苷的研究。迄今已從羅漢果果實(shí)中分離鑒定了11種葫蘆烷三萜苷類化合物,其中羅漢果皂苷Ⅴ在羅漢果果實(shí)中的含量以及甜度均較大,是主要的皂苷成分［5－6］。羅漢果皂苷作為一類高甜度、低卡路里的理想天然甜味劑,比蔗糖甜300倍,且食用安全無(wú)毒、沒(méi)有異味、熱穩(wěn)定性好、水溶性好［1，7－8］。已被批準(zhǔn)作為一種甜味劑添加到食品中,同時(shí)也是高血壓、肥胖癥、糖尿病患者的優(yōu)良甜味劑和保健品［1，9－11］。目前關(guān)于羅漢果皂苷穩(wěn)定性的研究主要是針對(duì)羅漢果皂苷提取物,發(fā)現(xiàn)羅漢果總皂苷具有較好的熱穩(wěn)定性,受酸堿的影響較小,但對(duì)于其主要皂苷組分穩(wěn)定性的研究報(bào)道較少［12］。羅漢果常以干果的形式保藏,傳統(tǒng)的加工方法是將羅漢果鮮果與室溫通風(fēng)處后熟至果皮變黃后,于50℃溫度下烘干［13］,但該方法缺乏有效的科學(xué)依據(jù)。盧來(lái)鳳等研究表明,采用不同干燥溫度處理可引起羅漢果指紋圖譜的變化,可能造成羅漢果皂苷含量的降低［14］。而關(guān)于羅漢果不同后熟處理方式對(duì)主要皂苷含量的影響尚未見(jiàn)有關(guān)報(bào)道。隨著羅漢果應(yīng)用領(lǐng)域的拓寬及市場(chǎng)需求量的增大,羅漢果的種植面積及品種也日益增多,果實(shí)品質(zhì)差別較大,為了獲得高品質(zhì)的產(chǎn)品,本文研究了不同的后熟及干燥處理方法對(duì)羅漢果中主要皂苷成分的影響及其穩(wěn)定性,為羅漢果資源的深度開(kāi)發(fā)和利用提供一定的理論依據(jù)。1材料和方法1.1試劑與儀器羅漢果鮮果于2012年11月初采自廣西省永?？h,并經(jīng)華中農(nóng)業(yè)大學(xué)姜玲教授鑒定為羅漢果青皮果和白毛果;羅漢果粗提物由桂林萊茵生物制品有限公司提供;羅漢果皂苷V對(duì)照品(質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥98%)上海同田生物技術(shù)有限公司;濃硫酸、香蘭素等均為分析純購(gòu)自國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;乙腈為色譜級(jí)購(gòu)自FisherChemAlertCo.,USA;色譜柱購(gòu)自大連依利特科學(xué)儀器有限公司。Varian2700MitchellDrive高效液相分析儀VarianCo.,USA;Christ真空冷凍干燥機(jī)ChristCo.,Germany。1.2分析方法及結(jié)果1.2.1羅漢果總皂苷的分光光度法分析樣品制備:稱取8.0000g的羅漢果鮮果,用50%的酒精在70~80℃水浴中回流提取3次,每次1h,將提取液抽濾,合并濾液,濃縮后定容至25mL。分析方法:取上述提取液0.5mL,加10%香草醛乙醇溶液0.5mL,搖勻,在冰浴下加75%硫酸5mL,搖勻,于50℃水浴中加熱20min,立即放在冰浴中冷卻10min,在600nm波長(zhǎng)處測(cè)定其吸光值,再根據(jù)經(jīng)驗(yàn)公式計(jì)算出羅漢果總皂苷的含量［10］:A=K×C式中:A-吸光值,K-經(jīng)驗(yàn)系數(shù)即1.0635,C-羅漢果皂苷濃度(mg/mL)1.2.2羅漢果皂苷Ⅴ的HPLC法分析樣品制備:稱取一定量的羅漢果鮮果和干果,采用1.2.1中樣品制備的方法。色譜條件:色譜柱:250×4.6mm(I.D),5μm;流動(dòng)相:乙腈∶水=23∶77(v/v);溫度:室溫;流速:0.5mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng):210nm;靈敏度:0.04AUFS;進(jìn)樣量:10μL。以保留時(shí)間進(jìn)行定性,以峰面積計(jì)算樣品中羅漢果皂苷Ⅴ含量［11］。1.2.3不同后熟處理方法對(duì)羅漢果中羅漢果皂苷V含量的影響羅漢果采收后,對(duì)不同品種的鮮果進(jìn)行如下后熟處理:室內(nèi)后熟一周(室溫20~25℃,空氣相對(duì)濕度60%~80%)、室內(nèi)后熟二周(室溫20~25℃,空氣相對(duì)濕度60%~80%)、室內(nèi)后熟40d(室溫20~25℃,空氣相對(duì)濕度60%~80%)、冷藏保存40d(5℃),然后將后熟處理的樣品進(jìn)行HPLC分析。1.2.5羅漢果皂苷V穩(wěn)定性的研究加熱溫度的影響:稱取一定量的羅漢果皂苷粗提物溶于蒸餾水,分別在20、40、60、80、100℃溫度下加熱30min,冷卻后測(cè)定樣品中羅漢果皂苷V含量。加熱時(shí)間的影響:稱取一定量的羅漢果皂苷粗提物溶于蒸餾水,在100℃溫度下加熱不同時(shí)間,冷卻后測(cè)定樣品中羅漢果皂苷V含量。放置時(shí)間的影響:稱取一定量的羅漢果皂苷粗提物溶于蒸餾水,在室溫條件(20~25℃)下放置不同時(shí)間,觀察羅漢果皂苷V含量的變化。pH的影響:稱取一定量的羅漢果皂苷粗提物,用稀鹽酸和氫氧化鈉調(diào)至不同的pH,在室溫條件(25℃)下放置3h,觀察羅漢果皂苷V含量的變化。1.2.6數(shù)據(jù)處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用X=x珋±SD表示,用SAS專用軟件進(jìn)行分析,觀察其顯著性。p<0.05為差異顯著,p>0.05為差異不顯著。2結(jié)果與分析2.1品種和部位對(duì)羅漢果主要皂苷及其皂苷v含量的影響羅漢果的品種很多,本文選取了兩種主要的羅漢果品種:青皮果和白毛果,并對(duì)其羅漢果皂苷V含量進(jìn)行分析,結(jié)果見(jiàn)表1。由表1可知,羅漢果總皂苷及羅漢果皂苷V的含量隨羅漢果品種和存在部位的不同而不同,果皮中羅漢果總皂苷及其皂苷V的含量均遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于果肉,而青皮果果皮及果肉中羅漢果總皂苷及其皂苷V的含量均高于白毛果,表明羅漢果中主要活性成分皂苷及其皂苷V的含量與品種和部位有一定關(guān)系。而羅漢果皂苷V是羅漢果皂苷中主要的組份,其含量高低常常是評(píng)價(jià)羅漢果甙類產(chǎn)品的重要質(zhì)量指標(biāo),說(shuō)明青皮果果實(shí)品質(zhì)較好,其總甙和甙V含量均較高。2.2不同采后處理對(duì)蘋(píng)果果皮和蘋(píng)果果酒中羅漢果皂苷v含量的影響由圖1可知,同未處理的鮮果相比,后熟處理方式對(duì)羅漢果中羅漢果皂苷V含量的影響很大。經(jīng)不同后熟處理后,白毛果的果皮中羅漢果皂苷V的含量均有所下降;而白毛果的果肉中羅漢果皂苷V的含量除冷藏保存40d的采后處理方式外,其他的采后處理方式均比未處理鮮果低;對(duì)于青皮果,經(jīng)不同采后處理后,其果皮中的羅漢果皂苷V含量除室內(nèi)后熟40d的比鮮果低,其他的采后處理方式都有所增加,其中以室內(nèi)后熟兩周的效果最好;而果肉中羅漢果皂苷V含量均比未處理的鮮果低。由此可知,不同品種的羅漢果受后熟處理方式的影響不同,白毛果和青皮果的最佳后熟處理方式分別為冷藏保存40d及室內(nèi)后熟兩周。2.3不同微生物的量變化不同的干燥處理方式對(duì)采收后的鮮果中羅漢果皂苷V含量的影響見(jiàn)圖2。由圖2可知,經(jīng)過(guò)不同干燥方法處理后,羅漢果中羅漢果皂苷V的含量變化很大。白毛果的果皮采用微波中火烘干時(shí),其羅漢果皂苷Ⅴ的含量最高;而經(jīng)過(guò)真空冷凍干燥的果肉中羅漢果皂苷Ⅴ的含量最大;對(duì)于青皮果而言,經(jīng)直接烘干的果皮中羅漢果皂苷Ⅴ的含量最大;而果肉則是采用微波中火烘干的羅漢果中羅漢果皂苷Ⅴ的含量最高?？傊?為了避免羅漢果在干燥過(guò)程中羅漢果皂苷的損失,同時(shí)考慮到生產(chǎn)成本,白毛果和青皮果最佳干燥處理方式分別為微波中火干燥及直接烘干。2.4熱反應(yīng)對(duì)皂苷v含量的影響在其他條件一直的情況下,探討了加熱溫度、加熱時(shí)間、貯藏時(shí)間以及pH的變化對(duì)羅漢果皂苷V含量的影響,結(jié)果見(jiàn)圖3~圖6。實(shí)驗(yàn)表明,羅漢果皂苷V的穩(wěn)定性較好。隨著加熱溫度的增加以及加熱時(shí)間的延長(zhǎng),羅漢果皂苷V的含量有所下降,但是變化幅度不大。表明羅漢果皂苷V的熱穩(wěn)定性較好。此外,pH以及放置時(shí)間對(duì)羅漢果皂苷V含量的影響也不顯著。3后熟方式和干燥方式對(duì)羅漢果中皂苷v含量的影響分析表明,羅漢果皂苷提取物中皂苷V的穩(wěn)定性較好,其含量受加熱溫度、加熱時(shí)間、pH以及放置時(shí)間的影響不大。羅漢果總皂苷及羅漢果皂苷V的含量隨羅漢果品種和存在部位的不同而不同,青皮果中羅漢果皂苷的含量高于白毛果,果皮中的羅漢果皂苷含量低于果肉。羅漢果皂苷V是羅漢果的主要活性成分,也是控制羅漢果質(zhì)量的重要指標(biāo)。而后熟處理方式和干燥方式對(duì)羅漢果中皂苷V的含量影響較大,白毛果和青皮果的最佳后熟處理方式為冷藏保存40d及室內(nèi)后熟兩周;其最佳干燥方式分別為中火的微波干燥及50℃直接烘干。這是由于羅漢果中不同皂苷的含量隨生長(zhǎng)期的變化而變化,而甜甙Ⅴ的含量一般隨生長(zhǎng)周期增加而增加,且在果實(shí)成熟后有一個(gè)較長(zhǎng)的甜甙積累過(guò)程［15］。本實(shí)驗(yàn)表明,不同品種羅漢果在后熟過(guò)程中其皂苷成分轉(zhuǎn)化的規(guī)律有所不同。因此,為了提高產(chǎn)品質(zhì)量,應(yīng)根據(jù)羅漢果品種的不同,采用相應(yīng)的加工工藝條件并嚴(yán)格控制加工過(guò)程,這對(duì)于保證產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定,